苞舌兰的离体无性繁殖

InvitroClonalPropagationofSpathoglottisplicataCHENYong-Qin（GuizhouAgriculturalCollege,Guiyang550025）1植物名称苞舌兰（Spathoglottisplicata）。2材料类别茎段。3培养条件基本培养基为VW大量元素＋MS微量元素＋15％（体积比）椰子水。茎段培养基：基本培养基＋6－BA5．0mg·L－1（单位下同）＋NAA1．0；原球茎增殖培养基：基本培养基＋6-BA0．5＋NAA0．5；壮苗培养基：基本培养基十香蕉50．0g·L－1＋活性炭1．0g·L－1。以上培养基中蔗糖用量除原球茎增殖培养基为7．0g·L－1外，均为20．0g·L－1，琼脂用量为8．0…     

桃蚜对吡虫啉次亚致死用量反应的时间-剂量-死亡率模拟分析

采用电动弥雾法测定了桃蚜对吡虫啉次亚致死浓度(0.01～1.0μg·ml^-1)为期1周的反应。所获数据经时间-剂量-死亡率模拟分析,获得了根据不同期望杀蚜水平的致死浓度和致死时间,且二者互为函数关系,即达到同一期望杀蚜水平的时间越长,所需药液浓度越低,反之亦然.以弥雾后第1d和第5d为例,LC50及其95％置信限分别为2.8(1.8～4.6)和0.5(0．4～0．6)μg·ml^-1,LC90分别为7．1(3．8～13．0)和1.2(1.0～1．5)μg·ml^-1,LC99分别为11.9(6.0～23.9)和2.0(1.5～2．8)μg·ml^-1,当药液浓度为1．0、2．0和3.0μg·ml^-1时,LT50分别为2.9、1.4和1.0d,L1、90分别为5．8、3.6和2．4d。结果表明,吡虫啉的田间常规使用浓度(～33μg·ml^-1)是按快速击倒要求确定的,它比24h内LC99的上限还高;稍放宽时间要求,达到特定杀蚜水平所需的药液浓度可大幅降低。     

Xenorhabdus和Photorhabdus代谢产物体外抗肿瘤活性

用8株昆虫病原线虫共生菌(Xenorhabdus属和Photorhabdus属)的发酵液进行了体外抗肿瘤活性的研究,从中筛选出活性较高的菌株一嗜线虫致病杆菌(Xenorhabdus nematophila CB6)。经有机溶剂萃取和硅胶柱层析对嗜线虫致病杆菌发酵液进行进一步分离,得到5个组分。用MTT法测定体外杀肿瘤细胞作用,发现其中2个组分具有抗肿瘤活性。组分3对HepG2、Hela、BGC-823、A-549、K562和HT-29的IC50分别等于3．1μg／ml、8．5μg／ml、2．1μg／ml、3．0μg／ml、4．4μg／ml和1．5μg／ml;组分5对HepG2、Hela、BGC-823、A-549、K562和HT-29的IC50分别等于0．1μg／ml、1．8μg／ml、0．1μg／ml、0．4μg／ml、1．2μg／ml和0．6μg／ml。同时发现抗肿瘤活性组分对正常人肺成纤维细胞MRC-5和正常人肝细胞L-02生长的影响很小。该研究在国内率先报道了嗜线虫致病杆菌发酵液具有较强抗肿瘤活性,为新药物的研制和开发提供了一条崭新的途径。     

高效液相色谱法测定大黄素在Caco-2细胞中的摄取

目的:采用反相高效液相色谱法,观察大黄素在Caco-2细胞中的摄取特点。方法:将大黄素与Caco-2细胞共同孵育,收集细胞样品,液氮反复冻融。取细胞裂解液,加入甲醇提取,提取液采用HPLC进行分析。色谱分析柱为C18柱(250mm×4．6mm,5μm,Diamonsil),流动相组成为85%乙腈及15%水(含0．1%乙酸),流速1ml·min-1,进样量20μl,柱温25℃,3D模式采集数据。结果:检测Caco-2细胞中大黄素的工作曲线的回归方程为Y=0．278x 0．148(Y=0．9996,n=5),线性范围为0．037～4．8μmol·L-1,最低检测浓度为0．018μmol·L-1。当细胞中大黄素的浓度为0．05、2和8．5μg·ml-1时,回收率分别为(101．3±7．3)%、(96．7±3．0)%和(98．7±2．1)%(n=5);相应的日内标准偏差分别为0．25%、2．9%和1．4%;相应的日间标准偏差分别为2．3%、5．6%和6．3%。大黄素在Caco-2细胞中的摄取达峰时间为10分钟,峰浓度为108．56±11．57 nmol/L·mg·protein,10分钟后Caco-2细胞中大黄素的含量迅速下降。浓度处于2-50μM之间时,Caco-2细胞对大黄素的摄取量呈线性增加,浓度达50μM后,随着剂量的增加大黄素的摄取量变化不明显。结论:大黄素可被Caco-2细胞迅速摄取,随着剂量的增加,大黄素在Caco-2细胞中的摄取存在饱和现象。     

