龙须菜叶绿素-蛋白复合物的分离及鉴定

以海洋经济海藻--龙须菜(Gracilarialemaneiformis)为材料,机械破碎与超声波相结合破碎这种含胶量非常多的细胞,蔗糖密度梯度超速离心纯化其类囊体膜,去垢剂Triton X-100增溶纯化的类囊体膜,再用蔗糖密度梯度超速离心方法分离其叶绿素-蛋白质复合物.P700差示光谱鉴定分离的光系统Ⅰ(PSⅠ)颗粒,并且检测到了具有DCIP光还原活性的光系统Ⅱ(PSⅡ)颗粒.结果表明,尽管海藻类囊体膜增溶困难,但只要条件合适,可以得到具有活性的光系统颗粒.     

CO2浓度倍增对几种植物叶片的叶绿素蛋白质复合物的影响

研究了CO_2浓度倍增对大豆(Glycine max L.,C_3植物)、黄瓜(Cucumis sativus L.,C_3植物)、谷子(Setaria italica (L.) Beauv.,一种不很典型的C_4植物)和玉米(Zea mays L.,C_4植物)叶片的叶绿素蛋白质复合物的影响。实验植物盆栽于聚乙烯薄膜(或玻璃)的开顶式培养室中。播种后对照室的CO_2浓度立即保持在大气浓度(350±10)×10~(-6)中,CO_2浓度倍增处理室则保持在(700±10)×10~(-6)下。研究结果表明,对于大豆、黄瓜和谷子,CO_2浓度倍增均使其PSⅡ捕光叶绿素a/b-蛋白质复合物(LHCⅡ)的聚合体态的量增多,单体态的量减少。但C_4植物玉米对CO_2浓度倍增没有这样的反应。作者认为在大豆等植物中,LHCⅡ的上述状态变化可能是植物的光合机构对长期高CO_2浓度的一种适应效应,这样能提高光合作用中光能的吸收、传递和转换的效率,并支持高效的光合碳素同化作用。     

光逆境对叶绿体叶绿素蛋白质复合物的影响

研究了强光照射对菠菜叶绿体的叶绿素蛋白质复合物及一些光合特性的影响。实验结果表明,随着强光照射时间的延长,首先,属光系统Ⅱ核心的叶绿素蛋白质复合物的ＣＰａ带明显减少了;进而属ＬＨＣＩＩ的寡聚体和二聚体的带有了不同程度的降低;最后,包括光和Ｉ内的叶绿素蛋白质复合物带大部分被分解,结果还表明,当光逆境还未使叶绿素蛋白质复合物发生明显变化时;代表光系统ＩＩ活性的Ｆｖ／Ｆｏ值及ＤＣＩＰ光还原活性就已明显变     

具放氧活性的光系统Ⅱ核心复合物的光谱特性和叶绿素蛋白质成分的研究

我们从菠菜叶片分离出一种具有高放氧活性的光系统Ⅱ(PSII)核心复台物.我们对这种PSII核心复合物进行了PSII光化学活性、吸收、荧光光谱特性和叶绿素蛋白质成分的研究.这种PSII核心复合物是一种不含PSI成分,又除去了LHC-Ⅱ的较纯,较小的具有高放氧活性(?)的单位.在文中对PSII反应中心叶绿素的吸收成分和CPa带进行了一些讨论.     

管藻目绿藻叶绿素蛋白复合物特性及比较研究

采用温和的ＰＡＧＥ法从管藻目刺松藻（Ｃｏｄｉｕｍ ｆｒａｇｉｌｅ （Ｓｕｒ．）Ｈａｒｉｏｔ）和假根羽藻（Ｂｒｙｏｐｓｉｓ ｃｏｒｔｉｃｕｌａｎｓ Ｓｅｔｃｈ．）,丝藻目绿藻软丝藻（Ｕｌｏｔｈｒｉｘ ｆｌａｃｃａ （Ｄｉｌｌｗ．）Ｔｈｕｒ．）,及菠菜（Ｓｐｉｎａｃｉａ ｌｏｅｒａｃｅａ Ｍｉｌｌ．）中分别得到１１、１１、７和９种色素蛋白复合物,对复合物的多种特性,包括分子量、Ｃｈｌ ａ／ｂ比值、叶绿     

从超声波破碎的蓝藻类囊体膜中分离的叶绿素蛋白复合物

当蓝藻的类囊体膜用超声波进行破碎,并在4℃下用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,有6条叶绿素带被分离出来,它们分别是 CPIa,CPIb,CP1,CPa1 CPa2,FC。CP1 在红区和蓝区的吸收峰分别位于674和435 nm 处。在液氮甲该组分在725和680 nm 处有两个荧光发射带。CPa1和 CPa2的吸收光谱相似,其红峰和蓝峰的位置分别位于667和431.5nm 处。它们在77 K 的荧光发射峰都位于684 nm 处。用超声破碎法分离的叶绿素蛋白复合物的光谱特性,除 CPa1和 CPa2在红峰和蓝峰的吸收位置蓝移了3—5 nm 之外,其余与用 SDS 增溶法分离的相应复合物相似。属于光系统Ⅰ的 CPIa-CPI 的叶绿素含量占总叶绿素的40.93%,而属于光系统Ⅱ的 CPa1和 CPa2的叶绿素则占总叶绿素的38.78%,二者之差仅有2.15%。     

