8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种的SSR分析

选取9对SSR引物对8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种进行扩增,估算了扩增片段长度,结果表明,利用这9对SSR引物可以把8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种区分。8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种的等位基因数（Na）平均为2.8889,有效等位基因数（Ne）平均为2.2162,Shannon多样性指数（I）平均为0.8669,期望杂合度（Nei）平均为0.5217。9对引物中,UDV-067提供的信息量最大,引物VMC7bl最小。     

8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种的SSR分析

选取9对SSR引物对8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种进行扩增,估算了扩增片段长度,结果表明,利用这9对SSR引物可以把8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种区分.8个山葡萄及山欧杂种葡萄品种的等位基因数(Na)平均为2.8889,有效等位基因数(Ne)平均为2.2162,Shannon多样性指数(I)平均为0.8669,期望杂合度(Nei)平均为0.5217.9对引物中,UDV-067提供的信息量最大,引物VMC7b1最小.     

山葡萄的新发现——双优山葡萄

山葡萄做为小浆果品种之一,在酒的酿造上已充分发挥了它的优越性,所酿造的山葡萄酒远近闻名,深受国内外消费者的欢迎,但是随着长白山区森林资源的开发,野生的山葡萄资源逐渐破坏,收购数量日益减少,远远满足不了酿造部门的需要。山葡萄家植成功之后,     

茎尖培养保存山葡萄种质和缩短育种周期初探

我所山葡萄研究室,现已收集并保存山葡萄种质400多份,“八五”期间还将继续收集,这样多的材料都靠田间保存活体植株,人力和经费的消耗很大;品种选育方面,自1973年以来做了山葡萄种内杂交50个组合,种间杂交160个组合,选出的单株繁殖无性系之后能成为品种的是其中的极少数,其余可做为进一步育种材料的,田间已保存200多个,材料之多难于承受;山葡萄栽培历史很短,生产上急需优良品种苗木,而且对苗木的需求是不稳定的。     

烟台地区葡萄根瘤蚜(Phylloxera vitifoliae Fitch)观察

葡萄根瘤蚜是葡萄栽培事业上的一种大害虫,也是国际重要检疫对象之一。 1954年9月苏联来华植物保护与植物检疫考察组奥波连斯基专家在烟台张裕公司西葡萄山发现了葡萄根瘤蚜之后1),政府对此害虫极为重视,曾先后数次组织专家进行视察。1955年9月农业部委托山东大学生物系负责主持有关葡萄根瘤蚜的生活史,寄     

基于SSR分子标记的73份山葡萄及杂交后代的遗传多样性分析

采用SSR分子标记技术,分析俄罗斯葡萄资源及东北山葡萄资源的遗传多样性及亲缘关系,旨在为葡萄种质资源利用与创新及分子标记辅助育种提供依据。筛选11对多态性好的SSR引物分析了10份东北山葡萄品种和63份俄罗斯引种葡萄的遗传多样性及亲缘关系。11对引物在73份葡萄资源中共检测到75个等位基因,每个位点扩增3(VVIN31)-10(VVS2)个等位基因,平均等位基因6.8182个,有效等位基因(Ne)在5.280(VVS2)-1.3050(VVIN31)之间,平均值为3.5196;Shannon多态性信息指数(I)范围1.8830(VVS2)-0.4678(VVIN31),平均值1.3736;各位点多态性信息含量(PIC)变化范围为0.2337(VVIN31)-0.8098(VVS2)平均值0.6440,其中VVIN31、VMCA12位点只具有低中度多态性;Nei’s遗传多样指数在0.8098(VVS2)-0.2337(VVIN31)之间,平均值0.6444,表明各位点遗传多样性存在较大差异,等位基因在群体内的分布不均匀;观测杂合度变化范围为0.1667-0.9315,平均值0.4642,期望杂合度变化范围0.8154-0.2353,平均值为0.6489,不同位点杂合度差异较大,平均观测杂合度低于期望杂合度,表示种群内存在一定的近交率,杂合体缺失,纯合体较多;遗传分化系数Fst平均值为0.1183。基因流Nm平均值为1.8641,种质中度遗传分化,基因流较大。聚类分析结果表明东北山葡萄资源与俄罗斯野生葡萄资源亲缘关系较近,与俄罗斯选育葡萄资源亲缘关系较远;俄罗斯选育品种的遗传多样性高于山葡萄品种与俄罗斯野生葡萄资源。11对SSR引物含有丰富的多态性信息,73份葡萄资源产生了中度的遗传分化,基因流较丰富,俄罗斯葡萄资源的遗传多样性较丰富,可用于山葡萄新品种选育。     

