动物病理组织制片过程的体会

组织切片技术是兽医科学研究和临床学观察组织病理形态变化，进行疾病诊断的一种重要方法，制作优质的组织切片，取材新鲜，固定完全，脱水彻底，透明适度，浸蜡充分，切片要薄，染色良好，如在某一步骤上不加注意，即将会造成事倍功半，但在实际工作中，常由于某些人为因素，使切片质量不佳，甚至影响研究和诊断的结果，本文介绍了我室制片过程中人为现象及其原因和纠正方法的体会，从而制出优质的组织切片标本。     

蚤类染色体空气干燥制片技术

<正> 以往蚤类染色体制备,以蚤幼期生殖腺、肢芽组织及卵为材料,沿用醋酸地衣红压片法制作。我们参考凌发瑶、Dyban等其它昆虫和动物染色体制作技术,摸索和建立了适合于蚤的染色体常规制作方法。该法以蚤成熟三龄幼虫脑组织和成蚤生殖腺为材料,采用体外短期培养、空气干燥Giemsa染色技术制片,具取材容易、操作简便、中期分裂相多且染色体标本不需封片即可长期保存等优点,现将其制作方法介绍如下。     

纤维支气管镜活检组织的精细化制片

近年来,纤维支气管镜(纤支镜)的广泛运用,活检的组织病例越来越多,对于病理科技术制片的质量要求也越来越高,我们通过不断总结,分析和制定出专门针对支气管活检组织微小、组织重要、制片要求高的特点,制片过程中进行精细化操作,取得良好的效果,现介绍如下。     

几种实验动物组织石蜡制片的改进

根据多年教学经验 ,现将小鼠、大鼠、家兔等几种常见实验动物的石蜡制片的一些研究方法、出现问题及矫正方法做简要介绍。1)不同种属的动物组织 ,在脱水、透明、浸蜡时应尽量单独处理。有条件时同属的不同脏器组织最好也分批处理 ,以利于条件的掌握。2 )动物组织块较小、质地较细嫩 ,脱水时应从 5 0 %或 6 0 %乙醇较低浓度开始。据报道 ,脱水的低浓度酒精时间长短均可。低浓度酒精的时间应视材料的大小、被膜是否完整而定 ,各段时间不能操之过急 ,总的不能少于 3h。最好在 70 %酒精中过夜 ,否则在无水酒精中会引起组织骤然收缩 ,切片出现裂…     

面向重要实质器官的生物制造技术

在体外制造可修复人体受损组织与器官功能的活性替代物一直是人类的梦想.制造、材料与生命科学的交叉与融合发展,为生物组织与器官的体外制造提供了必要的技术、材料与生物学基础,从而实现了皮肤、骨、膀胱等简单活性组织的临床应用,但人体重要实质器官如肝脏、肺等的再造研究至今未取得突破性进展.重要实质器官内部复杂的微观结构系统及多细胞体系的构建是实现其体外制造的关键,也是当前生物组织与器官制造技术所面临的巨大挑战.从生物制造的角度,综述国内外在重要实质器官复杂微结构制造领域的主要技术方法及最新研究进展,通过分析与评价,对未来重要实质器官的生物制造技术发展进行展望.     

罗氏集团领先激酶抑制剂的开发竞争

肺癌的特征是易发生的部位、发展形式和速度、症状等的临床表现多种多样．并存在多种组织型。肺癌大致可以分为小细胞癌和非小细胞癌两种．非小细胞癌又可以分为腺癌、扁平上皮癌、大细胞癌、腺扁平上皮癌等组织型。在日本．腺癌发生率最高．占男性肺癌的40％、女性肺癌的70％以上。其次是扁平上皮癌,占男性肺癌的40％、女性肺癌的15％,在支气管进入肺附近,最易发生肺门型肺癌。大细胞癌,一般生长速度快,在被诊断为肺癌时．     

组织和时间特异性表达的钙黏蛋白-16

钙黏蛋白-16(CDH-16)是非典型的钙黏蛋白超家族成员,其表达具有明显的时空特异性,主要分布在肾脏和甲状腺,Cdh-16转录产物也暂时性出现在小鼠胚胎时期的生殖管道和肺上皮.迄今为止的研究表明,CDH-16与组织完整性、胚胎发育密切相关,并参与维持组织正常代谢、影响癌症发生等过程,但其具体的作用机制仍不清楚.本文对...     

肺干细胞与肺再生研究进展

探寻肺干细胞来源和肺再生原理的动物实验及临床研究均有很大的进展.利用基因选择技术有效的分离、培养出纯化度较高的肺干细胞群;以及肺内原始细胞与生物兼容性较好的组织工程材料共同培养形成类肺泡细胞结构,对肺组织再生的动物实验和临床应用方面起到推进的作用.并且近年来,干细胞参与肺损伤修复的基础实验研究也有了长足的发展.现对肺干细胞与肺再生方面的最新进展做一综述.     

