猪卵丘细胞对卵母细胞膜电位影响的研究

本文应用细胞内微电极技术,测试分析了猪卵丘细胞对卵母细胞膜电位的影响。结果表明,卵母细胞周围卵丘细胞的数量和形态特点的差异对卵母细胞膜电位有显著影响,Ａ、Ｂ、Ｃ三类卵母细胞的膜电位有极显著差异。Ａ类和部分Ｂ类母细胞的膜电位为负值,Ｃ类和另一部分Ｂ类卵母细胞的膜电位为正值。     

日本血吸虫卵胚胎发育的组织化学研究

血吸虫病的病变和发病机理是由于虫卵在人体组织中引起肉芽肿所致。目前认为发育成熟含毛蚴的血吸虫卵分泌可溶性抗原物质,它致敏寄主后,使淋巴细胞、巨噬细胞和嗜酸粒细胞集聚在虫卵周围形成了肉芽肿,并证明血吸虫卵肉芽肿是属于迟发型超敏免疫反应(Warren,1972)。Warren等(1975)还认为日本血吸虫卵和曼氏血吸虫卵肉芽肿形成的有关免疫因素及发病机理可能有所不同。通过组织化学的途径对组织内日本血吸虫卵胚胎发育的研究,不仅有助于探讨血吸虫卵发育的生理及寄主组织和虫卵之间的相互关系,而且对血吸虫病的病原诊断方面亦有一定的实际意义。为此,作者对沉积于组织内的虫卵从受精卵细胞至形成毛蚴的胚胎发育全过程进行了一般组织学及组织化学的观察。     

有无卵丘细胞对猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻的影响

本研究探讨卵丘细胞对猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响。根据卵丘细胞层数将体外收集的猪卵母细胞分成对照组、A组(3层以上卵丘细胞)、B组(2~3层以上卵丘细胞)、C组(裸卵),研究卵母细胞玻璃化冷冻后的存活率、成熟率和孤雌激活后发育潜能的变化。结果表明:玻璃化冷冻后B组和A组的卵母细胞存活率显著高于C组(p0.01);冻融后的卵母细胞在成熟率方面的表现为:A、B、C三组的成熟率分别为22.17%、27.2%和18.15%,其中B组的成熟率显著高于C组(p0.05),但均明显低于对照组(p0.01)。通过进一步的孤雌激活发现,冻融后卵母细胞的卵裂率、4~8细胞卵裂率和囊胚率在3组中均无显著性差异(p0.05),均显著低于对照组(p0.01),但B组与其中两组相比具有上升趋势。综上所述,玻璃化冷冻时保留部分卵丘细胞可以降低冷冻对猪GV期卵母细胞造成的损伤。     

牛卵丘细胞的生长特征与转基因

目的了解牛卵丘细胞的生长特征及构建的基因载体对卵丘细胞的转染情况和转染后阳性细胞的扩增效率。方法用透明质酸酶消化牛卵丘/卵母细胞复合体(COCs)获得牛卵丘细胞,了解牛卵丘细胞的生长特点,并用分子大小分别为7178 bp和31 085 bp两种带有增强绿色荧光蛋白(EGFP)和新霉素抗性基因(Neor)的质粒载体pMSCV-EGFP-Neor和pGC1-collagen-EGFP-Neor分别转染靶细胞。结果用脂质体法转染对数生长期的细胞,均获得了绿色荧光阳性细胞,但小质粒的转染效率在72 h时是大质粒的6倍(14%vs.2.3%)。在800μg/mLG418筛选浓度下,14 d后分别获得了7个和3个较明显的单克隆细胞群,对它们进行挑选、扩大,都获得了较纯的单克隆细胞系。最后根据EGFP和collagen的已知基因序列对转染pGC1-collagen-EGFP-Neor质粒的阳性细胞进行三个不同区域DNA片段的扩增,结果表明,扩增的基因片段大小正确,数目完整。结论对卵丘细胞进行基因转染,分子大小等于或小于31 kb的基因可以有效转入,但小分子载体比大分子载体具有更高的转染效率。经过筛选都可以获得纯的转基因细胞...     

