儿童过敏性结膜炎与变应性鼻炎的相关性及鼻眼联合防治效果分析

目的：探讨儿童过敏性结膜炎与变应性鼻炎的相关性研究及鼻眼联合防治的临床效果。方法：回顾性分析300 例儿童过敏性 结膜炎与310 例儿童变应性鼻炎患者的临床资料,对儿童过敏性结膜炎与变应性鼻炎的相关性进行分析后将所有患儿随机均分 为对照组与观察组,对照组采用常规点眼的方法进行治疗,观察组则采用鼻朗喷鼻联合人工泪液点眼进行治疗。比较两组临床疗 效及不良反应情况。结果：（1）300 例过敏性结膜炎患儿中,50 例（16.67%）并发变应性鼻炎;310 例变应性鼻炎患儿中,59 例 （19.03%）并发过敏性结膜炎（P＞0.05）;（2）109 例同时并发两种疾病患儿中,均进行眼结膜与鼻粘膜的刮片检查嗜酸性粒细胞, 其中60 例（55.05%）结膜刮片与67 例（61.47%）鼻粘膜刮片检测到嗜酸性粒细胞（P＞0.05）;（3）两组治疗前后BUT 及角膜荧光素 染色评分、症状评分、临床总有效率比较差异明显（P＜0.05）。结论：儿童过敏性结膜炎与变应性鼻炎具有一定的相关性;鼻朗喷鼻 联合人工泪液点眼治疗儿童合并变应性鼻炎的临床疗效显著。     

变应性鼻炎患者外周血中IL-27和Treg细胞的相关性分析

目的探讨外周血IL-27和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在变应性鼻炎（AR）发病机制中的作用。方法2012年3月至7月,收集AR患者32例（AR组）和20例健康志愿者（对照组）外周血,采用流式细胞术（FCM）检测外周血中Treg细胞比例;ELISA检测血清中IL-27、IL-10和TGF-β1的水平。结果AR组Treg细胞百分率[（1．75±0．56）％]明显低于对照组[（4．76±1．75）％],两组比较的差异有统计学意义（P〈0．01）。AR组IL-27、IL-10和TGF-β1的水平分别为（24．43±16．36）pg／ml、（14．29±6．16）pg／ml、（0．34±0．04）pg／ml,均低于对照组（44．09±13．12）pg／ml、（31．32±21．20）pg／ml、（O．49±0．06）pg／ml,两组之间的差异有统计学意义（P〈0．01）。AR患者外周血中IL-27和Treg细胞百分率、IL-10、TGF-β1存在正相关（r分别为0．825,0．646,0．517,P〈0．01）,Treg细胞百分率和IL-10、TGF-β1存在正相关（r=0.622,0．738,P〈0．01）,IL-10和TGF-β1无相关性（r=0．304,P〉0．05）结论AR患者外周血中IL-27水平降低,Treg细匏百分率降低及其主要分泌因子IL-10、TGF-β1水平降低,且IL-27与Treg细胞百分率、IL-10、TGF-β1水平呈正相关,提示在AR发病中IL-27对Treg细胞可能具有免疫调节作用。     

孟鲁司特与糠酸莫米松鼻喷剂联合治疗儿童变应性鼻炎的近期疗效观察

目的:评价口服孟鲁司特和糠酸莫米松鼻喷剂联合治疗儿童变应性鼻炎的近期疗效,以优化儿童变应性鼻炎的治疗方案。方法:选择2011年4月~2012年4月在潍坊市人民医院耳鼻喉科就诊并确诊为变应性鼻炎的患儿48例,随机分为联合用药组(MM组,24例)和糠酸莫米松组(MS组,24例)。MM组患者给予糠酸莫米松喷鼻(早晨喷鼻1次,每次2喷),孟鲁司特片口服(5mg/次,1次/天,睡前30分口服);MS组患者给予糠酸莫米松喷鼻(早晨喷鼻2次,每次2喷)。两组的治疗疗程均为3个月,治疗后观察和比较两组患者鼻塞、鼻痒、流清涕、喷嚏等临床症状及鼻内镜的检查结果。结果:治疗1个月后,两组治疗总有效率的差异无统计学意义(P0.05);治疗3个月后,两组症状评分的改善高于1月末(P0.05);治疗3个月后,MM组的治疗总有效率显著高于MS组(P0.05)。结论:糠酸莫米松与孟鲁司特联合治疗儿童常年性变异性鼻炎的临床疗效优于单用糠酸莫米松治疗,且不良反应少。对于常年性变应性鼻炎患儿的治疗应以序贯性和个体化治疗为原则,最大程度发挥糠酸莫米松与孟鲁司特间的相互协同作用。     

