脱落酸的药理功能及分子靶标的研究进展

脱落酸(abscisic acid,ABA)是一种在高等植物中广泛分布的激素,其最初被证明存在于哺乳动物脑组织中,后来被发现也存在于哺乳动物血浆和其他组织部位如脂肪细胞,胰岛β细胞,角质形成细胞,粒细胞,单核细胞,巨噬细胞,间充质干细胞及海马神经元中,并且ABA与许多临床相关的人类疾病密不可分。本文概述了ABA用于改善或治疗炎症性肠病、糖尿病及动脉粥样硬化的研究进展,以及其对神经元细胞的作用。ABA可能以羊毛硫氨酸合成酶C样蛋白2(lanthionine synthetase C-like 2,LANCL2)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated receptor-gamma,PPARγ)为作用靶标发挥生理效应。基于ABA的生物安全性,其可能作为治疗炎症和感染性人类疾病的新药候选物。     

利用靶标分子使药物释放优化

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮｅｗｓ ,2 0 0 1年 2 1卷 15期报道 :专化性在开发有效药物中是一个关键。刚成立 6个月的ＴａｒｇｅｔｅｄＭｏｌｅｃｕｌｅｓＣｒｏｐ .(ＴＭＣ) (Ｓａｎｄｉｅｇｏ ,ＣＡ)在药物专化性释放研究领域中是一个新加入者。该公司针对血管专化性靶标来改善药物在体内的有效释放 ,因而该公司成为研究肿瘤学、血管系统疾病和炎症的公司的新伙伴。ＴＭＣ是去年 11月从ＢｕｒｎｈａｍＩｎｓｔｉｔｕｔｅ(ＬａＪｏｌｌａ ,ＣＡ)独立出来的研究开发型公司 ,拥有Ｂｕｒｎｈａｍ公司的 12个专利和一个有专利保护的技术所生…     

STAT3与在肿瘤耐药中的研究进展

STAT3是信号转导与转录活化蛋白(STATs)家族的重要一员,是一种存在于胞浆并在激活后能够转入核内与DNA结合的蛋白家族,具有信号转导和转录调控双重功能。STAT3在多种肿瘤组织与细胞系中异常表达,并与肿瘤的增殖分化、细胞凋亡密切相关。肿瘤耐药是其治疗失败的重要原因,STAT3能够通过多种途径介导肿瘤耐药。因而,STAT3在近年的抗肿瘤研究中备受关注,成为肿瘤治疗的良好靶点,由传统药物与STAT3抑制剂组成的新型治疗方案使得肿瘤患者大大受益。然而,STAT3介导肿瘤耐药的机制还不是很明确,需要进一步研究。本文就近年来一些化疗药物和靶向药物耐药的发生,对STAT3介导耐药的作用进行综述。     

STAT3 入核分子机制的初步研究

为了研究Stat3入核的分子机制,将SV40大T抗原的经典核定位序列NLS(nuclear localization sequence)分别融合在Stat3-GFP分子和缺失突变体Dstat3-GFP的分子之间,构建Stat3-NLS-GFP和Dstat3-NLS-GFP融合分子。转染293T细胞,以NLS-GFP为阳性对照,通过激光共聚焦显微镜的观察融合分子的亚细胞位置,未经白介素-6刺激的Stat3-NLS-GFP和经白介素-6刺激的Stat3-GFP呈胞核分布,未经白介素-6刺激的Stat3-GFP和Dstat3-NLS-GFP呈胞浆分布,初步证明Stat3入核是由于获得了核定位序列。     

miRNA体内作用靶标鉴定的策略

miRNAs是一类重要的基因表达调节因子,近年的研究表明miRNA在控制细胞的生长发育、分化、凋亡等过程中发挥着十分重要的作用。但对miRNA作用机制和分子功能的研究却进展缓慢,归其原因是miRNA和靶标之间非完全配对,缺乏快捷有效的靶标鉴定方法。因此,就miRNA靶标鉴定的策略作一综述。miRNA调节靶标的鉴定有助于揭示一些疾病的致病机理,发现可用于治疗的新分子靶标,为基因治疗奠定基础。     

抗肿瘤天然药物抑制STAT3 信号通路的分子机制研究进展

信号转导和转录激活因子3（STAT3）是细胞内重要的信号转导蛋白和转录因子,与肿瘤的发生发展密切相关,抑制其信号通路,可抑制肿瘤生长与转移,故近年来将STAT3 蛋白作为抗肿瘤靶点,开发STAT3 抑制剂,已成为研究热点。概述STAT3 及其信号通路与肿瘤发生、发展和转移的关系以及STAT3 信号通路的主要抑制途径,重点综述抗肿瘤天然药物抑制STAT3 信号通路的分子机制研究进展。     