意大利蝗的胚胎发育及卵滞育发生的胚胎发育阶段

【目的】明确意大利蝗Calliptamus italicus (L.)胚胎发育及卵滞育发生的胚胎发育阶段。【方法】2013-2014年间,通过室外胚胎发育进度检测和室内孵化培养观察,研究其胚胎发育等级、滞育和越冬的胚胎阶段及自然越冬滞育的解除。【结果】意大利蝗的胚胎发育可划分为18个阶段;意大利蝗胚胎有反向移转、转旋和顺向移动3种胚胎转动方式;意大利蝗卵滞育发生的胚胎发育阶段为第Ⅻ阶段。自然条件下,意大利蝗卵发育至次年1月21日,仅部分卵解除滞育,解除滞育卵的发育历期最长;随着越冬时间的延长,解除滞育的卵逐渐增多,其发育历期逐渐缩短;直至次年3月29日卵基本完全解除滞育。意大利蝗雌成虫所产的早中期卵（7月27日-8月16日所产卵）以胚胎发育第Ⅻ阶段（滞育发生的胚胎发育阶段）越冬,于翌年4月16日（侯地温平均值：7.59℃,最高温：15.95℃,最低温：2.67℃）继续发育;雌成虫所产的晚期卵（8月28日-9月4日所产卵）,自11月4日（侯地温平均值：7.32℃,最高温：9.00℃,最低温：5.18℃）开始以胚胎第Ⅹ阶段越冬,于翌年3月29日（侯地温平均值：3.78℃,最高温：10.27℃,最低温：0.14℃）继续发育。【结论】意大利蝗雌成虫所产的早中期和晚期卵,其越冬胚胎发育阶段、开始越冬时间及越冬后继续发育的时间均不同。     

中华稻蝗的胚胎发育及卵滞育发生的胚胎发育阶段

为弄清中华稻蝗Oxya chinensis(Thunberg)卵滞育发生的胚胎发育阶段,观察了其胚胎发育过程,检测了中华稻蝗铁岭、济南、长沙及儋州种群产卵后卵粒含水量的变化规律和胚胎发育的停滞时期.根据胚胎形态,自原头与原颚胸折叠的胚胎发育阶段开始,将中华稻蝗的胚胎发育过程划分为11个阶段.在25℃的温度条件下,4个地...     

促性腺激素对猪卵丘细胞-卵母细胞复合体体外减数分裂恢复作用的研究

本实验利用猪卵母细胞体外无血清培养技术,选用猪卵泡液中自然存在的次黄嘌呤（ＨＸ）作为卵母细胞自发成熟的抑制剂,研究了促性腺激素对猪卵丘细胞－卵母细胞复合体（ＣＥＯ）减数分裂恢复的具体作用。ＣＥＯ在含有不同浓度的促性腺激素（ＦＳＨ,ｈＣＧ,ＦＳＨ＋ｈＣＧ）的培养液中培养２４ｈ,观察卵母细胞减数分裂恢复（ＧＶＢＤ）情况。实验结果如下：１．ＦＳＨ（１－５００ＩＵ／Ｌ）能够明显刺激ＣＥＯ克服ＨＸ的抑制作用而恢复减数分裂（Ｐ＜０．０５）,该作用具有剂量依赖性;２．ｈＣＧ（１－５００ＩＵ／Ｌ）对ＣＥＯ减数分裂的恢复无明显作用;３．ｈＣＧ（１０－５００ＩＵ／Ｌ）与ＦＳＨ（１０,１００ＩＵ／Ｌ）无协同作用。上述结果表明,猪ＣＥＯ减数分裂的恢复可能主要依赖于ＦＳＨ的作用,该作用能使猪卵丘细胞产生一种或几种阳性因子,作用于卵母细胞,从而克服ＨＸ的抑制作用而恢复减数分裂。ｈＣＧ无明显作用,可能是因为卵丘细胞上没有ＬＨ受体或ＬＨ受体的数量不足     

蝗卵的研究Ⅳ.浸水对于蝗卵胚胎发育和死亡的影响

一、引言 东亚飞蝗常生长在湖滨、已干涸的河道、沿海边等长着禾本科杂草的低洼荒地;这些地方也就成为它们的产卵场所。蝗卵在产入土中之后须经一定时间方始孵化;夏蝗所产卵在自然情况下须经12天以上的孵育时间,秋蝗卵在越冬时在土中常长达7—8个月。蝗区每当雨季或湖、河的水位上涨时其有卵的地区常被淹没,使蝗卵在水中经过长短不一的     

发头裸腹溞卵和胚胎发育形态研究

在实验室恒温条件下,观察了发头裸腹溞的卵和胚胎发育.结果表明,该种枝角类的卵是均等分裂的,并具有螺旋卵裂的特点。它的发育过程大致可分为4个阶段.其间可分若干小期。发头裸腹溞卵和胚胎发育所需时间与温度的关系十分密切,在10、20、30C时发育所需时间分别为150、47和23.5小时。对该种溞的卵的形态特点进行了讨论。     

