影响高山红景天细胞悬浮培养中细胞生长和红景天苷积累的几个因素(简报)

高山红景天细胞悬浮培养过程中,3mg·L916－BA、0．3mg·L－1NAA、60mmol·L－1氮源（其中NH_4~:NO_3~- 为1：1）、0．5～1．25mmol·L－1KH2PO4和200mg·L－1蛋白胨,较适合于细胞生长和红景天苷的积累。在适宜的接种量（3．2g·L-1）下细胞培养24d后,生物量达14．04g·L－1,干细胞中红景天苷含量为5．66mg·g-1。     

高山红景天细胞悬浮培养中pH值对红景天甙胞外释放及细胞活性…

高山红景天细胞悬浮培养中,通过降低培养基ＰＨ值能有效地诱导培养细胞中红景天甙的胞外释放。红景天甙的跨膜运输是一个有与Ｈ对运的动态过程,培养基ＰＨ值决定了红景天甙在胞内外含量的分布。细胞组织在ＰＨ值大于３的培养基中处理３ｈ以内,对细胞活性的影响不大。将诱导释放处理过的细胞转入到新鲜的生产培养基中,细胞仍具有合成红景天甙的能力。     

高山红景天细胞悬浮培养中pH值对红景天甙胞外释放及细胞活性的影响

高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor.)细胞悬浮培养中,通过降低培养基pH值能有效地诱导培养细胞中红景天甙的胞外释放。红景天甙的跨膜运输是一个与H~ 对运的动态过程,培养基pH值决定了红景天甙在胞内外含量的分布。细胞组织在pH值大于3的培养基中处理3h以内,对细胞活性的影响不大。将诱导释放处理过的细胞组织转入到新鲜的生产培养基中,细胞仍具有合成红景天甙的能力。     

氮素营养水平对高山红景天生长和红景天苷含量的影响

在温室中采用砂培法以4种氮素营养水平(1．75、3．50、7．00和14．00mmol／L)培养移栽的高山红景天,50d后测定了生长状况和根的红景天苷含量。株高、全株生物量、地上部分生物量随氮水平的增加而增加,而根生物量、根冠比则随着氮水平的增加而降低。在氮水平为7mmol／L左右时,高山红景天根中红景天苷的含量和产量最高,而低氮水平和高氮水平均不利于红景天苷的积累。     

高山红景天愈伤颗粒组织悬浮培养动力学及工艺的研究

研究了高山红景天愈伤组织颗粒悬浮培养过程的生长及红景天甙合成的规律,发现红景天甙合成与细胞生长偶联,两者之间的关系表示为q=5．38×10^-3μ。其产率系数Yx/s及维持系数m分别为0．66g·g^-1和0．033g·(g·d)^-1。在3.5L气升式反应器中研究了培养过程的操作特性,发现“发泡”现象几乎不存在,氧传递系数K1a的变化不同常规植物细胞的悬浮培养．愈伤组织颗粒在培养过程中经历一个由小变大,后叉变小的过程。     

高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢的调控：Ⅰ …

探索了高山红景天细胞培养中红景天甙生物合成的途径,认为甙元酪醇是红由莽草酸途径的。在此基础上研究了酪醇,Ｌ－酪氨酸与Ｌ－苯丙氨酸三种前体加入对就天甙生物合成的调控作用。结果表明,酪醇,酪氨酸等前体易被酚氧化成褐色,用与前体浓度为１：１的ＶＣ来防止褐化效果显著;     

高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢调控Ⅱ：真 …

考察了６种真菌诱导物对高山红景天（Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ,Ｂｏｒ）细胞生长与红景天甙积累的影响。其中以黑曲霉诱导物效果最好。在细胞培养初期添加浓度为４０ｍｇ（ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ）Ｌ的黑曲霉诱导物能使培养细胞中红景天甙含量提高到０．９９５％。前体与诱导物调控组合运用最终使红景天甙产量达到１６７．４ｍｇ／Ｌ,是对照培养的３．８倍。另外,对真菌诱导物的作用机理也进行了探讨,真     

高山红景天生长规律观察

高山红景天生长规律观察张卫东,秦佳梅,张增江（通化市园艺研究所,通化１３４００１）高山红景天（ＲｈｄｉｏｌａｓａｃｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ;Ｂｏｒ。）为景天科红景天属多年生草本植物。是目前较人参、刺五加更为理想的滋补强身药。因资源贮量小,目前正大面积...     

