增大农垦58s小穗育性对光周期条件响应强度的尝试(简报)

光敏核不育水稻农垦585在15h长日照（LD）下小穗完全不育,在10h短日照（SD）、日平均气温28．4℃（HT,32℃／25℃）或23．5℃（LT,27℃／20℃）下自交结实的小穗只有6％～13％。以小穗育性对光周期条件响应较强为指标做选择,所得农垦58s－01在LD下小穗仍然完全不育,在SD的LT乃至HT下,平均自交结实率超过35％,对光周期的响应增大两倍多。     

HPGMR农垦58s光敏感期叶片中阳离子过氧化物酶的变化

以逐垦５８ｓ水稻为材料,用分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了５８ｓ在１０ｈ／ｄ短日照（５８ｓ－ＳＤ）和自然不育长日照（１４．１２ｈ／ｄ左右,５８ｓ－ＮＤ）条件下,育性转换光敏感期,阳离子过氧化物酶活性同工酶的变化。结果表明,在育性转换期阳离子过氧化物酶活性随幼穗发育时期的推进而升高,在ＮＤ条件下,酶活性升高更快。在所测定的２上时期中,收丙烯酰胺凝胶电泳图谱可以况５８ｓ－ＳＤ和５８ｓ－ＮＤ均有５     

内源植物激素与光敏核不育水稻农垦58S育性的关系

采用气相色谱－质谱联用选择离子检测（ＧＣ－ＭＳ－ＳＩＭ）技术,定性、定量分析了光敏核不育水稻农垦５８Ｓ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ． ｓｕｂｓｐ． ｊａｐｏｎｉｃａ）及对照品种“农垦５８”在长（ＬＤ）、短（ＳＤ）日照处理下,不同发育时期顶端全展叶片中内源ＩＡＡ、ＡＢＡ 和生殖器官中内源ＩＡＡ、ＡＢＡ、ＧＡ１、ＧＡ４ 的含量变化。实验结果表明：在ＬＤ 处理下,农垦５８Ｓ雌雄蕊形成期的叶片和花粉母细胞形成期的幼穗中ＩＡＡ 相继发生亏缺;农垦５８Ｓ－ＬＤ花粉母细胞形成期、单核期和扬花期,生殖器官中内源ＡＢＡ 均低于农垦５８Ｓ－ＳＤ 的含量,“农垦５８”则与此相反;扬花期不育花药中内源ＧＡ１ 和ＧＡ４ 含量剧减。据此认为：生殖器官中早期ＩＡＡ 的亏损、ＡＢＡ 含量剧减伴随着抗逆性能的减弱及ＧＡＳ的不足共同导致了农垦５８Ｓ的雄性败育     

光敏核雄性不育水稻叶绿体的光合特性

本文报告了在育性转换敏感期光周期处理对湖北光敏核雄性不育水稻（农垦５８ｓ）最新全展叶叶绿体光合特性的影响。结果表明：与短日照（ＳＤ）相比,长日照（ＬＤ）处理的农垦５８ｓ水稻叶绿体只有较低的ＰＳⅡ光化活性和ＰＳⅡ原初光能转化效率,其ＰＳⅡ和全链的电子传递速率低,叶绿体中叶绿素ｂ的含量较少,叶绿素ａ／ｂ值比短日照处理的高约１０％。长日照处理使农垦５８ｓ叶绿体的光化活性普遍下降,这可能是导致农垦５８ｓ败育的初始原因之一。     

光周期诱导光敏感核不育水稻花药蛋白变化的研究

采用双向电脉技术对不同光周期条件下,光敏感核不育水稻（农垦５８ｓ）的可育与不育花药蛋白的变化进行分析,发现花粉发育的不同阶段中,不育花药具有四个特异蛋白ｐＩ６．２／ｂＭＷ７０ＫＤ,ｐＩ６．２／ＭＷ６８ＫＤ,ｐＩ６．２／ＭＷ３８ＫＤ和ｐＩ７．４／ＭＷ３７ＫＤ．对游离组蛋白的分析表明．长日照诱导的不育花药中游离组蛋白的相对百分率均明显低于短日照下的可育花药．据此推测长日照诱导不百花药蛋白质组成和代谢变化．不育花药中游离组蛋白含量低,可能受ＤＮＡ合成数量少的影响．     

光敏核不育水稻花药IAA的免疫组织化学分析

首次应用免疫组织化学分析方法对长日和短日处理后的农垦５８Ｓ和对照农垦５８（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．ｓｕｂｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａ）花药中的ＩＡＡ进行了定位研究和相对水平的比较。结果表明,此方法可反映游离态ＩＡＡ在花药中的分布及其相对水平的变化。从雌雄蕊原基形成期至单核晚期的５个时期中,经长日照处理的农垦５８Ｓ花药中的ＩＡＡ水平都低于短日照处理的农垦５８Ｓ及在不同光周期处理下的农垦５８花药。对花     