发头裸腹蚤卵和胚胎发育形态研究

在实验室恒温条件下,观察了发头裸腹蚤的卵和胚胎发育,结果表明,该种枝角类的卵是均有分裂的,并具有螺旋卵裂的特点。它的发育过程大致可分为４个阶段,其间可分若干小期。发头裸腹蚤卵和胚胎发育所需时间与温度的关系十分密切,在１０、２０、３０℃时发育所需分别为１５０、４７和２３．５小时,对该种蚤的形态特点进行了讨论。     

乌骨鸡胚胎发育过程中卵内蛋白质脂肪的变化研究

对乌骨鸡胚胎发育过程中卵内各组成成分(蛋清、蛋黄、胚胎)在不同胚龄(即入孵的第0、3、6、9、12、15、18d和出壳)时蛋白质、脂肪含量变化进行测定与分析．结果表明：在不同胚龄时,蛋清中蛋白质含量显著高于蛋黄,蛋黄中脂肪含量始终高于蛋清;而胚胎中的蛋白质、脂肪逐渐增加。另外,胚胎发育过程中胚胎蛋白质的主要来源是蛋黄中的蛋白质,说明蛋黄是禽类胚胎发育过程中营养需要的主要来源。     

茌梨的胚胎发育和开花结实的相关性研究

茌梨的花药以造孢组织越冬。第二年春,花芽萌动时形成小孢子母细胞。小孢子的发生为同时型。成熟花粉粒为2细胞型。4月初,珠心顶端第三层细胞中的造孢细胞发育为大孢子母细胞,属厚珠心型。胚囊发育属蓼型。胚发育始于4月下旬,受精卵进行横分裂,后经棒状原胚、球形原胚、心形胚和鱼雷形胚,至7月中旬幼胚逐渐成熟。胚的发育属藜型。胚乳发生为核型。茌梨大小孢子的发生和雌雄配子体的形成与花芽、花外形标志之间,有较稳定的相关性。胚和胚乳的发育与果实的生长有一定的相关性。     

促性腺激素对猪卵丘细胞—卵母细胞复合体体外减数分裂？…

本实验利用猪卵母细胞体外无血清培养技术,选用猪卵泡液中自然存在的次黄嘌呤（ＨＸ）作为卵母细胞自发成熟的抑制剂,研究附了中性腺激素对猪卵丘细胞－卵母细胞复体（Ｃ ＥＯ）减数分裂恢复的具体作用。ＣＥＯ在含有不同浓度的促性腺激素（ＦＳＨ,ｈＣＧ,ＦＳＨ＋ｈＣＧ）的培养液中培养２４ｈ,观察卵母细胞减数分裂恢复（ＧＶＢＤ）情况。实验结果如下：１．ＦＳＨ（１－５００ＩＵ／Ｌ）能够明显刺激ＣＥＯ克服ＨＸ的抑制作     

温度对中华鳖卵孵化和胚胎发育的影响

在25℃,27．5℃,30℃,32．5℃和35℃条件下,分别研究了中华鳖（Trionyx sinensis)卵的孵化和胚胎的发育。卵黄和卵壳的湿重分别占卵重的85．10％和14．90％,含水量分别为76．63％和21．01％。中华鳖胚胎重随孵化时间呈逻辑斯谛曲线增长,孵化温度越高,胚胎发育速度r越大。25℃－30℃的胚胎发育仅表现为‘S’型生长曲线的前,中段,在孵化后期发育速度未受到明显的抑制,32．5℃和35℃温度条件下,后期发育速度受到了较大的影响。孵出稚鳖湿重和干重均与初始孵重存在极显著的经性相关关系。孵化温度对孵出稚鳖湿重没有显著影响,但对孵出稚鳖干重的影响极显著。随孵化温度的升高,孵出稚鳖干重吾‘U’形变化,在适中温度下,胚胎的生长效率最低。卵黄干重随孵化时间呈指数递减,温度越高,孵黄的利用速度越快。在孵化过程中,卵重,卵干重和卵内水总量都随孵化时间的延长,孵化温度的上升而略有下降。孵化期随温度升高呈双曲线缩短,其相关关系可用方程I＝30．6＋109／（T－22．5）来表示。中华鳖卵的最适孵化温度在32．5℃左右,胚胎孵化后期比早期对温度的需求可能要低一些。     

