沃特世推出全新ACQUITY Arc系统,搭建HPLC和UPLC之间的桥梁

<正>沃特世公司(Waters)近日推出了Waters ACQUITYArcα系统。作为ACQUITY产品系列新成员,全新的ACQUITY Arc系统可以帮助科学家高效转换、调整或改进任意LC平台上开发的方法。迄今为止,分析科学家们在运行现有方法时还没有找到一款足够强大的多功能LC平台来弥补HPLC与UPLC之间的性能差距。随着     

基因芯片在临床诊断方面的应用

基因芯片自问世以来,以其操作简单、信息量大、快速便捷等优点迅速受到人们的关注。经过半个世纪的研究发展,基因芯片技术现已广泛运用于科学研究、生活生产的各个领域。现重点介绍基因芯片在临床诊断方面的应用。     

体外血栓形成试验在脑梗塞诊断中的应用（摘要）

体外血栓形成试验在脑梗塞诊断中的应用（摘要）第二十九医院颉元文体外血栓形成试验在血液流变学中作为一项表示血液凝固性高低的指标之一,在辅助诊治脑梗塞等疾病中,是一种简便易行实用可信的方法。本文通过１１５例男性脑梗塞组和１０３例男性正常人对照组做了体外血...     

CRISPR/Cas9系统在临床医学研究的应用与改进

癌症与遗传疾病等难治性疾病的发生发展一般是多因素协同的结果,涉及复杂的信号网络及多生物分子的相互作用。了解其中驱动的关键元素有助于为临床上的治疗和研究打开新的突破口。然而,探究驱动元素用于难治性疾病治疗的挑战之一是缺乏方便、可编程的基因编辑工具。近年来,新型的CRISPR/Cas9系统由于其组分简单、基因编辑效率高等特点逐渐成为临床医学研究中应用最为广泛的基因编辑工具。本文介绍了CRISPR系统应用于临床研究中的相应进展和潜在挑战。阐述了基于CRISPR系统sgRNA序列重构能改变靶向性及系统本身的可编程性等特性,其可在进行适当的改造和修饰后实现对活细胞染色体的实时成像,用以了解生物体在面临外界刺激时基因组的时空调节。评估了CRISPR系统在基因筛选、免疫治疗和遗传疾病治疗方面的重大价值,尤其是CRISPR系统进行相应改造后系统用在临床研究中安全性与功能性的提升。介绍了CRISPR系统在临床研究中的应用障碍、局限以及对其相应的优化改造,展望CRISPR/Cas9基因编辑技术的应用前景及其在临床医学领域的发展优势,以期能为CRISPR系统的进一步应用与优化提供参考。     

Th1/Th2与PCT检测在感染性疾病诊断中的临床应用

病原微生物引起的感染性疾病是临床中极为常见的一类疾病,此类疾病的预后主要取决于感染的病原微生物类型及疾病的严重程度。早期诊断和积极干预可在很大程度上改善感染性疾病患者的预后。因此,快速、有效地识别感染的病原微生物并对其进行靶向治疗,避免抗生素的滥用显得尤为重要。Th1/Th2在感染性疾病中的作用越来越得到重视,而降钙素原(PCT)是临床感染性疾病诊断和鉴别诊断的早期指标,且具有高度的敏感性和特异性。Th1/Th2和PCT的联合检测对感染性疾病的诊断、病情评估和疗效监测都具有重要的意义。     

永久起搏器程控在心房颤动诊断中的临床应用及意义

摘要 目的：探究永久起搏器程控在心房颤动诊断中的临床应用及意义。方法：选择78例我院收治的心房颤动患者随机分为程控组和非程控组2组,其中观察组患者给与永久起搏器程控诊断,非程控组则仅给植入永久起搏器,但非程控。对比分析两组患者基本资料、房颤负荷、心房与心室起搏比、心房结构重构及左心功能、P波结果;比较永久起搏器程控诊断与临床诊断结果的差异,分析永久起搏器程控在心房颤动诊断敏感度。结果：程控组和非程控组患者的男女比例、年龄、心率失常的类型、存在的基础性疾病以及使用过的治疗药物比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;程控组和非程控组患者的房颤负荷、VP值和P波最小时限均显著小于非程控组,AP值、P波最大时限和P波离散度则显著大于非程控组（P<0.05）;程控组和非程控组患者的LAD、RAD、LVEDD和LVEF值在植入前和植入后均不存在显著性差异（P>0.05）。与临床诊断结果比较可以发现,永久起搏器程控对心房颤动检出率为97.44 %,且永久起搏器程控应用于诊断心房颤动敏感度高达98.72 %。结论：对心房颤动患者采用永久起搏器程控进行诊断,可以在心电图检查的各项指标结果上对患者的心房颤动给与准确的判断,具有较高的临床应用价值,值得临床推广使用。     