光周期对光敏核不育水稻叶绿体类囊体膜超分子结构的影响

通过冰冻撕裂叶绿体类囊体膜电镜术的研究,在超分子水平上揭示出长日照（ＬＤ）与短日照（ＳＤ）对突变型光敏核雄性不育水稻农垦５８Ｓ及其野生型农垦５８ 倒二叶叶绿体类囊体膜的形成有不同的影响。农垦５８－ＳＤ 和农垦５８－ＬＤ差别不明显;而农垦５８Ｓ－ＳＤ和农垦５８Ｓ－ＬＤ之间出现较明显的差异：（１）农垦５８Ｓ－ＳＤ 叶绿体类囊体膜的垛叠和非垛叠膜区的４ 个冰冻撕裂膜小面呈现的功能蛋白粒的密度、大小及构象分布与其对照农垦５８－ＳＤ 和农垦５８－ＬＤ 类似,均属正常的超分子结构类型。（２）农垦５８Ｓ－ＳＤ叶绿体垛叠类囊体膜区的外质撕裂面（ＥＦｓ）功能蛋白粒的密度比５８Ｓ－ＬＤ的大,且在有的垛叠膜区呈现出类晶格状的规则排列。（３）农垦５８Ｓ－ＬＤ 叶绿体非垛叠膜区的原生质撕裂面（ＰＦｕ）和外质撕裂面（ＥＦｕ）出现频率较低,往往在基粒的边缘膜或末端中能找到,且分布于膜上的功能蛋白粒的密度较小。有的叶绿体ＥＦｕ、ＰＦｕ、ＥＦｓ和垛叠膜区原生质撕裂面（ＰＦｓ）功能蛋白粒极少或丧失,表明类囊体膜受到严重损伤     

光（温）敏核雄性不育水稻在广州的育性表现及光温反应特性研究

对１２个光（温）敏核雄性不育水稻在广州的育性测定表明：１２个不育系在夏季都有一个不育期,但不育性稳定程度不尽相同,以Ｗ６１１１ｓ和Ｗ６１５４ｓ育性波动较大．其中９个不育系在早晚季各有一个长短不一的可育期,ＫＳ—９仅见第二可育期,ＫＳ—１４则未见可育期．在晚季,７００１ｓ,Ｎ５０８８ｓ,农垦５８ｓ和８９０２ｓ可育恢复较好,可育期明显,而其余７个不育系仅能部分恢复正常．光温处理表明：７００１ｓ,Ｎ５０８８ｓ,８９０２ｓ,农垦５８ｓ和８９１２ｓ为光敏型,长日条件下不育性受温度影响不大,但短日条件下不育性恢复程度与温度有一定关系．Ｗ６１５４ｓ和Ｗ８０１３ｓ,培矮６４ｓ,ＫＳ—１４和ＫＳ—９为温敏型．Ｗ６１５４ｓ和Ｗ８０１３ｓ转育起始温度在２４—２７℃间,ＫＳ—１４和培矮６４ｓ则在刀一２４℃间．     

免疫测定光敏核不育水稻中光敏色素Ⅰ含量

光敏核不育水稻（农垦５８Ｓ）是中国水稻研究中的一个重要发现,在水稻杂交育种上有巨大潜力。研究表明：农垦５８Ｓ的雄性不育性受光周期调控,光敏色素是育性转变过程中光周期反应的光受体,然而,鉴于高等植物中存在至少两种不同的光敏色素分子,并且它们同时存在于水稻中,人们对调节农垦５８Ｓ雄性不育过程的光敏色素分子种类及作用方式仍然不清楚。本文采用酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）,比较了不同光周期下农垦５８Ｓ和对照品种农垦５８叶片（光周期感受器官）中光敏色素Ｉ（ｐｈｙＡ）的含量。从农垦５８Ｓ的二次枝梗原基分化期开始,进行１０天的光周期处理。一组为短日照（ＳＤ）,另一组为长日照（ＬＤ）。在第１０个暗期结束前,于暗绿光下收获每株水稻的最上部两片新展叶,立即保存在液氮中。样品在研钵中磨成液氮粉,然后加入提取液（含５０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣＩ和０．２ｍｏｌ／Ｌ巯基乙醇,ｐＨ８．５）匀浆。粗提液经０．５％聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）沉淀后,上清液供ＥＬＩＳＡ分析。以燕麦ｐｈｙＡ的多克隆抗体、单克隆抗体分别作ＥＬＩＳＡ的一抗和检测抗体。采用ＥＬＩＳＡ可以专一性地检测水稻ｐｈｙＡ（Ｔａｂｌｅ１）。几次独立的实验说明,光周期处理对ｐｈｙＡ含     

