细菌自动培养仪厌氧培养的临床应用

目的 :探讨用细菌自动培养仪作厌氧培养的临床应用价值。方法 :选用 mini VITAL 全自动荧光血培养仪检测常见临床标本 5472份 (其中血液 4869瓶、胸腹水 2 40瓶、脓腔及组织穿刺液 175瓶、脑脊液12 2瓶、骨髓液 2 3瓶、胆汁及其引流液 2 1瓶、其他 2 2瓶 )厌氧培养结果 ,对其阳性检出率、检出细菌种类和时间、假阳性以及药敏结果进行综合分析和评估。结果 :设定收瓶时间为 5d,厌氧培养的阳性检出率为2 5.51% (其中胆汁 76.19% ,脓汁 57.14 % ,血液 2 5.2 8% ,胸腹水 14 .17% ,骨髓 13 .0 4% ,脑脊液 5.74% ) ;共检出各种感染菌 3 3属 77种 ,专性厌氧菌、微需氧菌和兼性厌氧菌的比例为 4.8∶ 1.0∶ 94.2 ;专性厌氧菌的平均检出时间为 (2 6.13± 2 0 .59) h;兼性厌氧菌的检出时间厌氧株比需氧株平均延长 -0 .54～ 4.7h;假阳性率 0 .16% ;药敏结果厌氧株的耐药率普遍较需氧株低。结论 :仪器厌氧培养简便、快速、安全、有效 ,是临床常见标本检测厌氧菌值得推荐使用的方法 ;与需氧培养配对应用可提高培养阳性检出率     

香味菌临床分离株耐药谱分析

目的回顾性分析本院临床分离的香味菌的药物敏感情况,指导临床合理使用抗生素。方法收集本院2012年1月至2013年12月期间临床分离的香味菌,采用法国生物梅里埃公司的全自动微生物分析仪VITEK-2进行菌株鉴定,以及VITEK-2配套药敏试验复合板进行药敏检测,分析其耐药谱。结果共收集了8株香味菌,且均呈现多重耐药谱。对头孢菌素类抗生素的耐药率很高,特别是对头孢唑林、头孢他啶、头孢曲松的耐药率均为100%。对氨曲南和呋喃妥因的耐药率均为100%。对碳青霉烯类抗生素亚胺培南的非敏感率达到87.5%。而耐药率最低的左旋氧氟沙星为37.5%。结论本院分离的香味菌呈现多重耐药谱,需对其耐药机制进一步研究。     

影响细菌自动培养阳性检出率的若干因素探讨

目的:探讨影响血(体)液细菌自动培养阳性检出率的若干因素,提高培养阳性率.方法:对使用Mini VITAL全自动荧光血培养仪三年多来检验6 223例的结果作回顾性分析.结果:本组阳性检出率28.19%,培养阳性率可因标本种类不同而异;在需氧和厌氧配对培养阳性的1 681例中,有9.88%的病例厌氧培养和12.67%的病例需氧培养未检出感染菌;5天收瓶时限的漏检率为0.29%;培养阳性者的年龄分布有随年龄增大而阳性率升高的趋势(χ2=530.79,P＜0.01).结论:同时做需氧和厌氧培养,阴性收瓶时限不少于5天,适当增加儿童病例血培养采血数量,可进一步提高细菌自动培养阳性率.     

瘤胃细菌的分离培养研究进展

瘤胃微生物的发酵使反刍动物能够有效利用粗纤维等营养物质,瘤胃作为自然界的天然饲料发酵罐,是微生态菌剂开发的重要来源,包括纤维素、木聚糖、脂肪、毒素降解菌、非蛋白氮利用菌、甲烷氧化菌等.然而,瘤胃中大部分的微生物仍不可被培养,人工培养方法和流程的参差不齐限制了瘤胃菌种资源的开发利用.因此,本文基于国内外已有的瘤胃细菌分离...     

