脂质过氧化对细胞衰老的延缓作用(Ⅱ)(英文)

本文以传代培养的人胚肺成纤维细胞为研究对象,以Fe~(2 )/维生素C为诱发脂质过氧化的体系,研究了脂质过氧化对细胞衰老的影响。结果表明适当低水平的脂质过氧化可以明显改善细胞形态,延缓细胞退变性形态特征的出现,并使细胞存活期延长2—8天。随着细胞传代数的增加,对照组和处理组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力下降,但处理组细胞中SOD活力并不高于对照组,说明SOD至少在某些情况下对延缓细胞衰老并不起主要作用。     

水杨酸在小麦幼苗渗透胁迫中的作用

用含１．０ｍｍｏｌ／Ｌ ＳＡ的不同渗透势ＰＥＧ溶液漂浮处理小麦幼苗叶片,研究ＳＡ在水分逆境下脂质过氧化中的作用。结果表明,ＳＡ降低了叶片ＣＡＴ活性,轻度渗透胁迫下ＳＡ对稳定膜结构和功能有一定作用。较严重的渗透胁迫加ＳＡ处理使叶片失水量、膜相对透性和ＭＤＡ含量有所增加,Ｈ２Ｏ２和Ｏ２＾－积累较快,但与不加ＳＡ处理比较,ＳＯＤ和ＰＰＯＤ活性仍较高,脂质过氧化程度稍有加重。ＳＡ在诱导植物提高抗逆力中的作     

汞对玉米幼苗膜脂过氧化及体内保护系统的影响

随着处理ＨｇＣｌ２浓度的升高,细胞膜脂质过氧化水平升高,细胞膜透性增大,ＣＡＴ活性降低,ＳＯＤ、ＰＯＤ活性升高,组织可溶性蛋白质含量升高。     

生长抑素对羟自由基损伤的人胃粘膜上皮细胞系GES—1的影响

目的和方法：采用人胃粘膜上皮细胞系ＧＥＳ１细胞传代培养技术,利用Ｆｅ２＋与Ｈ２Ｏ２反应生成的羟自由基（ｈｙｄｒｏｘｙｌｒａｄｉｃａｌ,ＯＨ·）建立细胞损伤模型,探讨ＯＨ·损伤人胃粘膜细胞的机制,观察生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＳ）对ＧＥＳ１细胞抗ＯＨ·损伤的影响。结果：（１）ＯＨ·可直接损伤ＧＥＳ１细胞,表现为细胞存活率下降而细胞乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ,ＬＤＨ）漏出量增多;预先在细胞培养液中加入ＯＨ·特异性清除剂二甲基亚砜（５ｍｍｏｌ／Ｌ）,可预防该损伤。预先加入ＳＳ（０．０１ｍｇ／Ｌ,０．１ｍｇ／Ｌ,１．０ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ）对细胞存活率和细胞ＬＤＨ漏出量无影响;（２）加入ＯＨ·后,细胞丙二醛（ＭＤＡ）、氧化型谷胱甘肽（ＧＳＳＧ）含量上升而还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）含量下降。以ＳＳ０．１ｍｇ／Ｌ,１．０ｍｇ／Ｌ,１０ｍｇ／Ｌ预处理,可部分减轻上述改变。结论：ＯＨ·可直接损伤ＧＥＳ１细胞,其机制与破坏细胞的巯基稳态及加重细胞的脂质过氧化程度有关;ＳＳ可通过维持细胞的巯基稳态,部分减轻ＯＨ·所致的ＧＥＳ１细胞脂质过氧化程度。     

镍对离体玉米叶片衰老的调节作用

本文研究了镍对离体玉米叶片衰老的调节作用。研究结果表明,玉米叶片在衰老过程中,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）过氧化氢酶（ＣＡＴ）、抗坏血酸过氧化物酶（ＡsＳ－ＰＯＤ）活性和抗坏血酸（ＡsA)含量显著降低,超氧阴离子自由基（Ｏ^-2)产生率显著增加,脂质过氧化作用加剧,丙二醛（ＭＤＡ）含量升高,细胞质膜透性增大。而１０^-2、１０^-3mol.L^-1Ni^2 处理能增强上述保护酶活性和抗氧化剂ＡsA的含量从而能减轻细胞膜脂过氧化使用。２０^-3、１０^-2mol.L^-1Ni^2 处理能显著延缓蛋白质和叶绿素 降解。因此镍能延缓离体玉米叶片的衰老,尤其是以１０^-2mol.L^-1Ni^2 对衰老的延缓作用更大。动态测定结果表明,１０^-2mol.L^-1Ni^2 处理能使衰老滞后２－天。     