垃圾基因对卵和早期胚胎发育的影响

哺乳动物的基因组很可能有充分理由来坚持大量收集科学家称谓的垃圾基因 .根据 2 0 0 4年 10月的DevelopmentalCell上一篇报道 ,在这些垃圾基因中有某些可以调控卵子及早期胚胎的基因表达 .哺乳类基因组中总共约有 1 3是由长的、重复的DNA序列组成的 ,其称为逆转录转座子 .研究     

猪骨髓间充质干细胞的分离培养及核移植后重构胚胎发育能力的研究

不同类型的细胞核移植效率不同,原因之一可能是不同类型细胞核移植后进行重编程的潜力不同.本实验对猪骨髓间充质干细胞(porcine bone marrow mesenchymal stem cells,pMSCs)体外分离培养的方法进行了优化.对猪骨髓间充质干细胞的增殖及生长特性进行了观察分析,并以其作为供体细胞进行核移植,对此类型细胞进行重编程的潜力进行了评估.结果表明用密度梯度离心法分离猪骨髓间充质干细胞优于全骨髓贴壁法:猪骨髓间充质干细胞数目在培养第6天达到峰值,传代培养10 h时,贴壁率达到78.50%;传代培养后第4天分裂指数最高,为24.00‰;以猪骨髓间充质干细胞(pMSCs)和猪胎儿成纤维细胞(PF)分别作为供核细胞构建核移植胚胎,其体外囊胚发育率分别为14.63%与15.07%(P＞0.05),孤雌对照组囊胚发育率为30.91%(P＜0.05);而三组囊胚细胞数分别为30.67±17.7、24.1±6.5和25.8±11.4(P＞0.05).实验表明,体外培养的猪骨髓间充质干细胞生长增殖旺盛,生物学性状稳定.并适合作为核移植供体细胞.     

稻虱跗扇的个体发生研究：卵的形成和胚胎发育

捻翅目昆虫是胎生的,胚胎发育和孵化均在母体血腔内进行。稻虱跗Ｅｌｅｎｃｈｉｎｕｓ　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ属捻翅目,跗科,寄生于白背稻虱、褐稻虱和灰稻虱。本文报道稻虱跗　卵的形成各阶段：１）雌虫体内无典型的卵巢,所有卵在母体体腔内同步发育和成熟。最早发现的原卵是包囊干细胞,在雌幼虫血腔内。２）每个包囊细胞内含２５６个姐妹细胞,其中有一个细胞分化成卵母细胞,其余的成为营养细胞。３）成熟卵为椭圆形,大小为７５－１００×４０－５０μｍ。其胚胎发育过程按顺序包括：卵裂、胎盘形成、胚带分节、附肢形成和胚胎背合等阶段。稻虱跗　行单胚生殖。     

稻虱跗煽的个体发生研究：卵的形成和胚胎发育

捻翅目昆虫是胎生的,胚胎发育和孵化均在母体血腔内进行。稻虱跗蝇Elenchinus japonicus属捻翅目,跗煽科,寄生于白背稻虱、褐稻虱和灰稻虱。本文报道稻虱跗煽卵的形成各阶段：1)雌虫体内无典型的卵巢,所有卵在母体体腔内同步发育和成熟。最早发现的原卵是包囊干细胞,在雌幼虫血腔内。2)每个包囊细胞内含256个姐妹细胞,其中有一个细胞分化成卵母细胞,其余的成为营养细胞。3)成熟卵为椭圆形,大小为95-100X40-50μm。其胚胎发育过程按顺序包括：卵裂、胎盘形成、胚带分节、附肢形成和胚胎背合等阶段。稻虱跗蛔行单胚生殖。     

黑水虻卵胚胎发育过程及在生产上的应用

黑水虻作为近年来广受关注的资源昆虫,其规模化应用的基础理论研究成为热点。本文对其胚胎发育过程进行研究,利用显微镜对资源昆虫黑水虻卵孵化发育过程进行观察并拍照,对胚胎各个时期的发育时间和形态进行记录。试验发现,在32℃下,黑水虻卵的发育历期为51 h。黑水虻的胚胎发育经过卵裂期、胚盘胚带形成期、原肠形成期、胚体分节期、体壁形成期、器官形成期6个典型时期。试验对孵化过程中的15个具体发育时期的特征和发育时间进行记录,形成了一套虫卵镜检技术应用于实际生产。在生产上,通过镜检技术对每一批次待孵化虫卵进行镜检观察,可初步判定该批次待孵化虫卵所处的发育阶段和死亡率,预估虫卵孵化时间和孵化率,为规模化稳定培育黑水虻苗种提供理论依据。