水分胁迫对小麦捕光色素蛋白复合物的影响

棉农４号春小麦幼苗（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｕｖｕｍ Ｌ．ｅｖ ．Ｍｉａｎｎｏｎｇ Ｎｏ．４）经一０．５ＭＰａ ＰＥＧ溶液渗透胁迫２４、４８和７２ｈ,使叶片分别受到轻蔗、中度和重度的水分胁迫。在渐进水分腔迫条件下,叶绿体类囊体膜中光系统Ⅱ捕光色素蛋白得合物（ＬＣＨ Ⅱ）的各组分含量发生了不同变化。对类囊体纱蛋白复合物进行的温和电泳结果显示,在轻度水分胁迫（２４ｈ）时,明轻度水分胁迫对其有诱导作     

不同叶龄黄瓜叶片叶绿素蛋白质复合物组分的比较研究

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对比分析了老、嫩黄瓜叶片叶绿素蛋白质复合物之间的差异,发现嫩黄瓜叶片中缺少1条属光系统Ⅰ的CPI_b带。从低温荧光发射光谱观察到,嫩黄瓜的光系统Ⅰ相对高于光系统Ⅱ,而老黄瓜则相反。指出在叶绿体发育过程中首先形式光系统Ⅰ,以后是光系统Ⅱ。我们还注意到,叶片中的F685/F735比值与叶绿素蛋白质复合物中的单体/寡聚体比值之间是正相关关系。     

龙须菜中溴过氧化物酶的分离纯化及酶学性质分析

对中国北方海域江蓠属养殖龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)进行了溴过氧化物酶分离纯化及性质的研究。粗提液中酶催化检测反应不稳定, 活力单位较低或无; 经DEAE cellulose 52离子交换层析, 去除了结构多糖及藻胆蛋白, 酶催化反应稳定, 得到比活力为2.8的电泳纯溴过氧化物酶。对纯化溴过氧化物酶性质研究表明: 该溴过氧化物酶为单体酶, 分子量约66 kD, 溴化单氯双甲酮时的最适pH值为6.0, 在40°C以下和pH 3.0~9.0之间有很好的稳定性。钒酸盐可提高该溴过氧化物酶的催化活性, 而Fe2+、Fe3+、Cu2+、Zn2+和EDTA等化合物对其有较显著的抑制作用。反应动力学实验表明, 该酶对Br-、H2O2的Km分别为53.5 mmol/L和38 mmol/L。     

龙须菜中溴过氧化物酶的分离纯化及酶学性质分析

对中国北方海域江蓠属养殖龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)进行了溴过氧化物酶分离纯化及性质的研究。粗提液中酶催化检测反应不稳定, 活力单位较低或无; 经DEAE cellulose 52离子交换层析, 去除了结构多糖及藻胆蛋白, 酶催化反应稳定, 得到比活力为2.8的电泳纯溴过氧化物酶。对纯化溴过氧化物酶性质研究表明: 该溴过氧化物酶为单体酶, 分子量约66 kD, 溴化单氯双甲酮时的最适pH值为6.0, 在40°C以下和pH 3.0~9.0之间有很好的稳定性。钒酸盐可提高该溴过氧化物酶的催化活性, 而Fe2+、Fe3+、Cu2+、Zn2+和EDTA等化合物对其有较显著的抑制作用。反应动力学实验表明, 该酶对Br-、H2O2的Km分别为53.5 mmol/L和38 mmol/L。     

大型海藻龙须菜的化学成分研究

从大型海藻龙须菜(Gracilaria lemaneiformis(Bory)Daws)中分离获得了9个化合物.通过波谱分析,分别鉴定为(2S)-1-O-棕榈酸-3-O-β-d-吡喃半乳糖甘油酯(1)、(2S)-1-O-棕榈酸-2-O-棕榈油酸-3-O-β-d-吡喃半乳糖甘油酯(2)、(2S)-1-O-棕榈酸-2-O-...     