水杨酸诱导烟草培养细胞的脂质过氧化和保护基因表达的研究

用外源水杨酸（ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ,ＳＡ）处理烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａ ｔａｂａｃｕｍ Ｌ．）培养细胞,证实ＳＡ能诱导脂质过氧化,抑制过氧化氢酶活性并诱导ＰＲ－１基因的表达。对苯二酚和Ｈ２Ｏ２也能不同程度地诱导烟草培养细胞的脂质过氧化ＰＲ－１基因的表达,但不能抑制过氧化酶活性。     

天然抗氧化剂丹参酮Ⅱ—A对肝细胞脂质过氧化产物与DNA相互作用的影响

［３Ｈ］花生四烯酸标记的肝细胞,经ＦｅＣｌ２－ＤＴＰＡ启动脂质过氧化后,细胞ＤＮＡ出现放射性,并随保温时间增加而逐渐增高,表明在细胞内脂质过氧化产物与ＤＮＡ发生相互作用,生成了一种ＤＮＡ加成物,经测定它具有特征荧光光谱,显示较低的增色效应和Ｔｍ值。用高度敏度荧光图象显微镜直接观察发现丹参酮Ⅱ－Ａ经细胞摄取后主要滞留在细胞膜与胞浆中。它能有效地抑制细胞脂质过氧化,减少脂质－ＤＮＡ加成物的产生,并阻止了细胞存活率和Ｏ６甲基鸟嘌呤转移酶活性的降低,其抑制率与ＶｉｔＥ,ＢＨＴ相近,但显著高于ＮａＮ３,甘露醇和ＳＯＤ。上述结果提示丹参酮Ⅱ－Ａ是一种新的有效的细胞内脂质过氧化产物与ＤＮＡ相互作用的抑制剂。它对ＤＮＡ的保护作用可能是通过清除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应,抑制ＤＮＡ加成物的生成,从而减少了细胞毒性。     

D—半乳糖对神经元和成纤维细胞拟老化作用的实验研究

实验用体内、外相结合的方法,观察了Ｄ－半乳糖（Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓｅ,Ｄ－ｇａｌ．）对细胞的促老化作用。结果表明,Ｄ－ｇａｌ使培养大鼠胎脑神经元出现生长发育缓慢、突起脱落、死亡率增高等退行性变;大鼠肺成纤维细胞的体外分裂代数减少;人胎儿肺二倍体成纤维细胞（ＨＢＳ）分裂周期中Ｇ２－Ｍ期细胞减少、Ｇ－Ｇ１期细胞增加、ＤＮＡ含量下降,细胞增殖速度减慢;大鼠胎脑神经细胞和ＨＢＳ中ＳＯＤ含量降低,丙二醛（ＭＤＡ）水平升高,这些结果与次黄瞟呤（ＨＰＸ）－黄瞟呤氧化酶（ＸＯＤ）系统产生的超氧阴离子自由基（Ｏ－２·）作用一致。提示,Ｄ－ｇａｌ抑制细胞生长发育和分裂繁殖,加速细胞老化,其机理可能与Ｏ－２·等活性氧（ＲＯＳ）过荷引起的脂质过氧化有关。     

MnSOD与CuZnSOD基因转染细胞在电离辐射敏感性中的作用

诱导超氧阴离子（Ｏ２·）的产生是电离辐射损伤细胞和组织的重要机制之一。超氧化物歧化酶ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤ是细胞内清除Ｏ２·的主要抗氧化酶。本研究将ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤｃＤＮＡ真核表达载体分别导入ＣＨＯ细胞,以稳定表达这两种酶的ＣＨＯ细胞系为细胞模型,通过分析细胞形态学、线粒体功能和受照射细胞Ｄ０值变化比较研究了ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤ对细胞辐射敏感性的影响。结果表明,ＭｎＳＯＤ表达的增强能明显降低细胞的辐射敏感性,同时维持线粒体的正常代谢功能,而ＣｕＺｎＳＯＤ则不能。由此提示ＭｎＳＯＤ和ＣｕＺｎＳＯＤ对细胞的辐射敏感性存在着不同的调控机制。     

三唑酮对玫瑰切花衰老指标的影响(简报)

三唑酮处理的玫瑰切花ＭＤＡ含量降低,ＰＯＤ活性维持在较高水平,蛋白质含量提高,ＳＯＤ活性变化不大。表明三唑酮可以延缓脂膜过氧化,降低膜的透过性,具有延缓玫瑰切花衰老的作用。     

二氧化硫对蚕豆叶片H2O2累积和膜脂过氧化的影响

对经ＳＯ２熏气处理后,蚕豆叶片中Ｈ２Ｏ２的累积与膜脂过氧化关系进行了研究。低浓度ＳＯ２处理引起叶片中Ｈ２Ｏ２轻微累积,膜脂过氧化程度较低;较高浓度ＳＯ２引起Ｈ２Ｏ２含量增加,同时膜脂过氧化产物丙二醛含量也迅速增加,回归分析结果表明,ＳＯ２处理蚕豆叶片Ｈ２Ｏ２含量与丙二醛含量存在极显著的线性关系：ｙ＝３．５２９８＋０．０１６３ｘ,ｒ＝０．９３９７。     