新铁炮百合的离体快速繁殖

1植物名称新铁炮百合（Liliumlongiflorum×L．formosanum,铁炮百合和高砂百合的杂交种）。2材料类别鳞片。3培养条件以MS为基本培养基。（1）鳞片初次接种培养基：1／3MS＋6－BA1mg·L-1（单位下同）＋IBA0．02＋GellanGum（美国生产的微生物多糖培养基固化剂）2g·L-1;（2）增殖培养基：MS＋6－BA1．0～1．5＋IBA0．2;（3）球茎形成培养基：MS＋6－BA0．2～0．5＋IAA0．2＋NAA0．05;（4）生根培养基：1／2MS＋IBx0．5。培养基含蔗糖25g·L－1,除（1）外,其它培养基附加普通琼脂5．5g·L－1,pH5．8。培养温度22～25…     

闹羊花素-Ⅲ对斜纹夜蛾和小菜蛾的杀虫活性研究

报道了闹羊花素 Ⅲ对斜纹夜蛾和小菜蛾的杀虫活性。结果表明 ,闹羊花素 Ⅲ对斜纹夜蛾 5龄幼虫处理后 2 4h、48h和 72h的拒食中浓度分别为 16 93μg·ml-1、19 31μg·ml-1和 16 96 μg·ml-1,10 0 μg·ml-1浓度的闹羊花素 Ⅲ处理斜纹夜蛾幼虫 ,幼虫的平均发育历期为 2 2 .36d ,存活率为39 72 % ,化蛹率为 33 95 % ,处理后 72h的雌蛹重为 0 .2 96 g/头 ,均明显低于对照。以 5 0 0 μg·ml-1浓度的闹羊花素 Ⅲ处理小菜蛾幼虫 ,1d后的拒食率为 70 43% ,处理后 5d的化蛹率为 16 6 7% ,羽化率为 6 6 6 7% ,均明显低于对照     

对节白蜡的组织培养及植株再生

1植物名称对节白蜡（Fnainushupehen－sis）,又名湖北白蜡,湖北俗称对节树、望乡树。2材料类别幼嫩茎段,取自本校盆景园20～30年生中型盆景桩（高50～60cm）当年新梢。3培养条件分化培养基：（1）MS＋6－BA2．5mg·L－1（单位下同）;（2）MS＋6－BA5．0;（3）MS＋6BA10．0;（4）WPM＋6-BA2．5;（5）WPM＋6－BA5．0;（6）WPM-6-BA10．0;（7）DKW＋6－BA2．5;（8）DKW＋6－BA5．0;（9）DKW＋6－BA10．0。生根培养基：（1）WPM＋IBA0．5;（11）WPM＋IBA2．0。以上培养基均附加蔗糖30g·L－1,琼脂6g·L-1…     

山葵的离体培养和植株再生

CInvitroCultureandPlangtletRegenerationofEutremawasabiWANGGuang-Dong,LIShi-Jun(DepartmentofHorticulture,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095)1植物名称山葵（Eutremawasabi）,又名山嵛菜。2材料类别带侧芽的根状茎。3培养条件（1）诱导培养基：1／2MS＋6－BA0．2mp·L－1（单位下同）＋NAA0．05;（2）增殖培养基：MS＋6-BA0．2＋KT0．2＋NAA0．05;（3）生根培养基：1／2MS＋NAA0．05。培养基（1）附加琼脂粉5．0g·L－1,其余附加6.0g·L－1。（1）和（2）培养基加蔗糖30g·L－1,（3）加20g·L－…     