CRISPR/Cas系统在抗病毒研究中的应用

近年来,CRISPR/Cas系统因其效率高、靶向性强、易操作等优势,已被广泛应用于多种病毒研究中。本文首先简单介绍了CRISPR/Cas系统的分类,并比较了Cas9和Cas12a与Cas13a的特点;其次重点介绍了CRISPR/Cas9通过靶向破坏病毒基因组,或编辑宿主关于病毒生命周期的关键因子的策略在抗病毒方面的各种应用,CRISPR/Cas13a采用靶向破坏病毒基因组方法在抗病毒中的应用,以及CRISPR/Cas12a和CRISPR/Cas13a在病毒基因检测中的应用。最后讨论了CRISPR/Cas在病毒研究中面临的挑战,并讨论了CRISPR/Cas12a作为抗病毒工具的潜在应用前景。由于CRISPR/Cas系统自身的优势,预计该系统将会给病毒相关的疾病诊断和控制带来革命性的变化。     

体外反搏治疗小儿急性脑外伤的临床应用分析

目的:探讨以体外反搏为主的综合康复治疗对脑外伤后偏瘫患儿运动功能和日常生活活动能力(ADL)的影响。方法:选择2015年7月至2017年7月我院神经外科收治的脑外伤后偏瘫患儿46例,将其随机分为对照组和治疗组。两组患者均采用常规的康复治疗和护理,对照组采取常规的物理治疗(PT治疗),治疗组患者给予以体外反搏为主的综合康复治疗。于治疗1、3个月后,评价和比较两组患者粗大运动能力(GMFM)评分、精细运动能力(FMFM)评分和日常生活能力(ADL)评分的变化。结果:治疗1、3个月后,两组患儿GMFM、FMFM评分均较治疗前明显增加(均P0.01),而治疗组治疗后GMFM、FMFM评分均明显高于对照组(均P0.01)。两组治疗一个月后ADL总有效率(显效率与有效率之和)分别为90.48%和76.19%,治疗三个月后分别为95.24%和85.71%,治疗组均显著高于对照组(均P0.05)。结论:以体外反搏为主的综合康复治疗有利于促进脑外伤后偏瘫患者ADL及部分运动功能的提高。     

糖尿病患者血脂检验在临床诊断中的应用探讨

目的:讨论并分析糖尿病患者的血脂检查在临床诊断中的实际应用及临床价值。方法:选取我院2010年10月~2013年11月期间收治的40例糖尿病患者为研究对象,另抽取同一时期内到我院进行常规体检的40例健康人群为研究对照,将其分为观察组和对照组,分别抽取两组患者的空腹学进行检测,检测的内容主要包括:高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)的指标含量,然后对比并分析两组人群的血脂含量。结果:两组人群血脂含量比较,观察组明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),其中LDL-C观察组为(3.42±1.05),对照组为(2.49±0.85)、TC观察组为(5.41±1.04),对照组为(4.09±0.68)、TG观察组为(2.79±1.19),对照组为(1.61±0.68)。这三项指标均明显高于对照组。结论:对糖尿病患者行血脂检验有助于医护人员第一时间掌握其继发性并发症的情况,并以此为基础做好预防和治疗的工作,这也就意味着在对于糖尿病患者我们不能仅仅只是以降低其血糖为目的,还应对其血脂含量进行严格的监测。     