变应性鼻炎患者外周血中Tr1/Th3细胞的检测和分析

目的:检测变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者和健康对照者外周血中IL-10+CD4+T细胞、TGF-β+CD4+T细胞(分别代表Tr1细胞和Th3细胞的特性)的比例,并探讨其在AR发病中的意义,为AR的治疗提供临床参考。方法:分离19例对粉尘螨过敏的AR患者和19例健康对照者外周血单个核细胞(PBMCs),采用流式细胞术分别检测外周血中IL-10+CD4+T细胞、TGF-β+CD4+T细胞的比例。结果:同健康对照者相比,AR患者外周血中IL-10+CD4+T细胞的比例显著降低[(1.66±0.48)%vs.(3.80.92)%,t=-9.08,P0.01)],AR患者外周血中TGF-β+CD4+T细胞的比例降低[(1.92±0.54)%vs.(4.76±1.12)%,t=-9.94,P0.01)]。结论:外周血中IL-10+CD4+T(Tr1)细胞比例的降低可能是AR发病的一个重要因素,提高AR患者外周血中分泌IL-10的Tr1细胞的比例可能在AR的治疗中具有重要意义。外周血中TGF-β1+CD4+T(Th3)细胞的比例显著降低,可能是AR发病的一个重要因素。但TGF-β1与AR关系的研究较少,特别是外周血中TGF-β1水平与AR的关系研究较少,需进一步研究。     

孟鲁司特与糠酸莫米松鼻喷剂联合治疗儿童变应性鼻炎的近期疗效观察

目的：评价口服孟鲁司特和糠酸莫米松鼻喷剂联合治疗儿童变应性鼻炎的近期疗效,以优化儿童变应性鼻炎的治疗方案。方法：选择2011年4月-2012年4月在潍坊市人民医院耳鼻喉科就诊并确诊为变应性鼻炎的患儿48例,随机分为联合用药组（MM组,24例）和糠酸莫米松组（MS组,24例）。MM组患者给予糠酸莫米松喷鼻（早晨喷鼻1次,每次2喷）,孟鲁司特片口服（5mg／次,1次／天,睡前30分口服）;MS组患者给予糠酸莫米松喷鼻（早晨啧鼻2次,每次2啧）。两组的治疗疗程均为3个月,治疗后观察和比较两组患者鼻塞、鼻痒、流清涕、喷嚏等,临床症状及鼻内镜的检查结果。结果：治疗1个月后,两组治疗总有效率的差异无统计学意义（P〉0．05）;治疗3个月后,两组症状评分的改善高于1月朱（P〈0．05）;治疗3个月后,MM组的治疗总有效率显著高于MS组（P〈0．05）。结论：糠酸莫米松与孟鲁司特联合治疗儿童常年性变异性鼻炎的临床疗效优于单用糠酸莫米松治疗,且不良反应少。对于常年性变应性鼻炎患儿的治疗应以序贯性和个体化治疗为原则,最大程度发挥糠酸莫米松与孟鲁司特间的相互协同作用。     