ADP—Fe~（2＋）启动脂质过氧化的化学发光研究

以化学发光法和雨二醛测定法为实验手段研究了ＡＤＰ—Ｆｅ２＋启动的脂质过氧化反应以及几种金属离子对该反应的影响、结果表明,当反应体系中只有ＡＤＰ－Ｆｅ２＋存在时,通过化学发光法和丙二醛测定法都可以现察到脂质过氧化反应在０—５分钟内有一“潜伏期”存在,同时在微粒体浓度保持不变的条件下,增大二价铁离子的浓度,则脂质过氧化的水平增强。如果反应体系中同时加入ＡＤＰ—Ｆｅ２＋与ＡＤＰ—Ｆｅ３＋,则反应起始时的“潜伏期”消失。当ＡＤＰ—Ｆｅ３＋、ＡＤＰ—Ａｌ３＋和ＡＤＰ－Ｐｂ２＋单独存在时本身并不启动脂质过氧化,但对ＡＤＰ－Ｆｅ２＋启动的脂质过氧化都有增强作用,并且三价铁离子对鼠肝微粒体脂质过氧化的增强作用随着ＡＤＰ－Ｆｅ２＋浓度的增大而逐渐加强。将化学发光法与雨二醛测定法的结果加以比较,发现微粒体本身对它的脂质过氧化反应过程中的发光具有猝灭作用。     

谷胱甘肽的抗线粒体脂质过氧化作用

谷胱革肽是细胞内重要的抗氧化损伤物质之一,以ＮＡＤＨ诱导的牛心肌线粒体脂质过氧化体系为模型,研究了谷胱甘肽的抗氧化作用。结果表明,一定浓度的谷胱甘肽能够部分抑制该体系中线粒体的脂质过氧化,保护组的丙二醛含量为损伤组７２．５％;线粒体的膨胀度较损伤组降低;细胞色素ｃ氧化酶及ＡＴＰ酶活力分别较损伤组提高了１．５及２．２倍。     

磁处理水对衰老贻贝棘尾虫消除自由基能力影响

将衰老的贻贝棘尾虫Stylonychia mytilus无性系(分裂2000代以上)随机分成两组:一组在经H型强场磁化杯磁处理的无机液中培养;另一组做为对照组在不经磁处理的无机培养液中培养。在喂食,温度等其他条件一致的情况下培养三个月后,分别测定两组消除·OH自由基,O2-自由基能力,脂质过氧化程度及脂褐素含量。结果表明在磁化了的培养液中培养的衰老贻贝棘尾虫无性系,其消除·OH自由基02-自由基能力(P<0.01)显著高于对照组,脂质过氧化程度(P<0.05),脂褐素含量(P<0.01)显著低于对照组。根据D.Harman的衰老自由基学说,本文在自由基角度上证实了磁处理水在保持细胞活力和延缓细胞衰老方面的作用。     

渗透胁迫下水稻幼苗中叶绿素降解的活性氧损伤作用

水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）幼苗在渗透胁迫下,随着胁迫强度的增加及时间的延长,Ｃｈｌ降解加剧,活性氧Ｏ－·２ 、Ｈ２Ｏ２ 及脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量明显增加,抗氧化剂抗坏血酸（ＡｓＡ）还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）及胡萝卜素（ＣＡＲ）含量显著降低,叶绿素蛋白复合体（Ｃｈｌ－Ｐｒｏ）结合度松弛． Ｃｈｌ含量的降低和Ｏ－·２ 、Ｈ２Ｏ２ 及ＭＤＡ 含量呈显著的负相关,与ＡｓＡ、ＧＳＨ及ＣＡＲ含量的下降呈良好的正相关性．ＡｓＡ、α－生育酚（ＶｉｔＥ）及甘露醇预处理可使胁迫诱导的ＭＤＡ 增多及Ｃｈｌ降解延缓,而Ｆｅ２＋ 、Ｈ２Ｏ２ 及Ｆｅｎｔｏｎ 反应则刺激ＭＤＡ 增加． Ｆｅｎｔｏｎ 反应可加速Ｃｈｌ降解． 渗透胁迫下水稻幼苗Ｃｈｌ的降解可能主要是由Ｏ－·２ 和Ｈ２Ｏ２ 的代谢产物·ＯＨ氧化损伤之故     

