分子标记在鉴别拟船叶藓属和猫尾藓属中的应用

船叶藓科的拟船叶藓属(Dolichom itriopsis)和猫尾藓属植物(Isothecium)非常相似,不易从外部表型上进行属间物种的区分.以尖叶拟船叶藓6个居群、猫尾藓1个居群及疑似尖叶拟船叶藓种1个居群为材料,进行了随机扩增多态性(RAPD)标记分析,结果表明:50个随机引物中有15个引物扩增的产物具有多态性,15个引物共扩增出77条带,其中多态性条带为71条,多态带比率高达92.21%.聚类分析结果表明,疑似种与猫尾藓有较近的亲缘关系,与尖叶拟船叶藓亲缘关系较远.同时测定了疑似尖叶拟船叶藓种的rDNA的ITS全序列,与Genbank已知序列比对结果表明,疑似种与猫尾藓的同源性高达94.74%,而与尖叶拟船叶藓的同源性只有80.64%.进一步支持了RAPD的聚类结果,说明疑似种是猫尾藓而非尖叶拟船叶藓.     

尖叶拟船叶藓的77K荧光光谱及对强光照的短期适应

报道了东亚特有濒危植物尖叶拟船叶藓(Dolichomitriopsis diversiformis)在不同光质的光照诱导下的低温77K荧光光谱及状态转移的初步研究结果,实验中,尖叶拟船叶藓在77K下出现了3条发射带,分别是F680、F685、F720nm,并没有出现存在于大部分高等植物中的F695nm和F740nm两个峰．经过PSⅡ光诱导后、在77K下出现了F680nm,这个峰在77K下出现是首次报道,而以前的研究认为只在4K下才出现这一条光谱带,这一结果表明尖叶拟船叶藓叶绿体的两个光系统结构与其他高等植物存在着差异。在自然光下,PSⅡ与PSⅠ的总能量比是2.04,经过15min的PSⅡ光(670nm)诱导后,PSⅡ与PSⅠ的总能量比变成了1．28(状态2),当用15min的PSⅠ光(716nm)照射后,PSⅡ与PSⅠ的总能量比从2．04变成了3．4l(状态1)。在自然光下,由尖叶拟船叶藓的光系统的外部LHCⅡ所吸收的激发能是整个光系统激发能的21．19％．这说明尖叶拟船叶藓对光的短期调节能力是21．19％．尖叶拟船叶藓的光系统的外部LHCⅡ有51．7％位于PSⅡ中,48．3％在PSⅠ中.     

梵净山尖叶拟船叶藓的遗传多样性分析

采用RAPD技术,选取10个引物对梵净山的尖叶拟船叶藓(Dolichomitriopsis diversiformis)自然分布区的南、北坡14个居群153个个体的总DNA进行了扩增,共得到196个位点.统计分析表明:(1)梵净山尖叶拟船叶藓在物种水平有较高的遗传多样性,居群水平的遗传多样性相对较低.(2)该藓种遗传多样性高低与海拔高度无关,但南坡的多样性水平略高于北坡.(3)遗传多样性的63.29%发生在居群间,只有36.71%发生在居群内.研究结果提示尖叶拟船叶藓的遗传多样性受小生境的影响较大,遗传漂变和环境适应可能是影响居群分化的主要原因.     

尖叶拟船叶藓居群叶形态变异的初步研究

对东桠特有濒危植物尖叶拟船叶藓4个地点9个居群叶的形态变异进行了初步观测,结果表明,7个形态指标除叶表外,叶的形状、叶细胞形状、叶基部反曲和宽窄程度、叶边缘的分化及齿的类型和数量、叶尖和中肋的相对长度等均存在一定程度的变异,尤其是后三者变异程度较大,在梵净山的4个居群中,随着海拔的上升,叶的宽度递减和长度递增,叶缘齿的数量递减,叶尖和叶中肋的相对长度却以中度海拔的居群较大。     