CT联合MRI在早期肝癌诊断临床价值分析

摘要 目的：探究CT联合MRI在早期肝癌诊断中的应用价值。方法：选择2016年6月至2019年6月于我院接受诊断治疗的78例已知或疑似肝癌患者,分别对其实施CT及MRI检测,以病灶部位病理学检查结果为金标准（50例确诊为早期肝癌,28例为良性病变）,分别评估CT、MRI、CT联合MRI对早期肝癌的诊断价值,将确诊为肝癌的50例患者按照病灶大小区分为直径≤3 cm组（21例）和>3 cm组（29例）,对比CT与MRI对不同直径肝癌诊断率。结果：（1）检测发现,CT对早期肝癌诊断一致性为73.08 %,灵敏度为72.00 %,特异度为75.00 %;（2）MRI对早期肝癌诊断一致性为82.05 %,灵敏度为82.00 %,特异度为82.14 %;（3）CT联合MRI检测对早期肝癌诊断一致性为93.59 %,灵敏度为92.00 %,特异度为96.43 %;（4）对比发现,对直径≤3 cm的早期肝癌患者,MRI诊断率明显高于CT（95.24 % vs 76.19 %,P<0.05）。结论：CT及MRI对早期肝癌均具有较好的诊断价值,但联合检测明显优于任一单独检测,同时对病灶直径≤3 cm的早期肝癌患者,MRI诊断准确率更高。     

中国结节性硬化症患者的临床特点及诊断现状分析

目的:回顾结节性硬化症(TSC)在中国的诊断现状,分析中国TSC患者的临床特点,促进TSC的识别、规范化诊治和管理。方法:在维普数据库、万方数据库、中国知网、中国生物医学文献数据库、PubMed数据库中全面检索2001年-2014年13年间国内外发表的关于中国患者TSC的269篇所涉及的3171例TSC患者从皮肤、神经系统、肾脏、心脏、肺等多系统的临床特点对文献进行了统计和分析,并对TSC患者遗传学方面的基因检测情况进行了归纳和总结。结果:对照2012年TSC诊断指南,在对诊断标准中主要指征的报道中,共有247篇文献对2607例TSC患者的皮肤损害进行了描述,212篇文献对2395例TSC患者的神经系统损害的影像学表现进行了报道,有55篇文献报道了对348例患者进行的眼底检查中发现多发性视网膜错构瘤84例,32篇文献报道了对282例患者进行的心脏彩超检查中发现162例心脏横纹肌瘤,45篇文献在对282例患者进行的胸片检查、20篇文献在对36例患者进行的胸部CT检查中共发现淋巴管肌瘤病50例。在98篇文献报道的对696例患者进行的肾脏超声检查、51篇文献报道的对221例患者进行的肾脏CT检查和2篇文献报道的对2例患者进行的肾脏MRI检查中共发现肾脏血管平滑肌脂肪瘤416例;在58篇文献报道的对586例TSC患者进行的肝脏超声检查、30篇文献报道的对104例患者进行的腹部CT检查、2篇文献报道的对3例患者进行的腹部MRI检查中共发现肝脏血管平滑肌脂肪瘤141例。在诊断标准中的次要指征的报道中,对多发性肾囊肿的报道最多,而对牙釉质凹陷、Confetti皮损的描述却几乎缺失。在其他临床表现的研究中,癫痫的相关文献最多,有关智力评估的文献尚缺乏客观的智力评估标准。遗传学基因检测逐渐成为近几年文献报道的热点。结论:在过去13年间,中国医生对TSC的诊治作出了很大贡献,但诊断过程中仍存在对疾病认识的不足和对全局观念的缺乏,推广新版指南的诊断标准对于中国医生是十分有意义的。     

GAL4/UAS系统在转基因技术中的应用研究进展

GAL4/UAS系统是一种转基因技术体系,其原理是利用特定的启动子或增强子,以组织特异性的方式激活酵母转录激活子GAL4的表达,GAL4又以同样的方式引起GAL4反应元件(UAS)-靶基因的转录。GAL4/UAS系统的关键点在于:GAL4基因和UAS-靶基因分别存在于两个转基因系中。GAL4转基因系中有转录激活子,但没有靶基因;在UAS-靶基因系中,转录激活子不存在,因而靶基因处于沉默状态,只有将GAL4转基因系与UAS-靶基因系进行杂交,才可能产生表达靶基因的后代。本文综述了GAL4/UAS系统的建立及其研究应用。     

免疫组织化学反应抗原恢复新法在临床病理诊断中的应用

应用蒸馏水在ｐＨ６２, 加热煮沸后能够较好的恢复组织中被封闭的抗原。经２８０４ 张组织切片在进行免疫组织化学反应之前, 用现配ｐＨ６２ 的蒸馏水加热煮沸后微火保温１０ 分钟, 然后再按常规免疫组化染色。经此法恢复抗原处理后, 并显示强度和阳性率与微波辅助盐溶液方法相比结果基本相似, 两者与未抗原恢复处理相比有显著性差异（Ｐ＜ ００１）。经彩色图像分析结果同样有显著性差异（Ｐ＜ ００５）。本法恢复抗原与微波技术相比, 同样能使组织内抗原得以充分的暴露, 提高抗原的检出率, 证明了蒸馏水在ｐＨ６２ 时,可作为一种新的暴露抗原的方法, 且操作简单, 抗原恢复均匀, 很适合各种实验室的应用     

