黑曲霉木聚糖酶的底物特异性和低聚木糖生产

对黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）木聚糖酶进行了纯化研究,结果表明,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０分离后,获得三个组分,称为Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３。它们经ＰＡＧＥ电泳分析均为单一组分。对Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３的相关性质,特别是底物特异性也作了研究,纯酶Ｘ３组分或部分纯化的酶可用于生产低聚木糖,产品得率为１０％。     

蔗渣制备低聚木糖的有机酸预处理条件研究

采用有机酸法水解制备蔗渣低聚木糖,通过单因素实验、正交试验研究了甲酸-乙酸比例、温度、水解时间、固液比等因素的影响,以水解率、总糖收率和聚糖收率为考察指标,得到有机酸法水解蔗渣制备低聚木糖的最优预处理条件为甲酸∶乙酸=9∶1、水解温度100℃、水解时间60min、固液比1∶7,在此条件下蔗渣水解率为47.78%,总糖收率20.57%,聚糖收率11.88%。HPLC检测结果显示:水解物中木二糖含量为17.69%,木三糖为11.23%,更高聚合度聚糖所占比例为29.42%,木糖为36.78%。半纤维素有机酸水解物可进一步通过木聚糖酶水解、分离制备低聚木糖。研究结果可为蔗渣制备低聚木糖新工艺提供科学依据。     

低聚木糖分离纯化的研究进展

综述了低聚木糖分离纯化的研究进展。低聚木糖是一种非消化性寡糖 ,能选择性增殖肠道内双歧杆菌 ,可广泛应用于食品工业和饲料工业。低聚木糖的分离纯化技术主要包括层析分离技术 (包括凝胶过滤层析、离子交换层析和吸附层析 )和膜分离技术 (包括超滤、纳滤和反渗透 )。低聚木糖的提纯主要采用膜分离技术和层析分离技术 ,低聚木糖单一组分的分离主要采用凝胶过滤层析和吸附层析     

低聚木糖的提取工艺及相对分子质量分布

通过单因素试验和正交试验研究低聚木糖的提取条件,使用凝胶树脂对低聚木糖粗提液进行分离,采用高效液相色谱法测定了低聚木糖的相对分子质量分布。低聚木糖的最佳提取条件:在底物质量浓度为100 g/L的情况下,加酶量1 000 U/g,酶解温度55℃,提取时间为4 h。在此条件下,提取的平均聚合度为3.12,高效液相色谱测定结果发现,低聚木糖主要是由木二糖、木三糖以及4～8个聚合度的糖组成。     

高效液相色谱法同时测定保健食品中低聚果糖和低聚木糖

目的 建立高效液相色谱法同时测定保健食品中低聚果糖(包括蔗果三糖、蔗果四糖及蔗果五糖)和低聚木糖（包括木二糖、木三糖、木四糖、木五糖、木六糖及木七糖）的含量。方法 采用键合有酰胺官能团杂化填料的色谱柱,以乙腈和水为流动相,利用亲水保留色谱机制（HILIC）实现对低聚果糖和低聚木糖各单体的有效分离,结合示差检测以外标法定量。该方法同时利用木糖对低聚木糖各单体转换系数进行定量。结果 低聚果糖和低聚木糖各单体线性关系良好,相关系数均大于0.998,平均加标回收率为95%以上,具有较高的准确度和良好的重现性。结论 高效液相色谱法由于采用木糖对照品转换定量低聚木糖含量,减少低聚木糖各单体标准品在日常工作中的使用量,进而降低检测成本。该方法经济可靠,测定结果准确,适合于添加有低聚果糖和低聚木糖的功能性产品检测。     

酶法水解超级稻秸秆木聚糖制备低聚木糖的工艺研究

本文以超级稻秸秆为原料,碱溶液抽提法得到粗木聚糖,然后酶水解,制备低聚木糖。对酶解条件进行了优化,并采用高效液相色谱法对木聚糖酶解液主要组分进行了分析。结果表明,正交试验优化的最佳酶解条件为温度50℃、pH5. 0、加酶量4%,在该试验条件下低聚木糖得率为13. 5%。酶解液组分分析发现,其主要组分为木二糖和木三糖,只有少量的单糖,该结果有利于后续低聚木糖的纯化,符合低聚木糖制备的要求。     

投喂低聚木糖对草鱼肠道菌群的影响

投喂添加0.1%、0.2%、0.4%和0.6%低聚木糖的基础饲料56 d, 对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道菌群进行了研究。分别在投喂前(0 d)和投喂后的第14、28、42 和56 天取样, 对草鱼肠道大肠杆菌(E. coli)、气单胞菌(Aeromonas)和双歧杆菌(Bifidobacterium)数量进行了分析。结果表明: 基础饲料中添加不同浓度的低聚木糖对草鱼肠道菌群有一定影响, 大肠杆菌数量在28 d 达最低值, 其中0.4%组减少的幅度最大, 与对照组比较显著减少(P<0.05); 气单胞菌数量均有减少但与对照组比较差异并不显著; 双歧杆菌数量均有增加, 其中0.4%组在第14 天时差异显著(P<0.05)。因此, 饲料中添加0.4%低聚木糖效果最佳, 有利于草鱼肠道菌群保持健康的状态。     

