甲烷氧化混合菌的保藏方法研究

【目的】甲烷氧化混合菌是自然界中吸收甲烷的关键微生物,在甲烷氧化混合菌的研究和应用中,首先要解决其长期稳定保藏的问题,保藏方法应能有效保持菌群结构和功能的完整性、稳定性。【方法】以从煤矿土壤富集得到的两种结构稳定的甲烷氧化混合菌为实验体系,研究对比了冷藏法、低温冷冻法、石蜡油冷冻法、甘油冷冻法4种保藏方法,考察保藏前后混合菌的生长状况、MMO活性、菌群结构等。【结果】保藏6个月后,除甘油冷冻法以外,经其它3种方法保藏的混合菌,都具有与保藏前相当的细胞密度、甲烷氧化能力、MMO酶活以及传代稳定性,且DGGE图谱显示保藏前后的菌群结构变化不大。【结论】这3种保藏方法都可以有效的保持甲烷氧化混合菌功能和菌群结构的稳定性。     

含有甲烷氧化菌的混合菌群特性研究

为获得高效甲烷氧化微生物体系,从农业土壤中采样,以甲烷作为唯一碳源进行好氧选择性传代培养,得到生长性能稳定、生长优于Methylosinus trichosporium OB3b纯培养的具有甲烷单加氧酶(Methane Monooxygenase,MMO)活性甲烷氧化混合菌。利用MMO的共代谢特性,分别以苯酚和环氧丙烷作为目标对象,考察该混合菌对有机污染物的降解及用于生产有用化学物质的催化特性。结果表明,所得混合菌具有高效降解苯酚能力,对初始浓度为600mg/L的苯酚,经过11h培养,苯酚降解率可达99%。另外,以该混合菌为催化剂可以实现丙烯氧化生产环氧丙烷。通过降低磷酸盐浓度可以有效提高环氧丙烷的积累浓度,最大可至5mmol/L。此外,采用纯种分离方法结合PCR扩增、16SrRNA和MMO功能基因分析技术对混合菌群结构进行解析。结果表明,该混合菌群由Ⅱ型甲烷氧化菌及其它至少4种非甲烷氧化菌组成,它们分别属于Methylosinus trichosporium和Acinetobacter junii、Cupriavidusme tallidurans、Comamonas testosteroni和Stenotrophomonas maltophilia。采用PCR方法从混合菌及纯化菌株M.trichosporiums Y9总DNA中都能扩增得到mmoB、mmoX和pmoA基因片段,表明该甲烷氧化菌同时具有sMMO和pMMO两种形式的MMO。通过对从甲烷氧化混合菌中分离纯化得到的甲烷氧化菌进行PCR产物测序,结果发现其与Methylosinus trichosporium的同源性为99.9%。     

混合菌发酵转化纤维素生产单细胞蛋白

纤维素是自然界中存在的最丰富的天然资源 ,合理开发和利用纤维素是科学家们一直致力于研究的重点领域。尽管几十年来人们在纤维素及纤维素酶的理论研究和实践应用方面均取得了较大进步 ,迄今尚无一种微生物或一套酶系按传统方法用于大规模降解纤维素 ,并取得显著经济效益[1 3] 。利用微生物混合发酵 ,可使纤维素转化为单细胞蛋白。该方面研究不仅可以解决蛋白资源短缺 ,解决动物饲料需求上的短缺 ,而且还可以提高和改善饲料中的蛋白含量和营养价值。本文就混合菌发酵转化纤维素合成单细胞蛋白的应用研究进行概述。1　液态混合菌体系发酵纤…     

ERIC-PCR在人工混合菌体系中的检出灵敏度

提取大肠杆菌DHSα和阴沟肠杆菌(E-26R)的基因组DNA,进行ERIC-PCR,可以分别得到稳定而独特的DNA指纹图谱;模板量的变动范围从10～100ng都不会影响其图谱的稳定性;在图谱中DHSa和E-26R各自均有一条含量最大的特征带,其不易受实验环境和实验条件的干扰而发生变化。把DHSa和E-26R按比例混合,提取混合菌基因组DNA,进行ERIC-PCR,结果表明：混合菌的DNA指纹图谱为各纯菌图谱的叠加,亦具有稳定性;通过对凝胶电泳图谱中特征带的分析,可以看出：当DHSα的菌含量达到总菌量的0．5％时,可被ERIC-PCR方法清楚地检测出来。为ERIC-PCR用于土壤微生物和环境微生物的研究,特别是用于发酵工业中杂菌污染的检测与鉴定提供了一定的依据。     