2株海绵细菌的分离与鉴定

利用R2A培养基对海绵中的细菌进行分离,获得89株菌落形态有差异的菌株。通过在R2A培养基和营养丰富的LB培养基上的长势比较,发现有13株菌在LB培养基上生长缓慢、长势较弱。对此13株菌进行16S rDNA序列测定,发现菌株HB09009与Bacillus carboniphilus JCM9731T(AB021182)同源性最高,为97.1%;菌株HB09012与Planctomyces maris DSM8797T(NR025327)同源性最高,为97.4%,在发育树上处于一个分支,但在生长条件、培养特征和生理生化等方面都存在较大的差异,初步鉴定HB09009可能是Bacillus属的一个新种,暂定名为Bacillus sp.HB09009;鉴定HB09012可能是Planctomyces属的一个新种,暂定名Plancto-myces sp.HB09012。     

临床分离凝固酶阴性葡萄球菌细菌谱

目的了解玉溪市人民医院临床分离凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的菌种构成和耐药特征。方法对该院近6年来临床分离的808株CNS作回顾性分析。结果808株CNS共有16种;表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血葡萄球菌占CNS的77.2%;甲氧西林耐药（MRCNS）和甲氧西林敏感（MSCNS）各占63.3%和36.7%;β-内酰胺酶阳性检出率为84.5%,且MRCNS显著高于MSCNS（χ^2=50.88,P〈0.01）;药敏结果：MRCNS除万古霉素、呋喃妥因和利福平外,青霉素、氨苄西林等12种临床常用抗菌药物的耐药率在50.6%-100%,显示了高度的耐药性和多重耐药。结论CNS在临床标本中的检出范围广、种类多,以表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血葡萄球菌为主,MRCNS的高度耐药和多重耐药形势严重,加强CNS的细菌学监测非常必要。     

2株瘤胃纤维降解细菌的分离鉴定

从日粮精粗比为3:7的小尾寒羊×蒙古羊杂交一代绵羊的瘤胃内容物中分离到2株严格厌氧细菌,一株球菌WQ-1,1株弧菌WH-2,二者对滤纸有很好的降解能力。通过酶活力试验测得WQ-1的滤纸酶活、羧甲基纤维素酶活和β-葡萄糖苷酶活分别为0.66,7.0 U/mL和15.3 U/mL;WH-2的滤纸酶活、羧甲基纤维素酶活和β-葡萄糖苷酶活分别为0.52,6.9 U/mL和17.2 U/mL。经形态学、生理生化反应、生态特性和遗传型的鉴定,WQ-1归类为瘤胃球菌属(Ruminococcus)的黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)。WH-2归类为丁酸弧菌属(Butyrivibrio)的溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)。     

不同培养条件对海洋沉积环境细菌的选择性分离

海洋环境中存在着大量未被培养和利用的微生物资源。本研究对一份南海沉积物样品采用不同培养温度、盐度、pH、样品稀释倍数和营养浓度条件进行可培养细菌的多样性研究。经过16S rRNA基因序列分析,获得825株菌分属于5个门,8个纲,17个目,26个科,57个属。分离到最多的属级类群为芽胞杆菌属（Bacillus）。通过不同培养条件的分离实验发现,厚壁菌类群在4 °C~60 °C、0%~15%盐度、pH 5~8及不同的样品稀释倍数和营养浓度实验条件中均为优势培养类群,具有广泛的环境适应性,但2~200的样品稀释倍数可以大大减少分离培养基中厚壁菌的数量。放线菌类群在4 °C低温和0%NaCl添加条件下的可培养多样性较高,同时pH 6和寡营养培养基有助于分离获得稀有放线菌类群。另外,本研究发现新物种资源的获取几率分别在寡营养培养基、5%~10%较高盐度和60°C高温培养有所增加。分离获得的5个主要细菌门类分别为厚壁菌门（Firmicutes,86%）、放线菌门（Actinobacteria,13%）、变形菌门（Proteobacteria,1%）、拟杆菌门（Bacteroidetes）和异常球菌-栖热菌门（Deinococcus-Thermus）。本研究共分离得到29株潜在新种,分别属于芽胞杆菌纲（Bacilli）、放线菌纲（Actinobacteria）、酸微菌纲（Acidimicrobiia）、嗜热油菌纲（Thermoleophilia）、红色杆菌纲（Rubrobacteria）和异常球菌纲（Deinococci）。海洋环境微生物新类群、海洋放线菌稀有类群等微生物新资源的选择性分离培养提供了有效的方法和方案,为后期的深入开展打下良好的基础。     

