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相似文献
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1.
人食管鳞状上皮癌糖复合物表达的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
凝集素可与其相对应的糖复合物特异性结合。在癌症形成过程中细胞表面经历着显著的变化,本文用十种生物素化凝集素即UEA-I、RCA-I、DBA、PSA、PNA、BSL、LCA、WGA、ConA和SBA作为探针,对正常食管上皮和食管鳞状上皮癌进行研究,以确定正常食管上皮和食管鳞状上皮癌中糖复合物的改变,结果发现,PNA和PSA在正常食管和食管鳞状上皮癌中均无反应,RCA-I、DBA、BSL、LCA、ConA和SBA受体在正常和癌组织中有着特征性变化,BSL和DBA在食管中无反应,LCA、SBA和RCA-1正常食管和食管鳞状上皮癌中反应方式不同,ConA和WGA则在同一癌组织的不同部位都显示出不同的反应。尽管UEA-I在正常食管和食管鳞状上皮癌均呈阳性反应,但似乎未表现出有意义的变化。上述结果提示食管癌的发生与含α-D-GalNAc(DBA和SBA)、β-D-Gal/β-N-acetyl-D-Galactosamine(RCA-I)、α-D-Glc/α-D-Man(LCA和ConA)、[β-(1-4)-D-GlcNAc]2/NeuNAc(WGA)和α-D-Gal(BSL)等的糖复合物的改变有较为密切的关系。  相似文献   

2.
将含有鸡传染性支气管炎病毒 S1 基因c D N A 的重组转移质粒p S X I V V I+ X3 S1 . Holte 和p S X I V V I+ X3/4 S1 . Holte 分别与粉纹夜蛾核型多角体病毒 Tn N P V S V I- G D N A( O C C- ,gal+ ) 共转染草地夜蛾( Sf9) 细胞,经空斑纯化得到重组病毒 Tn N P V( X3) S1 . Holte O C C+ 和 Tn N P V( X3/4) S1 . Holte O C C+ 。将重组毒株分别感染 Tn5 B1 细胞,并进行 S D S P A G E 与 Westernblot 检测。结果表明, Tn N P V( X3/4) S1 . Holte O C C+ 在感染的细胞中高效表达了 S1 蛋白, S D S P A G E 凝胶薄层色谱分析结果显示,感染病毒后72 h S1 蛋白的表达量占细胞内总蛋白量的35 .8 % ,而 Tn N P V( X3) S1 . Holte O C C+ 感染的细胞内检测不出 S1 蛋白。经分析认为这一差异主要来自 S1 基因翻译起始位点及其附近的周围环境。  相似文献   

3.
根据猪瘟病毒C株的序列,以计算机辅助设计,化学合成1对引物(PF5648/PR6604),应用RTPCR技术从感染猪血中成功地扩增了我国猪瘟病毒强毒石门株NS23基因片段,大小为957bp,位于NS3基因的中部NTPase和Helicase活性区。克隆后测序,结果表明该段基因产物具有解旋酶超家族全部七个特征性保守序列,包括共同的NTP结合基序A位点(GXGKT/S)和B位点(3hy,2x)D。序列同源性比较表明,石门株与日本的ALD和GPE-株同源性最高,与其它3株猪瘟病毒(C株、Brescia株和Alfort株)的同源性也很高,并与2株牛病毒性腹泻病毒(BVDV)(NADL株和SD1株)也有较高的同源性,尤其是由核苷酸序列推导的氨基酸序列,同源性均大于90%,是瘟病毒属基因组中最保守的区段,这与该基因产物在病毒复制及聚蛋白前体加工过程中所具有的重要功能是一致的  相似文献   

4.
真菌还原Cr(VI)的研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
从不同来源的样品中分离筛选出几株抗Cr(VI)的真菌,他们能在含300 ̄500mg/LK2Cr2O7的蔗糖合成培养基中生长,其中BS-1菌株抗K2Cr2O7达900mg/L.BS-1等4株真菌在含200mg/L K2Cr2O7的培养基中生长4 ̄6d后,培养液中的Cr(VI)已全部消失。这些真菌经鉴定为青霉菌BS-1和BS-3,黑曲霉BR-4和黄曲霉BX-1。经紫外可见光扫描及化学分析证实,高毒的C  相似文献   

