小儿副轮状病毒的检出

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,从婴幼儿急性腹泻粪便中检出轮状病毒RNA电泳阳性293份,发现一株副轮状病毒(青-27株),此株病毒经电泳观察,呈典型的轮状病毒形态,但易破碎。ELISA检测表明不具有一般轮状病毒的特异性群抗原,病毒RNA基因组由11个片段组成,但电泳图型特殊,吴4:3:2:2排列模式,本文证实,此一小儿副轮状病毒与国外报道的,散发罕见的小儿副轮状病毒RNA电泳图型相同,提示此病毒的重要意义。     

从绵羊羔和山羊羔腹泻粪样中检出B组轮状病毒

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,从新疆巴里坤县的22份绵、山羊羔腹泻粪样中,检出11份具有B组轮状病毒的RNA电泳图型,联合电泳表明,绵羊羔与山羊羔的B组轮状病毒电泳图型完全相同,电镜观察表明,该病毒与典型轮状病毒(A组)具有相同的形态特征,但易降解破碎,口服接种剥夺初乳的绵羊羔和山羊羔,经11～13小时羔羊发生急性水样腹泻,并排出大量病毒,经A组轮状病毒组抗原ELISA检测,不具有共同组特异抗原,但经对流免疫电泳检测,它与成人腹泻轮状病毒(B组)具有共同组特异抗原,从而证实我国存在与国外报道相同的羊B组轮状病毒,既感染绵羊羔也感染山羊羔。是引起绵,山羊羔急性腹泻的不可忽视的病原之一。     

沙市婴幼儿腹泻中检出3株C群轮状病毒

1987～1988年在沙市165份婴幼儿急性腹泻标本中,用PAGE法检出轮状病毒37株(22.4％),其中3株为少见的轮状病毒,此种病毒经电镜观察,具有典型轮状病毒的形态结构,ELISA证实该病毒不具有A群和B群轮状病毒的群特异性抗原。RNA电泳分析表明,其基因组由11个双链RNA片段组成,电泳图型特殊,呈4:3:2:2的排列模式。上述试验表明,该病毒为世界上罕见的C群轮状病毒。免疫电镜证实,该病毒能被病人恢复期血清所凝集,提示该病毒是腹泻病儿的致病因子。     

轮状病毒RNA基因图谱变异分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对轮状病毒(RV)标准株进行RNA基因图谱分析,发现人轮状病毒(HRV)Wa株在MA104细胞上连续传5代后,其RNA基因图谱由原来的4:2:3:2模式变为4:3:3:2模式。继续分别在CV-1、MA104细胞上传代后,基因图谱进一步演变为4:3:4:2模式。经比较电泳、病毒空斑纯化,初步证实RVWa有变异林存在。目前尚未见RV标准株变异的报告,有待进一步研究。同时对多个RV标准株及1939年南京市区婴幼儿秋季腹泻的RV流行株进行基因图谱分析,发现不同的人RV及牛RV标准株有相同的基因图谱;不同实验室来源的同一标准株有不同的基因图谱。此外,尚证实HRV是1989年南京市区婴幼儿秋季腹泻的主要病源,总检出率45.1％,电泳长型为流行优势株89.2％。本文尚对RV RNA基因图谱变异的原因及意义进行了讨论。     

人心肌肌凝蛋白轻链(CMLC)的分离及临床应用

从人心肌提取了肌凝蛋白,并检测了其ATP酶活力的稳定性。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法纯化并鉴定了人心肌肌凝蛋白轻链(CMLC),结果表明CMLCI的分子量为27000;CMLCⅡ的分子量为20 000。它们的紫外吸收光谱显示A260>A280,表明其高含苯丙氨酸。制备了兔抗人CMLC抗血清,免疫双扩散的结果表明,纯化后的CMLC与肌凝蛋白有相同的抗原性。用阳性的兔抗人CMLC抗血清为对照作ELISA实验,不仅从免疫学角度进一步证实了人心肌CMLC的特性且为其在临床诊断应用提供了可靠的方法。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳的快速脱色方法

以牛血清白蛋白为材料进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),凝胶固定后,用考马斯亮蓝R-250染色后比较传统脱色液(冰乙酸-甲醇溶液)和不同盐溶液(NACL、KCL、CUCL2)的脱色效果的结果表明:PAGE和SDS-PAGE胶,0.25和0.5MOL·L-1NACL,在70℃(PAGE)、50℃(SDS-PAGE)下脱色,约2￣4H,效果好,灵敏度高,背景低。     

自制绿色荧光蛋白（GFP）的血清抗体

介绍了如何利用GFP的荧光特性和制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离GFP免疫动物获得血清抗体的方法。     