地被菊的组织培养

1植物名称地被菊[Dendranthemagrandiflorun（Ramatuelle）cvs.]，品种伏地玉龙、盏黄、橙黄片。2材料类别带腋芽的茎段。3培并条件（1）启动培养基：MS＋6－BA0．1mg·L－1（单位下同）＋NAAO．1。（2）诱导分化培养基两种：MS＋6－BA0.3＋NAA0．1；MS＋6－BA0．5＋NAA0．1。（3）生根培养基：1／2MS＋IBA0．3～0．5＋NAA0．1。上述培养基均加蔗糖20g·L－1，0．5％琼脂，PH值6．0。培养温度27C，光照12h·d-1（人工光和散射光）。4生长与分化情况4．l启动培养取带腋芽的茎段，先用浓度0．1％的洗衣粉液洗净，自来水冲15min…     

几种蛇毒与鲎试剂产生凝胶反应的实验研究

目的探讨蛇毒能否与鲎试剂产生凝胶反应．建立中药及有效成分抗蛇毒作用的试验途径。方法采用鲎试剂试管凝胶反应法。结果不同的蛇毒能使鲎试剂产生凝胶反应的浓度不同,眼镜蛇毒与竹叶青蛇毒为5μg／ml．五步蛇毒0．32μg／ml．蝮蛇毒37．5μg／ml,蝰蛇毒2．5pg／ml。结论蛇毒能与鲎试剂产生凝胶反应。     

氮素营养对非洲菊组织培养芽增值的影响

非洲菊（Gerberajamesonii）品种“签证”的无菌芽，以MS培养基（内含3％蔗糖、0．8％琼脂、10．0mg·L－1KT、05mg·L－1IAA，pH5．8）培养。每100ml的三角瓶内装30ml培养基，接6个芽，置于2000lx光照度（10h·d-1），白天20～30℃、夜间10～15℃下培养。以MS中全氮量为1（MSN），另设1／2含氮量（1／2N）和1／4含氮量（1／4N）处理。铵态氮（NH＋4４－N）和硝态氮（NO－3－N）比值试验是在总氮浓度不变的条件下调整两者浓度，共设2：1、1：1、1：2和1：5四个处理。所有上述处理均接10瓶，培养5周后随机取5个丛芽进行测定。结果…     

内毒素引起的乳鼠心肌细胞血红素加氧酶—1基因的表达

为了探讨在内毒素作用下的乳鼠心肌细胞（neonatal rat cardiomyocytes,NRCMs）血红素加氧酶－1（heme oxygenase-1,HO-1）基因的表达及其在细胞损伤中的作用,分别用10、30及50μg/ml的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）,10μg/ml LPS 10μmol/ml锌原卟啉Ⅸ（Zn-protoporphyrin-Ⅸ,ZnPPⅨ）和单纯10μmol/ml ZnPPⅨ与培养的NRCMs共同孵育6h,以及10μg/ml LPS与NRCMs共同孵育9h和18h。分别观察细胞HO－1 mRNA表达、MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率的变化。结果显示,同样与细胞孵育6h,LPS10μg/ml时HO－1 mRNA表达比对照组增加81.2％,30μg/ml时表达量增加126.3％,50μg/ml时表达量增加92.8％;LPS为10μg/ml时,孵育9h后HO－1 mRNA的表达量比对照组增加93.6％,孵育18h后一增加105.8％。LPS30、50μg/ml,10μg/ml LPS＋10μmol/ml ZnPPⅨ与细胞孵育6h及LPS 10μg/ml孵育18h后,细胞MDA含量、LDH释放量与台盼蓝摄取率明显增加（P＜0.01）;单纯10μg/ml LPS与单纯10μmol/ml ZnPPⅨ孵育6h后,上述指标均无明显升高。结果表明,LPS可诱导NRCMs HO－1 mRNA的表达,且在较低LPS剂量范围内具有时间依赖性和浓度依赖性;NRCMs HO-1 mRNA的表达可减低LPS引起的细胞损伤,这可能是细胞产生的一种自身保护性反应。     