鼻内镜下低温等离子刀鼻后神经切断术与鼻内镜下鼻后神经切断术对中重度变应性鼻炎的近远期疗效及安全性分析

摘要 目的：探讨鼻内镜下低温等离子刀鼻后神经切断术与鼻内镜下鼻后神经切断术对中重度变应性鼻炎的近远期疗效及安全性。方法：选择2019年3月到2021年3月来我院诊治的变应性鼻炎患者90例,将其随机分为对照组与观察组,对照组中48例,观察组42例,对照组给予鼻内镜下鼻后神经切断术治疗,观察组给予鼻内镜下低温等离子刀鼻后神经切断术治疗。对比两组患者术前、术后3个月及术后1年的喷嚏、鼻塞、鼻痒、流涕临床症状评分、临床疗效、生活质量评分、血清血管活性肠肽5水平,对比两组并发症发生率。结果：术后3个月及术后1年,两组临床症状评分降低,且观察组较对照组低（P<0.05）;术后3个月,两组的临床症状评分低于同组间术后1年,但对比无差异（P>0.05）。术后3个月及术后1年,观察组的治疗有效率均较高（P<0.05）。术后3个月及术后1年,两组生活质量评分降低,且观察组较对照组低（P<0.05）;术后3个月,两组的生活质量评分高于同组间术后1年,但对比无差异（P>0.05）。术后3个月及术后1年,两组血清血管活性肠肽5水平降低,且观察组较对照组低（P<0.05）;术后3个月,两组的血清血管活性肠肽5水平低于同组间术后1年,但对比无差异（P>0.05）。观察组的并发症发生率较对照组低（P<0.05）。结论：与鼻内镜下鼻后神经切断术相比,鼻内镜下低温等离子刀鼻后神经切断术可提高中重度变应性鼻炎的近远期疗效,且安全性较好。     

鼻用皮质类固醇对儿童变应性鼻炎患者鼻腔粘液菌群 影响的研究

目的:探讨皮质类固醇激素糠酸莫米松对儿童变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者鼻腔粘液菌群(包括需氧菌和真菌)的影响,同时观察其临床疗效。方法:选择30例儿童AR患者作为观察组,给予糠酸莫米松进行治疗,检测其治疗前后鼻腔粘液的菌群分布情况,同时与对照组的正常儿童进行比较。结果:经糠酸莫米松治疗后,患者的症状和体征显著减轻。细菌检出率和真菌检出率方面,对照组为90.0%和3.3%,观察组治疗前为86.7%和16.7%,治疗后为93.3%和20.0%,对照组与观察组治疗前及观察组治疗前后差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:糠酸莫米松治疗儿童变应性鼻炎,可以改善患者的临床症状,对于鼻腔粘液菌群没有显著影响。     

同时提取油茶中DNA和RNA的简便方法

介绍了一种以CTAB提取方法为基础,结合其它DNA和RNA提取方法,经反复实验建立的一种同时提取油茶DNA和RNA的简便方法。该方法能有效地去除植物组织中酚类和多糖等次生物质的影响,所得到的DNA和RNA纯度高,完整性好,可以用于进一步的如DNA分析,mRNA的分离,RT-PCR,构建cDNA文库和基因表达分析等实验。     

同时抽提DNA和RNA的简便方法

同时抽提ＤＮＡ和ＲＮＡ的简便方法刘定干（中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）关键词ＤＮＡＲＮＡ抽提在研究工作中,常同时需要培养细胞的ＤＮＡ和ＲＮＡ,从同一样品中同时提取ＤＮＡ和ＲＮＡ。目前,已有好几种同时抽提ＤＮＡ和ＲＮＡ的方法［１～４］。作...     

豌豆种子发育过程中DNA和RNA的变化

实验结果表明：豌豆种子发育过程中单粒鲜重、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量都随开花后日数增加而增加。其中豌豆开花第２１天,ＲＮＡ含量达最高峰,拖尾现象消失而趋于单一带区,ＤＮＡ的迁移率也降到最低,从而确定出豌豆开花后第２１天是基因转录活动降低的转折点,为种子蛋白质基因工程研究提供参考。     

用免疫荧光标记对人组织中肥大细胞亚型的分选与形态观察

方法:利用中性蛋白酶成分、特征性酶抗体的免疫荧光染色和流式细胞仪确定分选肥大细胞亚型,以激光扫描共聚焦显微镜显示肥大细胞内分泌颗粒。结果:三种免疫表型被确定:肥大细胞的类胰蛋白酶阳性(MCT)、类糜蛋白酶阴性;类糜蛋白酶阳性(MCC)、类胰蛋白酶阴性和类胰蛋白酶阳性、类糜蛋白酶阳性(MCTC)。肥大细胞内分泌颗粒分散或聚集存在,分泌颗粒突起分泌或以分散的方式释放。分泌颗粒大范围释放后,肥大细胞的形态结构发生了改变。结论:利用肥大细胞的特征性酶抗体、免疫荧光标记和流式细胞仪可将人组织中的肥大细胞分选纯化为三种亚型;以共聚焦显微镜显示肥大细胞含有丰富的分泌颗粒,它说明肥大细胞具备了为人体I型变态反应提供快速反应的物质基础。     

