用徒手切片法鉴定生物组织中的有机物

1　可溶性还原糖的鉴定切下一片极薄的梨肉薄片 ,放在载玻片上 ,加 2滴刚配制的斐林试剂 ,把载玻片在酒精灯上加热片刻 (注意受热均匀 ) ,盖上盖玻片 ,在显微镜下可看到多边形梨肉细胞内分散着许多砖红色的小颗粒。2　淀粉的鉴定取一小块马铃薯 ,用刀片刮些马铃薯泥放在载玻片上 ,滴上 2滴碘液 ,盖上盖玻片 ,在低倍显微镜下 ,可找到清晰的淀粉颗粒 ,转到高倍镜 ,可看到马铃薯细胞内 ,含有大量圆形或椭圆形的蓝紫色的颗粒。3　蛋白质的鉴定取新鲜的大豆种子 (去种皮 ) ,用刀片切下极薄的一片放在载玻片上 ,先滴 2滴质量浓度为 0 .1g/ m L的…     

介绍一种简便快捷的网状纤维染色法

为了提高病理诊断的阳性率 ,提高网状纤维染色质量及速度 ,减少误诊现象。我们经过反复试验多次摸索 ,网状纤维加温染色法获得了满意的效果。本方法从原来的一个小时缩短到三十五分钟至四十分钟之间 ,即稳定又可靠 ,现将此方法介绍如下。材料和方法1.材料　试剂购自上海虹桥试剂研究所 ,氨银液由技术人员自己配制。二氨银液的配制 (10 %硝酸银、3%氢氧化钠、氨水均购自上海虹桥医用试剂研究所 )一滴一滴加氨水至硝酸银液中直到沉淀不能完全溶解为止 ,再加入氢氧化钠。为使沉淀再溶解在溶液内 ,再一滴一滴地加氨水到仅有微量乳白色为止。加玻…     

用显微镜观察小肠绒毛的方法

取鸡小肠一段,切开,洗净。用鸡毛将绒毛轻轻地向一边扫,然后顺绒毛倒向的一边,切下长13毫米左右,宽3—4毫米的条块。将切块轻放到载玻片上,滴一滴清水,用镊子压住切块两端,再用鸡毛将绒毛向倒向的相反的一条边扫,待看到绒毛在边缘排列较整齐为止,再滴1—2滴清水,盖上盖玻片,装片就制成了。此时,将装片放在显微镜的低倍镜下,经调试,就能看到切块一边缘有多而完整的绒毛。     

观察植物细胞有丝分裂实验的一点改进

本实验采用在载玻片上染色的方法,其具体作法是:把解离后漂洗好的根尖放在载玻片上,用两根解剖针将根尖生长点端拨开,滴一滴0.25%的龙胆紫,染色两分钟.然后再滴一滴     

用显微镜观察蛔虫头部效果好

我们用显微镜观察蛔虫的头部,效果很好,具体做法如下:先用剪刀剪下蛔虫的头部,放在小培养皿中,加入二甲苯,透明五小时左右。再将头部放在载坡片上,用双面刀片尽可能将头部切得更短一些。用眼科镊子使头部竖立起来,再滴加一滴二甲苯,以免标本干缩,影     

花粉管生长测定实验中培养小室的改进

花粉管生长测定实验是用悬滴培养法培养花粉粒 ,使其在潮湿的环境中萌发 ;花粉粒萌发的潮湿环境是培养小室或称潮湿小室。传统培养小室的制作 ,是在一干净载片上放置一玻璃环 (φ=15mm,h=5mm) ,环口用金刚砂磨平 ,并在边缘涂上凡士林 ,使玻璃环固定在玻片上 ,以防止水分蒸发。环内放两滴水 ,然后用一洁净盖玻片 ,中央滴一滴液体培养基 ,再将花粉粒撒于培养基上 ,将此盖片盖于玻璃环上 ,有花粉粒的一面朝下。经2 0～ 2 5℃培养一段时间后 ,将此装置直接放于低倍镜下观察 ,并测定花粉管的长度。这种传统培养小室有 4个缺点 :1)将长玻璃管切割…     

观察小鱼尾鳍血液流动的简便实验

用检查血型的双凹载片,将其一边的凹坑里滴上几滴清水(养鱼缸內的水为好),再将适当大小的单尾的小鱼或金鱼放到载片上,让它的鳃部贴到有水的凹坑里,上面再盖上适当大小的纱布,鳃部也滴上几滴清水,或用纱布把鱼身连同载片包上,露出尾鳍,这样放     

