TLR9的特性及其介导的TLR9/CpG-DNA免疫信号通路

TLRs在天然免疫应答中发挥着重要作用,构成了机体抗感染的第一道防线,是沟通天然免疫和获得性免疫的桥梁。其中TLR9已经被证实能够识别细菌DNA中免疫刺激序列CpG,从而激活哺乳动物细胞的天然免疫机制,这一发现具有重要的生物学意义与应用价值。它不仅进一步推进了外源DNA激活哺乳动物抗感染天然免疫的进一步研究,更为CpG-DNA应用于抗感染、肿瘤和免疫缺陷疾病等的治疗提供新的思路,为改进DNA疫苗效果提供非常有益的帮助。     

TLR9介导DNA病毒的免疫识别

Toll样受体(toll-like receptor,TLR)是免疫细胞表面的模式识别受体(patttern recognition receptoi,PRR),参与微生物病原体相关分子模式(pathogen associated molecular patterns,PAMPs)的识别,从而诱导天然免疫应答。迄今在人类已经确定了10个TLRs家族成员。不同的TLRs识别不同的PAMPs,如TLR9是免疫细胞识别病毒和细菌中非甲基化DNA的必需成分;     

TLR9介导的Myd88信号通路分子在稽留流产患者绒毛组织中的表达及其临床意义

目的:研究TLR9介导的Myd88信号通路在稽留流产患者绒毛组织中的表达及其临床意义。方法:本研究收集了稽留流产患者及正常分娩者的绒毛组织,采用Real-time-PCR及Western-blot方法检测了TLR9介导Myd88信号通路中TLR9、Myd88、TNF-a、NF-κB、IRF1 mRNA和蛋白表达。结果:与正常对照组相比较,TLR9、Myd88、TNF-a、NF-κB、IRF1 mRNA和蛋白在稽留流产组患者绒毛组织中相对表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:稽留流产的发生与TLR9/Myd88信号通路有关。     

Toll-NF-kB信号途径及其介导的功能

Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）家族是宿主细胞识别各种微生物致病成份的主要受体,NF-kB位于TLR下游信号通路的枢纽位置,当细胞受到生物应激刺激后激活NF-kB,活化的NF-kB进入细胞核调节炎性细胞因子的表达,启动针对病原微生物的固有免疫和获得性免疫。因此,对Toll-NF-kB信号途径的研究将有助于对免疫反应、炎症病理的理解。     

TLR9与先天性免疫反应

TLR9（Toll-likereceptor9）是一种微生物病原相关分子结构模式识别受体,TLR9能够识别CpG—ODN（胞嘧啶磷酸鸟甘-寡聚脱氧核苷酸）,使病原相关受体在先天性免疫细胞上表达,并激活下游炎性通路。研究表明,TLR9在先天性免疫反应中产生了重要作用,如脓毒血症、自身免疫性疾病、刀豆体球蛋白A介导肝炎性肝脏损伤、炎性泡沫细胞形成、缺血再灌注损伤等,并且与多种致病因子相关联,如肝x受体、甲酰多肽受体、线粒体DNA等。     

Toll样受体信号通路的负调控

综述了Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)介导炎症反应信号通路的负调控机理．TLRs可以被病原体激活并迅速启动炎症反应,对先天性和获得性免疫反应起着重要调节作用．TLRs介导的免疫反应必须受到严格的调控,持续激活状态可长时间高表达炎症因子,导致机体产生慢性炎症、自身免疫紊乱和其他TLRs相关疾病．正常生理状态下,机体存在着多种TLRs的负调控机制,以维持免疫反应的平衡．该领域的研究近年来取得了重要进展,为许多免疫相关疾病的治疗提供了线索．     

TLR家族及其功能研究进展

由于TLR能识别病原体,从而在病原体入侵机体的早期即启动天然免疫,提示其在抗感染中的重要作用。至今已发现的TLR家族中的TLR1～10,其中TLR～5的结构已经被确定,而对于TLR的功能,现今对TLR在细菌内毒素(LPS)作用下引起的免疫毒理学作用的研究较为深入,提示TLR对由病原体引起的免疫病理损伤有重要的作用。随着研究的深入,发现TLR在促进细胞因子的合成与释放,引发炎症反应;促进免疫细胞膜表面表达相关免疫分子,促进免疫细胞的成熟和功能化;抗病毒感染;调节免疫应答;诱导一氧化氮(NO)依赖性杀菌活性;介导全身免疫病理损伤以及其家族间的协同作用影响免疫应答等方面起到重要的作用。     

