SHR和SD鼠脑梗塞后外侧皮质细胞的代谢变化

运用酶组织化学方法结合计算机图像分析,对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压的ＳＤ大鼠在大脑中动脉迅速阻断之后皮质细胞的代谢变化进行了比较观察。实验结果显示在缺血１５ｍｉｎ,皮质细胞的细胞色素Ｃ氧化酶（ＣＣＯ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的活性即已发生变化,而且随缺血时间的延长而更加明显,ＳＨＲ酶活性的变化更为显著,提示ＳＨＲ皮质细胞对缺血缺氧更为敏感。     

褪黑素激活大鼠大脑中动脉BKCa通道的受体依赖和非受体依赖途径

目的：研究褪黑素通过大电导Ca²⁺激活K⁺（BK_Ca）通道介导大脑中动脉张力变化的作用机制。方法：8周龄雄性Wistar大鼠,麻醉后取大脑中动脉,酶消化法急性分离脑中动脉平滑肌细胞,采用膜片钳技术全细胞记录模式检测细胞外液加入褪黑素前后BK_Ca通道和电压门控钾（K_V）通道的电流密度,褪黑素受体抑制剂2-苯基-N-乙酰色胺（luzindole）孵育后,全细胞记录模式记录加入褪黑素后BK_Ca通道电流幅值和贴附式单通道记录模式记录加入褪黑素后BK_Ca通道Po值,内面向外记录模式检测加入褪黑素后BK_Ca通道电导（G）,开放概率（Po）,平均开放时间（To）和关闭时间（Tc）。结果：①褪黑素（100 μmol/L）显著增加全细胞BK_Ca通道电流密度,但对K_V通道电流密度无显著影响;②luzindole （1 μmol/L）显著抑制褪黑素引起的BK_Ca通道电流密度增加;③贴附式单通道记录模式下,褪黑素（100 μmol/L）增加BK_Ca单通道Po值,luzindole （1 μmol/L）显著抑制褪黑素引起的Po增加;④内面向外单通道记录模式下,褪黑素（1 μmol/L,100 μmol/L）缩短BK_Ca单通道的To和Tc值,且Tc较To显著缩短;结论：褪黑素通过受体依赖和非受体依赖途径激活BK_Ca通道,介导大脑中动脉血管舒张。     

《科学》：研究提出早老性痴呆发病新机制

美国麻省总医院和哈佛医学院的科学家称,阿尔茨海默症（早老性痴呆症）患者大脑内的淀粉斑让朊蛋白变形。导致大脑的星形胶质细胞变得过度活化,使大脑不能正常工作,因此,造成了阿尔茨海默症。这个发现对阿尔茨海默症背后的大脑机制提出了新的解释,为研发新药物提供了线索,相关研究论文发表在近期出版的《科学》杂志上。     

首次证明神经元形成能清除旧记忆

2009年11月13日出版的美国《细胞》（Cell）杂志上，日本富山大学TakashiKitamura、Kaoru Inokuchi等发表研究文章称，新生脑细胞能够破坏大脑海马区的脑细胞之间的联系，清除大脑旧有记忆，为学习新知识提供“空间”。     

产前应激对子代大鼠脑缺血/再灌注后星形胶质细胞的影响

目的：探讨产前应激对雄性子代大鼠大脑中动脉缺血/再灌注后星形胶质细胞的影响。方法：SD孕鼠随机分为有产前应激处理（妊娠第15到21天每日3次限制活动）和无产前应激处理,并对其雄性子代大鼠采用线栓法制备大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,共分为产前应激+假手术组、MCAO模型组、产前应激+MCAO组（n=10）,于再灌注后第5天检测脑梗死体积,免疫荧光双标染色检测缺血灶边缘区星形胶质细胞形态及促红细胞生成素肝细胞受体A4（EphA4）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的共表达情况,并采用Western blot检测EphA4、GFAP和神经蛋白聚糖（Neurocan）蛋白表达。结果：产前应激+MCAO组子代大鼠脑梗死体积百分比、EphA4、GFAP和Neurocan蛋白表达均较MCAO组显著增加（P均<0.05）,且GFAP阳性细胞形态学改变及EphA4/GFAP共表达也较MCAO组明显。结论：产前应激可能改变子代大鼠脑缺血/再灌注后星形胶质细胞上EphA4受体的表达,促进星形胶质细胞活化,产生神经蛋白聚糖。     