植物幼嫩子叶的染色体制片

本文报道了用蚕豆(Vicia faba)、小巢菜(V. hirsuta)、豌豆(Pisum sativum)、菜豆(Phaseolus vulgaris)的幼嫩子叶作为研究体细胞有丝分裂及染色体的材料。与根尖比较,优点是:子叶细胞的有丝分裂活性高,组织易于解离和压片,且取材方便。     

人口腔粘膜上皮细胞系列制片

人口腔粘膜上皮细胞有着取材简便,对人体几乎无伤害等优点,被广泛应用于教学实验和科研中。我们使用它作为材料来源的几种制片技术,在普通显微镜下就可清晰看到细胞膜、细胞质、细胞核以及部分细胞器和化学成分,是学生观察高等生物———人的细胞的理想用材。现分别介...     

高尔基体的取材与染色及其制片

高尔基体显微切片在生物学制片中是一项重要技术,本文介绍了从取材到染色制作良好的高尔基体切片的过程。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂mRNA在吸烟大鼠肺组织中的表达

目的 研究吸烟大鼠肺组织和肺泡巨噬细胞中基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)基因的表达,探讨其在细胞外基质重塑中的作用。方法 建立吸烟大鼠模型,随机分为对照组和吸烟1、2、3、4、5及6月组(每组10只),用原位杂交技术检测肺组织和肺泡巨噬细胞MMP-9和TIMP-1 mRNA表达,用免疫组织化学技术观察Ⅳ型胶原在肺内的表达。结果 吸烟组肺组织和肺泡巨噬细胞MMP-9 mRNA的表达逐渐上升,至吸烟6月时均达高峰;而TIMP-1 mRNA的表达渐上升,至吸烟3～4月时达高峰,后逐步下降;肺组织Ⅳ型胶原的表达在吸烟3月时达高峰,然后渐降。结论 MMP-9／TIMP-1的动态平衡在吸烟大鼠肺气肿模型肺组织的细胞外基质重塑中有重要作用。     

呼吸道合胞病毒感染兔呼吸系统组织病理学的改变和相关指数评分标准的建立

目的探讨RSV感染兔呼吸系统的组织病理学改变及其病理学指数评估方法。方法将RSV 100μL（108 TCID50/mL）鼻腔接种新西兰兔,分别于3和5 d时处死动物,取鼻黏膜、气管、肺门支气管、肺组织做石蜡包埋切片、HE染色,与正常对照组比较,显微镜下观察组织病理学改变。根据病变程度、参考相关文献,制定鼻黏膜、气管/支气管、肺组织的病理学指数评分标准并进行评分。结果与正常对照组相比,接种病毒动物可见鼻黏膜增厚甚至可见坏死脱落灶、单个核细胞浸润以及淋巴样组织增生;气管、支气管黏膜增厚、粗糙、排列紊乱,有坏死脱落,支气管内可见渗出物;肺组织以肺门部位病变显著,可见以围绕支气管或血管组织为主的炎细胞浸润灶,肺泡内、各级细支气管内存在炎性分泌物;接种RSV5 d组病理学指数评分与正常对照组相比有统计学意义。结论RSV鼻腔接种新西兰兔可致其鼻黏膜、气管、支气管及肺组织发生炎性损伤。我们制定的鼻黏膜、气管/支气管、肺组织的病理学指数评分标准适用于动物呼吸系统炎性损伤程度的评估。     

日本三角涡虫生殖系统组织结构的观察

涡虫在动物系统演化史上占有十分重要的地位,雌雄同体,具有很强的再生能力,因此,对其生殖系统组织结构进行深入研究具有重要的意义.本文用3种染色方法(H.E染色、Masson染色、Van Gieson染色)显示了日本三角涡虫(Dugesiajaponica)生殖系统的组织结构并对其进行了光镜观察.结果表明.该类涡虫生殖系统为雌雄同体.雌、雄性生殖系均由生殖腺和生殖管道构成,雌性生殖腺包括卵巢、卵黄腺和交配囊,生殖管道包括输卵管、交配囊柄;雄性生殖腺主要是精巢,生殖管道包括输精囊、输精管、球腔、射精管4部分.交配囊由单层柱状上皮构成,胞质强嗜碱性,胞核位于上皮基底面,游离面胞质呈现很多泡状结构;卵黄腺为单细胞腺,灯泡状,其核较小,位于柄部.因此,可以确定交配囊具有外分泌的功能;卵黄腺的数目存在周期性.     

