p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达

在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中,ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因,研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有重要的意义。我们将野生型ｐ５３基因编码区３’端７０３ｂｐ的ｃＤ－ＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中,得到了一个重组体表达质粒ｐＲＲ３３,经热诱导表达,用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实ｐ５３蛋白多肽在大肠杆菌中得到了表达,它不仅可用于抗ｐ５３蛋白抗体的制备,而且也可用于对ｐ５３蛋白羧基端多肽功能的研究。     

DNA肿瘤病毒蛋白与p53蛋白的相互作用

大多数人类肿瘤发生p53基因突变,突变性p53蛋白功能失活、半衰期延长,并在肿瘤细胞中大量累积,一般认为,p53基因突变是肿瘤发生的主要因素之一。但是,近年也发现一些人类肿瘤细胞存在p53蛋白累积而无基因突变。这种现象与DNA肿瘤病毒密切相关,业已证明：SV－40T抗原、腺病毒E1B55－kD、E4orf6蛋白、HBVX蛋白、HPVE6蛋白、HCMVIE84蛋白、EBVBZLF1和EBNA5蛋白均与p53蛋白结合而使其功能失活。这表明：p53基因突变并非是p53蛋白功能失活的唯一原因。p53蛋白与病毒蛋白或细胞蛋白相互作用可能是其功能失活的另一主要原因？本文就近年国外有关病毒蛋白与p53蛋白相互作用的研究加以概述;试图引起人们的注意。     

p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达

在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中，ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因，研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有很需要的意义，我们将野生型ｐ５３基因编码３＇端７０３ｂｐ的ｃＤＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０，得到了一个重组体表达质粒ｐＲＲ３３，经热诱导表达，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实ｐ５３蛋白多肽在大肠杆菌中得到了表达，它不仅可用于抗ｐ５３蛋白抗体的制备，而且也可用     

p53的两种结合蛋白：53BP1和53BP2

ｐ５３基因是一种广谱的肿瘤抑制基因,其产物ｐ５３为一多功能的转录调节因子,可以发挥调节细胞生长、细胞凋亡和ＤＮＡ修复的作用。在人类肿瘤已发现多种ｐ５３基因的点突变,但突变不是ｐ５３蛋白质丧失功能的唯一途径。胞内蛋白可能影响其活性和功能。５３ＢＰ１和５３ＢＰ２是ｐ５３在胞浆中的两种结合蛋白。本文阐述了有关这两种蛋白质的研究进展。     

衰老或肿瘤: 端粒酶和p53的相互作用

端粒酶和p53两者在肿瘤和衰老的发生发展过程中都起着关键的作用。在人类大多数的肿瘤中都发现了这一现象: p53基因发生突变和端粒酶的重新激活。端粒酶和p53基因的治疗逐渐成为肿瘤治疗的重要手段之一。文章论述了端粒酶或p53基因敲除的不同组合的小鼠模型(mTR-/-p53+/+; mTR-/-P53-/-)的衰老与肿瘤表型, 对端粒功能异常可抑制或促进肿瘤发生的辩证作用作一综述, 以期理解p53与端粒酶在衰老与肿瘤发生中的辩证相互作用, 寻求一种治疗肿瘤的新思路。     

p53基因与DNA修复

DNA的损伤修复是一个多因子参与的、多环节的复杂修复系统。p53基因以多条信号通路,多种调控方式参与DNA修复。它可以通过其下游一系列靶基因p21、gadd45等调控细胞周期,使细胞停滞于G1期、G2期等检测点,从而使受损DNA有足够的时间进行多因子参与的修复过程;也可以与DNA修复因子PRSA、PCNA、XPp48基因等相互作用,直接参与DNA修复;还可以蛋白－蛋白相互作用参与DNA修复。     

甲状腺肿瘤p53mRNA及p53蛋白表达的研究

本文采用原位杂交法、免疫组织化学方法分别检测了甲状腺癌ｐ５３ｍＲＮＡ、ｐ５３蛋白的表达,结果显示：２０例甲状腺癌ｐ５３ｍＲＮＡ、ｐ５３蛋白均呈阳性反应,８例甲状腺瘤仅１例呈弱阳性反应,８例Ｇｒａｖｅｓ病全部呈阴性反应。细胞质和细胞核ｍＲＮＡ、ｐ５３蛋白灰度检测发现,甲状腺瘤细胞质、核ｐ５３ｍＲＮＡ灰度值和ｐ５３蛋白灰度值均明显高于Ｇｒａｖｅｓ病,而甲状腺癌其细胞质、核ｐ５３ｍＲＮＡ灰度值和ｐ５３蛋白灰度值又明显高于良性甲状腺瘤,提示甲状腺癌ｐ５３ｍＲＮＡ和ｐ５３蛋白的高表达可能与甲状腺肿瘤细胞分化程度有关     

