微量免疫酶染色检测斑疹伤寒IgM、IgG抗体

本文介绍了微量免疫酶染色(Micro-IP)检测斑疹伤寒IgM、IgG抗体的方法,Micro-IP与临床诊断的符合率为78.9%。IgM抗体早于第四病日阳性,第一周阳性率达76.2%,适于早期诊断。检测IgG抗体适于流行病学调查。Micro-IP检测免疫兔及患者血清抗体为群特异性(对普氏及莫氏立克次体均反应)。     

人IgG标记金纳米棒并用于抗人IgG抗体的检测

目的：研究金纳米棒（GNRs）IgG生物学标记及其在抗人IgG检测中的应用。方法：利用种子生长法制备GNRs,用巯基十一酸（MUA）对GNRs端头邀111妖晶面进行化学修饰,MUA提供的羧基可与人IgG结合;抗人IgG与活化的GNRs反应引起GNRs表面等离子体共振（SPR）特征变化,通过读取SPR值判断免疫反应的结果。结果：合成了不同长径比（AR）的GNRs,成功地将人IgG标记于GNRs（AR=3.7）的端头;利用标记后的GNRs对抗人IgG进行检测,其SPR最大吸收峰发生9nm红移,检测灵敏度可达纳摩尔量级。结论：基于人IgG-抗人IgG免疫反应建立了GNRs用于免疫检测的方法,为GNRs用于免疫检测进而研制免疫传感器奠定了基础。     

用固相酶免疫吸附法检测克里米亚出血热(CHF)抗原

<正>对于自然疫源地采集标本中克里米亚出血热(CHF)病原的检测一般采用接种新生小白鼠法(生测法);分离出的病原再用补体结合试验(CF)、间接血凝试验(IHA)和免疫荧光(IF)试验进行鉴定。这些方法特异性高,但是十分费力,且均不能直接用于原始材料中的病原体测定。     

抗SEA鸡卵黄抗体用于血吸虫循环抗原检测的初步研究

目的:探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)鸡卵黄抗体(Immunoglobulin Y,IgY)用于血吸虫循环抗原检测的可行性。方法:以纯化的鸡抗SEA卵黄抗体为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B进行双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA)法做比较。结果:S-ELISA法测得SEA浓度(y)与A450值(x)呈明显的正相关(r=0.9481,y=459.22x-108.14)。S-ELISA法检测急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100%,慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84.40%,健康人的特异性为96%。两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:S-ELISA可用于血吸虫病的免疫诊断。     

巨细胞病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法)的性能验证

目的:对本公司研制的人巨细胞病毒(HCMV)Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫法)的性能进行验证。方法:应用间接法研制HCMV Ig G抗体检测试剂盒(酶联免疫法),对的3批试剂盒的阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、重复性、检测限、批间差等技术指标进行评价,并用1050例样本进行比对试验,结果进行Kappa检验、χ~2检验。结果:3批试剂盒阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、检测限、重复性、批间差均达到要求。同时,经中国食品药品检定研究院检定,3批试剂盒所检项目全部合格。比对试验敏感度为98.92%,特异性为98.60%,与已上市试剂盒的总符合率为98.83%,Youden指数为0.9752,Kappa系数为0.9710,一致性优,χ~2检验P0.05。结论:制备了HCMV Ig G抗体检测试剂盒,可应用于临床监测、诊断及预后判断。     

葡萄糖氧化酶免疫酶染色检测硝酸纤维膜印染的病毒抗原或抗体

<正>近十年来,由于引进了下列技术,包括聚丙烯酰胺凝胶电泳后免疫沉淀、等电聚焦及将样品转移到支持基质的印染技术,分析复杂抗原混合物和其抗体反应的能力显著地提高了。人们已综述了蛋白质印染的一般技术。研究了影响样品经电泳转移到硝酸纤维素(NC)膜上的许多条件。可用同位素或免疫酶方法检测蛋白质印迹。同位素方法很敏感,但较昂贵而配置有些问题,并且有效使用期短。由于同位素法有上述缺点,导致了免疫酶方法的建立。     