综述与专论: 运动调节骨源性因子改善阿尔茨海默病的机制

阿尔茨海默病 （Alzheimer’s disease， AD） 作为一种神经退行性疾病会引起中枢神经病变。骨骼和大脑的紧密联系揭示出骨骼和AD之间的内在关联。骨骼作为骨内分泌器官逐渐受到重视。骨骼可分泌骨源性因子（SOST、OCN、OPN）、生成小胶质样细胞以及骨髓干细胞，这些骨源性因子和来源于骨骼的细胞通过血脑屏障调节大脑的生理特性，改善AD的代谢过程。运动刺激骨骼内分泌功能，调节骨源性因子分泌和表达水平，最终延缓AD病理变化并改善AD认知功能水平。本文侧重于阐述骨源性因子对AD的改善作用，以及运动刺激骨骼内分泌改善AD过程的新方法和新视角，为脑骨交互研究提供新思路。     

神经环路设计的普遍原则

该文介绍一种可以不断升级神经环路的规模的设计原则。作者将单个视网膜神经节细胞的树突区域定义为类似于数码相机CCD上的一个“像素”。决定这个像素的大小（即树突区域所占的大小）存在两种相互竞争的因素：为得到最高的分辨率,像素应越小越好;另一方面,像素越大越利于平均化输入信号,以得到信噪比精确度最高的光强度值递呈给大脑。作者列举了三种可能的策略来阐释如何设计一个视网膜像素大小,并且为进化中实际选择的策略提供了证据。     

两种免疫磁珠分离法分选小鼠骨髓粒-单核祖细胞的效率比较

摘要 目的：提取小鼠骨髓细胞（bone marrow cell, BMC）,用两种不同的免疫磁珠分离（magnetic activated cell sorting, MACS）试剂盒从小鼠BMC中分选提纯粒-单核祖细胞（granulocyte-monocyte progenitor, GMP）,比较这两种免疫磁珠的分选效率。方法：从小鼠股骨和胫骨中提取BMC,通过两种不同的MACS试剂盒,即Lineage阳性细胞清除试剂盒和CD117阳性细胞分选试剂盒,分别得到Lineage-细胞群和CD117⁺细胞群,用代表GMP细胞表面标志物的荧光抗体标记,孵育后通过流式细胞荧光分选技术得到GMP细胞,并且对比得到GMP细胞的效率。结果：每2只野生型C57BL/6J小鼠可共收集骨髓细胞（7.02±1.24）×10⁷个,细胞活力为（91.86±5.24）%。经过Lineage阳性细胞清除试剂盒得到的细胞数量为（5.71±2.86）×10⁶个;经过CD117阳性细胞分选试剂盒得到的细胞数量为（2.70±0.56）×10⁶个。Lineage磁珠分选纯化得到的GMP细胞数占总细胞数的比例为（10.90±1.37）%,CD117磁珠分选纯化得到的GMP细胞数占总细胞数的比例为（4.83±2.08）%。结论：Lineage阳性细胞清除试剂盒能更有效分选小鼠骨髓细胞中的粒-单核祖细胞。     

TRPV1介导H4组蛋白乳酸化调控AD炎症激活小胶质细胞

摘要 目的：阿尔茨海默病（AD）中小胶质细胞的免疫监测和吞噬功能逐渐减弱并发生炎症激活。以往研究报道瞬时受体电位香草素1型（TRPV1）通道的激活可以缓解3xTg小鼠脑内小胶质细胞的炎症激活和吞噬功能障碍,作用机制尚不清楚。方法：首先,通过蛋白印迹法和免疫荧光实验测量3xTg小鼠大脑细胞核内组蛋白H4的12位赖氨酸乳酸化（H4K12la）的表达水平和细胞定位情况。其次,验证TRPV1的激活是否可以调控3xTg小鼠大脑细胞核内H4K12la的表达水平。最后,使用Imaris软件和流式细胞术分析TRPV1的激活对小胶质细胞炎症激活形态和生物标志物的影响。结果：蛋白印迹法显示3xTg小鼠大脑细胞核内H4K12la的表达水平上升,免疫荧光实验证明H4K12la与小胶质细胞共定位。TRPV1的激活可以减少3xTg小鼠脑内小胶质细胞中H4K12la的表达水平,缓解3xTg小鼠脑内小胶质细胞炎症激活。结论：TRPV1可以通过抑制组蛋白H4K12la表达缓解AD小胶质细胞炎症激活。     