TLR4及其作用的研究进展

Toll样受体(toll-like receptors,TLRs)因其积极的研究成果而成为近年来广受关注的一种病原体识别受体,TLRs分布相对比较广泛,不但在小肠上皮、呼吸上皮细胞表达,同时也在血管内皮细胞、树突状细胞[1]、大鼠脾及心肌细胞[2]等细胞中表达.研究证实,它属于模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs),病原相关分子模式(pathogen-associated molecule pattern,PAMPs)可被其辨别,然后引发一系列的信号转导,TLRs 是备受关注的一种PRRs.Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)是TLRs家族中极为重要的成员,是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体,在天然免疫反应中扮演着关键性作用.细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为一类受体,主要作用是介导信号跨膜转导,尤其对革兰氏阴性菌所引起的感染性炎症起着极为关键的作用.由于近年来对TLR4介导的信号转导及TLR4与疾病的关系研究成为热点,本文就TLR4的信号转导、TLR4与LPS的关系及TLR4信号通路调节进行综述如下.     

Toll样受体介导的肠道免疫研究进展

黏膜免疫系统的第一道防线——肠黏膜上皮,不但能区分和识别致病菌和共生菌,而且能启动适当的免疫应答。在机体正常情况下,肠黏膜上皮细胞（IEC）对肠道共生菌持耐受状态,维持肠道内环境的稳定。IEC能识别致病菌的危险信号,激活派伊尔结节,启动免疫应答。有关实验已证实肠黏膜上皮针对肠腔细菌呈“耐受”或“非耐受”状态,主要依赖于Toll样受体（TLRS）介导的信号转导通路。     

TLR/MyD88信号通路与自身免疫性疾病

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是近年来发现的一类模式识别受体,通过识别病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP),激活天然免疫.TLR信号还通过上调抗原提呈细胞(antigen presenting cells,APC)表面共刺激分子及APC分泌的炎症细胞因子调节获得性免疫.TLR/MyD88信号在自身免疫性疾病的发病过程中起重要作用.本文介绍了TLR/MYD88信号通路及其在自身免疫病如实验性自身免疫脑脊髓膜炎、类风湿性关节炎、实验性自身免疫性葡萄膜炎、实验性自身免疫性心肌炎和自身免疫性肾小球肾炎等发生发展中的作用.     

TOLL样受体9在动脉粥样硬化中的作用研究进展

动脉粥样硬化是一种慢性免疫炎症性疾病,它与自身的先天性免疫和适应性免疫密切相关。Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)作为激活非特异性免疫的重要受体蛋白,可以识别病原微生物,激活免疫反应。Toll样受体9是TLR家族中的重要一员,是先天免疫系统中识别细菌和病毒Cp G DNA的重要受体,其与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生发展紧密相关。研究发现,TLR9与动脉粥样硬化的发生、发展(内皮受损和泡沫化细胞形成)密切相关,但也有研究发现TLR9在AS进程中具有潜在的保护效应。本文对Toll样受体9与动脉粥硬化疾病之间关系做一个简要的阐述,简明的总结了TLR9与树突细胞及自噬之间的联系,并为其作为靶点治疗动脉粥样硬化提供新的思路。     

病毒感染对宿主TLRs模式识别与免疫应答信号的影响

TLRs是一类古老的天然模式识别分子,通过识别病毒的PAMPs,活化依赖和非依赖于MyD88的信号通路,诱导IFNs、促炎性细胞因子和趋化因子等分子的释放和表达,清除病毒的感染;同时,病毒为了感染宿主,采用多种免疫逃避策略干扰机体TLRs的信号,尤其调节MyD88、NF-κB、TRIF和IRFs等重要信号分子,以逃避机体天然PRRs的监视、识别和清除。因此,本文重点以VACV、HCV和HIV为例,介绍病毒感染对宿主TLRs模式识别与免疫应答信号的调节,以进一步理解病毒与宿主相互作用的复杂性,为病毒病的有效防治提供理论依据。     