树干附生尖叶拟船叶藓性比和有性生殖的比例

通过对贵州梵净山树干附生尖叶拟船叶藓的野外调查和室内研究,结果表明,在44个被调查样方共计1320株植株中,尖叶拟船叶藓单株的性比为8♀∶1♂(N=1320),其中25.0%的单株没有进行性表达;其种群的性比为5♀∶1♀♂(雌性种群:混合种群,N=44),没有发现雄性种群;其单株的有性生殖的比例为10.5%,种群的有性生殖比例为9.3%。结果表明尖叶拟船叶藓种群具有明显的雌性偏向,其种群的自然更新更多的是依赖各种营养繁殖。     

树干附生尖叶拟船叶藓的孢子体分布格局和败育研究

通过野外定位考察和实验室观察分析,结果显示:(1)贵州梵净山树干附生尖叶拟船叶藓的孢子体种群80%分布在树干的基部;(2)尖叶拟船叶藓的孢子体在其主茎和一到四次分枝上皆有分布,但在一次分枝上分布最多,并且一次分枝上的与主茎或其它各次分枝上分布的之间存在显著差异;(3)孢子体败育发生在胚胎发育时期、孢蒴膨大期或者孢子形成期等3个时期,孢子体败育率为7.3%,败育孢子体的平均生物量为正常成熟的43.3%.表明尖叶拟船叶藓孢子体种群偏少且孢子体败育率低是其重要的生物学特征.     

尖叶拟船叶藓光系统Ⅱ光合荧光特性、活性氧代谢与耐脱水生理生态适应的关系

以广布湿生藓类——湿地匐灯藓(Plagiomnium acutum)为比较材料,研究东亚特有濒危植物尖叶拟船叶藓(Dolichomitriopsis diversiformis)在不同快速脱水和复水胁迫下PSⅡ的叶绿素光合荧光变化和活性氧代谢及抗氧化系统变化,探讨两种藓类生理生态适应性差异的成因,以初步确定尖叶拟船叶藓受水分条件限制分布狭窄趋于濒危的原因。结果显示:(1)尖叶拟船叶藓的光合电子传递在脱水后可被极微弱光完全抑制,其抑制光强的恢复明显慢于湿地匐灯藓;其PSⅡ最大光化学效率(Fv/Fm)和实际光化学量子效率(YⅡ)先降而后升,恢复较慢;光化学淬灭(q P)复水后恢复较快,非光化学淬灭(NPQ)的绝对值和变化速率则始终低于湿地匐灯藓。(2)尖叶拟船叶藓活性氧水平明显高于湿地匐灯藓;其SOD、CAT、APX等抗氧化系统酶活性整体变化幅度较大,抗氧化保护物质(As A)含量则明显低于湿地匐灯藓。以上结果表明尖叶拟船叶藓受到环境水分因子限制的原因主要有:(1)PSⅡ的反应中心色素(P680)对脱水伤害较为敏感;(2)复水修复过程中抗氧化保护系统的保护能力偏低。     

贵州梵净山森林树干附生尖叶拟船叶藓分布格局研究

通过使用双向指示种分析（TWINSPAN）和无偏对应分析（DCA）两种方法进行研究的结果表明,梵净山树干附生尖叶拟船叶藓在群落水平上的分布与森林群落类型相对应,其所在群落可以分成贵州青冈-箭竹群落、贵州青冈＋巴东栎＋雷公鹅耳枥-箭竹群落、贵州青冈-短柱柃群落、大钟杜鹃＋多脉青冈-野八角群落、亮叶水青冈＋多脉青冈＋贵州青冈-箭竹群落和贵州青冈-尖叶山茶-野八角群落6类树附生苔藓植物群落类型。尖叶拟船叶藓在梵净山的垂直分布范围为海拔1650～2080m;在树干垂直分布表现为下部显著多于中部,中部显著多于上部;在不同树种间的分布存在显著差异。分析了影响树附生尖叶拟船叶藓生态分布的相关因素。     