内源性一氧化碳对内毒素休克肺组织和肾组织保护作用的实验研究

目的：研究内毒素休克时内源性一氧化碳（CO）对肺组织和肾组织的保护作用及其机制;方法：采用盲肠结扎穿孔（CLP）的方法建立大鼠内毒素休克模型,通过免疫组化、光镜下组织形态学观察及超氧化物岐化酶活性、丙二醛含量的测定进行研究;结果：治疗组肺组织和肾组织病变明显减轻,炎症反应及脂质过氧化程度减轻;结论：内毒素休克时内源性CO对肺组织和肾组织具有保护作用,且此保护作用与其抑制炎症反应和抗氧化作用有重要关系。     

影响魔芋愈伤组织形成的几个因素

研究了魔芋不同外植体类型、激素种类和激素组合、光暗培养条件、不同生理时期取材等因素对愈伤组织诱导能力的影响以及不同处理所得愈伤组织的分化能力。结果表明 ,不同外植体类型诱导愈伤组织能力顺序为 :顶花芽 >幼嫩芽鞘 >子芋 >根状芋 ;经过 4℃低温预处理的子芋和根状芋比未经预处理的外植体更易诱导出愈伤组织 ;MS +BA1 .0～ 2 .0 +NAA1 .0～ 2 .0培养基均能诱导外植体产生愈伤组织 ,愈伤组织诱导率大多在 5 0 %以上 ,最高达 87.5 % ;在魔芋生长期取材比在休眠期取材更易诱导出愈伤组织 ;不同处理所得愈伤组织在分化能力上具有较明显的差异。     

栓质细胞和硅质细胞的制片

在常见禾本科作物中,高粱、玉米成熟的中上位叶片是制片的好材料,此时的细胞分化已完成,栓质细胞和硅质细胞较多,表皮坚韧,便于制取和观察,具体做法如下: 1.取材固定剪取叶片中段,在水中浸湿,然后放在载玻片上用单面刀片刮除上侧表皮及叶肉、叶脉等组织(注意不要刮破下面保留的表皮),将材料固定于FAA液中保存备用,或将材料先固定,制片时再刮除也可。 2.水洗将材料放入水中浸泡清洗几遍,除去固定液。     

赛加羚羊部分器官组织学结构观察

为了解世界濒危物种、国家Ⅰ级保护野生动物赛加羚羊(Saiga tatarica)主要器官组织的结构特征,本研究利用石蜡组织切片技术,对1只因胎衣不下死亡的雌性成年赛加羚羊心、肝、脾、肺、肾的组织结构进行了观察。赛加羚羊心肌纤维发达,呈圆柱状,有分支,其胞核位于细胞边缘,各心肌纤维分支末端相互连接构成肌纤维网,闰盘明显。肝组织致密,间质少,肝小叶分界不清,切面呈不规则的多边形,肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列。脾的被膜较厚,脾小梁由被膜和脾门的结缔组织伸入脾实质形成,相互连接构成脾的粗支架;实质部分可明显分为白髓和红髓,白髓主要分布在脾内小动脉周围,其内部脾小结形状为圆形或椭圆形;红髓主要分布于白髓区周围,其内充满大量的红细胞。肺实质导气部主要可见细支气管和终末细支气管,其中,细支气管的管腔面富含纵行皱襞,黏膜上皮为假复层柱状纤毛上皮;呼吸部可见大量的肺泡管、肺泡囊和肺泡,肺泡结构清晰可见。肾为平滑单乳头肾,由被膜和实质构成,实质可明显分为皮质与髓质,皮质内可见大量肾小体和少量结缔组织。总体而言,与其他同类型反刍动物相比较,赛加羚羊各主要器官的组织结构未见有明显差异。     

振荡法在组织石蜡制片中的应用

本文成功地把振荡法应用于组织石蜡制片中,采取鸡的各种组织,用常规、加温、振荡三种方法进行固定、脱水、透明和浸蜡,然后常规切片染色试验比较。结果表明,用振荡法从固定到浸蜡仪用2小时20分钟,提高功效10倍以上。具有传统方法所不及的简便、快速、切片薄及质量好等优点,尤其适用于临床病理检验的快速诊断。完全可以代替一般的快速石蜡切片和冰冻切片。     

不同固定液及保存温度、时间对小鼠组织DNA的影响

比较10％甲醛、95％乙醇、Saccomanno3种固定液及不同保存温度、保存时间对小鼠肝、肺组织DNA的影响。取材后将标本分为无固定液组、甲醛组、乙醇组和Saccomanno组,不同温度保存至一定时间后提取DNA进行比较。结果无固定液时,保存3d后,室温且与低温组差别不大。甲醛固定时,对不同保存温度、时间、不同组织的DNA影响不同。乙醇、Saccomanno法室温放置1个月后DNA仍保存良好。短时间室温保存对DNA影响不大。10％甲醛使DNA降解,95％乙醇、Saccomanno法固定则可以保护DNA的完整性。