冷锻炼对水稻和黄瓜幼苗SOD,GR活性及GSH,AsA含量的影响

水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）和黄瓜（Ｃｕｃｕｍ ｉｓｍ ｅｌｏ Ｌ．）幼苗在昼夜温度为１５ ℃／１０ ℃、白天光照１２ ｈ,光强为２５０ μｍ ｏｌ·ｍ － ２·ｓ－ １的条件下锻炼３ ｄ,明显地提高幼苗叶片中膜保护酶——超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性和内源抗氧化剂——还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）、抗坏血酸（ＡｓＡ）的含量。经冷锻炼和未锻炼的幼苗移置４ ℃、光强为２５０ μｍ ｏｌ·ｍ － ２·ｓ－ １下胁迫处理２ ｄ,未锻炼苗叶片中ＳＯＤ、ＧＲ 活性和ＧＳＨ、ＡｓＡ 含量明显下降,而经冷锻炼的苗则相对比较稳定。从脂质过氧化产物——丙二醛（ＭＤＡ）含量及幼苗的存活率亦看出：冷锻炼苗具有较低的脂质过氧化水平和较高的幼苗存活率。由此认为：冷锻炼能提高水稻和黄瓜幼苗细胞膜的稳定性,从而增强了耐低温光胁迫的能力     

抗坏血酸对沙打旺原生质体分离和培养中膜损伤及相关酶活性的影响

抗坏血酸（ＡＳＡ） 能减轻沙打旺原生质体的褐化,改善原生质体的培养状况。ＡＳＡ的作用可能与它增强原生质体抗过氧化能力有关。酶解处理诱导原生质体超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 和抗坏血酸过氧化物酶（ＡＰＸ）活性升高,但培养过程使ＡＰＸ 活性明显下降,原生质体清除过氧化物能力减弱,膜脂过氧化产物丙二醛（ ＭＤＡ） 积累增加,膜发生损伤。向酶溶液和培养基中添加ＡＳＡ 可显著提高ＳＯＤ 尤其是ＡＰＸ 活性,减轻膜脂过氧化,增强原生质体的存活力,促进原生质体的分裂和细胞克隆的形成。所有处理中过氧化氢酶（ＣＡＴ） 活性变化不大,表明它在原生质体清除过氧化物过程中不具主要作用。     

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化的发生发展与低密度脂蛋白受到氧化修饰有关。本文从以下四个方面对本室的工作进行了综述：（１）动脉粥样硬化机体受到脂质过氧化损伤;（２）Ｏｘ－ＬＤＬ对内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞的毒性效应;（３）Ｏｘ－ＬＤＬ和ＭＤＡ－ＬＤＬ的比较及与Ｏｘ－ＬＤＬ和ＭＤＡ－ＬＤＬ结合的清道夫受体的特征;（４）不同方法对ＬＤＬ氧化修饰的比较和以ＬＤＬ氧化修饰为模型对某些物质的抗氧化修饰研究。研究结果为动脉粥     

MnSOD基因转染对电离辐射诱发细胞凋亡的调控

电离辐射能诱发超氧阴离子自由基（Ｏ－２·）的产生,同时也是细胞凋亡发生的诱因之一。锰超氧化物歧化酶（ＭｎＳＯＤ）是一种存在于真核细胞线粒体、具有清除Ｏ－２·作用的抗氧化酶。为探讨ＭｎＳＯＤ在辐射诱发细胞凋亡中的作用,采用基因转染技术分别将有义和反义ＭｎＳＯＤｃＤＮＡ真核表达载体直接导入ＣＨＯ细胞,并用此细胞模型研究了ＭｎＳＯＤ对Ｘ射线诱发细胞凋亡的调控。结果发现,稳定表达有义ＭｎＳＯＤ的细胞克隆能明显抑制８ＧｙＸ射线诱发的细胞凋亡,而表达反义ＭｎＳＯＤ的细胞克隆对Ｘ射线诱发的细胞凋亡更加敏感,进一步的研究发现,线粒体膜电位的改变可能是ＭｎＳＯＤ调控细胞凋亡的机制之一。     

作物细胞耐旱保护酶系统对外磁场的反应

作物细胞的耐旱保护酶由过氧化物酶（ＰＯＤ） 、过氧化氢酶（ＣＡＴ） 和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ） 组成。对小麦种子施加０．１Ｔ 的磁场处理使其萌发时细胞中ＰＯＤ 活性提高,幼苗根系和叶片细胞中的ＰＯＤ 活性也发生了变化,叶片的ＰＯＤ 同工酶谱中多出了两个酶带。使用蛋白质合成抑制剂和转录抑制剂发现,ＰＯＤ 活性提高的原因是磁场处理促进了ＰＯＤ 合成的翻译过程。干旱胁迫下,经磁场处理的幼苗叶片细胞中的ＰＯＤ、ＣＡＴ 和ＳＯＤ 活性均比对照高,膜脂过氧化产物丙二醛（ ＭＤＡ） 含量比对照低,表明保护酶系统的功能有所增强。