5.
经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-SephadexC-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素(DaHT-1和DaHT-2).SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸(Asx,Glx)分别占23%和24%,DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具蛋白水解酶活性,无对TAME,BAEE的水解活性和PLA2酶活性.两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关.DaHT-1和DaHT-2的最适温度分别为35℃和40℃,最适pH为6-9,对热均不稳定,温度高于60℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含0.5mol的Zn,1mol的Ca,较多的Na、K、Mg,不含Co。  相似文献   

6.
木糖代谢基因表达水平对酿酒酵母重组菌株产物形成的影响   总被引:12,自引:2,他引:12  
以E.coli-S.cerevisiae穿梭质粒YEp24为骨架,将树干毕赤酵母(Pichia stipitis CBS6054)的木糖还原酶(XR)基因XYL1及木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL1分别以不同的相对表达方向置于酿酒酵母的乙醇脱氢酶I(ADH1)启动子和磷酸甘油激酶(PGK)启动子下,构建不同XYL1及XYL2的重组质粒。这些重组质粒分别转化酿酒酵母(H158)受体菌。得到的重组菌株  相似文献   

7.
沈辉  王梅 《生物化学杂志》1997,13(2):173-176
用SDS-PAGE电泳、高效液相色谱(HPLC)、质谱等方法,研究了人肝癌细胞(HepG2)分泌的胰岛素样生长因子结合蛋白-1(^35S-IGF-BP1)的分子结构、特性,及其被内源性蛋白酶降解的特点,^35S-IGF-BP1的经抗体免疫沉淀、生化分离,纯化为均一体,其分子是由多个亚构成的蛋白质,分子量约为27kD;细胞UMR、HepG2、H35BRL3A分泌的蛋白酶能将^35S-IGF-BP1催  相似文献   

8.
将编码丙型肝炎病毒(HCV)E2蛋白417~750位氨基酸的DNA片段 克隆到真核表达载体pcDNA 3.1(-)中的CMV IE启动子下游,构建成HCV E2重组真核表达质粒 pcE2。ELISA法检测pcE2 DNA免疫兔血清中的E2抗体变化和维持规律,结果显示免疫20d已有 抗体产生,30d后开始进入高峰,40d时达到最高值,至第90d抗体水平保持平稳,抗体滴度 达到1∶1600左右。流式细胞计数仪(FACS)检测pcE2 DNA免疫鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞变 化情况,与注射空载体pCDNA3.1(-)的阴性鼠相比,CD4+淋巴细胞水平略有上升,CD8+ 细胞水平有较大升高,增幅达35.46%。免疫组化检测结果显示注射pcE2的小鼠组织中有明显 的阳性着色,而注射pcDNA3.1(-)的对照组小鼠免疫组化结果为阴性。以上结果表明:pcE2 在实验动物内表达出的HCV E2蛋白可以引起免疫动物的体液免疫应答和细胞免疫应答,尤其 是MHC-1限制性杀伤性CD8+T淋巴细胞水平的提高对清除 病毒是十分有利的,因此HCV E2 DNA免疫有可能成为预防和治疗HCV感染的一条新途径。  相似文献   

9.
中国河南株丁型肝炎病毒全基因组的cDNA克隆和序列分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
从我国河南-抗丁型肝炎病毒抗原(anti-HDAg)及丁型肝炎病毒(HDv)RNA双阳性的HBsAg携带者血清中提取RNA,采用人工合成的引物进行逆转录和聚合酶链反应(PCR),获得了贯穿HDV全基因组的6个相互重叠的cDNA片段。经双脱氧末端终止法进行核苷酸序列分析,得到了长度为1674bp的我国人河南株HDVcDNA全序列。计算机分析表明,该株与我国台湾株(HDVIA型)、美国-1株(HDVIB型)、日本-1株(HDVⅡ型)和秘鲁-1株(HDVⅢ型)的核苷酸同源性分别为的94.3%、86.8%、75.4%和66.3%,氨基酸序列的同源性分别为89.7%、85.1%、71.9%和64.6%,并在核苷酸和推导的HDAg氨基酸序列中分别发现了5个和2个集中保守的区域。这些区域均与HDV的某些重要功能密切相关。  相似文献   