上海地区胃癌病人运铁蛋白(Tf)、组特异性成分(Gc)、α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)亚型分布的研究

用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分析了上海地区202例汉族胃癌病人及202例正常对照组的运铁聋白(Tf)和α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)亚型的分布,发现胃癌组Tfc_1c_1纯合子频率(0.3713)和Tfc_1基因频率(0.5718)显著低于对照组(分别为0.5149和0.6782),均为p<0.01,胃癌组Tfc_2c_2纯合子频率(0.2228)和Tfc_2基因频率(0.4019)显著高于对照组(分别为0.1436,p<0.05和0.2970,p<0.01),胃癌组和对照组的α_1-抗胰蛋白酶亚型分布无显著差异。用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦结合免疫固定分析了上海地区200例汉族胃癌病人和200例正常对照组的组特异性成分(Gc)亚型分布,发现胃癌组Go1F表型频率(0.22)和Gc1F基因频率(0.4375)均显著高于正常对照组(分别为0.14和0.3600,均为p<0.05)。     

大鳞副泥鳅LDH同工酶的发育遗传学研究

采用聚丙烯酸胶凝胶电泳技术研究了大群副泥鳅早则发育过程（受精后0一227小时）和成体7种组织器官（脑、肾、骨骼肌、肠、心、肝和服）中的LDH同工两表达状况．结果表明,大群副泥鳅的LD同工酶具有明显的组织特异性和发育阶段特异性．     

An Occurrence of Diarrheal Cases Associated with Group C Rotavirus in Adults

Six of the 23 college students who joined a group trip in February of 1991 developed acute nonbacterial gastroenteritis with severe diarrhea. The causal agent was identified as group C rotaviruses by electron microscopy (EM), immune-EM (IEM) and the molecular examinations including polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and polymerase chain reaction (PCR) on virus particles detected in the extract of watery fecal specimens of the patients. The patients positive for virus isolation showed significant increase in IEM antibody to the isolated virus in their paired sera. These findings suggest that the group C rotavirus is an important etiological agent of diarrhea and may also cause serious food-borne diarrheal disease in adults.     

运用ELISA快速检测CPV抗体方法的建立与均衡性研究

用蔗糖密度梯度离心和凝胶层析纯化犬细小病毒 (CPV)作抗原 ,建立了检测CPV抗体的间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)法 ,其特异性和稳定性良好 ,结果判定准确明显 ,易于把握。     

丙型肝炎病毒核壳蛋白抗原的化学合成及其在血清学诊断中的应用

选取丙型肝炎病毒(HCV)核壳蛋白区两个可能含有优势抗原表位的19和16氨基酸的肽殴(C-19肽和C-16肽),利用固相多肽合成技术进行了化学合成。经用反相高压液相层析(HPLC)及脉冲液相多肽测序技术检定合成肽产品的纯度及序列后,以C-19和C-16肽作为包被抗原组装成检测HCV血清抗体的ELISA诊断试剂。用所组装的合成肽试剂检测中国药品生物制品检定所提供的HCV标准参比血清,并比较利用该试剂和美国Abbott实验室生产的HCV第二代EIA诊断试剂平行检测109份献血员血清的结果,表明C-19肽能够特异、重复、灵敏地检出HCV血清抗体,可以作为我国第一代HCV诊断试剂的合成肽抗原。     

C群流脑多糖菌苗唾液酸含量测定试验

Ｃ群脑膜炎球菌多糖菌苗是我们近年开发的一种新制品,其中唾液酸（ＳＡ）是该制品的有效成份之一。为了严格控制该制品的质量,经反复试验,对比各种试验条件,选择出较理想的测定ＳＡ方法－改良法,该法与Ｓｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍ氏法比较,其标准曲线变异系数（ｃｖ％）为０．０３％,低于Ｓｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍ氏法（０．３１％）;其回收率平均为１００．６２％。与中检所方法比较,无显著差异（Ｐ〉０．０５）,对批样品进行６     

Amphiphilic,glycophosphatidylinositol-specific phospholipase C (PI-PLC)-insensitive monomers and dimers of acetylcholinesterase

1. In a recent study, we distinguished two classes of amphiphilic AChE3 dimers in Torpedo tissues: class I corresponds to glycolipid-anchored dimers and class II molecules are characterized by their lack of sensitivity to PI-PLC and PI-PLD, relatively small shift in sedimentation with detergent, and absence of aggregation without detergent. 2. In the present report, we analyze the amphiphlic or nonamphiphilic properties of globular AChE forms in T28 murine neural cells, rabbit muscle, and chicken muscle. The molecular forms were identified by sucrose gradient sedimentation in the presence and absence of detergent and analyzed by nondenaturing charge-shift electrophoresis. Some amphiphilic forms showed an abnormal electrophoretic migration in the absence of detergent, because of the retention of detergent micelles. 3. We show that the amphiphilic monomers (G1a) from these tissues, as well as the amphiphilic dimers (G2a) from chicken muscle, resemble the class II dimers of Torpedo AChE. We cannot exclude that these molecules possess a glycolipidic anchor but suggest that their hydrophobic domain may be of a different nature. We discuss their relationship with other cholinesterase molecular forms.     