中国野生葡萄资源在生产和育种中利用的概况

中国自古就有采食葡萄野果的习惯。自从2000多年前葡萄的栽培种——欧亚种传入我国,国内原产野生葡萄逐渐失去重视,但其栽培利用在一些地方一直延续至今。刺葡萄是中国野生葡萄中果粒最大的一个种,因其耐湿热和抗病性强,在江西、福建、湖南、贵州等地区一直作为鲜食葡萄栽培利用至今。长期以来,毛葡萄在广西、湖北、陕西、西藏等地被用作生产独具地方特点的野葡萄酒。山葡萄在东北被用作酿酒原料的历史有90年以上。一些野生葡萄被用作抗性砧木育种的亲本材料。新中国成立以来,野生葡萄的栽培利用和遗传改良不断得到重视,实现了山葡萄的人工栽培,选育了大量优良单株,培育了一系列葡萄新品种,在我国葡萄产业发展中发挥了或正在发挥作用。本文对中国野生葡萄资源在遗传改良和栽培利用中的成就进行了总结,旨在引起葡萄育种工作者对中国原产野生葡萄的重视,加强中国野生葡萄在葡萄遗传改良中的利用。     

SSR分子标记鉴定山葡萄和河岸葡萄种间杂种

利用SSR分子标记技术,对山葡萄和河岸葡萄种间杂交后代的真伪性进行鉴别。从12对多态性SSR引物中筛选出能扩增出父本特异性条带的7对引物,作为杂种鉴定的标记。用这7对引物对239株山葡萄和河岸葡萄的杂交后代进行鉴定。结果表明,有161株后代具有父本的特异性条带,结合田间形态学分析,确认为真杂种。另外,后代中还出现了新的条带,表明杂交后代产生了丰富的变异。因此,SSR标记可以有效地对葡萄属种间杂交后代进行真实性鉴定,可作为葡萄种质创新的有效辅助手段。     

山葡萄(Vitis amurensis)资源核心种质的初步构建

采用省份分组-花型分组-聚类-分组法构建了山葡萄核心种质,在此基础上,考虑到山葡萄品种在生产上和雄株山葡萄在科学研究上的作用,把未进入核心种质的山葡萄品种和雄株山葡萄也并入核心种质。该核心种质包括48份资源（占资源总数的31％）,其中来自吉林省的资源18份（占37．5％）,黑龙江省的资源29份（占60．4％）,辽宁省的资源1份（占2．1％）;两性花资源22份（占45．8％）,雌能花资源21份（占43．8％）,雄株5份（占10．4％）。除出汁率外,其他性状的符合度达72％以上;除果粒质量外,其他性状的变幅吻合度达79％以上。以上结果表明,所构建的核心种质较好地代表了评价的山葡萄资源。     

山葡萄的新变型

本变型和山葡萄的主要区别在于花两性,叶较薄,叶片组织的过氧化物酶同工酶的酶带多一条,而山葡萄的花雌雄异株,叶较厚,过氧化物酶同工酶的酶带少一条。     

花锚的三种新(口山)酮甙

从抗肝炎植物药花锚中分得了三种新天然产(口山)酮双糖甙。经化学反应和光谱分析,化合物Ⅰ和Ⅱ分别被鉴定为1-O-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5,7-四甲氧基(口山)酮和1-O-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,5-三甲氧基(口山)酮。经药理实验证明,该两成分为该植物抗肝炎的主要水溶性活性成分。化合物Ⅲ的结构初步被鉴定为1-0-[β-D-木吡喃糖-(1-6)-β-D-葡萄吡喃糖]-2,3,4,5-四甲氧基(口山)酮。     