肌纤维简易装片制作及横纹的观察

取蝗虫胸部小束肌肉于玻璃皿中,将10％HCl溶液滴加到肌束上解离30分钟,尔后用玻棒轻研到细绒状。用针挑少许于玻片上,先染色,后用解剖针分离,滴一滴10％亚甲蓝溶液染色1分钟,用吸水纸吸去余液,再用生理盐水冲洗几次除去浮色,然后将玻片置于解剖镜下(肉眼操作亦可),用尖细解剖     

大、小鼠寄生虫检测方法探讨

大、小鼠在所有实验动物中的地位及用量均占首位。作者于1987年进行了大、小鼠寄生虫检测方法探讨,现报道于下。1检测方法抽查的大小鼠分笼过夜(每笼1鼠),翌日逐个收粪,每鼠同时采用下述四种方法检测,比较各种方法的寄生虫检出率。1.1直接涂片检查法取一张清洁的载玻片,滴一滴生理盐水及一滴0.5—1%的碘液,两滴液体相距约0.8—1.0cm。用竹签挑取少量粪便,先在生理盐水中涂抹,再用此竹签在碘液中涂抹。取一清洁薄盖片盖在此2滴粪便混悬液上,生理盐水与碘液扩散后在盖片中间形成一条分界线。在低倍镜下先检查生理盐水的一半,观察有无滋养体、…     

“斐林试剂和双缩脲试剂”使用的再研究

通过实验证实:斐林试剂和双缩脲试剂使用的实验鉴定结果与被鉴定溶液(如豆浆)原有的颜色、鉴定试剂的用量(如滴加的滴数)、被鉴定物质的浓度(如葡萄糖的浓度)有关,与添加顺序无关。     

玻璃上打孔的一种简便方法

在实验室里,常需要在玻璃器皿等上钻孔,如自制玻片微滴培养凹阵,普通玻璃瓶改作滴液瓶用等。以往钻孔需要到专门的工厂或拥有专门的设备加工。几年来,我们采用一种很简便的方法加工,达到同样目的。方法如下:先洗净需加工的玻璃件,凉干或烘干,然后在打孔部位做好记号,用钢锉或砂轮把打孔或需要加工的部位打(锉)毛糙并滴上浓氢氟酸(HF40.0％),或者把需要加工的部位浸润于氢氟酸中,每隔1小时左右,用干布擦净残液,换滴新液;若玻璃厚度大,在擦净残液后,用钢锉或砂轮再打磨一下被腐蚀部位的表面再滴上新液,每隔1小时,如此反复进行,效果较好。通常1毫米厚薄的玻璃,打穿孔约需1天时间,1毫米以下的则很快就能腐蚀穿,2—3毫米厚薄的玻璃板需要的时间约3天,这也要视玻璃件是否便于加工而定,总之用这种化学腐蚀方法来加工小型玻璃器皿等,给实验室工作带来方便。注意事项:因氢氟酸是一种毒物和强烈的腐蚀剂,有刺激嗅味,加工时切勿与人体皮肤直接接触(可带塑     

骨组织总RNA的提取技术

目的探讨Trizol试剂提取骨组织总RNA的技术方法。方法采用高速均质仪进行组织粉碎处理,用Tr-izol试剂提取RNA后,分3组进行RNA纯化处理,并通过紫外分光光度计、电泳、Real-time PCR等方法验证RNA的质量。结果用Tirzol试剂从经粉碎处理的骨组织中所提取的总RNA纯度差,只有再进行DNase1消化及有机溶剂再纯化后,才能保证所提RNA完整且纯净。结论从组织中提取的总RNA经DNase1消化及有机溶剂抽提,可提高RNA质量;另外实验证实用紫外分光光度法判断RNA的质量有许多局限性,利用琼脂糖电泳及Real-time PCR方法也能很简便的判断RNA质量。     

叶绿体色素分离方法的改进

目前多采用纸层析法分离叶绿体色素。一般做法是将少量叶绿体色素的提取液滴于一滤纸中央,用电吹风或自然风干后,在原处再滴少量色素提取液,再风干,如此重复多次,直到滤纸中心的色素斑呈深绿色为止。然后,再将适当的推动剂滴于色斑上,使色素自滤纸中心向四周移动。由于不同色素在滤纸上移动的速度与距离不同,从而把它们分离开来。也有先将色素提取液浓缩于一纸捻一端,而后在滤纸上分离所含色素的。     