豆科植物的体细胞杂交

包括许多重要粮食和饲料作物在内的豆科植物的体细胞杂交研究已有20多年历史。早在70年代，Kao等[15]即利用豌豆、大豆原生质体与其它植物原生质体进行融合，观察到可以分裂的大豆（＋）豌豆、玉米（＋）大豆、小麦（＋）大豆异核体，大麦和大豆融合细胞最后形成细胞团，同时指出核融合发生在融合后的第一次分裂过程中。1974年，Kartha等[16]将大豆（Glycinemax）悬浮培养细胞原生质体与油菜原生质体融合，也得到细胞团。1976年，Constabel等[10]得到了大豆悬浮培养细胞与豌豆、Viciahajastana（一种野豌豆）、烟草、番红花叶肉细胞原生质…     

双氟沙星对异育银鲫血脑屏障渗透性及消除规律

以异育银鲫（Carassais auratus gibebio）为研究对象,采用组织匀浆法和高效液相色谱法,研究了双氟沙星（Difloxacin,DIF）通过异育银鲫血脑屏障情况,并比较分析了大脑和外周组织中DIF消除差异。结果显示,根据DIF 96h 半数致死剂量（2840 mg/kg b.W）给药后,第96h时异育银鲫大脑组织匀浆中DIF的含量为（10.490.35） g/g;同时在临床推荐用药剂量（20 mg/kg）给药后的15个时间点（0960h）上均能从大脑组织匀浆中检测出DIF。上述结果表明DIF能渗透通过血脑屏障而进入异育银鲫大脑组织。另外,在大脑和外周组织消除过程上,以大脑组织中的DIF消除过程最为平缓（按照20 mg/kg给药）。到试验第960h,大脑组织中DIF含量最高,为（0.3920.007） g/g,且大脑中的消除半衰期最长,为1157.713h。因此,异育银鲫大脑组织可作为DIF药物残留分析的靶组织。另根据欧盟关于食品中DIF最大残留限量（MRL）之规定,实验条件下DIF休药期至少为25d。结果为研究鱼类血脑屏障作用,DIF神经毒性及其在水产养殖上的临床应用提供了参考。       

Flt3配基的生物学特性研究进展

Ｆｌｔ３配基（ＦＬ）是一种新近发现的、能够刺激早期造血的细胞因子。该因子通过与造血干细胞表面酪氨酸激酶受体３（Ｆｌｔ３）结合,刺激造血干细胞的增殖和分化,增加淋巴细胞、树突状细胞（ＤＣ）、自然杀伤（ＮＫ）细胞及体外长期培养的干细胞等的数量。若与其它造血细胞因子合用,ＦＬ的作用可以得到明显加强。最近的研究还发现,ＦＬ通过促进体内ＤＣ、ＮＫ细胞、细胞毒Ｔ细胞（ＣＴＬ）的增殖、分化和成熟,发挥抗肿瘤作用     

突变质体随细胞分裂而传递的性质和规律初探

设一初始细胞中共有ｍ个质体,其中ｉ个是突变的,我们研究了它们随细胞分裂而分裂并在细胞间进行随机分配的过程中,一细胞分配ｍ个突变质体的概率。令ｘ（ｔ）＝１表示在第ｔ次分裂时,一细胞只含突变质体这一随机事件,ｘ（ｔ）＝０为其对立事件。我们得到了随机过程｛ｘ（ｔ）,ｔ∈Ｔ｝的一些性质、证明了该过程为一马尔可夫链,给出了细胞质内质体杂化（含突变与非突变两类质体）与质体纯化（仅含一类质体）两种状态之间的转移概率矩阵,揭示了突变质体随细胞分裂而传递的若干规律。     

甘珀酸干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察缝隙连接阻断剂甘珀酸对局灶性脑缺血/再灌注损伤的影响。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型（MCAO）,将动物随机分为脑缺血60min再灌注（MCAO）组,脑缺血再灌注加甘珀酸干预（MCAO＋CBX）组和假手术组（sham）。采用尼氏染色显示脑梗死灶并计算梗死灶体积;应用免疫荧光与TUNEL染色法分别观察脑缺血后3d与7d不同时间点缺血边缘区胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达和细胞凋亡情况。结果（1）缺血后3d、7d MCAO＋CBX组大鼠梗死体积小于MCAO组,3d、7d MCAO＋CBX组大鼠梗死体积较MCAO组分别缩小5%和4.6%;（2）缺血后3d、7d于缺血边缘区可见大量TUNEL阳性染色细胞,且MCAO组大鼠缺血边缘区细胞凋亡数目明显多于MCAO＋CBX大鼠（P〈0.001）;（3）缺血后3d和7d组缺血边缘区GFAP表达明显增强,3d的MCAO组与MCAO＋CBX组大鼠缺血边缘区GFAP的表达均较假手术组强（P〈0.05）,7d的MCAO＋CBX组大鼠缺血边缘区GFAP的表达较假手术组强（P〈0.001）,但明显弱于MCAO组大鼠（P〈0.01）;结论缝隙连接阻断剂甘珀酸可减少大鼠大脑中动脉阻塞后脑梗死体积,其机制可能与阻断缝隙连接后缺血边缘区神经元凋亡降低有关,星型胶质细胞的反应性变化参与了该过程。     