几种野生果树种子氨基酸的测定

应用氨基酸自动分析仪测定山定子(Malus baccaea(L.)Borkh.)山梨(Pyrus ussuriensi s Maxim.)山里红(Crataequ spinnatifida Btmqe)山杏(Prunussibirica L.)山桃(Prunus dalidina(Care.)]山葡萄(Vitaceaeamrrensis Rupr。)等六种种子的氨基酸。测试结果表明,这些种子含有14～17种氨基酸,其总含量较多的是山梨、山定子、山里红,其次是山桃、山杏、山葡萄;含人体必需的八种以上氨基酸(色氨酸因分解无法测其含量),其总含量较多的是山梨、山杏、山定子,其次是山里红、山桃、山葡萄;而含赖氨酸     

‘双优’两性花山葡萄浆果发育的研究

对两性花山葡萄‘双优’及雌性花‘左山一’山葡萄等生长发育规律及其果实性状进行了系统的研究,结果表明：浆果的生长发育曲线呈单‘Ｓ’型,表现出慢—快—慢的生长节奏。双优的果实性状明显优于其它山葡萄品种,而且能够自花结实,但双优的座果率低于‘左山一’。     

吉林省山葡萄资源及开发利用

东北山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)是葡萄科葡萄属植物中一个重要的种,由于它的抗寒性极强,浆果酿造品质良好。作为选育抗寒葡萄品种的原始材料,早已引起国内外的重视并得到广泛的利用。吉林省通化葡萄酒厂、吉林市长白山葡萄酒厂、黑龙江省一面坡葡萄酒厂生产的山葡萄酒,酒香浓郁,余味绵长,具有独特的风味和果香,不但深受国内市场的欢迎,还远销世界几十个国家和地区。     

山葡萄种质资源DNA条形码通用序列的筛选

对山葡萄(Vitis amurensis)种质资源样品的ITS、ITS2、psb A-trn H、rbc L和mat K序列进行PCR扩增及测序,优化PCR反应的退火温度,比较各序列的扩增效率、测序成功率、品种间和品种内的差异及barcoding gap图,使用BLAST和NJ树法比较不同序列的鉴定能力,最终从5条DNA片段中筛选出可用于山葡萄种质资源鉴定的DNA条形码通用序列。结果表明,在采集的11份33个山葡萄样品中,psb A-trn H和ITS2序列的扩增与测序成功率较高,其品种间、品种内差异及barcoding gap较ITS、rbc L和mat K序列具有明显的优势,且ITS2序列能够鉴别psb A-trn H序列无法鉴别的品种。实验证明,ITS2和psb A-trn H序列是较适合鉴别山葡萄资源的DNA条形码序列组合。DNA条形码弥补了形态学鉴定的不足,可为山葡萄种质资源的准确鉴定提供科学依据。     

三种不同抗冻性葡萄中CBF2基因的生物信息学分析及植物表达载体构建

从赤霞珠、贝达和山葡萄三种不同抗冻性葡萄的基因组DNA中分别克隆了CBF2全长基因,并利用生物信息学的方法进行了分析。结果显示：三种葡萄的CBF2基因长均为969 bp,编码253 个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸相似性在96.7%～97.94%之间。生物信息学分析显示3种不同抗冻葡萄的CBF2基因具有连续的开放阅读框,推倒的氨基酸序列具有AP2结合域,初步判断克隆的CBF2具有诱导抗寒性产生的作用。但氨基酸序列、进化树、理化性质、疏水性/亲水性等在抗寒性较强的山葡萄、贝达与抗寒性较差的赤霞珠之间存在一些差异,与GenBank上的原始序列同源性最低的是赤霞珠,而且其CBF2 N端7个氨基酸残基序列与山葡萄和贝达的氨基酸序列存在较大差异,且具有较强的疏水性,这些差异可能与赤霞珠较弱的抗寒特性有关。以带有35S启动子的载体pBI121为基础,成功构建了植物表达载体pBI121 CaMV35S CBF2,为深入研究CBF2基因在葡萄抗寒性中的作用提供了基础资料。     