Toll样受体调节树突状细胞中腺苷受体A2B亚型的表达及功能

树突状细胞（dendritic cell,DC）表面所表达的腺苷受体A2B亚型（ADOR-A2B）可促进DC对辅助性T淋巴细胞（T helper cell,Th）的激活,导致自身免疫性疾病的发生或加重. 本文旨在研究作为免疫反应的诱导分子Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）是否可调节ADOR-A2B在DC中的表达并籍此影响其功能. 体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞（BM-DC）,以多种TLRs的配体,Pam3csk4、polyIC、LPS及CpG进行干预. 提取细胞总RNA,real-time PCR测定ador-a2a、ador-a2b的表达;放射性配体结合实验测定BM-DC对3H 腺苷结合能力的变化.以LPS及选择性ADOR-A2B激动剂BAY 60-6583协同干预BM-DC,ELISA测定培养基中IL-1、IL-6及IL-12的含量. 以干预后的BM DC刺激naive CD4细胞,ELISA测定培养基中IL-17A、IFNγ的含量,荧光抗体染色及流式细胞仪分析检测CD4细胞的分化. 结果显示, TLR 4的配体LPS可显著提高BM DC中ador-a2b的表达及对腺苷的结合能力. BAY 60-6583与LPS相协同可刺激BM DC分泌多种致炎因子,并增加其诱导CD4细胞向Th1及Th17分化的能力. 由此可见,Toll样受体可上调ador-a2b在DC中的表达,并可籍此增加DC分泌促炎因子的能力及对CD4细胞的刺激作用.     

CpG DNA特异性识别的关键蛋白Toll样受体-9

Toll样受体在对抗外来病原微生物的天然免疫应答中发挥中心作用。新发现的一种分子识别模型受体Toll样受体-9（TLR9）,能特异性识别CpG DNA并起动信号转导级联反应,在不同种类中的TLR9具有对序列识别的特异性。本文概述国外在TLR9识别作用机制和生物学活性研究中已取得的进展,并提出了今后研究的发展方向。     

胰岛素受体介导的信号传递

就胰岛素与其受体结合后, 信号传递的过程及参与信号传递的细胞内信号分子进行了综述.胰岛素作为一种重要激素,参与机体的新陈代谢, 调节细胞的生长分化.其发挥生理功能的第一步是与靶细胞膜上的受体相结合, 激活胰岛素受体的酪氨酸激酶活性, 随之磷酸化细胞内的信号分子, 从而使胰岛素的刺激信号转化为细胞反应.     

Identification and expression analysis of cobia (Rachycentron canadum) Toll-like receptor 9 gene

Cobia culture is hindered by bacterial infection (Photobacterium damselae subsp. piscicida) and in order to study the effect of P. damselae subsp. piscicida challenge and CpG ODN stimulation on cobia Toll like receptor 9 (RCTLR9), we used PCR to clone RCTLR9 gene and qRT-PCR to quantify gene expression. The results indicated that RCTLR9 cDNA contains 3141 bp. It encodes 1047 amino acids containing 16 typical structures of leucine-rich repeats (LRRs) including an LRRTYP, LRRCT and a motif involved in PAMP binding was identified at position 240–253 amino acid. Broad expression of RCTLR9 was found in larval, juvenile and adult stages irrespective of the tissues. In larval stage, RCTLR9 mRNA expression decreased at 5 d and then increased at 10 dph. At juvenile stage cobia, the expression was significantly high (p < 0.05) in spleen and intestine compared to gill, kidney, liver and skin. However, at adult stage, the significant high expression was found in gill and intestine. Cobia challenged with P. damselae subsp. piscicida showed significant increase in RCTLR9 expression at 24 h post challenge in intestine, spleen and liver, while in kidney the expression was peak at 12 h and later it decreased at 24 h. The highest expression was 40 fold increase in spleen and the lowest expression was ∼3.6 fold increase in liver. Cobia stimulated with CpG oligonucleotides showed that the induction of these genes was CpG ODN type and time dependent. In spleen and liver, CpG ODNs 1668 and 2006 injected group showed high expression of RCTLR9, IL-1β, chemokine CC compared to other groups. Meanwhile, CpG ODN 2006 has induced high expression of IgM. The CpG ODNs 2395 have induced significant high expression of Mx in spleen and liver. These results demonstrates the potential of using CpG ODN to enhance cobia resistance to P. damselae subsp. piscicida infection and use as an adjuvant in vaccine development.     

缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时TLR4信号通路表达的影响

目的：观察缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后TLR4通路表达的影响。方法：成年健康雄性SD大鼠110只,随机分为假手术组（sham组）（n=10）、缺血再灌注组（I／R组）和后处理组（IP组）,后两组又依据缺血再灌注6h、12h、24h、48h、72h不同的时间点再分五个亚组。对各组行神经行为学评分,脑组织梗死体积测量,TUNEL技术检测神经细胞凋亡的情况,免疫组织化学技术观察各组大鼠脑组织TLR4、NF—KB和TNF—a蛋白的表达,原位杂交方法检测各组大鼠脑组织TLR4mRNA、NF-KBmRNA的表达。结果：缺血后处理可下调TLR4、NF-KB、TNF-a细胞炎性因子的表达,抑制细胞凋亡、减少脑梗死体积,改善神经行为。结论：后处理可通过抑制TLR4信号通路表达,减少脑梗死体积,改善神经功能。