以STAT3为靶标的抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立和应用

旨在建立稳定可靠的以转导与转录激活子(STAT3)为靶标的抗肿瘤高通量筛选模型,应用该模型筛选潜在的抗癌药物。利用基因重组、蛋白表达纯化技术,获得STAT3目的蛋白,使用酶联免疫吸附法(ELISA)进行高通量药物筛选,将筛选出的抑制剂在细胞水平上利用MTT比色法测定化合物对癌细胞增殖的影响。结果显示,成功构建表达载体pET-28a-STAT3;所建立的模型稳定可行,可用于以STAT3为靶标的抗肿瘤药物的高通量筛选;用该模型对8 248个样品进行筛选,在500μmol/L药物浓度下,化合物MDC6抑制率为92%,另外,进行IC50值的测定时,分子水平上最低达到3.37μmol/L,在细胞水平上可达到15.92μmol/L。建立的高通量药物筛选模型,具有操作方便、成本低、结果稳定等特点,可用于STAT3抑制剂的大规模筛选。     

Novel imidazopyridine suppresses STAT3 activation by targeting SHP-1

The unregulated activation of STAT3 has been demonstrated to occur in many cancers and enhances tumour growth, migration, and invasion. Stimulation by cytokines, growth factors, and hormones triggers this activation by phosphorylating STAT3 at tyrosine 705. Novel imidazopyridine compounds were synthesized to evaluate the inhibition of STAT3 at Y705. Among the tested compounds, 16 reduced the level of phospho-STAT3, inhibited the downstream signalling cascade and subsequently attenuated the survival of hepatocellular carcinoma (HCC) cells. Further assays showed that the reduction effects of compound 16 on tyrosine 705 of STAT3 were attributed to up-regulation of protein tyrosine phosphatase SHP-1.     

SIPAR和STAT3相互作用并对其信号通路进行负调控

STAT3 对细胞的生长、存活、增殖以及机体的发育都具有重要的作用 . STAT3 基因的失活可以引起多种疾病,而 STAT3 基因的过度激活又可以引发很多癌症 . 为了对 STAT3 信号通路的调控做进一步的研究,采用酵母双杂交的方法,以 STAT3 蛋白全长作为诱饵蛋白,筛选了小鼠 7 天的胚胎文库 . 得到了与 STAT3 相互作用的一个功能未知的蛋白质,将其命名为 SIPAR (Stat3 interacting protein as a repressor). 免疫染色的实验结果表明, SIPAR 是一种在核内分布为主,细胞质中也有少许分布的蛋白质 . 荧光酶活性测定结果表明 SIPAR 对 STAT3 的转录活性具有抑制作用 . 斑马鱼注射实验说明 SIPAR 基因表达严重影响了斑马鱼的正常发育 .     

Development of a STAT3 reporter prostate cancer cell line for high throughput screening of STAT3 activators and inhibitors

STAT3 is constitutively activated in several cancers, including prostate cancer, and is therefore, a potential target for cancer therapy. DU-145 prostate cancer cells were stably co-transfected with STAT3 reporter and puromycin resistant plasmids to create a stable STAT3 reporter cell line that can be used for high throughput screening of STAT3 modulators. The applicability of this cell line was tested with two known activators and inhibitors of STAT3. As expected, EGF and IL-6 increased STAT3 reporter activity and enhanced the nuclear localization of phosphorylated STAT3 (pSTAT3); whereas Cucurbitacin I and AG490 decreased STAT3 reporter activity dose and time-dependently and reduced the localization of pSTAT3 in the nuclei of prostate cancer cells. Given the importance of STAT3 in cancer initiation and progression, the development of a stable STAT3 reporter cell line in prostate cancer cells provides a rapid, sensitive, and cost effective method for the screening of potential STAT3 modulators.     

STAT3基因沉默降低小鼠乳腺癌细胞的体外迁移能力

信号转导子与转录活化子3(STAT3)是一个具有信号转导和转录调控双重功能的转录因子,有文献报道STAT3在乳腺癌中的表达显著升高,并能促进乳腺癌的转移。为了深入探索STAT3在肿瘤发生发展中的作用和影响乳腺癌转移的分子机制,采用RNA干扰技术在小鼠乳腺癌细胞株4T1中沉默STAT3的表达。MTT实验结果显示STAT3沉默对4T1细胞的增殖能力没有影响;细胞迁移实验结果表明STAT3表达被沉默后4T1细胞的迁移能力明显被抑制;定量PCR结果显示,STAT3基因沉默后4T1细胞中VEGF和IL-6的mRNA水平下降,E-cadherin表达上升,mosin表达下降;信号通路检测显示STAT3基因表达沉默后MAPK的活化明显降低。研究表明STAT3在小鼠乳腺癌细胞的迁移过程中发挥重要作用,为以STAT3基因为靶向的治疗提供了一定的实验依据。