头孢曲松神经保护作用的研究

目的：探讨头孢曲松通过抑炎通路发挥神经保护作用的机制。方法：45只雄性sD大鼠,随机分为3组（n=15）,预处理组在大鼠大脑中动脉阻断（MCAo）前5d每日给予腹腔注射头孢曲松缓冲液（200mg／kg）,观察局灶性脑缺血2h再灌注24h后,各组间大鼠神经行为学评分、脑梗死容积变化、小胶质细胞和IL-1β的数量变化。结果：再灌注24h后,头孢曲松预处理组可改善大鼠神经行为学评分和脑梗死面积（P〈0．05）,小胶质细胞活化数量减少（P〈0．05）,ELISA检测IL-1β分泌数量有显著下降趋势,但无统计学差异（P=0．18）。结论：头孢曲松可以部分抑制小胶质细胞活化,减少IL-1β释放发挥神经保护作用。     

缺氧对大鼠大脑皮层星形胶质细胞Inos Mrna表达的影响

目的：观察缺氧和谷氨酸对星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS)mRNA表达的影响,探讨大脑星形胶质细胞在缺氧性脑血管扩张反应中的作用。方法：取新生Wistar大鼠大脑皮层进行星形胶质细胞原代、传代培养,分为四组：（1）对照组;（2）谷氨酸组;（3）缺氧组;（4）缺氧＋谷氨酸组。每一组包括5个时相点：0h、3h、6h、12h、24h(以缺氧后开始记时）。于（2）和（4）组加入100μmol/Lr L-谷氨酸。（3）和（4）组用95％N2／5％CO2的混合气体缺氧。提取总RNA,用RT－PCR技术检测iNOS mRNA的表达量。结果：对照组和谷氨酸组各时相点未见星形胶质细胞iNOS mRNA表达。缺氧组与缺氧＋谷氨酸组iNOSmRNA于6h开始显著增高,以后更为显著（24h内）。缺氧＋谷氨酸组iNOSmRNA表达的幅度显著高于缺氧组。结论：缺氧及缺氧＋谷氨酸可使iNOSmRNA表达增强,后者催化合成一氧化氮,作用于脑血管平滑肌,可能是缺氧性脑血管扩张的重要机制之一。     

金鱼PP2A-B′家族δ基因cDNA的克隆及表达分析

通过3′-RACE及5′-RACE技术克隆得到了金鱼蛋白磷酸酶2A（protein phosphatase2A,PP2A）调节亚基B′家族δ（Delta）基因的cDNA全序列.结果显示,金鱼δ基因cDNA全长2415bp,编码一个含555个氨基酸的蛋白.序列分析表明,该基因编码的蛋白与已知其他物种对应的B′家族蛋白质均有着很高的同源性.RT-PCR分析证明,该基因mRNA表达水平在大脑中为最高,肝脏、精巢、卵巢、肾脏和鳃中次之,鳍中最少.在不同胚胎时期中,两细胞期、多细胞期、囊胚期和原肠胚期表达最高,其他时期相对较低.在蛋白水平上,精巢、卵巢、大脑和心脏中最高,肝脏中次之,肾脏、鳃和鳍中最少.在胚胎中,两细胞期、多细胞期、囊胚期、原肠胚期和神经胚期及视原基期表达最高,脑泡分化和眼色素期表达量最少.由此可以推测PP2AB′-δ基因在金鱼不同组织和胚胎发育的不同时期中可能起着多种重要作用.     