非培养细胞的贴壁方法及细胞内Ca^2＋观测

本文介绍非培养细胞贴壁的简易方法和细胞内Ｃａ＾２＋观察。以ｆｌｕｏ－３／ＡＭ进行染色,在３７℃孵育箱内孵育６０分钟,用激光共聚焦显微镜监测细胞内Ｃａ＾２＋的荧光信号。结果表明本方法可成功地应用于共聚焦显微镜测定细胞的研究。     

变应性鼻炎模型小鼠鼻黏膜的形态学观察

目的:建立小鼠变应性鼻炎模型,观察小鼠鼻腔黏膜组织的重塑情况。方法:20只BALB/c小鼠被随机分为致敏组和对照组,使用卵清蛋白(OVA)诱导建立小鼠变应性鼻炎模型。通过HE染色观察小鼠鼻黏膜的大体重塑情况,吉姆萨染色观察嗜酸性粒细胞,阿辛蓝-过碘酸-希夫染色观察杯状细胞;酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)的水平。结果:小鼠变应性鼻炎模型的生物学行为评分为6.5±1.3,提示造模成功。与对照组相比,致敏组鼻腔黏膜出现上皮细胞脱落、坏死,杯状细胞增生,鳞状上皮化生,固有层和黏膜下层腺体增生、血管扩张,组织水肿,固有层内可见特征性的嗜酸性粒细胞浸润,造模后鼻腔黏膜结构存在重塑。致敏组小鼠鼻黏膜嗜酸性粒细胞计数及杯状细胞计数分别为(26.4±5.72)和(24.14±3.12),而对照组分别是(8.31±2.42)和(9.41±1.22),两组比较均具有统计学差异(P0.05);致敏组血清中白细胞介素4(IL-4)水平为(18.9±3.1)pg/ml,对照组为(8.3±1.4)pg/ml,致敏组显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:通过卵清蛋白诱导建立的小鼠变应性鼻炎模型鼻腔黏膜存在组织重塑。     

In Situ Microspatial Imaging Using Two-Photon and Confocal Laser Scanning Microscopy of Bacteria and Extracellular Polymeric Secretions (EPS) Within Marine Stromatolites

The combination of a hydrophilic embedding resin, Nanoplast, with fluorescent probes, and subsequent imaging using two-photon and confocal laser scanning microscopy (2P-LSM and CLSM) has allowed in imaging of the in situ microspatial arrangements of microbial cells and their extracellular polymeric secretion (EPS) within marine stromatolites. Optical sectioning by 2P-LSM and CLSM allowed imaging of endolithic cyanobacteria cells, Solentia sp., seen within carbonate sand grains. 2P-LSM allowed very clear imaging with a high resolution of bacteria using DAPI, which normally require UV excitation and reduced photo-bleaching of fluorescent probes.     

Bacillus cereus B-02对Botrytis cinerea拮抗机理的研究

采用电子显微镜(扫描、透射)和激光扫描共聚焦显微镜,从细胞形态学和生理学水平上研究蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus B-02过滤液对灰葡萄孢菌Botrytis cinerea的拮抗机理。结果表明,处理菌丝表面形态受到严重破坏,发生强烈变形;菌丝细胞核、线粒体和细胞壁等亚细胞结构发生了明显改变,细胞内出现大量无膜透明内含物,并产生较大液泡。此外,处理菌丝DNA、线粒体膜电位和活性氧荧光强度均低于对照组,且差异极显著;说明B-02菌株对病原真菌菌丝细胞DNA的合成、线粒体膜电位和活性氧水平有重要影响。     