贵州梵净山森林树干附生尖叶拟船叶藓分布格局研究*

通过使用双向指示种分析( TWINSPAN) 和无偏对应分析( DCA) 两种方法进行研究的结果表明, 梵净山
树干附生尖叶拟船叶藓在群落水平上的分布与森林群落类型相对应, 其所在群落可以分成贵州青冈- 箭竹群落、
贵州青冈+ 巴东栎+ 雷公鹅耳枥- 箭竹群落、贵州青冈- 短柱柃群落、大钟杜鹃+ 多脉青冈- 野八角群落、亮
叶水青冈+ 多脉青冈+ 贵州青冈- 箭竹群落和贵州青冈- 尖叶山茶- 野八角群落6 类树附生苔藓植物群落类型。
尖叶拟船叶藓在梵净山的垂直分布范围为海拔1 650~ 2 080 m; 在树干垂直分布表现为下部显著多于中部, 中部
显著多于上部; 在不同树种间的分布存在显著差异。分析了影响树附生尖叶拟船叶藓生态分布的相关因素。     

铅胁迫对3种藓类植物抗氧化酶活性的影响

采用水培实验研究了重金属Pb对3种藓类植物尖叶拟船叶藓(Dolichomitriopsis diversiformis)、湿地匍灯藓(Plagiomnium acutum)和匍枝青藓(Brachythecium procumbens)的抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性的影响.结果表明,(1)在1~200 mg·L-1的铅胁迫浓度范围内,Pb对3种藓类植物的SOD活性均具有显著的促进作用,对Pb胁迫的种间敏感性差异为尖叶拟船叶藓>湿地匍灯藓>匍枝青藓;(2)POD活性对Pb胁迫的反应趋势有一定差别,尖叶拟船叶藓和匍枝青藓的POD活性随Pb浓度的增加先升后降,湿地匍灯藓的POD活性变化较为平缓,种间敏感性差异为匍枝青藓>尖叶拟船叶藓>湿地匍灯藓;(3)在100 mg·L-1时Pb对湿地匍灯藓CAT活性表现为显著促进作用外,其余在低浓度下显示无显著影响,在高浓度下表现为抑制效应,种间敏感性差异为尖叶拟船叶藓>匍枝青藓>湿地匍灯藓.3种藓类植物的抗氧化酶体系中对Pb胁迫的抵抗起关键作用的是SOD,可作为藓类植物受Pb胁迫的敏感生理指标.3种植物中对Pb胁迫的反应较为敏感的是尖叶拟船叶藓.     

Analysis on Genetic Diversity of Dolichomitriopsis diversiformis(Lembophyllaceae) in Fanjing Mountain

Dolichomitriopsis diversiformis is the only Dolichomitriopsis species in China, and is the member of Lembophyllaceae. Ten random primer pairs were selected to amplified 153 individuals from 14 D. diversiformis populations from both northern and southern slops of Fanjing Mountains by using RAPD methods, and 196 sites were derived . Results suggested that (1) D. diversiformis from FanjingMount kept a high level genetic diversity, and the genetic diversity is relative low at the population level ; (2) genetic diversity have no relationship with altitude, but populations on southern slope have a little higher diversity than that on the northern slope; (3) 63.29% genetic diversity exist among populations, and only 36.71% within population. These results suggested that small habitat was the major impact factors of D. diversiformis genetic diversity, genetic drift and habit adaption should be the prominent reason of population differentiation .     

镉胁迫下三种藓类植物的细胞伤害及光合色素含量的变化

采用水培试验研究了不同浓度Cd 胁迫下3种藓类植物的细胞伤害、光合色素含量和Cd 含量的变化,以探讨其对Cd 胁迫的反应敏感性和耐性.结果表明：低浓度Cd （1 mg·L^-1）胁迫显著损伤尖叶拟船叶藓和匍枝青藓叶细胞,3种藓的叶细胞伤害率随Cd 浓度的升高而显著增加,高浓度Cd （100 mg·L^-1）胁迫下的细胞伤害率大小为匍枝青藓>湿地匍灯藓>尖叶拟船叶藓.低浓度Cd 胁迫（1 mg·L^-1）对3种藓类植物的总叶绿素含量无显著影响,随着Cd 胁迫浓度的增加（≥ 10 mg·L^-1）,3种藓类植物总叶绿素含量显著下降,降幅顺序为匍枝青藓>湿地匍灯藓>尖叶拟船叶藓;1和10 mg·L^-1 Cd胁迫对3种藓类植物叶绿素a/b值无显著影响,100 mg·L^-1 Cd胁迫下湿地匍灯藓和匍枝青藓叶绿素a/b值显著下降;Cd胁迫对匍枝青藓类胡萝卜素含量的影响最大,1 mg·L^-1 Cd下其类胡萝卜素含量显著降低.3种藓类植物均能显著地富集Cd,其体内Cd累积量以尖叶拟船叶藓最高,湿地匍灯藓次之,匍枝青藓最少.细胞伤害率、叶绿素和类胡萝卜素含量的变化可用来指示3种藓类植物对Cd胁迫的敏感性差异.尖叶拟船叶藓对Cd胁迫的耐受性最强,湿地葡灯藓和匍枝青藓相对较弱.3种藓类植物对Cd胁迫的耐受性与其体内Cd累积量呈明显的正相关关系.     