10.
作者Author期-页码No.-Page朝仓伸司SHINJIASAKURA2-260白俊杰BAIJunjie3-409白秀英BAIXiuying1-1142-3002-304毕汝昌BIRuchang1-79RolandBLUME4-5934-597蔡国平CAIGuoping1-83蔡建华CAIJianhua6-10066-1012蔡以滢CAIYiying4-600曹殿芳CAODianfang2-332曹凯鸣CAOKaiming4-671曹立环CAOLihuan1-105曹淑桂CAOShugui3…  相似文献   

11.
动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰HDL(oxidized HDL,OX-HDL)对培养人主动脉SMC cyclin D1(细胞周期蛋白D1)基因转录表达的影响.结果表明:(1)N-HDL对SMCcyclin D1基因表达无影响(P> 0.05);(2)OX-HDL使SMCcyclin D1基因表达显著增强(P<0.01),其表达量随时间(2、12、24 h)延长而增加.上述结果表明,OX-HDL的致AS作用可能与其刺激SMCcyclin D1基因表达增加有关.  相似文献   

12.
采用DOCA硅胶管皮下埋入法建立大鼠心衰模型,从基因转录水平检测正常与心衰大鼠心肌组织中心肌收缩蛋白分子基因α-MHC、β-MHC、α-cardiacactin、α-skeletalactin表达的变化。结果显示:(1)心衰大鼠心肌收缩力指标dp/dtmax较正常大鼠明显降低(下降27.51%,P<0.01),(2)心衰大鼠与正常大鼠相比,心肌组织中α-MHC基因表达水平显著下降(降低21.43%,P<0.05),β-MHC基因表达水平显著升高(升高62.43%,P<0.01)、α-cardiacactin基因和α-skeletalactin基因表达水平未见明显改变,(3)α-MHCmRNA的含量与心肌收缩力指标dp/dtmax值之间存在正相关关系(r=0.4143,n=43,P<0.05),β-MHCmRNA的含量与dp/dtmax值之间存在负相关关系。(r=-0.3902,n=43,P<0.05)。这提示:心肌组织中MHC基因表达水平的改变是心衰时心肌收缩力降低的主要分子基础  相似文献   

13.
用核酸原位杂交和图像分析等方法,观察直接缺氧(H)和缺氧猪肺动脉内皮细胞条件培养液(HECCM)对人胚肺成纤维细胞(KMB17)的前胶原proα1(Ⅰ),proα1(Ⅲ)mRNA表达和抗高血压药1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对此过程的影响。结果发现,H和HECCM均可使KMB17的两型前胶原mRNA表达量增高,明显高于对照组(P<0.01)。DDPH对HECCM组细胞的Ⅰ,Ⅲ两型前胶原mRNA表达增高均有显著的抑制作用(抑制率分别为-43.97%和-56.22%),而对H组仅抑制proα1(Ⅰ)前胶原mRNA的过量表达(-53.58%)。提示缺氧可直接或通过肺动脉内皮细胞的介导,促进人胚肺成纤维细胞的Ⅰ、Ⅲ两型前胶原mRNA表达,DDPH在基因转录水平上对此过程有抑制作用  相似文献   

14.
本文报道了[B1~Ala,B2-Ala]-胰岛素与人胎盘细胞膜胰岛素受体结合的特性和体外生物活力,并与胰岛素进行比较。在37℃和杆菌肽存在下,125I-[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素和125I-胰岛素与人胎盘细胞膜作用依赖于反应时间,反应6分钟到达平衡,此时,[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素和胰岛素与胰岛素受体的最大结合分别为每毫克膜蛋白结合6.44fmol和3.47fmol:达到平衡一半所需时间(T1/2)分别为19秒和25秒。用125I-[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素作为放射配体进行竞争性结合研究,从IC(50)得[B1-Ala,B2-Ala]胰岛素的受体结合活力为胰岛素的139.6%。Scatohard分析求得;[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素与高亲和和低亲和结合位点的结合常数在4℃时分别为5.88×108L/mol和7.63×105L/mol,而胰岛素分别为4.83×108L/mol和3.39×105L/mol。促脂肪细胞生成脂的实验表明:[B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素的活力为胰岛素的130%。  相似文献   

15.
用PCR方法从pPAIJ.7中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)基因,与pPUC18重组,经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析,获得全长人PAI-2基因.PAI-2基因与表达载体pPIC9重组,构建受乙醇氧化酶1基因(AOX1)启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化GS115宿主菌,经表型筛选和PCR扩增筛选阳性克隆,用甲醇诱导表达,重组PAI-2以分泌型表达,占分泌总蛋白的30%,具PAI-2抗原性,与低分子量尿激酶形成了抗SDS复合物,具抑制纤溶的活性(91.4AIU/ml).对培养条件也进行了探讨.  相似文献   