龙须菜藻红蛋白亚基分离及抗肿瘤活性研究

目的研究藻红蛋白不同亚基对人直肠癌SW-480细胞的抑制作用。方法通过盐析和DEAE-Sepha-rose FF柱层析从龙须菜中获得高纯度藻红蛋白,然后通过脲变性、CM-Sepharose F F阳离子交换层析与透析复性,获得具活性的PE亚基,采用MTT法检测藻红蛋白亚基对SW-480细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测藻红蛋白亚基对SW-480细胞凋亡的影响。结果 PE亚基对SW-480有较强的生长抑制作用,其中以β亚基最为显著,当β亚基剂量为20μg/mL,作用时间48 h时,其对SW-480细胞的抑制率达72.64%。结论藻红蛋白及其亚基对SW-480细胞株的生长具有较强的抑制作用,β亚基效果最好,预示其具有一定的抗肿瘤潜力。     

龙须菜免疫活性多糖的分离纯化及结构鉴定

利用小鼠淋巴细胞增殖模型,筛选龙须菜中具有免疫活性的多糖,并对其结构进行鉴定。活性筛选与分离纯化相结合,经室温提取,DEAE-Sepharose F.F.离子柱和凝胶Sephacryl S500层析,分离纯化得到具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖活性的龙须菜多糖GCpF2-3B。免疫实验表明,GCpF2-3B在较低浓度10μg/mL就表现出刺激作用(增殖率135%),当浓度为50μg/mL时增殖率达到最高(195%)。高效渗透色谱HPSEC层析纯度鉴定和紫外扫描表明GCpF2-3B为均一多糖,分子量约为1.03×105Da。红外光谱扫描显示,GCpF2-3B为典型的含硫酸基团多糖,具有糖类特征峰和总硫酸基吸收峰;13C NMR谱显示GCpF2-3B主要由交替相连的(1→3)-β-D-半乳糖和(1→4)-α-L-3,6-内醚半乳糖重复二糖组成。     

龙须菜多糖脱硫酸化及免疫活性研究

考察了Miller等和Nagasawa等报道的脱硫酸方法对龙须菜多糖硫酸基脱除效果,并比较了脱硫酸前后多糖的免疫活性变化。实验结果显示,采用Miller等报道的方法时,以草酸作为催化剂对硫酸基脱除效果最好,脱除率达到71.4%,远好于其他种类酸催化,但多糖回收率却只有36.4%;采用Nagasawa等报道的方法时,向二甲基亚砜溶液中加入10%甲醇比加入2%吡啶或2%吡啶+2%三甲基氯硅烷具有更好的脱硫酸基效果,硫酸基脱除率达到72.9%,回收率48.9%,是本次实验中效果最好的。免疫活性实验表明,当降低龙须菜多糖硫酸基含量时,免疫活性相应降低。     

Nutritional Composition and Assessment of Gracilaria lemaneiformis Bory

The chemical composition, mineral elements, vitamins, free fatty acids and amino acid content of the edible red alga Gracilaria lemaneiformis Bory, grown in the sea near Nan＇ao island, Guangdong Province, were analyzed in the present study. Gracilaria lemaneiformis Bory showed a total sugar content of 14.65%. The protein content was 21%, of which approximately 41% was determined to be essential amino acids （EAA）. The major amino acid components were glutamic acid, leucine, arginine, and alanine. Of the EAA assayed, methionine and cysteine appeared to be the most limiting amino acids compared with the EAA pattern provided by Food and Agricultural Organization of the United Nations. The total lipids content was 0.87% and comprised a high composition of unsaturated fatty acids （61%）, mainly as linoleic acid and oleic acid, and a little amount of polyunsaturated fatty acid; palmitic acid was the main component （39%） of saturated acids. Relatively high levels of vitamin C, iodine, phosphorus, and zinc were also present in G. lemaneiformis. The nutritional composition between G. lemaneiformis and Nostoc flagelliforme, a rare alga that is widely eaten in Chinese society, was compared. The results suggest that N. flagelliforme can be substituted for by G. lemaneiformis, not only because of their similar shape, but also because of their approximate nutritional composition. Gracilaria lemaneiformis may possibly serve as a potential healthy food in human diets in the future.     

管藻目绿藻叶绿素蛋白复合物特性及比较研究

By mild PAGE method, 11, 11, 7 and 9 chlorophyll-protein complexes were isolated from two species of siphonous green algae (Codium fragile (Sur.) Hariot and Bryopsis corticulans Setch.), green alga (Ulothrix flacca (Dillw.) Thur.), and spinach (Spinacia oleracea Mill.), respectively. Apparent molecular weights, Chl a/b ratios, distribution of chlorophyll, absorption spectra, low temperature fluorescence spectra of these complexes were determined, and compared with one another. PSⅠ complexes of two siphonous green algae are larger in apparent molecular weight because of the attachment of relative highly aggregated LHCⅠ. Four isolated light-harvesting complexes of PSⅡ are all siphonaxanthin-Chl a/b-protein complexes, and they are not monomers and oligomers like those in higher plants. Especially, the absence of 730 nm fluorescence in PSⅠ complexes indicates a distinct structure and energy transfer pattern.