蝙蝠血清IgG的纯化及兔抗蝙蝠IgG酶标抗体的制备

目的纯化蝙蝠血清IgG,制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体。方法采用亲和层析纯化法纯化蝙蝠血清IgG,SDS-PAGE电泳鉴定蝙蝠IgG纯度。免疫大白兔制备兔抗蝙蝠IgG抗血清,免疫双扩散法测定抗血清效价,亲和层析纯化法纯化抗血清IgG。用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,直接ELISA和Western blot法对兔抗蝙蝠IgG酶标抗体进行工作浓度测定。结果纯化的蝙蝠血清IgG,其SDS-PAGE测定纯度大于95%;免疫大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价为1∶64;用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,其直接ELISA和Western blot工作浓度分别为1∶12800和大于1∶2000。结论制备了蝙蝠血清IgG的抗血清和酶标抗体,为蝙蝠的血清学检测体系提供了技术和资源储备。     

蛋白A酶免疫分析法用于筛选杂交瘤的发展

<正>单克隆抗体的生产技术进展终于使很多研究者和商业公司的实验室,迫切地要求发展廉阶、快速和定量的方法检测各种抗原特异性和亚类抗体。筛选杂交瘤的一种方法是     

检测特异性抗体分泌细胞(ASCs)的固相酶联免疫斑(ELISPOT)技术的建立

ＥＬＩＳＰＯＴ技术是目前国外评价疫苗免疫原性和免疫应答机理研究中最常使用的方法。本文用自制的ＮＣ膜２４孔板为固相支持物,建立了检测小鼠脾细胞中特异性ＡＳＣｓ的ＥＬＩＳＰＯＴ技术,在检测方法的特异性、结果的稳定性上均取得了满意的效果。并对该方法的某些实验条件进行了摸索。     

胶体金免疫电子显微技术用于病毒抗原的检测

本文报道了一种改良的胶体金免疫电镜技术:以低温包埋,常规超薄切片代替超薄冰冻切片,成功地显示了细胞内的病毒抗原定位。     

酶标葡萄球菌A蛋白组化法检测腺病毒抗原的研究

葡萄球菌 A 蛋白(SPA)具有与人和许多哺乳动物血清 IgC 的 Fc 段结合的特性。目前已成为一种适用范围很广的免疫试剂。近年来曾将它与辣根过氧化物酶(HRP)结合替代人工免疫制备的第二抗体(抗 IgC),用于 ELISA 法测定病毒抗体的研究,而用 HRP 标记 SPA(HRP—SPA)组化法检测病毒抗原的研究,国内尚无报导。本文是在徐氏用 HRP—SPA 法快速测定炭疽病人英膜抗体的实验研究的启发下,为了解 HRP—SPA 组化法在小儿腺病毒肺炎早期诊断上的意义。我们首先用腺病毒(AdV)模拟标本接种人胚肾(HK)单层细胞,然后涂片检测 AdV 抗原,与酶标抗体、荧光抗体法进行了特异性、敏感性比较,在实验中对 AdV 的复制做了动态观察。并于1981年冬1982年春应用本法对34例小儿肺炎患儿进行了临床诊断,现将初步结果报告如下:     

人抗乙脑病毒IgG抗体检测试剂盒的研制和应用

乙脑病毒SA14-14-2株疫苗原液经β丙内酯灭活Sepharose 4FF纯化后作为包被抗原,制备阳性替代品,应用间接ELISA法检测人血清中乙脑病毒抗体。建立内部质量控制血清标准,比较蚀斑减少中和试验(PRNT)与ELISA的相关性。检测46份乙脑相关血清的结果与国内同类试剂进行比较,阳性符合率为93.1%,阴性符合率为89.5%。在咸安地区3万多名2~14岁人群中进行乙脑病毒IgG抗体水平普查,阳性率22.5%,与国内同类试剂的符合率为95.7%,使用效果很好。     

应用斑点金免疫渗滤试验快速同步检测抗HIV-1，HIV-2 IgG抗体

应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸。通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C)。这5种抗原蛋白首先被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,其中的病毒抗体通过免疫反应与抗原结合,再加胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA),待其渗过膜片后,洗涤,即可形成肉眼可见的红色斑点。用已确证的21份HIV阳性血清(其中包括1份HIV-1标准阳性血清和1份HIV-2标准阳性血清)和30份阴性血清进行了试验,结果表明该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5分钟。与传统的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,应用范围广等优点。同时,此HIV快速诊断试纸可以同步检测并区分针对HIV-1和HIV-2感染的不同检测标志物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗体),这对提高快速检测的灵敏度和准确性,以及对判断HIV感染者是否临近或已进入AIDS期有着较高的应用价值。     