尖叶拟船叶藓原丝体发育特征研究

将尖叶拟船叶藓[Dolichomitriopsis diversiformis(Mitt.)Nog.]孢子接种于Knop培养基上,置于恒温培养箱中培养,在光学显微镜下对其原丝体(protonema)发育特征进行了详细观察和记录。结果表明:孢子第2天就开始萌发,第6天时其萌发率达90%以上;原丝体系统由绿丝体(chloronema)和轴丝体(caulonema)构成,假根(rhizoides)产生于芽体基部,由轴丝体退化而成;配子枝原始细胞产生于绿丝体分枝的基部或轴丝体上的斜壁细胞;配子枝(game tophore)形成后其上各部位都可形成假根;孢子萌发类型为真藓型(Bryum-type)。     

Characterization of the Isoenzymes of cyclic nucleotide phosphodiesterase in human platelets and the effects of E4021

In extracts of human platelets, three isoenzymes of cyclic nucleotide phosphodiesterase (PDE), namely, PDE2, PDE3, and PDE5, were identified; activities of PDE1 and PDE4 were not detected. In human platelets, the cGMP-hydrolytic activity was about six times higher than the cAMP-hydrolytic activity, and PDE5 and PDE3 are the major phosphodiesterase isoenzymes that hydrolyze cGMP and CAMP, respectively. PDE5 exhibited organ-specific expression in humans, and platelets were among the tissues richest in PDE5. A novel inhibitor of PDE5, sodium 1-[6-chloro-4-(3,4-methylenedioxybenzyl)aminoquinazolin-2-yl] piperidine-4-carboxylate sesquihydrate (E4021), was a potent and highly selective inhibitor of human platelet PDE5. However, E4021 (up to 10 μM) did not inhibit 9,11-epithio-11,12-methano-thromboxane A₂-induced platelet aggregation, in vitro. E4021 plus SIN-1 (3-morpholino-sydnonimine), at concentrations that had little effect individually, inhibited aggregation. These results suggest the unique distribution of phosphodiesterase isoenzymes in human platelets and the PDE5 inhibitors might be useful as a new class of antiplatelet drugs.     

不同季节高原鼢鼠乳酸脱氢酶活力和同工酶谱

目的:探讨高原鼢鼠对洞道低氧高二氧化碳环境的代谢适应机制。方法:用酶活力分析法,分析春季、夏季和秋季高原鼢鼠血清乳酸脱氢酶(LDH)活力、乳酸含量和组织LDH活力,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析血清和组织LDH同工酶谱。结果:高原鼢鼠血清LDH活力在春夏秋三季具有明显的差异,春季高于夏季,夏季高于秋季,血清乳酸含量表现出同样的变化趋势;春季血清中五种同工酶条带都清晰可见,夏季血清中LDH5和LDH4清晰可见,秋季血清中只能看见LDH5带。骨骼肌、心肌和脑组织LDH活力较高,而且从春季到秋季显著降低;肝、肾和肺组织LDH活力较低,肝组织LDH活力春季显著高于夏季和秋季,夏秋两季之间没有明显差异;肾和肺组织LDH活力在春季与夏季之间没有明显差异,但秋季明显降低。心、肝、肺、肾、脑和肌肉组织LDH同工酶谱,在春夏秋三季都显示出五条带,并表现出明显的组织差异;各组织同工酶含量也有不同程度的季节差异。结论:高原鼢鼠体内糖酵解过程具有明显的季节性变化,从春季到秋季依次降低,这与它们的季节性活动特点和洞道中氧气和二氧化碳的季节性波动有关。