胰腺β细胞的离子通道和胰岛素分泌

1 .胰腺β细胞膜上几种重要的离子通道和动作电位β细胞内的离子通道特性和胰岛素分泌的机制研究是深入了解糖尿病的基础。 2 0世纪 70年代初 ,胰岛 (ｉｓｌｅｔ)电生理研究表明 ,葡萄糖刺激伴随着β细胞膜电势的变化 ,并推测其与胰岛素分泌相关[1] 。 2 0世纪 70年代末 ,Ｎｅｈｅｒ等[2 ] 发明了膜片钳记录技术 ,大大促进了包括β细胞在内的单细胞电生理的研究。1 .1　Ｋ 通道　　 2 0世纪 80年代前期 ,各种不同膜片钳构型的研究都表明 ,葡萄糖刺激下β细胞的膜电势变化源于膜上一种Ｋ 通道活性的改变 ,因其可直接被ＡＴＰ关闭而被命名为…     

胰岛素分泌的细胞内调节物——ADP

胰岛素分泌的细胞内调节物——ＡＤＰ美国华盛顿大学医学院的Ｎｉｃｈｏｌｓ等最近指出,ＡＴＰ敏感型钾通道（ＫＡＴＰ）把细胞代谢过程与电活动相偶联,并且在血糖浓度与胰岛素分泌之间扮演关键的联结角色。一种个体硫酰受体（ＳＵＲ）二级核苷酸键折叠（ＮＢＦ２）突变...     

大黄素对豚鼠结肠带细胞内腺嘌呤核苷酸的影响

大黄素 (Ｅｍｏｄｉｎ)是中药大黄 (Ｒｈｕｂａｒｂ)有效成分蒽醌类衍生物之一。我们已报道 ,大黄素通过促进豚鼠结肠带平滑肌细胞膜电位去极化 ,增强细胞的电兴奋性和收缩活动 ;大黄素作用受ＫＡＴＰ通道特异激动剂ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ的抑制 ,提示其作用与抑制ＫＡＴＰ通道活性相关。本文进一步研究了大黄素对豚鼠结肠带细胞内ＡＴＰ、ＡＤＰ和ＡＭＰ的影响。1　材料与方法(1)标本制作和实验条件　健康豚鼠 (310± 2 5 )ｇ雌雄不限。制备分离的豚鼠结肠带标本 ,长 10ｍｍ ,固定于浴槽中 ,自由收缩的一端与肌张力传感器相连。用改良的Ｋｒ…     

青龙木制剂对小鼠胰腺β细胞单位电活动的影响

目的:观察青龙木制剂(Ambyna preparation)对小鼠胰岛β细胞单位放电的影响,探讨青龙木制剂促进胰岛素分泌的机制.方法:以大于刺激阁以上(＞5mmol/L)的葡萄糖滴注在体小鼠胰腺上诱发胰岛β细胞电活动,用玻璃微电极记录在体小鼠胰岛β细胞的单位放电.结果:青龙木制剂和格列本脲一样加强葡萄糖诱导的胰岛β细胞电活动.结论:青龙木制剂加强葡萄糖诱导的胰岛β细胞电活动进而促进胰岛素的分泌.     

胰岛β细胞中钠通道对胰岛素分泌的作用

胰岛β细胞是典型的兴奋性内分泌细胞,能响应机体葡萄糖水平的升高而分泌胰岛素,其功能受损会导致胰岛素分泌异常,进而引发多种疾病的发生,尤其与糖尿病(diabetes mellitus,DM)的发生密切相关。近年来对胰岛素分泌及调控过程的研究受到越来越广泛的关注,尤其在胰岛素分泌相关的离子通道——钾离子、钙离子通道方面,取得了重要进展,但对钠通道研究较少。钠通道是广泛分布于细胞膜上、亚型众多的一类离子通道,它们通过参与动作电位形成、物质运输和胞间通讯等过程影响细胞的多种生理功能。在此,对胰岛β细胞上钠通道的种类、生理特性、功能等方面的研究进展进行综述,从而为后续胰岛β细胞钠通道的相关研究提供新思路。     