核酸代谢抑制剂对水稻光敏核不育性的影响

在稻穗分化的二次枝梗期后,观察比较了叶片喷施核酸代谢抑制剂５ＦＵ对水稻光敏核不育性及幼穗发育的影响,结果表明：长日照下,５ＦＵ在使农垦５８Ｓ穗长缩短、颖花数减少的同时,却使其抽穗提前,可育性得到一定程度的恢复;５ＦＵ处理还使农垦５８的抽穗被完全阻止。在短日照下,５ＦＵ处理则使农垦５８Ｓ与农垦５８在穗长与颖花数减少的同时,其抽穗反被延迟,可育性受到抑制而结实率显著降低,上述效应还可被随后施用的恢复剂乳清酸所弱化。因此可以认为光敏核不育现象与稻穗发育中核酸代谢的改变有关。     

光敏核不育水稻光敏色素基因的RFLP分析

以灿稻“ＩＲ３６”光敏色素基因ｐｈｙＡ的ｃＤＮＡ克隆作探针,对光敏核不育水稻“农垦５８Ｓ”和对照水稻“农垦５８”进行ＲＦＬＰ分析,性内切酶ＥｃｏＲｖ,ＤｒａＩ,ＨｉｎｄⅢ、ＸｂａＩ、ＭｓｐＩ等都没有显示出多态性,而用ＨｐａⅡ显示出了多态性。ＭａｐＩ和ＨｐａⅡ是一对同裂酶（识别位点为ＣＣＧＧ）,但二者对识别位点上第２个胞嘧啶（即ＣｐＧ）甲基化的敏感性不同。实验结果表明,“农垦５８Ｓ”ｐｈｙＡ基因中Ｃ     

在控制条件下光敏核雄性不育粳稻抽穗与结实的光周期与温度反…

在人工气候室研究了１５个光敏核雄性不育系粳稻抽穗与结实对日长与温度的反应特性。１个品系抽穗的光周期反应均强,但ＰＳＰ略有差异;而且农垦５８Ｓ在雌雄蕊原基分化前移入ＬＤ,不但抽穗延迟且结实率显著降低,而农垦５８抽穗延迟胜结实正常。高温抽穗促进率品系差异大,２２ ０～４４．９％,较多为２２％－３８％。１５个不育结实的光周期反应明显;它们在高温、低温、ＬＤ下结实明显受阻,有的即使在ＳＤ下结实率亦很低。说     

在控制条件下光敏核雄性不育粳稻抽穗与结实的光周期与温度反应特性

在人工气候室研究了１５个光敏核雄性不育系粳稻抽穗与结实对日长与温度的反应特性。１个品系抽穗的光周期反应极弱,８个中等;６个强;农垦５８Ｓ与其原种反应均强．但ＰＳＰ略有差异;而且农垦５８Ｓ在雌雄蕊原基分化前移入ＬＤ,不但抽穗延迟且结实率显著降低,而农垦５８抽穗虽延迟但结实正常。高温抽穗促进车品系间差异大,从０～４ｄ．９％,较多为２２％～３８％。１５个不育结实的光周期反应明显;它们在高温、低温、ＬＤ下结实明显受阻,有的即使在ＳＤ下结实率亦很低。说明它们雄性细胞较孱弱易受不良光、温条件危害,可能是遗传上有缺陷;繁种时应注意地区的光、温条件,并利用ＳＤ下结实尚可的品系。     

利用分子标记定位农垦58S的光敏核不育基因

对农垦５８Ｓ（Ｏｒｙｚａｓａｔｉｖａｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａ）／大黑矮生标记基因系ＦＬ２组合组建可育集团和不育集团,并以亲本为对照进行了ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ和双引物ＲＡＰＤ分析,结果第１２染色体上的一个单拷贝标记Ｇ２１４０与光敏核不育基因连锁遗传,二者间的遗传图距为１４．１ｃＭ（ｃｅｎｔｉｍｏｒｇａｎ）。在筛选过的１０４０个随机单引物和１９０个双引物中,仅引物ＯＰＡＵ１０扩增出与光敏核不育基因连锁的１．５ｋｂＤＮＡ片段,回收、克隆该ＤＮＡ片段并制备探针,将其转换成共显性的ＲＦＬＰ标记并命名为ＯＰＡＵ１０１５００。分离群体连锁分析表明该标记与标记Ｇ２１４０紧密连锁,将农垦５８Ｓ的一对光敏核不育基因定位于第１２染色体上。     