复合式悬液芯片系统在病原学检测中的临床应用

复合式悬液芯片系统（multiplex suspension array system,MSAS）由悬浮芯片和微流体芯片组成,具有高通量精确定量的特点,而且具有较高的准确性和重复性,在多种蛋白质分子的同时精确定量和大规模样品检测方面有着很大的应用优势,其应用领域覆盖感染性疾病的快速诊断、细胞因子、信号通路、肿瘤标志物、流行病学病原体的筛查、蛋白质的相互作用、单核苷酸多态性（SNP）的研究等。就MSAS在病原学检测中的应用作一简要综述。     

常规磁共振成像结合磁共振波谱在临床脑胶质瘤诊断及鉴别诊断中的应用价值

目的:分析磁共振氢质子磁共振波谱(Proton Magnetic Resonance Spectroscopy,1H-MRS)的特征与脑胶质瘤病理分级的相关性,探讨氢质子磁共振波谱及常规磁共振成像(Magnetic Resonance Imaging,MRI)联合应用在提高脑胶质瘤的临床诊断中的应用价值.方法:脑胶质瘤(经临床手术证实及病理诊断确诊)患者34例,参照国际卫生组织诊断标准,分为低级别胶质瘤组及高级别胶质瘤组.其中,低级别组16例,高级别组18例,在行常规MRI检查的同时,配合1H-MRS检查,测NAA(N-乙酰天门冬氨酸)、Cho(胆碱)、Cr(肌酸)值,在不同级别胶质瘤、同级别胶质瘤不同位置的代谢物进行综合分析.结果:在获得常规MRI图像并进行诊断后,进行氢质子磁共振波谱检测分析:在低级别胶质瘤及高级别胶质瘤患者中,Cr(肌酸)的总量变化不大,有轻度的下降;而NAA(N-乙酰天门冬氨酸)下降程度较为明显;Cho(胆碱)则明显升高.低级别胶质瘤及高级别胶质瘤患侧的肿瘤组织同对侧的正常脑组织的各种代谢物及其比值(Cho、NAA、NAA/Cho、NAA/Cr值)具有显著性差异(P＜0.05);低级别胶质瘤及高级别胶质瘤的肿瘤组织的代谢物比值NAA/Cr、NAA/Cho值差异具有显著性(P＜0.05).低级别胶质瘤及高级别胶质瘤的Cho/Cr、NAA/Cho、NAA/Cr值与脑胶质瘤的病理分级具有相关性;在各个比值中,NAA/Cr与NAA/Cho值能够较好地反映脑胶质瘤的病理分级,二者的值呈现负相关;Cho/Cr值呈正相关.结论:常规MRI联合1H-MRS在脑胶质瘤的诊断中,能够有效提高准确性,在临床评估脑胶质瘤的分级、确定范围和鉴别诊断都具有重要的指导作用.     

CRISPR/Cas9系统在疾病研究和治疗中的应用

基因组编辑技术(Genome editing technology)是一种通过人工手段在基因组水平对DNA序列进行改造的遗传操作技术,包括特定DNA片段的插入、敲除、替换和点突变.其中,依赖核酸酶的基因组编辑技术的基本原理是在基因组的特定位置产生双链DNA断裂(Double-stranded break,DSB)后通过...     

局部血含量和血氧含量在乳腺肿块诊断中的临床应用

目的:研究乳腺肿块中血含量和血氧含量的变化,探讨其在乳腺肿块早期诊断中的应用价值.方法:选取我院103例乳腺肿块住院患者进行乳腺血氧成像,超声,钼靶检查,通过与术后病理对比,比较3种检查方法的准确性、敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值.结果:血氧成像技术,超声,钼靶准确率分别是95.1％,90.3％,85.4％;敏感性分别是95.2％,76.2％,66.7％;特异性分别是95.1％,93.9％,90.2％;阳性预测值分别是83.3％,76.2％,63.6％.阴性预测值分别是98.7％,93.9％,91.4％.血氧成像技术对乳腺肿块诊断的准确性、敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值优于钼靶,但与超声相比无统计学意义.结论:检测乳腺肿块中血含量和血氧含量的变化,可为乳腺良、恶性肿块鉴别诊断提供依据,其敏感性,特异性,准确性,阳性预测值,阴性预测值均不低于超声或钼靶,对临床乳腺肿块的辅助诊断有较大的应用价值.     