SOX4能与p53蛋白发生相互作用

目的：研究SOX4和p53蛋白之间的相互作用。方法：应用GSTpull-down、免疫共沉淀实验验证相互作用。结果：GSTpulldown实验证实SOX4能结合GST-p53融合蛋白,但不能结合GST蛋白;免疫共沉淀实验也证明,SOX4与p53能在细胞内发生相互作用。结论：SOX4能与p53发生相互作用,为p53信号通路的研究提供了新的线索。     

p53基因及其功能研究进展

p53基因是一种肿瘤抑制基因,野生型p53对细胞周期和细胞凋亡起重要作用。其编码的蛋白P53相对分子质量为53×103,可刺激Cipt基因产生相对分子质量为21×103的蛋白,该蛋白可以抑制促使细胞通过细胞周期进入有丝分裂的酶的活性,进而抑制细胞生长表达而调控细胞生长,对于预防和治疗胆管癌、肝癌、胃癌等疾病有重要作用。我们在此简要阐述国内外对p53基因及其编码产物的结构、作用机制、检测、功能等方面的研究进展。     

促凋亡基因p53AIP1的研究进展

p53AIPl基因是近年发现的促凋亡基因,在p53依赖性的凋亡通路中起重要作用。p53AIPl介导线粒体凋亡途径,其表达依赖于p53蛋白的Ser^46的磷酸化。p53AIPl可直接促进凋亡,其促凋亡作用可能强于p53本身,并对p53抗性的肿瘤细胞也有作用。因此,对p53AIPl的深入研究可能会为对p53基因治疗有抗性的肿瘤患者带来新的希望。     

p53与癌症治疗

p53蛋白是一种重要的肿瘤抑制蛋白,它可以诱导肿瘤细胞生长停滞、衰老以及程序化死亡.由于它在癌细胞抑制中的至关重要作用,因而目前关于癌症的治疗大多数都是直接或间接通过调控p53蛋白来实现的.文中主要介绍了近几年来p53蛋白在理论和临床上最新的研究进展.     

肿瘤细胞中存活蛋白与p53的相互作用

存活蛋白(survivin)作为凋亡抑制蛋白(IAP)家族的最小成员,在肿瘤组织中高表达,且具有严格的细胞周期依赖性,而p53作为细胞周期中的负调节因子,参与了细胞周期调控和细胞凋亡等重要的生物学功能。最近研究表明,存活蛋白与p53的相互作用在肿瘤的发生发展中具有重要作用。该文将从细胞周期与细胞凋亡的角度对存活蛋白/p53通路在肿瘤中的研究进展进行阐明。     

p53：一个具有双面性的癌基因

根据经典的癌症遗传学，有两类癌症诱发的基因突变：一类是原癌基因（Oncogenes），其突变后增加了表达或功能；另一类是肿瘤抑制基因tumour suppressor genes），突变后导致其丧失表达或功能，这些都作为肿瘤的诱发事件。从1979年发现到1980年代后期，p53都被认作原癌基因。但是后来的研究又对该基因进行了重新分类，这是由于发现在肿瘤细胞中p53突变和基因缺失，     

粉纹夜蛾核型多角体病毒（TnNPV）p35基因功能的研究

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）或细胞程序性死亡（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）,最早被定义为一种有秩序、受控制并按某种预定程序发展的生理性自然死亡过程〔１〕。诱导细胞发生凋亡的因素很多,而病毒感染是常见的导致细胞凋亡的重要因素之一。由...     

p53在诱导性多潜能干细胞向肿瘤细胞转化中的作用

p53基因是抑制肿瘤形成的抑癌基因,p53通过阻断细胞周期、诱导衰老细胞凋亡和修复受损的DNA从而抑制肿瘤的形成。而突变的p53则具有相反的功能,被认为是促进细胞重编程的关键。这些发现表明p53在去分化过程中具有重要的作用,而肿瘤的形成与细胞重编程存在高度的相似性,所以探讨p53与诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)和肿瘤形成之间的联系具有一定的意义。     

携带p53基因的重组腺病毒的构建及对肿瘤细胞抑制的研究

１　材料与方法１１　质粒ｐＣＭＶｐ５３ＢＡＭ由美国约翰·霍普金斯肿瘤中心ＢｅｒｔＶｏｇｅｌｓｔｅｉｎ教授赠送［５］;ｐＲＳｅｔＡ购于Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司;ｐＣＡ１３和ｐＢＨＧ１１为ＭｉｃｒｏｂｉｘＢｉｏｓｙｓｔｅｍＩｎｃ．产品。ｐＢＨＧ１１包含腺病毒Ａｄ５基因组３６ｋｂ中的约３４ｋｂ序列,但Ａｄ５Ｅ１区１８８ｂｐ至１３３９ｂｐ缺失,代之以氨苄青霉素抗性基因和复制起始位点。ｐＢＨＧ１１缺少包装信号φ（２２ｂｐ至３４２ｂｐ）和Ａｄ５Ｅ３区（２７８６５ｂｐ至３０９９５ｂｐ序列）。ｐＣＡ１３…     

Rb与p53途径及相关抗癌药物的研究进展

由多种因子在体内构成的两条复杂的反馈调节途径,控制着细胞周期的正常运行并抑制肿瘤的发生,成视网膜细胞瘤蛋白／(retinoblastoma,Rb)和p53是这一过程的核心。两条途径中的主要成员发生突变经常导致不同类型的肿瘤发生。人们对这两条途径的作用方式、相互联系及其与肿瘤的关系进行了大量研究,并在此基础上,针对诱发肿瘤的不同原因,合理地开发出了大量抗癌药物。