超速离心机制备冷冻干燥保存菌种

利用超速离心机原有的冷冻系统和真空系统进行冷冻干燥的方法冻干保存了３０种国际标准菌种,４℃保存一年后,随机检测了其中的１８种,全部存活良好。用本法还可以制备出１、２、３、１０ｍｌ不同容量的冷冻干燥生物制剂,适用于中批量各种冻干生物制剂的生产和研究。一机两用,省资金,省用房,提高了机器的利用率。     

成人牙周炎龈下套氧菌分离鉴定及药敏试验结果分析

分离并鉴定了329例成人牙周炎龈下优势厌氧菌群,并对不同病程中的菌群变迁、厌氧菌的药物敏感性进行了分析.成人牙周炎龈下标本中厌氧菌阳性检出率为97.9%,其中以牙龈紫质单胞菌检出率最高(38.5%),具核梭杆菌次之(18.9%).随着牙周病变程度的加重,牙龈紫质单胞菌、具核梭杆菌、产黑色素普氏菌、星群厌氧链球菌、厌氧消化链球菌的检出率增高(P＜0.05),小韦荣球菌的检出率下降(P＜0.01),表明前5种厌氧菌在AP发病过程中有重要作用,小韦荣球菌与之无关.替硝唑、甲硝唑和克林霉素对438株革兰氏阴性厌氧菌的MIC90分别为1～8,2～8和4～16 mg/L,对278株革兰氏阳性厌氧菌的MIC90分别为16～32,16～64和4～16 mg/L,表明替硝唑和甲硝唑体外抗革兰氏阴性厌氧菌效果优于克林霉素,抗革兰氏阳性厌氧菌作用不如克林霉素.     

三株解烃菌的分离鉴定和菌种保藏

我们从油田土样中分离得到三株解烃菌。它们是C20—11能利用樟脑,D36—3能利用十六烷,T3能利用苯甲酸和萘。菌株经鉴定,C20—11为粪产碱菌(Alcaligenes faecalls),D36—3为节杆菌(Arthrobacter sp.),T_3为乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcaceticus)。     

从临床感染中分离的九株粘质沙雷氏菌

从临床化脓性感染中分离到九株革兰氏阴性产生脂溶性红色素的小杆菌。经详细鉴定(20种生化反应,120种底物利用试验及G+C mol%测定)为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)。其中两株能利用3,4-二羟基苯甲酸盐为唯一的碳源而生长,证明此试验适用于本属的种型鉴定。9株菌中有7株细菌属于粘质沙雷氏菌A₂型。药敏试验显示青霉素及其它作用于细胞壁的抗生素对这些菌无效而所试验的氨基糖苷类抗生素几乎全有效。红霉紊、链霉素和复方增效磺胺则各株间的敏感性不同;磺胺虽     

云南程海螺旋藻养殖池中污染菌的研究

对程海螺旋藻玻璃温室－半封闭跑道式循环培养池中的细菌、真菌进行研究,结果发现,细菌总数通常为10^4-10^7个／mL,并且随培养时间呈一定规律性波动;养殖藻的报废与细胞总数有一定关系,与藻种抗逆性关系更大;在鉴定,优势菌为奈瑟氏球菌属（Neisseria)、葡萄球菌属（Staphylococcus)、微球菌属（Micrococcus)、肠杆菌科（Enterobacteriaceae)、拟青霉属（Paecilomyces)、曲霉属（Aspergillus)、束丝菌属（Ozonium)等;少数菌株能明显抑制或促进螺旋藻生长,主要是通过其代谢物对藻体产生影响。     

沙门氏菌增菌培养基中细菌混合培养生长动力学的试验研究

本文就甘露醇亚硒酸盐和亚硒酸盐两种增菌培养基对沙门氏菌各血清变型的选择性增菌作用作了研究。研究述及37℃下沙门氏菌与埃希氏大肠杆菌、绿脓杆菌、普通变形杆菌三种竞争菌混合培养生长动力学过程,测出了评价增菌培养基优劣的客观指标EI值;按沙门氏菌传统分离方法,对加有终浓度为10~1、10~2、10~4、10~6、10~8个活菌/毫升的沙门氏菌株与正常人大便的两种增菌培养基,经37℃下孵育20至24小时后作SS琼脂平板划线分离和沙门氏菌血清学鉴定。通过两种培养基EI值及沙门氏菌分离结果的比较证实,甘露醇亚硒酸盐培养基对沙门氏菌株的选择性增菌作用明显优越于亚硒酸盐培养基(P<0.001)。     