应用斑点金免疫渗滤试验快速同步检测抗HIV-1,HIV-2 IgG抗体

应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltration assay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸.通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C).这5种抗原蛋白首先被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,其中的病毒抗体通过免疫反应与抗原结合,再加胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA),待其渗过膜片后,洗涤,即可形成肉眼可见的红色斑点.用已确证的21份HIV阳性血清(其中包括1份HIV-1标准阳性血清和1份HIV-2标准阳性血清)和30份阴性血清进行了试验,结果表明该快速检测方法与ELISA方法无显著差异.该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5分钟.与传统的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,应用范围广等优点.同时,此HIV快速诊断试纸可以同步检测并区分针对HIV-1和HIV-2感染的不同检测标志物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗体),这对提高快速检测的灵敏度和准确性,以及对判断HIV感染者是否临近或已进入AIDS期有着较高的应用价值.     

应用斑点酶免疫法检测狂犬病毒抗体的研究

本文通过特异性试验、重复性试验、稳定性试验,建立了斑点酶免疫试验(DEIA)检测狂犬病毒抗体的方法,其结果与间接免疫荧光(IFA)法进行了比较,符合率100％,实验结果表明本法不但简便、稳定而且敏感特异,不需要特殊仪器设备及昂贵的荧光显微镜,是一种值得推广的检测狂犬病毒抗体的方法。     

免疫酶技术检测流行性出血热病人抗体的研究

流行性出血热(EHF)是一种死亡率较高的传染病,国内常用免疫荧光(IF)法进行此病的检测及诊断。由于荧光设备不普及,很多基层单位不能监测及诊断此病,因而妨碍防治工作的进展。本文介绍免疫过氧化物酶技术(IPT)或称免疫酶染色(IES)进行EHF抗体的检测,同时     

念珠菌血症时甘露聚糖抗原及其IgG抗体检测诊断价值的临床研究

目的评价念珠菌甘露聚糖抗原（M抗原）及甘露聚糖IgG抗体（M-IgG抗体）检测诊断念珠菌血症的价值。方法收集2013年5月～2014年1月我院住院患者及健康体检人群共107例,包括念珠菌血症组（念珠菌血培养阳性患者）13例、危险因素组（临床诊断侵袭性念珠菌病或接受化疗恶性疾病、留置深静脉置管等侵袭性念珠菌病感染高危患者）63例和对照组（健康体检人群）31例。通过ELISA方法检测甘露聚糖抗原及甘露聚糖IgG抗体,比较3组人群检测阳性情况及持续时间,计算两种方法的灵敏度、特异度、阴性预测值、阳性预测值、ROC曲线下面积及Kappa值。结果白念珠菌和光滑念珠菌为念珠菌血症的主要念珠菌病原,均为5例。念珠菌血症的7／14菌株（1例患者合并2种念珠菌感染）来自重症医学科,其次为感染内科（2／14株）。除1例死亡病例外,余12例患者进行了M抗原和M—IgG抗体监测。首次M抗原检测中,4例阳性,1例可疑阳性;首次M-IgG抗体检测中,11例阳性,1例可疑阳性。经抗真菌治疗,监测14d,M-IgG抗体持续阳性时间长于M抗原。甘露聚糖抗原在诊断念珠菌血症的敏感度41．7％,特异度98．8％,阴性预测值92．4％,阳性预测值100％。甘露聚糖IgG抗体在诊断念珠菌血症的敏感度91．7％,特异度52．8％,阴性预测值100％,阳性预测值27．5％。M抗原、M抗原并M—IgG抗体作为念珠菌血症时诊断实验的ROC曲线下面积均为0．708（95％CI：0．517—0．900）,两者的Kappa值分别为0．520和0．559。结论甘露聚糖抗原在诊断念珠菌血症时的特异度较高,甘露聚糖IgG抗体在诊断念珠菌血症的敏感性较高,两者的联合检测可以适当提高检测的敏感度及特异度,有助于念珠菌血症的诊断。