纤维素分解混合菌的扩繁条件研究

目的:开发纤维素分解混合菌制剂。方法:以菌数、纤维素酶活性及木聚糖酶活性做为评价指标,对具有开发潜力的菌群进行了培养条件研究。结果:该菌群的最适培养温度为35℃;最适接种量为1%;培养基的初始pH值以7.0-7.5为好;在培养基中添加一定量的FeSO4,有利于菌的生长;适当控制氧气浓度,可以确保混合菌群中纤维素酶产生菌的正常繁殖。结论:获得了纤维素分解混合菌的扩繁条件。     

纤维素分解混合菌扩繁培养基的研究

【摘 要】 以菌数、纤维素酶活性及木聚糖酶活性做为评价指标,进行的单因素和正交试验研究表明：纤维素分解菌群的最佳培养基配方为酵母膏0.5%,（NH4）2SO4 0.5%,淀粉1.5%,FeSO4?7H2O 0.02%,NaCl 6 g,KH2PO4 0.5 g,CaCl2 0.1 g,K2HPO4 0.5 g,CMC-Na 5 g,pH 7.0～7.5。     

沙门氏菌增菌培养基中细菌混合培养生长动力学的试验研究

本文就甘露醇亚硒酸盐和亚硒酸盐两种增菌培养基对沙门氏菌各血清变型的选择性增菌作用作了研究。研究述及37℃下沙门氏菌与埃希氏大肠杆菌、绿脓杆菌、普通变形杆菌三种竞争菌混合培养生长动力学过程,测出了评价增菌培养基优劣的客观指标EI值;按沙门氏菌传统分离方法,对加有终浓度为10~1、10~2、10~4、10~6、10~8个活菌/毫升的沙门氏菌株与正常人大便的两种增菌培养基,经37℃下孵育20至24小时后作SS琼脂平板划线分离和沙门氏菌血清学鉴定。通过两种培养基EI值及沙门氏菌分离结果的比较证实,甘露醇亚硒酸盐培养基对沙门氏菌株的选择性增菌作用明显优越于亚硒酸盐培养基(P<0.001)。     

自生固氮菌和纤维素分解菌的混合培养

本文对作者筛选的自生固氮菌和纤维素分解菌进行了混合培养。在较高的起始菌浓情况下,混合接种后,菌浓仍呈现上升趋势。同时混合培养与单独培养对比,其菌数有增无减。实验表明作者筛选的自生固氮菌和纤维素分解菌,可以进行混合培养并做成混合制剂。     

平板混合培养木质纤维素降解菌研究进展

微生物的混合培养已广泛应用于木质纤维素类物质的转化与降解领域.不同木质纤维素降解菌在混合培养时的相互关系在很大程度上影响混合培养的效果.目前对这种相互关系的研究主要依托平板混合培养展开,所用到的平板主要有基础培养基平板和改进培养基平板两种.其中基础培养基平板法主要根据菌落形态、菌丝体颜色、胞外挥发性有机化合物成分和典型胞外酶活性等进行研究,而改进培养基平板则是将基础培养基平板中的碳源更换为天然木质纤维素类物质进行对比研究.本文综述了采用平板混合培养不同木质纤维素降解菌菌株的研究现状和进展,并对该领域研究应重点关注的问题进行了展望.     

化学发光法测量类黄酮的抗氧化能力

类黄酮是一类具有广泛生化和药理学效应的二苯基丙烷的衍生物,它们的抗氧化性和保健作用越来越引起了人们的极大兴趣.本文以盐酸·2,2'-偶氮二(2-脒基丙烷)(AAPH)-鲁米诺体系产生自由基,用化学发光的方法评价了类黄酮的抗氧化能力,并对实验结果进行了讨论.     