不同干旱胁迫对山葡萄的光合作用和光系统II活性的影响

以山葡萄品种中抗性较强的‘左山一’和抗性较弱的‘双丰’品种为材料,利用气体交换分析和叶绿素荧光诱导动力学分析手段,研究了干旱胁迫对不同抗性山葡萄品种的光合作用和PSII活性的影响。结果显示,2种山葡萄叶片的净光合速率均随着干旱胁迫的加重而下降,并且细胞间隙CO2浓度升高,证明非气孔限制是干旱胁迫造成山葡萄光合速率下降的主要原因。JIP-test分析发现,干旱胁迫导致‘双丰’叶片相对荧光诱导动力学曲线中J点和I点相对可变荧光上升,同时出现了明显的K点,‘左山一’叶片的相对荧光诱导动力学曲线没有明显变化,说明干旱胁迫对‘双丰’叶片PSII电子供体侧和受体侧造成的伤害要显著大于对‘左山一’叶片的伤害,且干旱胁迫对‘双丰’叶片的最大光化学效率(Fv/Fm)、吸收光能为基础的光化学性能指数(PIABS)、单位面积有活性反应中心的密度(RS/CS)及单位面积用于电子传递的光能(ETo/CS)的改变幅度显著大于‘左山一’。干旱胁迫通过干扰山葡萄叶片PSII电子供体侧、受体侧以及电子传递链的功能,严重的伤害了叶片光合机构的正常功能。干旱胁迫对抗旱性较强的‘左山一’PSII活性的影响显著小于对抗旱性较弱的‘双丰’葡萄。     

山葡萄果实发育过程中花色苷和非花色苷酚成分及其含量的变化

以‘双红’山葡萄果实为试材,采用HPLC—MS／MS技术,分析山葡萄果实发育过程中果皮中花色苷和非花色苷酚成分及其含量的变化。结果表明,转色期前果皮内没有花色苷积累,随着果实的成熟,花色苷含量逐渐增加,成熟期的含量最高;非花色苷酚自花后2周至成熟期间的含量变化呈下降趋势。在山葡萄果实发育过程中检测出花色苷10种,其中双糖苷5种、单糖苷5种;非花色苷酚类物质检测到14种,其中苯甲酸类2种、肉桂酸类3种、黄烷-3-醇类2种、黄酮醇类5种、白藜芦醇类2种。     

滇黄芩中的两个酮甙

从龙胆科滇黄芩属植物滇黄芩(Veratrilla baillonii Franch.)中分离得到两个新的(口山)酮甙,分别命名为:滇黄芩甙C(I)和滇黄芩甙D(Ⅱ).经各种光谱解析及化学反应证明,其结构推定为:2,3,4,5-四甲氧(口山)酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6←l)-β-D-吡喃木糖甙(I)和3,4,5-三甲氧基(口山)酮-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基(6←1)-β-D-吡喃本糖甙(Ⅱ).     

RAPD标记在山葡萄种质鉴定中的应用

采用修改后的CTAB 法获得了高质量的基因组DNA 。利用RAPD 标记技术对山葡萄7 份种质进行鉴定, 用4 个引物(从30 个引物中筛选)对试材进行PCR 扩增, 共扩增出30 条谱带, 平均每条引物产生7.5 条谱带, 其中21 条谱带为多态性谱带, 占总谱带数的70%。不同引物扩增的谱带数不同, 范围在6~9 条之间。利用4 个引物扩增出的多态性谱带可以将7 份山葡萄种质区分。