核桃的组织培养和快速繁殖

植物名称　薄壳香核桃 (Ｊｕｇｌａｎｓｒｅｇｉａｃｖ .“ｂｏｋｅｘｉａｎｇ”)。2　材料类别　 3～ 4年生嫁接苗。。3　培养条件　培养基 :( 1 ) 1 /2ＤＫＷ ＢＡ1～ 2ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＩＢＡ 0 .0 1 Ｖｃ2～ 5 ;( 2 )ＤＫＷ ＢＡ2 ＮＡＡ0 .5 ＧＡ0 .5 ;(3)ＤＫＷ ＢＡ 1～ 2 ＩＢＡ 0 .0 1 ;( 4 ) 1 / 2ＤＫＷ ＩＢＡ 2 ＮＡＡ 2 ;( 5 )蛭石培养基。蔗糖浓度为 3.0 % ,琼脂浓度为 0 .6 %～ 0 .8% ,ｐＨ 5 .8,培养温度 ( 2 5± 2 )℃ ,每天光照1 2ｈ ,光照度 1 5 0 0～ 2 0 0 0ｌｘ。4　生长与分化情况4.1　芽的诱导…     

急性分离大鼠新皮层神经元上游活的KATP单电导多通道电流

目的和方法：探讨脑缺血时ＡＴＰ酶感钾（ＫＡＴＰ）通道的变化,在急性分离大鼠皮层神经元上,分别采取膜片钳技术的细胞贴附式和内面向外式记录方法,观察ＮａＣＮ、ＡＴＰ、乳酸和ｐＨ诱发的ＫＡＴＰ,单电导多通道电流。结果：ＫＡＴＰ多通道电流,均为外向电流;第一级电流电导与第二级电流电导基本相同,即为单电导多通道电流。贴附式记录时,对照组和ＮａＣＮ多通道电导分别为（９７．１６±９．３２）ｐＳ和（９３．４９±７     

大鼠胰腺β细胞离子通道的一些特性

实验以单个Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺β细胞为对象,用穿孔膜片箝和细胞贴附式记录技术研究ＡＴＰ敏感Ｋ＾＋通道（ＫＡＴＰ）、延迟整流型Ｋ＾＋通道（ＫＤＲ）、Ｃａ＾２＋通道和Ｎａ＾＋通道的有关特性。结果表明：⑴ＫＡＴＰ通道的内流电导约６５ｐＳ,外流电导约３１ｐＳ,反转电位在－６０ｍＶ左右;⑵ＫＤＲ通道在延迟２０ｍｓ后达到最大激活,ＫＤＲ电流约为ＫＡＴＰ的１／３;⑶钙电流在０ｍＶ左右达到４０－６０ｐＡ的峰值,Ｌ     

败酱的组织培养和快速繁殖

1　植物名称　败酱 (Ｐａｔｒｉｎｉａｓｃａｂｉｏｓａｅｆｏｌｉａ) ,民间称为苦菜。2　材料类别　一年生败酱的茎。3　培养条件　基本培养基为ＭＳ。 (1 )芽诱导培养基Ⅰ :ＭＳ ＢＡ 0 .5ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＫＴ0 .5 ＩＢＡ 0 .5 ;芽诱导培养基Ⅱ :ＭＳ ＢＡ 0 .5 ＫＴ 1 .0 ＩＢＡ 1 .0。 (2 )生根培养基 :ＭＳ ＢＡ 0 .2 ＩＢＡ 2 .0。培养基含蔗糖 3 0 ｇ·Ｌ- 1 ,琼脂 0 .8% ,ｐＨ5 .8,培养温度 (2 5± 1 )°Ｃ ,光照度 1 2 0 0～ 1 40 0ｌｘ ,光照 1 4ｈ·ｄ- 1 。4　生长与分化情况　　取败酱嫩茎用自来水冲洗干净 ,…     