光质对悬浮培养黄岑细胞生长及黄岑苷积累的影响

研究了不同光质、光强和光期对悬浮培养黄芩(Scutellaria baicalensis)细胞的生长、细胞中苯丙氨酸氨基裂解酶(PAL)活性及黄芩苷含量的影响。白光、紫外光、红光和蓝光对悬浮培养黄芩细胞PAL活性和黄芩苷含量有不同的影响。白光、紫外光和蓝光对PAL活性和黄芩苷的积累具有诱导促进作用,其中紫外光的促进作用最强,白光和蓝光的促进作用较弱,而红光照射对PAL活性和黄芩苷的积累有一定的抑制作用。在0-60μmolm-2s-1紫外光照射强度范围内,PAL活性和黄芩苷含量随着紫外光照射强度的增加而显著提高。实验结果同时表明,红光照射显著促进黄芩细胞的生长,紫外光抑制黄芩细胞的生长,而蓝光和白光对悬浮培养黄芩细胞生长的促进作用不明显。与黑暗(对照)相比,每天8h光照强度为60μmolm-2s-1的紫外光、16h光照强度为50μmolm-2s-1的红光交替处理,在培养12d后,细胞的鲜重和黄芩苷含量为对照的1.16和3.2倍,黄芩苷的产量达到439mgL-1,是对照的3.8倍。     

土壤水分对高山红景天生长和红景天甙含量的影响

温室中3种土壤水分条件(土壤相对含水量分别为35％～55％、55％～75％和75％～95％)下,以55％～75％土壤相对含水量上生长的高山红景天的株高、生物量、红景天甙含量和产量最高。     

高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢的调控 Ⅰ:前体的影响

探索了高山红景天(Rhodiola sachalinensis A.Bor)细胞培养中红景天甙生物合成的途径,认为甙元酪醇是经由莽草酸途径生成的。在此基础上研究了酪醇、L-酪氨酸与L-苯丙氨酸三种前体加入对红景天甙生物合成的调控作用。结果表明,酪醇、酪氨酸等前体易被多酚氧化酶氧化成褐色,用与前体浓度为1:1的V。来防止褐化效果显著;浓度为0.5mmol/L的酪醇,酪氨酸及苯丙氨酸在细胞培养15d时添加,使红景天甙含量由0.336％分别提高到1.43％、1.11％、0.85％。     

高山红景天细胞悬浮培养中红景天甙生物合成代谢调控Ⅱ:真菌诱导物的影响

考察了6种真菌诱导物对高山红景天(Rhodiola sachalinensis A. Bor)细胞生长与红景天甙积累的影响。其中以黑曲霉诱导物效果最好。在细胞培养初期添加浓度为10mg(carbohydrate)/L的黑曲霉诱导物能使培养细胞中红景天甙含量提高到0.995％。前体与诱导物调控组合运用最终使红景天甙产量达到167.4mg/L,是对照培养的3.5倍。另外,对真菌诱导物的作用机理也进行了探讨,真菌诱导物添加促进红景天甙的积累应该与激活培养细胞中的苯丙烷类代谢途径有关。     

生长调节剂对石刁柏悬浮培养细胞的生长和多糖含量的影响

选取在MS十2,4DI．0ms／L（单位下同）＋6－BA0．2培养基上,每30～40d继代1次的一年生长石刁柏（As～（nxv）zllaLLi）愈伤组织无性系,于26士IC下进行无菌悬浮培养,培养基为MS＋2,4D0·4＋6－BA0．4,每4d换液1次,8～12d继代1次,3个月后用于实验。测定生长（60C下供至恒重）和多糖（0．15g干培养物加3ml水,超声波处理回～2min后匀浆,于90C水浴中置lh,离心,上清液加2倍体积酒精沉淀过夜,取沉淀加入1．5ml水）。多糖测定按苯酚硫酸法（张惟杰．复合多糖生化研究技术．上海：上海科学技术出版社,1987．6）。结果表明：回…     

若干因子对鸡冠花悬浮培养中花色素苷积累的影响

本文研究几种植物生长调节剂和蔗糖浓度对鸡冠花细胞悬浮培养中花色素苷积累的影响。结果表明,细胞分裂素KT使花色素苷积累明显高于6-BA,且KT在2 μmol/L时积累量最高;2,4-D在2 μmol/L时对花色素苷积累效果明显,其它浓度的2,4-D和NAA对花色素苷积累效果不明显。高浓度蔗糖有利于花色素苷积累;MS+2,4-D(2 μmol/L)+KT(2 μmol/L)+蔗糖(292 mmol/L)为鸡冠花悬浮细胞培养生产花色素苷的最佳培养基。研究中还发现,在黑暗条件培养下无花色素苷积累,推断光是诱导花色素苷积累的主要因素。随着继代次数的增加,花色素苷含量明显增高,但到第4代时基本稳定。     