肝硬变中丙型肝炎病毒C33c抗原及HBxAg的分布及意义

应用抗ＨＣＶＣ３３ｃ抗原２Ｂ６株单克隆抗体和抗ＨＢｘＡｇ多克隆抗体。以ＡＢＣ法对８６例肝硬变组织进行ＨＣＶ及ＨＢＶ相关抗原定位研究,ＨＣＶＣ３３ｃ抗原及ＨＢｘＡｇ在肝硬变中的阳性率分别为７６．７％及６２．８％,Ｃ３３ｃ抗原和ＨＢｘＡｇ阳性占所检病例８８．４％,二者同时阳性为５１．２％,ＨＣＶＣ３３ｃ抗原位于肝硬变组织的肝细胞胞桨内,充满整个胞桨,细胞核及胸膜未见阳性;阳性细胞呈弥温、局灶及散在分布     

补体第六成分（C6）在汉族5个群体中的多态分布

用聚丙烯酰胺等电聚焦技术和免疫酶标法,调查分析了汉族5个群体补体第六成分(C6)的遗传多态性,得出基因频率如下。郑州汉族:C6*A 0.4521、C6*B 0.5228、C6*B_2 0.0183、和C6*R 0.0068。兰州汉族:C6*A 0.4612、C6*B 0.5218和C6*B_2 0.0170。呼和浩特汉族:C6*A 0.4452、C6*B 0.5286、C6*B_2 0.0214和C6*R 0.0048。西安汉族:C6*A 0.4899、C6*B 0.4874、C6*B_2 0.0126和C6*R 0.0101。广东梅州客家人:C6*A 0.4569、C6*B 0.5152和C6*B_2 0.0279。C6*R为罕见等位基因之频率。     

靶点药物Cetuximab(C225)研究新进展

在许多肿瘤组织中均有表皮生长因子受体(epidermal growthfactor receptor,EGFR)的过表达,它的失调与肿瘤对化疗和放疗的耐受以及不良预后相关,为肿瘤的治疗提供了一个理想的分子靶点.Cetuximab(C225)是特异性EGFR单克隆抗体,与化疗或放疗联合应用时具有协同作用,具有毒副作用少、靶向性好等优点.Cetuximab(C225)已被批准用于对伊利替康抵抗的结直肠癌和头颈部鳞癌的治疗,对非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌等具有EGFR高表达肿瘤治疗的临床试验正在进行之中,为肿瘤治疗开辟了一个全新的领域.     

血中检测SARS冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用

为明确严重急性呼吸综合症(SARS)冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用,通过微量中和试验及酶联免疫方法、间接免疫荧光法检测疑似病人恢复期血清(大于28天)中SARS-IgG抗体,确诊SARS患者。同时收集发病不同时期SARS及普通发热病人血清,利用酶联免疫方法检测SARS-CoVN蛋白,并与荧光定量PCR早期诊断方法相比较。共检测：广州地区2003年12月～2004．年1月新发4例确诊SARS患者不同时期的血液和咽漱液标本;恢复期血清SARS-CoV中和抗体阳性病人不同时期的血清46份;广州地区2003年1月～4月临床确诊SARS患者159例的血清和56例疑似患者血清;非SARS普通发热病人血清97份;正常人体检血清100份。结果：4例新发SARS患者的不同时期标本中,3例患者急性期血均检出N蛋白,优于常用的荧光定量PCR检测方法。46份SARS-CoV中和抗体阳性的血清标本,N蛋白检出率为100％。159例临床确诊病例中,发病早期5天以内SARS-CoVN蛋白的检出率为92．3％,随后呈现逐步下降的趋势,在发病第18天仍可检出。56例临床疑似患者发病早期也有23．2％检出率。而97例普通发热病人及100份正常人血清中均未能检测出SARS-CoVN蛋白。表明在血清中检测SARS冠状病毒N蛋白的方法敏感性和特异性都好,对SARS实验室早期诊断具有重要作用。