急性分离的大鼠皮层神经细胞膜去极化激活的优降糖敏感钾单通道电流

本实验利用氰化物阻断细胞呼吸链模拟缺氧模型,采用膜片钳技术的记录方法,对急性分离的大鼠大脑皮层神经细胞膜上ＡＴＰ敏感Ｋ￣＋通道特性进行研究。结果提示：在急性分离的大鼠大脑皮层神经细胞膜丢极化激活时,可记录到一类被优降糖（ＡＴＰ敏感钾通道阻断剂）阻断的钾通道,可能属新型ＡＴＰ敏感Ｋ￣＋通道。     

KATP通道活性对豚鼠结肠带平滑肌细胞电和收缩活动的作用

本文应用平滑肌电活动测量和张力测量技术,利用已知的ＫＡＴＰ通道特异性开放剂（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）和阻断剂（ｇｌｙｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ）,研究ＫＡＴＰ通道对豚鼠结肠带平滑肌细胞电和收缩活动的影响。结果表明：１．ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ通过使膜静息电位超极化抑制平滑肌细胞电和收缩活动。２．ｇｌｙｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ可以拮抗ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ的作用。３．降低灌流液中葡萄糖浓度使平滑肌细胞电和收缩活动下降,ｇｌｙｂｅｎｃｌｍｉｄｅ对此有恢复作用。实验证明：豚鼠结肠带平滑肌细胞膜上存在ＫＡＴＰ通道,ＫＡＴＰ通道通过对膜去极化过程的影响对细胞电和收缩活动起重要作用。     

3T3-L1脂肪细胞对MIN6胰岛素细胞中Kir6.2表达的抑制作用

为明确脂肪细胞对胰岛素细胞中KATP通道表达的直接影响,MIN6胰岛素细胞被分为两组：一组为对照组,一组与分化的3T3-L1脂肪细胞共培养1周。运用半定量RT-PCR方法测定MIN6细胞中KATP通道蛋白Kir6．2的表达变化,Fura-2荧光方法测定MIN6细胞内钙浓度的变化,放射免疫测定方法明确MIN6细胞的胰岛素分泌功能。结果显示,与3T3-L1脂肪细胞共培养1周后,MIN6细胞中Kir6．2的表达明显减少,其表达水平降低为对照组的65．3％。对照组MIN6细胞在0．1mmoi／L甲苯磺丁脲(KATP通道关闭剂)的刺激下,表现为细胞内钙水平显著性升高和胰岛素分泌显著性增加,而共培养组MIN6细胞则失去了甲苯磺丁脲刺激所引起的细胞内钙升高及胰岛素分泌反应。以上实验结果表明,3T3-L1脂肪细胞可以通过分泌一些活性因子直接降低MIN6细胞中KATP通道蛋白的表达和合成,损害MIN6细胞的胰岛素分泌功能。实验结果提示脂肪细胞直接参与2型糖尿病中胰岛β细胞功能障碍的发生。     

大鼠结肠平滑肌细胞的钙库操纵性通道

目的:探讨大鼠结肠平滑肌细胞是否存在钙库操纵性通道(SOC)。方法:荧光探针Fura-2/AM标记细胞内游离Ca2+后,用荧光分光光度计检测毒胡萝卜素(thapsigargin)和咖啡因(caffeine)耗竭胞内钙库后激活的SOC通道对酶解分离的大鼠结肠平滑肌细胞[Ca2+]i的影响。结果:在无Ca2+缓冲液中,thapsigargin(1μmol/L)以及caf-feine(10 mmol/L)分别使[Ca2+]i由静息时(68.32±3.43)nmol/L升高至(240.85±12.65)nmol/L(、481.25±34.77)nmol/L,继之,向细胞外液中引入两种浓度的Ca2+(1.5 mmol/L和3.0 mmol/L),导致[Ca2+]i进一步升高,分别为(457.55±19.80)nmol/L、(1005.93±54.62)nmol/L;(643.88±34.65)nmol/L、(920.16±43.25)nmol/L。且上述升高效应对维拉帕米(verapamil,5μmol/L)以及KCl引起的细胞膜去极化不敏感,但可被La3+(1 mmol/L)抑制。结论:在酶解分离的大鼠结肠平滑肌细胞上,存在胞内钙库耗竭激活的SOC通道,为支持在电兴奋性细胞上存在库容性Ca2+内流提供了实验和理论依据。     