克隆木糖还原酶XYL1基因的工程菌YT发酵玉米芯水解液的研究

克隆毕赤氏酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶基因XYL1,将其连接到适用于酿酒酵母工业菌株的多拷贝载体pYMIKP中,构建得到表达质粒pYMIKY-XYL1,转化酿酒酵母工业菌株Saccharomyces cerevisiae 6508.利用G418筛选转化子,得到含高拷贝木糖还原酶基因的酿酒酵母重组菌YT,以YT发酵玉米芯工业水解液生产木糖醇,研究其发酵特性和规律,为工业上生物转化法生产木糖醇提供参考.     

低聚木糖对模拟失重大鼠肠道微生态的影响

目的 研究低聚木糖对模拟失重大鼠肠道微生态的影响。方法 采用大鼠尾部悬吊法模拟失重。32只雄性SD大鼠随机分为4组,每组8只：FC组（地面对照组,饲喂基础饲料）,FS组（地面处理组,饲喂添加低聚木糖的饲料）,SC组（尾吊对照组,饲喂基础饲料）。SS组（尾吊处理组,饲喂添加低聚木糖的饲料）,实验21d,SC和SS组解除尾吊继续观察。实验21d。采用选择性培养基对大鼠粪便肠杆菌、肠球菌、类杆菌、双歧杆菌以及乳杆菌进行定量测定。结果 SC组与FC组相比,双歧杆菌数量减少,肠杆菌和肠球菌数量增加;FS组比FC组双歧杆菌数量增加显著,肠杆菌和肠球菌有不同程度的减少,SS组比SC组双歧杆菌数量增加显著,肠杆菌和肠球菌也有不同程度的减少。类杆菌和乳杆菌变化不明显。尾吊解除期,SS组双歧杆菌数量比SC组更快恢复到正常水平。结论 低聚木糖可促进尾吊大鼠肠道益生菌主要是双歧杆菌的增殖,一定程度上促进由于模拟失重造成肠道微生态失调的平衡,并对条件致病菌具有一定的抑制作用。     

酶法制备低聚木糖中木二糖的提纯与色谱鉴定

半纤维素经木聚糖酶水解得到混合的低聚木糖,用葡聚糖凝胶柱SephadexG-10层析分离后,出现四个组分峰,经高效液相色谱分析鉴定,其中3号峰为木二糖纯组分峰.结果表明:利用φ2.5 cm×120 cm凝胶柱,以蒸馏水为流动相,流速为10ml/h,在室温下,可以分离出高纯度的木二糖.     

3-脱氧葡糖松代谢酶产生菌的筛选及产酶条件

从霉菌和酵母中筛选到一株酵母（Saccharomycescerevisiae231）,该菌株具有能够代谢3-脱氧葡糖松（3－deoxyglucosone）的酶,且活性较高。研究了该菌株的最适产酶条件：培养温度28℃,培养基起始pH7.0,培养时间12h,碳源、氮源分别为蔗糖、牛肉膏,添加KH₂PO₄、Ca（H₂PO₄）₂·H₂O能促进产酶。     

臭氧对真菌杀灭作用的初步研究

以根霉 ,黑曲霉 ,青霉 ,酵母菌等为研究对象 ,测定了放电时间与致死率的曲线关系 ,并观察了与空白对照后其菌落形态的变化。实验结果表明 ,随着放电时间的增长 ,致死率明显升高 ,且能够达到完全杀菌。     

南极淡水分离出的菌物

本文报道从南极乔治王岛所采11个水样中分离出的菌物98株,初步鉴定出17属21种,其中6属(Acremonium,Arthrinium,Gliocladium,Phoma,Scopulariopsis,Ulocladium)13种为南极新记录,后者是:桃色顶孢Acremonium persicinum(Nicot)W.Gams,密顶孢A.strictum W.Gams,构巢曲霉Aspergillus nidulans(Eidam)Winter,聚多曲霉Asp.sydowii(Bainier & Sart)Thom & Church,芽枝状枝孢Cladosporium cladosporioides(Fries)de Vries,长孢被孢霉Mortierella elongata Linnemann,桔灰青霉Penicillium aurantiogriseum Dierckx,平滑青霉Pen.glabrum(Wehmer)Westling,鲜绿青霉Pen.viridicatum Westling,白瓶霉Phialophora alba v.Beyma,帚状瓶霉Ph.fastigiata(Lagerberg & Melin)Conant,纸状葡萄穗霉Stachybotrys chartarum(Ehrenberg ex Link)Hughes,和葡萄状单隔霉Ulocladium botrytis Preuss。温度试验表明:这些菌虽多为世界广布种,但已适应南极地区寒冷的气候。     