红豆杉悬浮细胞放大培养的细胞生长与紫杉醇合成动力学

研究了在Murashige&skoog s(MS)和 6 2号两种不同的培养基中 ,红豆杉细胞悬浮细胞从摇瓶到 1 0L机械通气搅拌式反应器放大培养过程中细胞生长与紫杉醇合成动力学 .结果表明 :尽管在不同的培养条件下 ,细胞生长曲线均呈现“S”型 .紫杉醇在延迟期与指数生长期中基本上没有积累 ,而且随着培养规模的增大 ,紫杉醇的含量逐渐降低 .进一步对各级放大培养的细胞生长 ,比生长率与胞内外紫杉醇合成量进行分析 ,发现MS利于细胞生长但不利于紫杉醇合成 ,而 6 2号则相反 .根据此文的结果 ,提出了红豆杉细胞培养条件的优化和大规模细胞培养生产紫杉醇应采取的策略     

石竹细胞悬浮培养研究

石竹细胞继代周期为 7d时 ,悬浮细胞培养系生长最快 ,生长率最高 ,而且培养物中胚性细胞较多 ,并能保持较快的分裂和生长 ,能促进已形成的大细胞团的生长和分化。转代时接种物与新鲜培养基的体积比以1∶2较好 ,悬浮系细胞生长最快 ,生长率最高 ,以 1∶2和 1∶3的高倍稀释接种有利于胚性细胞的形成及产生小的胚性细胞团 ,对悬浮系添加椰乳和水解乳蛋白的混合物 ,可较大幅度地提高悬浮细胞系的生长速率 ,单独添加上述两种物质的效果均不如二者的综合效应好。在 6种不同激素组合中 ,配方 2 (2 ,4 D 1 .5mg/L +NAA0 .5mg/L +6 BA 0 .5mg/L)最好 ,生长率最高。配方 5 (2 ,4 D 1 .5mg/L +NAA 0 .5mg/L +6 BA 1 .0mg/L)其次 ;配方 1 (2 ,4 D 1 .0mg/L +NAA 0 .5mg/L +6 BA 0 .5mg/L)次之。     

除虫菊细胞的悬浮培养

除虫菊悬浮细胞从培养后第8天开始迅速生长,14 d达到最大生长量,其最适培养基为:MS 4mg·L-12,4-D 0.1mg·L-1NAA 0.3 mg·L-16-BA 30 g·L-1蔗糖,最适接种量为15 g·L-1,摇瓶装液的体积分数为40%,初始培养的最适pH值为5.8,收获时pH下降为4.6±1,最适培养温度为25℃.     

几种生理因子对印楝细胞悬浮培养生长的影响

通过研究不同生理因子对印楝悬浮细胞生长的影响 ,建立了一种快速生长的印楝细胞悬浮培养体系。结果表明 ,在添加了 6 BA 0 .8mg/L、NAA 0 .8mg/L、蔗糖 3 0 g/L且初始 pH值为 5 .8的MS培养液中 ,以 60g/L的接种量进行印楝细胞的悬浮培养 ,细胞生长速率可达 4.49g/L·d。     

利用高山红景天培养细胞生物转化外源酪醇生产红景天甙的研究

高山红景天（ＲｈｏｄｉｏｌａｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓＡ．Ｂｏｒ．）培养细胞中,甙元酪醇在细胞生长静止期大量积累,而此时糖基化反应的效率很低,因而红景天甙（ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ）产量较低。考虑到培养细胞中酪醇葡萄糖基转移酶的活性在指数生长期达到最高,考察了在指数生长期添加外源酪醇生物转化生产红景天甙的可能性,并探讨了酪醇添加浓度、添加方法及细胞密度对酪醇转化率及红景天甙产量的影响。结果表明,细胞在酪醇浓度为１ｍｍｏｌ／Ｌ的培养基中培养２４ｈ后可使酪醇转化率达到９５％;过高的酪醇浓度（＞３ｍｍｏｌ／Ｌ）对细胞生长及酪醇转化率都有明显抑制作用;通过较低浓度酪醇的３次重复添加,可使细胞密度为６ｇＤＷ／Ｌ、１２ｇＤＷ／Ｌ及１８ｇＤＷ／Ｌ的培养物中的红景天甙产量分别达到１３２０ｍｇ／Ｌ、１７４０ｍｇ／Ｌ和１９８０ｍｇ／Ｌ。