16.
白鲢MHC Iα2基因克隆及序列分析   总被引:6,自引:0,他引:6  
夏春 《动物学报》1999,45(3):345-349
根据人和动物的MHCIα2基因中两个半脱氨酸侧翼的保守序列设计了混合型引物,采用PCR法从白鲢基因组DNA中克隆了MHCIα2(Hymo-BX1)。经氨基酸序列和同源性分析,Hymo-BX1与人和动物的MHCIα2存在26.7%~50.6%同源性,并存在抗原多肽结合位点(T-143、K-146、W-147、Y-159)以及α2微球蛋白结合位点(Q-115、D-119、G-120、D-122)。由此认为:Hymo-BX1属MHCclassIa类可作为白鲢种群分子进化指标之一。  相似文献   

17.
以鸡传染性法氏囊病病毒内蒙古毒株(IBDV-NM)dsRNA为模板,用RT-PCR法扩增其主要寄主保护抗原VP2基因的全长cDNA,克隆于pUC19的XbaI/KpnI位点,进行了全序列分析。序列比较发现IBDV-NM毒株VP2基因与已报道的其它7个IBDVCJ801bkf、Cu1、PBG98、52/70、002—73、STC及VariantE毒株之间高度同源,其核苷酸序列的同源率为91.6%~96.2%,推测的氨基酸序列的同源率为96.2%~98.6%。IBDV-NM毒株VP2高变异区的第一个亲水区氨基酸序列与CJ801bkf、Cu1、PBG98、52/70、STC、002—73比较,有一个氨基酸差异,第二个亲水区氨基酸序列与上述6个毒株完全相同。而与VariantE比较,两个亲水区内各有两个氨基酸差异。此外,IBDV-NM毒株VP2具有强毒株所特有的7肽保守区:SWSASGS。这些结果表明,IBDV-NM毒株为标准血清Ⅰ型IBDV强毒株。  相似文献   

18.
目的和方法:测定双肾双夹(2K2C)肾性高血压大鼠早期,左心室α-肌球蛋白重链(α-MHC)和β-肌球蛋白重链(β-MHC)mRNA水平的变化。实验分四组:对照组、2K2C组、巯甲丙脯酸组、巯甲丙脯酸对照组。术后24h、36h、48h、72h测动脉血压,提取左心室中样本取8.0μg,与^32P标记的α-MHC和β-MHC cDNA探针作班点杂交。结果:高血压大鼠左心室α-MHC mRA水平明显降低  相似文献   

19.
应用分子杂交技术和放射免疫检测方法研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞的环氧合酶(COX)和血栓素合成酶(TXS)基因表达及其条件培养基中6ketoPGF1α和TXB2含量的动态变化。发现:6,12,24和48h缺氧组分别与常氧组比,COX1和COX2基因表达增加,并且COX2mRNA在缺氧6和12h就明显表达增加。在前述的不同缺氧时间组内皮细胞条件培养基中6ketoPGF1α含量也均显著高于相应常氧对照组(P<0.05);但TXS的mRNA水平及TXB2含量在缺氧48h才有明显增加(P<0.05)。结果表明:(1)缺氧可诱导肺动脉内皮COX基因表达和PGI2生成增加,在早期以COX2基因表达增加更为明显,提示可能在肺血管缺氧反应中起调节作用。(2)48h的缺氧可使内皮细胞TXS基因表达及TXA2生成增加,它可能在慢性缺氧肺血管反应中起介导作用。  相似文献   

20.
慈溪麦冬甙A和B的结构   总被引:6,自引:0,他引:6  
从浙江慈溪产中药麦冬(Ophiopogon japonicum)中分离得到2个新的C27甾体甙--慈溪麦冬甙A(2)和B(3)以及已知甙ophiogenin3-氧-α-L-鼠李糖吡喃基(1→2)「β-D-木糖吡喃基(1→3)」-β-D-葡萄糖吡喃甙(2)和ophiogenin 3-氧-α-L-鼠李糖吡喃基(1→2)「β-D-木糖吡喃基(1→3)」「β-D-葡萄糖吡喃基(1→4)」-β-D-葡萄糖吡  相似文献   

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