酵母杂交系统在CRISPR/Cas9基因编辑系统脱靶率研究中的应用*

目的:为提高CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9)靶向性奠定基础,同时证明酵母杂交系统在研究CRISPR/Cas9脱靶效应中的应用价值。方法:以实验室前期构建成功的activase基因编辑水稻株为研究对象,先采用T7核酸内切酶Ⅰ法初步预测30株基因编辑水稻株的脱靶率。随后以酵母杂交系统进一步预测脱靶率以及研究sgRNA结构对脱靶率的影响。首先,将activase靶向基因的标准sgRNA(standard sgRNA)和短sgRNA(truncated sgRNA)分别克隆至CRISPR/Cas9系统表达载体pDW3769中,构建对应的重组载体pHZ2和pHZ4,转化至YPH499酵母单倍体形成重组酵母YpHZ2和YpHZ4;其次,根据脱靶位点预测选择7组脱靶序列A、B、C、D、E、F、G以及靶向序列,分别克隆至包含报告基因mCherry的高拷贝载体pDW3133和低拷贝载体pDW3134,构建相应的高拷贝重组载体pHZ5、pHZ7、pHZ9、pHZ11、pHZ13、pHZ15、pHZ17和pHZ19,以及对应的低拷贝重组载体pHZ6、pHZ8、pHZ10、pHZ12、pHZ14、pHZ16、pHZ18和pHZ20,转化至YPH500酵母单倍体,构建重组酵母YpHZ5-20。随后,重组酵母YpHZ2和YpHZ4与重组酵母YpHZ5-20分别杂交,挑取双倍体酵母菌落,在不同的时间段下检测荧光数值,根据荧光值定量预测脱靶率。结果:酵母培养144~192 h时荧光最为显著,脱靶序列sgRNA与靶向基因sgRNA同源性越高,越易造成脱靶,但短sgRNA较标准sgRNA脱靶率低。根据水稻植株的脱靶检测显示脱靶率约20%,基于酵母杂交的检测结果显示脱靶率为20%~28%。结论:酵母细胞进入稳定期时荧光值最为显著,且与载体的拷贝数量成正比。sgRNA序列以及长短结构可影响CRISPR/Cas9的基因靶向性。两种方法的脱靶率预测结果相当,表明酵母杂交系统在评价CRISPR/Cas9系统的脱靶率以及研究脱靶影响因素中具有良好的应用价值。     

MEWS系统在指导院前急性脑血管意外急救的临床应用

目的 探讨应用改良早期预警（MEWS）评分指导急性脑血管意外院前急救的临床价值.方法 将院前急救中临床诊断为急性脑血管意外的患者分为常规病情评估急救组（对照组）和进行现场MEWS评分指导急救组（实验组）,并比较两组患者的病死率及好转出院率.结果 对照组病死率为17.23%,好转出院率为82.77%;实验组病死率为8.76%,好转出院率为91.24%.两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 急性脑血管意外患者院前应用MEWS评分进行病情评估和指导急救,能降低患者的病死率及提高好转出院率,具有较好的应用价值,值得在院前脑血管意外急救中推广应用.     

MRCP在研究胆道系统解剖及变异中的临床应用进展

胆道系统疾病是临床常见病,外科以腹腔镜胆囊切除术为首选治疗方法。但是,腹腔镜胆囊切除术的胆管损伤发生率仍为0.2%～0.3%,约为开腹手术的2倍。胆道系统解剖变异是引起胆道系统疾病手术中胆管损伤这一严重并发症的重要因素之一,增加胆管损伤发生的风险,是临床愈发关注的问题。术前明确解剖变异的存在及变异类型对于临床制定治疗计划、制定手术方案、减少及避免并发症与二次手术的发生至关重要。磁共振胰胆管水成像技术（MRCP）自引入临床二十年以来,因其无创、无辐射、能够立体、多角度、直观全面地显示胆道系统组成,明确胆道系统的形态、位置、走行及分布而广泛应用。本文旨在综述胆道系统解剖、变异及变异类型以及MRCP技术对显示胆道系统解剖变异类型的临床应用、进展与临床意义。