差示扫描量热法直接测定抗冻蛋白质溶液的热滞效应

文献上一直用显微镜观察法等测定抗冻蛋白的热滞效应,其冰晶量是靠观察晶核体积估算得得的,人为性很大,用并示扫描量热法直接测定沙冬青抗冻蛋白质溶液的热滞效应,通过熔融焓和冻结焓值准确地测定了冰晶含有量和热滞温度。同文献比较,沙冬青ＡＦＰ具有极高的抗冻活性,而且开创了一个新的有效的测量抗冻蛋白抗冻活性的途径。     

发酵过程中细胞浓度在线检测系统*

利用微机软、硬件技术,设计了一套比浊法细胞浓度在线检测系统,并应用于5L发酵罐中木糖醇发酵过程细胞浓度在线检测。该系统能及时、较准确地反映发酵过程中菌体浓度随时间的变化情况,在规模化生产中具有较强的适用性、通用性,可为实现其它分析仪器的计算机在线检测系统提供值得借鉴的设计思路和实现方法。     

用显微穿刺技术直接测量微血管压力的伺服零方法研究

本实验制作了尖端的直径为０５－５０μｍ和斜面为２５°的玻璃微插管,成功地建立了用显微穿刺（ｍｉｃｒｏｐｕｎｃｔｕｒｅ）技术直接测量微血管压力（Ｐｍ）的伺服零方法（ｓｅｒｖｏｎｕｌｍｅｔｈｏｄ）,对自发高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压大鼠（ＷＫＹ）肠系膜Ｐｍ进行了测量研究。结果表明,ＳＨＲ的平均动脉压（ＰＡ）和微动脉的Ｐｍ均明显大于ＷＫＹ的ＰＡ和Ｐｍ;ＰＡ在微动脉中明显降低,最大压降在直径小于５０μｍ的微动脉以及毛细血管中。     

TLCS法测定不同月份血水草中四种生物碱的含量

本文以薄层扫描(TLCS)法测定了1996年3月至9月采集的血水草地下部分四种主要生物碱,即血根碱(Ⅰ)白屈菜红碱(Ⅱ),原阿片碱(Ⅲ)和α-别隐品碱(Ⅳ)的含量.结果表明:血水草中总生物碱的含量3月和9月最高,6月、7月和8月最低.四种生物碱之间,又以Ⅱ含量最高,Ⅰ和Ⅳ次之,Ⅲ含量最低.各生物碱含量高峰期也不一致,Ⅰ和Ⅱ为3月和9月,Ⅲ为7月,Ⅳ为3月和7月.     

低浓度氢清除法测定大鼠局部脑血流量

利用氢清除法测量动物局部脑血流量已被广泛应用于研究中。本文采用低于爆炸范围下限的３％Ｈ２浓度,它可以与任何比例的氮氧气体安全混合,且可避免吸纯氢期间的短暂缺氧,更为严格地控制了实验条件,增加了安全和准确性。本工作对吸１００％Ｈ２和吸３％Ｈ２以及吸３％Ｈ２１－１．５ｍｉｎ和吸３％Ｈ２５ｍｉｎ测得脑血流量分析作了比较,结果表明短期低浓度氢清除法能较好地反映动物的局部脑血流量。     

纸电泳—双波长扫描法测定鼠脑氨基酸

<正> 国内曾用纸层析法,玻璃纸电泳法测定神经组织中γ-氨基丁酸、谷氨酸、门冬氨酸。近年来有用上述方法或经分离后洗脱定量,或半定量测定其中一种氨基酸者,但操作较为繁琐。我们用纸电泳分离氨基酸,然后用双波长扫描直接定量,效果好,现将此法介绍如下: 一、样品的提取 昆明种小鼠(18—22g)或Wistar大鼠(188—220g) 断头后,鼠头立     

使用差示扫描量热仪测定抗冻蛋白热滞活性方法的研究

抗冻蛋白因具有独特的抗冻活性而被研究者广泛关注。但是,目前抗冻活性的检测没有一个标准的、统一的检测方法,这严重制约了该方面的研究进展。作者详细研究了采用差示扫描量热仪测定样品热滞活性的方法,并对该方法的稳定性、专一性和精密度进行评价。结果显示,采用差示扫描量热仪测定样品的热滞活性具有较高的稳定性、重复性和精密度。因此,差示扫描量热仪法可以作为一种通用的方法进行抗冻蛋白热滞活性的检测。     

应用医疗CT扫描法观察恐龙蛋化石的内部结构

应用医疗ＣＴ扫描法观察恐龙蛋化石，可清晰地分辨出蛋形、蛋壳、卵蛋白、蛋黄及胚盘等结构，并可测出各部分具体数据，为恐龙蛋化石和其它生物化石的研究开辟了一个新的途径。