Ⅰ型胶原蛋白在云母表面自组装的AFM研究

目的：利用原子力显微镜(AFM)观察不同浓度、pH值的I型胶原溶液在云母表面的自组装情况,从而研究样品浓度和酸度对胶原蛋白自组装的影响。方法：配制0．8μg/ml、8μg/ml、0．5mg/ml、1．0mg/ml、4mg/ml的胶原醋酸溶液(pH值2．7—3.0)和0.2mg/ml、0．5mg/ml、1．0mg/ml的胶原PBS溶液(pH值7．2—7．4)。取5μl的胶原蛋白溶液,滴于新剥离的云母表面,空气中在25℃室温下自然干燥后用AFM观察。结果：酸性条件下,低浓度时胶原蛋白在云母表面只是简单的吸附,随着浓度的增加,胶原分子在云母表面开始组装形成网状的结构,当浓度达到饱和浓度时,胶原形成无规线团结构。在中性条件下,胶原更容易行成纤维,随着浓度的增加,纤维的直径和长度都随着增加。结论：胶原蛋白分子有在固体表面进行自组装的特性,自组装的结果与样品的浓度、样品溶液的pH值有着很大的关系。     

甲醇诱导模式对重组人白介素11发酵的影响

目的：建立一种在150L发酵罐中提高rhIL-11蛋白产出率的控制方法。方法：研究在毕赤酵母表达rhIL-11的发酵过程中,分别采用间歇法(甲醇浓度0．5%,每24h诱导一次)、分批补料法(甲醇补料速度在8h内从2．88ml/min提高至8．64ml/min)以及恒甲醇浓度法(利用甲醇浓度传感器检测并控制甲醇补料速度使甲醇浓度始终保持0．5%左右)的不同甲醇诱导模式,对工程菌生长及目的蛋白表达的影响。结果：采用间歇法的菌浓OD_(600)可达到80、rhIL-11表达浓度可达到0．1mg/ml;分批补料法的菌浓OD_(600)可达到240、rhIL-11表达浓度可达到1．0mg/ml;恒甲醇浓度法的菌浓OD_(600)可达到300、rkIL-11表达浓度可达到1．0mg/ ml。结论：rhIL-11蛋白产出率,恒甲醇浓度法(约0．12g/d·L)比间歇法(约0．01g/d·L)和分批补料法(约0．09g/d·L)都高,分别提高了12～13倍和30～40%。     

RP-HPLC法测定酸枣仁汤中甘草苷的含量

目的：建立测定酸枣仁汤中甘草苷含量的反相高效液相色谱分析方法。方法：色谱柱：WatersC18（250nm×4．6mm,5wm）;流动相：乙腈一0．1％磷酸水溶液,梯度洗脱;流速：1．0ml／min,检测波长：276nm。结果：芒果苷在0．093μg·0．744μg范围内与峰面积线性关系良好（r==0．9999）,平均加样回收率为98．04％,RSD为0．41％。结论：本方法简便、准确、可靠、重复性好,可作为酸枣仁汤中甘草苷的含量测定方法。     

反相高效液相色谱法直接检测芳香族氨基酸

用反相高效液相色谱-变波长紫外检测法直接测定了芳香族氨基酸。流动相为磷酸盐缓冲溶液(pH6)和甲醇的混合溶液,其体积配比为7030,流速为0.6ml/min,变波长紫外检测,10min内完成。酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸的线性范围分别为50～500μg·mL-1、200～20000μg·mL-1、20～2000μg·mL-1,三者的检测限分别为10μg·mL-1、150μg·mL-1、5μg·mL-1。     