大花蕙兰的组织培养和快速繁殖

1植物名称　大花蕙兰 (Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｆａｂｅｒｉ )。2　材料类别　幼芽、幼根。3　培养条件　以ＶＷ和 1 2ＭＳ为基本培养基。诱导圆球茎培养基 :(1 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 1 .2 ＣＭ 1 5 0ｍｌ·Ｌ-1 0 .2 %活性炭 ;(2 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3 ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 2 .0 0 .3 %ＣＨ ＣＭ 1 5 0ｍｌ·Ｌ-1 0 .2 %活性炭。圆球茎增殖培养基 :(3 )ＶＷ 6 ＢＡ 0 .3 ＫＴ 0 .3 ＮＡＡ 0 .2 0 .2 %活性炭。壮苗生根培养基 :(4) 1 2ＭＳ ＧＡ1 .0 ＮＡＡ 0 .1 1 5 %香蕉泥 ;(5 ) 1 2ＭＳ…     

NIDDM发病前后中国地鼠胰岛和肝脏细胞GLUT的变化研究

用胶原酶法分离胰岛细胞、超速离心法提取中国地鼠胰岛和肝脏细胞膜蛋白,ＳＤＳ电泳、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ分离ＧＬＵＴ后,应用ＧＬＵＴ２抗体免疫结合法测定ＧＬＵＴ的含量与分子量,同时测定了动物血糖、尿糖和血浆胰岛素的含量、显微镜下直接计数了胰岛细胞总数。结果表明：ＮＩＤＤＭ发病后,自发ＮＩＤＤＭ中国地鼠胰岛细胞ＧＬＵＴ含量减少,与ＧＬＵＴ２抗体反应明显减弱,但肝脏ＧＬＵＴ无明显变化。胰岛细胞总数发病前后大体一致。而血糖、尿精及血浆胰岛素浓度明显升高。     

K~ 通道的药理学及其治疗学前景可观

细胞膜上存在着对电压敏感、被Ca~(2 )激活、同受体偶合和具有一定特异性的多种类型的K~ 通道,它们已被确定为某些药物主要作用的位点。一些K~ 通道阻断剂可以促进胰腺分泌胰岛素,对抗心律失常;而K~ 通道开放剂可使多种平滑肌舒张。胰岛β细胞上的K~ 通道是一种对ATP敏感的K~ 通道。它是细胞内葡萄糖水平和由葡萄糖引起的β细胞膜电位变化的中间环节。葡萄糖在细胞内代谢产生ATP,使β细胞除极,阻断该类K~ 通道而促进胰岛素的分泌。甲糖宁等磺酰脲类的作用位点就在这类K~ 通道上,它们促进胰岛素的分泌,是一种K~ 通道阻断剂。虽然二氮嗪也作用于同类的K. 通道,但作用相反,是一种开放剂。它可通过使K` 通道开放而抑制胰岛素的释放。     