Bacillus cereus B-02对Botrytis cinerea 拮抗机理的研究

采用电子显微镜(扫描、透射)和激光扫描共聚焦显微镜,从细胞形态学和生理学水平上研究蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus B-02过滤液对灰葡萄孢菌Botrytis cinerea的拈抗机理.结果表明,处理菌丝表面形态受到严重破坏,发牛强烈变形;荫丝细胞核、线粒体和细胞壁等哑细胞结构发生了明显改变,细胞内出现大量无膜透明内含物,并产生较人液泡.此外,处理菌丝DNA、线粒体膜电位和活性氧荧光强度均低于对照组,且差异极显著;说明B-02菌株对病原真菌菌丝细胞DNA的合成、线粒体膜电位和活性氧水平有重要影响.     

Confocal microscopy and plant cell biology: A perfect match

Abstract

The present short introduction to confocal microscopy in plant cell biology is meant to be a reference addressed to those who are approaching these studies. Optical and genetic techniques developed over the last years have revolutionised plant cell biology. They enable in vivo studies of cell organisation, mainly based on the use of confocal microscopy and derivatives of the Green Fluorescent Protein (GFP). Such fluorescent proteins are extremely useful tools for directly monitoring gene expression and protein localisation, and for selectively labelling sub-cellular structures. GFP-expressing plants can be directly examined by confocal microscopy to obtain high-resolution optical sections of intact tissues and to allow time-lapse observation of dynamic processes. The application of such approaches to the investigation of root cell responses during arbuscular mycorrhizal colonisation is discussed.     

Fluorescent stains for quantification of DNA by confocal laser scanning microscopy in 3-D

Confocal microscopy requires the use of fluorophores to visualize structures of interest within a specimen. To perform reliable measurements of the intensity of fluorescence, the stain should be specific, penetrate well into tissue sections, and bind stoichiometrically. Furthermore, emission must be linear with respect to DNA content and brightness, and fluorescence should be stable. Confocal microscopy is used to determine DNA ploidy and to analyze texture of nuclei, which is accomplished in three dimensions, because nuclei can be measured within the original tissue context. For this purpose the sample must be stained with a DNA binding fluorophore with the properties described above. Stains with different properties have been developed for different applications. We review here the advantages and disadvantages of these different stains for analyzing DNA ploidy and nuclear texture using three-dimensional microscopy. We conclude that SYBR green I and TO-PRO-3 are the most suitable stains for this purpose at present.     

变应性鼻炎与IRF5的单核苷酸多态性关系

目的:探讨变应性鼻炎与干扰素调节因子5(IRFS)的单核苷酸多态性(SNP)的相关性.方法:采用聚合酶链(PCR)和限制性片段长度多态性(RFL P)方法在新加坡华人中检测110例变应性鼻炎患者及101健康对照组IRF5位点上的3个单核苷酸多态性(rs4728142,rs11770589,rs2280714)计算基因型和等位基因频率.结果:IRF5基因的3个位点的基因型和等位基因频率在变应性鼻组和对照组间差异无统计学意义.结论:新加坡华人IRF5 rs4728142,rsl1770589,rs2280714多态性与变应性鼻炎无明显相关性.     

双光子及共聚焦激光扫描显微术研究天花粉蛋白对人绒癌细胞的作用机制

天花粉蛋白(trichosanthin, TCS)是从中草药栝楼根中提取的一种核糖体失活蛋白,具有抗肿瘤和抗HIV功能.应用双光子及共聚焦激光扫描显微术结合特异性荧光探针Hoechst 33342、2′,7′-二氯荧光黄双乙酸酯 (DCFH-DA)、Indo-1和Fluo 3-AM,首次同时观察了TCS诱导人绒癌细胞（JAR细胞）凋亡过程中活性氧自由基（ROS）和细胞内钙离子浓度（［Ca²⁺］_i）的变化,实验结果表明TCS引起的［Ca²⁺］_i升高和ROS形成参与了TCS诱导的JAR细胞凋亡,并且ROS形成和［Ca²⁺］_i升高有关.共聚焦激光扫描显微术的研究结果表明,［Ca²⁺］_i升高不是导致ROS形成的主要原因,TCS诱导产生的ROS可能是通过TCS与JAR细胞膜表面受体作用介导的.