1557株酵母菌的鉴定及其药敏试验分析

目的 研究临床分离的酵母菌种类及其对药物的敏感性。方法 采用API 20C、显色培养基对2004-2005年北京协和医院细菌室分离到的1557株念珠菌进行菌株鉴定,并对2005年收集的酵母菌采用ATB FUNGUS 2对氟康唑,伊曲康唑,两性霉素B,5-氟胞嘧啶进行药物敏感性试验;并以whonet 5．3软件进行结果分析。结果 在1557株酵母菌中自念珠菌为57．5％,热带念珠菌为17．0％,光滑念珠菌为14．8％,克柔念珠菌为2．8％,近平滑念珠菌为2．3％,葡萄牙念珠菌为0．9％,新生隐球菌为0．7％,季也蒙念珠菌0．4％,其他菌株共为3．6％。药敏结果显示：近平滑念珠菌、白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和其他念珠菌对氟康唑的敏感率分别为100％、97．6％、94．5％、81．1％、9．1％和75．0％;对5-氟胞嘧啶的敏感率分别为100％、98．0％、98．0％、99．0％、9．5％和88．0％。伊曲康唑对克柔念珠菌和未鉴定到种的念珠菌的MIC90为1μg／ml,光滑念珠菌为4μg／ml,热带念珠菌为0．5μg／ml,白念珠菌和近平滑念珠菌均为0．125μg／ml;两性霉素B对所有念珠菌的MIC50和MIC90均为0．5μg／ml。结论 白念珠菌比例最高,其次为热带念珠菌及光滑念珠菌。5-氟胞嘧啶和氟康唑对除克柔念珠菌之外的所有念珠菌敏感度都很高,两性霉素B对所有念珠菌的MIC90都很低,伊曲康唑对除克柔念珠菌和光滑念珠菌之外的其他菌株的MIC90较低。     

影响高山红景天细胞悬浮培养中细胞生长和红景天苷积累的几个因素(简报)

高山红景天细胞悬浮培养过程中,3mg·L916－BA、0．3mg·L－1NAA、60mmol·L－1氮源（其中NH_4~:NO_3~- 为1：1）、0．5～1．25mmol·L－1KH2PO4和200mg·L－1蛋白胨,较适合于细胞生长和红景天苷的积累。在适宜的接种量（3．2g·L-1）下细胞培养24d后,生物量达14．04g·L－1,干细胞中红景天苷含量为5．66mg·g-1。     

恩诺沙星残留对土壤微生物功能的影响

研究了恩诺沙星残留对土壤呼吸作用、纤维分解作用、氨化作用、硝化作用的影响 ,结果表明 ,相对较低浓度恩诺沙星残留(0 .0 1μg/ g土 ,0 .1μg/ g土 )刺激土壤呼吸作用 ,相对较高浓度恩诺沙星残留 (1μg/ g土 )对土壤呼吸作用产生抑制 ,药物作用活性维持期为 6 d;恩诺沙星残留对土壤纤维分解作用影响较不明显 ;较低浓度恩诺沙星残留 (0 .0 1μg/ g土 ,0 .1μg/ g土 )对土壤氨化作用有刺激作用 ,而较高浓度恩诺沙星残留 (1μg/ g土 ,10μg/ g土 )则会对其起抑制作用 ,药物作用活性期为 9d;不同浓度恩诺沙星对土壤硝化作用影响极其显著 ,当恩诺沙星浓度达到 1μg/ ml时 ,在 3～ 9d内 ,对土壤硝化作用有一定抑制作用。当恩诺沙星浓度达到 10μg/ ml时 ,强烈抑制了土壤硝化作用 ,直到本试验结束时 ,其抑制作用未见减弱。结果表明恩诺沙星残留影响了土壤微生物这些功能 ,因而可能影响到土壤特性和土壤中一些生态过程     

光照对蒙古裸腹溞摄食强度的影响

利用细胞计数法对不同光照强度、光谱成分、光周期对蒙古裸腹摄食强度的影响进行了研究。结果表明 :光强在 70 0 0 lx时蒙古裸腹对小球藻的摄食强度最高 ,成的滤水率和摄食率分别为 0 .5 2 8± 0 .0 0 9ml/ (ind· h)和 1.113± 0 .0 15μg C/ (ind· h) ,幼的滤水率分别为 0 .4 95± 0 .0 14 ml/ (ind· h)和 1.0 5 1± 0 .0 0 8μg C/ (ind· h)。在蓝光下蒙古裸腹对小球藻的摄食强度明显高于绿光组。光周期 L∶ D为 12∶ 12时蒙古裸腹对小球藻的摄食强度最高 ,成和幼的滤水率分别为0 .4 6 1和 0 .35 5 ml/ (ind· h) ,摄食率分别为 1.2 4 2和 1.0 0 5μg C/ (ind· h) ,而在 L∶ D为 0 :2 4时摄食强度最差 ,成和幼的滤水率分别为 0 .0 70和 0 .0 5 0 ml/ (ind· h)。在自然光照下 ,蒙古裸腹对小球藻的摄食强度在 7∶ 0 0～ 11:0 0和 15 :0 0～ 19:0 0最高