龙蒿的组织培养和快繁

1　植物名称　龙蒿 (Ａｒｔｅｍｉｓｉａｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ) ,又名狭叶青蒿。2　材料类别　嫩尖、茎段。3　培养条件　芽诱导培养基 :(1 ) 1 /3ＭＳ 6 ＢＡ1 .0ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＩＢＡ 0 .2。增殖培养基 :(2 )ＭＳ 6 ＢＡ 0 .5 ＩＢＡ 0 .2 ;(3 )ＭＳ 6 ＢＡ 0 .2 ＩＢＡ 0 .2 ;(4)ＭＳ。生根培养基 :(5 ) 1 /2ＭＳ ＩＢＡ 0 .5 ;(6 ) 1 /2ＭＳ ＮＡＡ 0 .5 ;(7) 1 /2ＭＳ ＩＢＡ0 .5 ＮＡＡ 0 .5。以上培养基加入微生物多糖固化剂 4.5 ｇ·Ｌ- 1 ,蔗糖 3 % ,培养温度 (2 5± 2 )℃ ,ｐＨ5 .86 .0 ,光照度 1 5 0 0…     

胰岛素对胰腺外分泌功能的影响

我们用链佐霉素选择性地破坏胰岛Ｂ细胞,研究胰岛素在糖尿病大鼠胰腺外分泌功能变化中的作用。结果表明：糖尿病时,胰淀粉酶含量显著减少,胰淀粉酶ｍＲＮＡ也降低为对照组的３．２±０．５％（Ｐ＜０．０）。体外实验表明,糖尿病大鼠胰腺腺泡上１２５Ｉ－胰岛素的结合明显增多。Ｂｍａｘ由对照组的２．８±１０－９ｍｏｌ／Ｌ增加为３．５±１０－９ｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。腺泡对３Ｈ－葡萄糖的摄取,３Ｈ－亮氨酸的掺入以及腺泡膜Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶的活性均比正常组明显降低（Ｐ＜０．０１）。补充胰岛素,可翻转上述变化。从而提示,胰岛素在调节胰腺外分泌功能方面具有重要作用。     

玉叶金花的组织培养和植株再生

1　植物名称　玉叶金花 (Ｍｕｓｓａｅｎｄａｐｕｂｅｓｃｅｎｓ)。2　材料类别　嫩茎、幼叶。3　培养条件　以ＭＳ为基本培养基。诱导愈伤组织附加 :( 1 )ＮＡＡ 0 .2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＫＴ0 .2 5 6 ＢＡ 0 .1 ;( 2 )ＮＡＡ 0 .5 ＫＴ 0 .2 5 6 ＢＡ0 .1 ;( 3)ＮＡＡ 0 .5 6 ＢＡ 0 .1 ;( 4 ) 2 ,4 Ｄ 0 .2 ＫＴ0 .1。继代培养基附加 :( 5 ) 6 ＢＡ 4 ＫＴ0 .2 5 ＩＡＡ 0 .5。不定芽诱导及增殖培养基附加 :( 6)6 ＢＡ 4 ＫＴ 0 .5 ＩＡＡ 0 .1。生根培养基 :( 7)1 /2ＭＳ ＩＢＡ 0 .5。上述培养基均含 0 .7%琼脂、3%蔗…     

条纹十二卷的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　条纹十二卷 (Ｈａｗｏｒｔｈｉａｆａｓｃｉａｔａ) ,大型和小型植株各 1种。2　材料类别　花葶。3　培养条件　启动脱分化培养基 :( 1 )改良ＭＳ ＫＴ 2ｍｇ·Ｌ- 1 (单位下同 ) ＮＡＡ 1 ＩＢＡ 0 .5 2 0 %椰子液体胚乳 ;不定芽诱导及增殖培养基 :( 2 )改良ＭＳ 6 ＢＡ 1 ＫＴ 2 ＩＢＡ 0 .4 2 0 %椰乳 ;长期继代增殖培养基 :( 3)改良ＭＳ 6 ＢＡ 1 ＮＡＡ0 1或 ( 4 )改良ＭＳ ＫＴ 2 ＩＢＡ 0 2 ,省去椰乳 ;诱导生根培养基 :( 5) 1 /2ＭＳ(大量元素减半 ,微量元素免用 ) ＩＢＡ 0 3。上述培养基均加 3%白…