光敏核不育水稻农垦58S与正常品种“农垦58”在pms1区段无育性基因…

光敏核不育水稻农垦５８Ｓ系由正常品种“农垦５８”自然突变产生。为弄清该突变基因在染色体上的位置,曾用覆盖整个水稻基因组的３００余个ＲＦＬＰ探针对农垦５８Ｓ和“农垦５８”进行了对比分析,得到了７个具多态性的探针,其中２个探针ＲＧ３０和ＺＲ６２６正好落在第７染色体上以前定位的光敏核不育基因ｐｍｓ１所在的区段。以这两个标记对农垦５８Ｓ／“农垦５８”组合Ｆ２随机群体１４０单株进行了ＲＦＬＰ分析,按ＲＦＬＰ     

光敏核雄性不育水稻叶绿体的光合特性

本文报告了在育性转换敏感期光周期处理对湖北光敏核雄性不育水稻最新全展叶叶绿体光合特性的影响。结果表明：与短日照相比,长日照处理的农垦５８ｓ水稻叶绿体只有较低的ＰＳⅡ光化活性和ＰＳⅡ原初光能转化效率,其ＰＳⅡ和全链的电子传递速率低,叶绿体中叶绿素ｂ的含量较少,叶绿素ａ／ｂ值比短日照处理的高化活性普遍下降,这可能是导致农垦５８ｓ败育的初始原因之一。     

光敏核不育水稻幼穗的乙烯生成与育性转换

研究了在不同光温组合下光敏核不育水稻（ＰＧＭＲ）农垦５８５（ＮＫ５８Ｓ）及普通水稻品种农垦５８（ＮＫ５８Ｂ）的幼穗乙烯生物合成变化及其与育性表达的关系。结果表明ＮＫ５８Ｓ幼穗乙烯生成受光周期和温度的共同调节,而光周期对ＮＫ５８Ｂ幼穗乙烯生成无明显影响。ＮＫ５８Ｓ幼穗乙烯生成的变化与育性转换光温作用模式完全吻合。其幼穗乙烯释放速率（ＥＲＲ）与花粉可育度（ｌｎｙ）呈极显著负相关。用ＡＶＧ抑制乙烯生成可使ＮＫ５８Ｓ（ＬＤ）不育性明显逆转,而用ＡＣＣ促进乙烯生成又可急剧降低ＮＫ５８Ｓ（ＳＤ）的可育水平。表明幼穗乙烯生成与ＰＧＭＲ育性表达密切相关,乙烯参与育性转换的调控并可能起着重要作用。     

ADH在光敏感核不育水稻中反应特征的研究

乙醇脱氢酶(ADH)活性在湖北光敏感核不育水稻(HPGMR)幼穗发育的育性诱导阶段对光周期反应非常敏感。此时,在短日照或远红光处理的条件下,乙醇脱氢酶同工酶AdhII活性高,湖北光敏感核不育水稻原始不育株农垦58雄性可育;在长日照或红光间断长暗期的条件下,AdhII活性陡降,表现雄性不育。因此认为AdhII与湖北光敏感核不育水稻育性转换有关,可能是它参予了育性基因表达的调控作用。     

上位性对光敏核不育水稻不育性不稳定性的影响

以来源于农垦５８Ｓ的籼型光敏核不育水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｗａ Ｌ．）培矮６４Ｓ（长日低温下不育性稳定）和８９０２Ｓ（长日低温下不育性不稳定）及其人Ｆ１、Ｆ２群体为材料,通过长日低温和不同长日生态条件的７种处理,并结合ＲＦＬＰ分子标准记,研究了影响光敏核不育基因的育性不稳定性的遗传及其基因定位和基因互作对其育性不稳定性的影响。结果表明：影响光敏核不育基因的育性不稳定性表现为微效基因的作用,定位了     

6—DMAP对小鼠卵母细胞减数分裂启动及孤雌发育作用

小鼠卵泡卵母细胞体外培养过程中加入２ｍｍｏｌ／Ｌ６－ＤＭＡＰ可抑制卵母细胞自发的染色持浓缩和生发泡破裂（ＧＶＢＤ）。源自超排的ＭⅡ期卵母细胞则能为６－ＤＭＡＰ所激活。ｈＣＧ注射后１８－１９ｈ的卵母细胞置于２ｍｍｏｌ／Ｌ６－ＤＭＡＰ的ＣＺＢ溶液中培养０．５ｈ、１ｈ、２ｈ、３ｈ,卵母细胞的激活率分别为２６．１％、７５．２％、７５．８％、７７．３％、卵裂率分别为８８．２％、７３．２％、６７．０％、５８．