新疆地区盐湖的中度嗜盐菌的16S rDNA PCR—RFLP分析

对来自新疆地区艾丁湖、艾比湖和玛那斯盐湖等盐湖的２８株中度嗜盐菌与９株相关的参比菌株,进行了１６Ｓ ｒＤＮＡ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析,这些菌株是革兰氏阴性杆菌,能在０～２５％ＮａＣｌ中生长。在实验中,选用４种限制性内切酶ＡｌｕⅠ、ＨｉｎｆⅠ、ＲｓａⅠ和ＨａｅⅢ,将供试菌株的１６Ｓ ｒＤＮＡ的ＰＣＲ产物进行酶切,用３％的琼脂糖电泳分析酶切产物。结果表明,在７４％的相似性水平上分为３群。群Ⅰ包括新分离的     

培养软骨细胞再形成生长板样软骨组织的研究

分离的家兔肋软骨的生长板软骨细胞在含10%的胎牛血清的IMDM培养液中进行高密度培养。培养的软骨细胞经过增殖、分化重新构建形成了生长板样软骨组织;在组织学上,细胞的排列呈现明显的方向性,肥大细胞位于上侧、增殖细胞位于下面从而形成明显的细胞分化区带,即增殖、成熟区和肥大区,并且细胞纵向排列成柱状;在生化代谢方面,软骨细胞DNA,蛋白多糖和碱性磷酸酶的合成具有动态的严格的时间规律性,与在体生长板软骨细胞分化的进程相一致,完整地模拟了在体软骨细胞分化及其代谢的全部过程。     

太湖不同解有机磷菌株胞外碱性磷酸酶活性对蓝藻碎屑的响应

浮游细菌胞外碱性磷酸酶在湖泊磷循环过程中具有关键作用, 但其与生物可利用性磷和颗粒态有机质之间的关系尚未得到充分的研究。研究以从太湖沉积物分离的3 株解有机磷细菌(OPB)和东湖水中OPB菌群为实验对象, 以蓝藻干物质为颗粒态有机质, 系统分析了模拟条件下OPB 的数量、不同大小颗粒所表现的胞外碱性磷酸酶活性(APA)与不同形态磷的浓度及其相互关系。从总体上讲, APA 与OPB 数量显著正相关, 且明显反比于溶解反应性磷(SRP)浓度, 在模拟实验过程中, 不同菌株(群)所对应的SRP 浓度均显著不同, 故其解磷能力各异。从绝对活性及其在总活性中所占的比例来看, 各处理间小颗粒(0.22—3.0 μm)APA亦明显不同, 而大颗粒(>3.0 μm)APA和溶解态(8 CFU/mL), SRP 浓度逐渐增加。实验后期(20—33 d)细菌数量大幅度减少, 且伴随SRP 和溶解态有机磷浓度的显著升高。因此, 在缺磷且富含颗粒态有机质的条件下, OPB 将产生胞外碱性磷酸酶, 分解有机磷, 进而满足其大量生长的需要, 同时有效改变溶解态磷的形态与生物可利用性。       

适合大量培养的红球藻藻种的筛选

研究了 4个雨生红球藻 (Haematococcuspluvialis)品系在 10℃、15℃、2 0℃、2 5℃和 2 8℃时的生长速率 (μ)、生物量、虾青素含量和产量 ,从中选出适合于大量培养的品系H .pluvialis2 6和H .pluvialisWZ。 2个品系的虾青素含量和产量分别达到 2 .4 1%— 3.16 % ,4 6 5 1— 5 4 35mg/L和 2 4 0 %— 2 5 9% ,39 84— 4 0 15mg/L。 2个品系的温度适应具有互补性 :H .pluvalisWZ适应于较低温度 (10℃— 2 0℃ ) ,H .pluvialis2 6适应于较高温度 (2 0℃— 2 8℃ ) ,在低温季节使用H .pluvialisWZ ,在高温季节使用H .pluvialis 2 6进行生产 ,可以延长生产期 ,提高产量