经颅多普勒血流动力学定量参数对青年脑卒中患者预后的预测价值

摘要 目的：分析经颅多普勒血流动力学定量参数预测青年脑卒中患者预后的价值。方法：病例纳入时间为2018年4月至2022年12月,来源于秦皇岛市第一医院,研究对象为349例青年脑卒中患者,将之作为病例组,根据病情严重程度分为轻、中和重度组,例数分别为97、196例、56例,根据预后情况分为预后不良组和预后良好组,例数分别为27、322例,另选同期358名健康体检青年人群作为对照组。比较病例组与对照组、不同病情严重程度及不同预后患者的血流动力学定量参数,分析血流动力学定量参数与患者、预后的相关性及对患者预后的预测价值。结果：与对照组比较,病例组大脑中动脉搏动指数（PI）更高,平均血流速度（Vm）、收缩期血流速度（Vs）、舒张期血流速度（Vd）、屏气指数（BHI）、脑局部血流量丧失指数（r CBFLI）更低（P<0.05）。重度组大脑中动脉PI高于中度组、轻度组（P<0.05）,中度组高于轻度组（P<0.05）;重度组大脑中动脉Vm、Vs、Vd、BHI、r CBFLI低于中度组、轻度组（P<0.05）,中度组低于轻度组（P<0.05）。预后不良组大脑中动脉PI高于预后良好组（P<0.05）,大脑中动脉BHI、r CBFLI低于预后良好组（P<0.05）。大脑中动脉PI与青年脑卒中患者病情严重程度、预后呈正相关（P<0.05）;大脑中动脉Vm、Vs、Vd、BHI、r CBFLI与青年脑卒中患者病情严重程度呈负相关（P<0.05）;大脑中动脉BHI、r CBFLI与青年脑卒中患者预后呈负相关（P<0.05）。大脑中动脉PI、BHI、r CBFLI联合检测的曲线下面积（AUC）值为0.864,高于大脑中动脉PI、BHI、r CBFLI单独检测（0.698、0.737、0.782,P<0.05）;大脑中动脉BHI、联合检测的敏感度分别为85.19%、81.48%,高于大脑中动脉PI、r CBFLI单独检测（66.67%、62.96%,P<0.05）;大脑中动脉r CBFLI、联合检测的特异度分别为81.68%、78.26%,高于大脑中动脉PI、BHI单独检测（64.29%、67.08%,P<0.05）。结论：青年脑卒中患者PI偏高,Vm、Vs、Vd、BHI、r CBFLI偏低,且PI随患者病情的加重而升高,Vm、Vs、Vd、BHI、r CBFLI随患者病情的加重而降低,另PI、BHI、r CBFLI可评估患者预后情况,三者联合检测对青年脑卒中患者预后的预测价值更高。     

分离和收集耐铝植物细胞的方法

日本Ｙａｍａｇａｔａ大学的科学家Ｔ．Ｗｎｇａｔｓｕｍａ及其同事描述了一种从铝－耐受和铝－敏感植物细胞混合物中收集耐铝植物细胞的新技术。基于以前发现耐铝品种的原生质体比铝－敏感品种的原生质体质膜表面的负电荷少,Ｗａｇａｔｓｕｔｍａ小组用新准备的带正电的二氧化硅小珠与来源于水稻（Ａｌ－耐受）,玉米（中等Ａｌ－耐受）或豌豆（Ａｌ－敏感）根细胞的纯化原生质体混合,然后以一个Ｆｉｃｏｌｌ不连续梯度高心混合物。他们从离心管底部级分得到来自铝－耐受植物（水稻）的原生质体,从上部级分得到来自铝－敏感植物（豌豆）…     

大脑胰岛素信号途径受损导致2型糖尿病时阿尔茨海默病发病风险增高

大脑胰岛素不仅可调节血糖,而且可改善记忆和认知,而大脑胰岛素缺乏常导致Alzheimer病（Alzheimer’s disease, AD）的发生. 本研究检测了正常及2型糖尿病（type 2 diabetes, T2D）大鼠外周及大脑胰岛素信号传导途径,以探讨T2D时由于大脑胰岛素异常导致AD发病的可能性.以同龄正常SD大鼠为对照（CTL组）,高糖、高脂、高蛋白饮食加链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）腹腔注射建造T2D大鼠模型（T2D组）.葡萄糖氧化酶法检测血浆血糖,放免法检测脑脊液及血浆胰岛素,免疫印迹技术检测大脑海马tau蛋白上部分位点磷酸化水平,大脑及肝脏、肌肉组织胰岛素信号传导途径中磷脂酰肌醇3 激酶（phosphatidylinositol 3 kinase, PI3K）/ 蛋白激酶B（protein kinase B,Akt)、糖原合成激酶3β（glycogen synthase kinase 3β, GSK 3β）活性. 结果显示：和对照组相比,T2D大鼠血浆葡萄糖水平及胰岛素水平显著升高,脑脊液胰岛素水平显著降低,大脑海马组织tau蛋白上所检测位点均呈过度磷酸化改变,海马及外周组织（肝脏、肌肉）胰岛素信号传导途径PI3K/Akt活性均显著下降,GSK 3β活性升高. 研究结果表明：2型糖尿病大鼠大脑胰岛素缺乏及其信号传导途径下调可能是导致阿尔茨海默病发病的重要原因.