四种真菌油脂提取方法的比较研究

采用索氏法、超临界CO2萃取法、酸热法和有机溶剂法分别提取雅致枝霉、拉曼被孢霉、少根根霉、畸雌腐霉和橙黄红酵母的油脂,从样品要求、最小样品量、仪器要求、处理样品能力及油脂得率等方面对4种提取方法进行综合评价,并对索氏法、超临界CO2萃取法和酸热法提取的雅致枝霉油脂的脂肪酸组成进行气相色谱分析。索氏法的油脂得率最高,但耗时较长;超临界CO2萃取法和酸热法的油脂得率相近,较索氏法略低,但酸热法更为简便,单位时间内样品处理能力强;有机溶剂法提取效果最差。我们建立的酸热法是一种适合油脂及多水饱和脂肪酸高产菌株筛选的简便、有效的真菌油脂提取方法。     

几种松树外生菌根真菌的研究

早在1956年前我们曾对松树和柞树的外生菌根真菌进行了分离。当时获得3株菌根真菌的纯培养,经初步鉴定属牛肝菌属(Boletus)、乳菇属(Lactarius)和滑菇属(Hebeloma)。对油松(Pinus tabulaeformis)幼苗回接试验取得了成功。在樟子松(Pimus sylvestris)幼苗的接种试验中,也获得了较好的结果;菌根化促进了樟子松幼苗的成活(张宪武等,1964)。 1978年以来,我们对外生菌根真菌又进行了研究。从不同林分下采集到能形成菌根的真菌子实体,在无菌条件下用切割组织法以分离菌根真菌,获得了纯培养菌株,根据子实体的特征进行了鉴定(邓叔群,1963)。同时对培养基选择及幼苗接种效果也进行了试验。本文是我们研究的初步结果。     

腺苷三磷酸和环腺苷单磷酸对丝状真菌纤维素酶合成的调节

以虫荧光素酶法检验了四株丝状真菌在葡萄糖—无机盐液体培养过程中的胞内ATP含量。结果表明,只有当胞内ATP浓度低于10~(-S)mg/ml时,真菌才开始合成胞外纤维素酶(FPA)。以不同浓度的各种碳源培养时,菌体胞内ATP含量只要超过10~(-1)mg/ml,FPA的合成即发生阻遏。菌体胞内ATP含量与FPA合成呈显著负相关。以高效液相色谱(HPLC)法检测了菌体培养液中的cAMP含量。在非阻遏条件下,外源cAMP可以提高FPA的合成水平。但外源cAMP不能解除已经发生的酶合成阻遏。菌体ATP和cAMP水平是调节真菌纤维素酶合成的重要因子。     

降解三硝基甲苯的酵母和类酵母菌的研究

从受三硝基甲苯（TNT）严重污染的土壤和废水中分离筛选到17株可降解TNT的酵母菌和白地霉。其中6株为克鲁斯假丝酵母（Candidakrusei）,4株为橡树假丝酵母（C.quercitrusa）,一株为无名假丝酵母（C.famata）,一株为伯杰汉逊酵母（Hansenulabeijerinckii）,一株为亚膜汉逊酵母（H.subpelliculosa）,4株为白地霉（Geotrichumcandidum）。对其中6株菌进行了降解TNT的条件实验,发现降解TNT的适宜pH为7,温度为37～40℃。在含75～80mg／LTNT的培养基中,40h内能降解TNT56～74mg／L,去除率达71％～93％。在培养基中加入0．01％～0．05％的葡萄糖作碳源,或加入0.01％～0．1％的酵母膏对6株菌降解TNT的能力略有促进作用。加入铵盐作为氮源则明显抑制这些菌对TNT的降解。     

真菌还原Cr(Ⅵ)的研究

从不同来源的样品中分离筛选出几株抗Cr（Ⅵ）的真菌,他们能在含300—500mg／LK2Cr2O7的蔗糖合成培养基中生长,其中BS－1菌株抗K2Cr2O7达900mg／L．BS－1等4株真菌在含200mg／LK2Cr2O7的培养基中生长4-6d后,培养液中的Cr（Ⅵ）已全部消失。这些真菌经鉴定为青霉菌（Penicilliumsp．）BS－1和BS－3,黑曲霉（Aspergillusniger）BR-4和黄曲霉（Aspergillusflavus）BX－1。经紫外可见光扫描及化学分析证实,高毒的Cr（Ⅵ）可被真菌还原成为低毒的Cr（Ⅲ）。BS－1菌株细胞还原Cr（Ⅵ）的最适温度为30℃,最适pH7．0。葡萄糖（0．25％）对细胞还原Cr（Ⅵ）有促进作用,但高浓度的Cr（Ⅵ）则抑制细胞对Cr（Ⅵ）的还原。