草履虫的分离

从野外采来的水中,除有草履虫外,也还会有其他一些微小生物,如眼虫、轮虫和藻类,应设法把草履虫从其他小的生物中分离出来。取玻片平放于显微镜的载物台上,然后用清洁的小吸管取牛肉汁(用1两牛肉2两水蒸熟),滴一滴在玻片左端,再用另一吸管取草履虫液,滴一滴在玻片右端两端相距2厘米左右,用解剖针从肉汁一端,引一条沟,将此两滴连接起来(见图)。在显微镜下可以观察到,苴履虫对牛肉汁反应较敏感,它们可以经过小沟引渡到牛肉汁这一端来。而其他小动物对牛肉汁反应不如草履虫敏感,游动很慢。不等这些小动物游过沟,即把小沟用吸水纸切断、擦干。这样,就将草履虫与其他小生物分离开了。     

口腔上皮细胞取材的简单方法

作口腔上皮细胞装片,可取材于唾液。人口腔咀嚼、说话以及新陈代谢作用,使大量的口腔上皮细胞不断脱落,因此,在唾液中含有大量的上皮细胞。在显微镜下的一个视野里就可以见到几个至几十个上皮细胞。将一滴唾液滴在载玻片上,再染色,盖上盖片即可。此法不用滴生理盐水和用牙签刮取,比传统方法简单得多。而且,用牙签刮取口腔上皮细胞制作的装片,细     

根对矿质元素离子交换吸附实验方法的改进

就地取材,整株挖出草本植物(根系最好是白而嫩),清水洗净根系,置于0.01％亚甲基蓝溶液中浸泡40—60秒钟。取出根系,用蒸馏水反复冲洗掉根系上的浮色。用滴吸管吸蒸馏水并滴到根上,让冲下来的水直接滴于白色比色板的凹中。然后用另一支吸管吸氯化钙(CaCl_2)溶液滴在根上,冲下来的水溶液直接滴于另一个凹中。比较两溶液颜     

菊花茎尖的玻璃化超低温保存研究

本文建立了适合中国菊花种质资源长期保存的玻璃化超低温保存技术体系.在4℃下,把1～2mm的菊花茎尖放在含0.4mol/L蔗糖的MS培养基上暗培养2～3d,用预处理液在25℃下处理30min,再用玻璃化试剂PVS2在冰浴条件下处理15min,换新鲜的PVS2试剂并迅速投入液氮.液氮保存24h后,40℃水浴解冻2min,用含蔗糖1.2mol/L的MS液体培养基洗涤20min,滤纸吸干后接种到恢复培养基中,在25℃条件下弱光培养1～3d转入正常光照培养条件下培养,2周后成活率可达86%以上,成活的茎尖均可再生.     

草菇菌丝原生质体的分离与再生

在适当的酶解条件下,用溶壁酶(Lywallzyme)酶解新鲜的草菇菌丝获得了大量的原生质体。分离出来的草菇原生质体形态正常,质膜清楚,有活力。原生质体通过悬滴培养和浅层培养均能再生成菌丝,其中,悬滴培养的再生频率为2—5%,浅层培养的再生频率为7—10%。     

利用药片包装板进行花粉萌发实验

花粉萌发实验时,必须给试验花粉提供一个便于显微镜下观察且具良好通气保温条件的环境,否则花粉萌发率不高且萌发过程不易清楚观察。我们在教学时利用常见的药片和奶片包装板上的凹槽作为培养小室简便易行、效果很好。方法是用银子小心剥出槽内包装的物品,保持槽底透明塑料无折痕或嗜污,将凹槽完整剪下·口向上平置于载玻片上,也可滴一些封片用树胶将其固定,凹槽内滴1～2滴清水。另取一盖玻片滴一滴花粉前发用培养基,将试验花粉撒在培养基表面,反覆盖玻片于凹槽口,然后即可在显微镜下观察花粉萌发或进行花粉管生长的测定。利用药片…     

花粉发芽实验时花粉播种方法的改进

在做花粉发芽实验时,多采用条播或点播法。笔者在多年试验中发现“接触平播法”具有许多优点,而且简单易行。 1.培养基配制首先配制适宜的蔗糖培养基(若不能肯定,可分设几个浓度),置于60℃水浴锅中备用。取干净载玻片,将不同浓度的培养基分别用滴管在每张片子上滴上2滴,使之稍散开,待培养基凝固后进行播种。 2.播种和镜检从将要开放的花朵中取几个鲜花放在干净载玻片上,在花药上滴一小滴水,用镊子夹挤花药,花粉即会散出并与水混合。取去残渣。然后将这片带有花粉的载片与滴有培养基的载玻片轻轻互贴一下,花粉就均匀地平播在培养基上。播后的载玻片反转过来,放在盛水的搪瓷盘的铁丝架上,并贴上标签,注明花