改良环介导等温扩增技术快速检测婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌

[目的]采用改良环介导等温扩增(LAMP)技术,快速检测婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌.[方法]以阪崎肠杆菌(ATCC29544)的16S-23S rRNA间区序列作为靶序列,设计内、外引物和环引物,通过肉眼观察白色沉淀,判断检测结果.[结果]LAMP检测阪崎肠杆菌的灵敏度为0.101 CFU/mL,人工污染阪崎肠杆菌的婴儿配方奶粉的检出限为1.1 CFU/g.采用试剂盒提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时1 h.而对照,PCR检测阪崎肠杆菌的灵敏度为101 CFU/mL,人工污染阪崎肠杆菌的婴儿配方奶粉的检出限为1100 CFU/g.采用同样方法提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时3 h.[结论]因此,LAMP检测婴儿配方奶粉中的阪崎肠杆菌灵敏度高,耗时短,方法简便.     

坂崎肠杆菌DNA提取方法比较和增菌研究

利用坂崎肠杆菌对婴儿配方奶粉进行人工污染,增菌培养,在不同的增菌时间用FTA滤膜法[1]、热裂解法、试剂法、试剂盒法4种不同的方法提取坂崎肠杆菌DNA,进行PCR检测,检出限为分别为1.5、2.5、2.0、2.0 cfu/100 g;由于4种方法的灵敏度不同,所以4种方法能检测出该菌的增菌时间也不一样,实验结果显示FTA滤膜法、热裂解法、试剂法、试剂盒法分别增菌2、6、4、4 h后分别达到15、2.5×105、2.0×104、2.0×104cfu/mL能检出。     

液相色谱-高分辨串联质谱法测定奶粉中A2 β-酪蛋白及β-酪蛋白与乳清蛋白含量关系的研究

目的：建立奶粉中A2 β-酪蛋白分离定量的液相色谱-高分辨串联质谱法，并利用婴儿配方奶粉中酪蛋白、乳清蛋白和总蛋白含量的关系，间接得到乳清蛋白含量。方法：样品经前处理后，采用ACQUITY UPLC HSS T3柱（100 mm×2.1 mm×1.8 μm），0.1%甲酸-水和乙腈为流动相，梯度洗脱分离。多反应离子监测模式定量测定其中的A2 β-酪蛋白特征肽。结果：在0.02~2.0 μmol/L范围内线性关系良好（r=0.993 8）。在低、中、高三水平加标试验中，回收率在94.9%~98.7%，相对标准偏差在1.7%~3.7%，检出限为0.80 mg/100 g，可满足对奶粉中A2 β-酪蛋白定量要求。采用该法对市售11批声称A2奶粉和18批未声称A2奶粉（以下简称A2奶粉和普通奶粉）中A2 β-酪蛋白进行测定。结论：A2奶粉中A2 β-酪蛋白占总β-酪蛋白含量的86.2%~98.7%，而普通奶粉则低至20.0%~50.0%。另外，乳清蛋白含量的间接测定值和理论计算值经统计分析，无明显差异（P>0.05），为分析婴儿配方奶粉中乳清蛋白含量是否符合国标要求提供参考。     

配方奶粉中维生素C检测方法探讨

本文就配方奶粉中维生素C检测方法进行了探讨,对实验中所要用到的主要仪器及试剂作了详细的介绍,并列举样品预处理和测定两个方面的步骤措施,最后还针对实验所得的结果进行了讨论,以期能为在配方奶粉中更易检测维生素C而提供参考借鉴。     

羊奶营养研究进展及羊乳基婴儿配方奶粉开发

牛奶和羊奶都可以作为婴儿配方奶粉的乳基来源,但二者的营养素构成和维生素和矿物质含量存在明显的差异。羊奶比牛奶含有较少的αs1酪蛋白和较多的β酪蛋白,非蛋白氮含量也高于牛奶。羊奶中的脂肪球要显著小于牛奶,小直径的脂肪球分布明显高于牛奶,脂肪球总表面积明显大于牛奶,山羊奶中还含有很高比例的短链和中链脂肪酸、共轭亚油酸和长链多不饱和脂肪酸,而且ω-3 长链多不饱和脂肪酸含量高于牛奶。羊奶中的低聚寡糖含量比牛奶中的更多,且种类和结构也更接近于人乳寡糖。羊奶作为乳基的婴儿配方奶粉较之牛乳基配方奶粉具有特有的营养特性和潜在的健康益处。     

HPLC法测定赣南脐橙中维生素B1、维生素B2含量

目的：建立2种不同的HPLC法测定赣南脐橙中维生素B1及维生素B2含量,通过比较,得出适合赣南脐橙维生素B1及维生素B2含量测定的最佳方法。方法：色谱条件：色谱柱：C18反相色谱柱（粒径5μm,150 mm×4.6 mm）;流动相：0.05mol/L乙酸钠溶液-甲醇=65∶35（pH值4.6）;流速1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长：维生素B1激发波长375nm、发射波长435nm;维生素B2激发波长462nm、发射波长522nm。结果：维生素B1和维生素B2线形范围是0.01～1.00μg/mL,最低检出限为0.001μg/mL;果皮、果肉维生素B1平均回收率分别为95.3%、92.98%;果皮、果肉维生素B2平均回收率分别为89.1% 、84.6% 。结论：此方法简单、准确,可用于测定赣南脐橙中的维生素B1及维生素B2含量。     

河套地区小麦粉营养品质分析及小麦粉营养化发展对策

目的：了解我国河套地区小麦粉营养品质。方法：选取当地2个不同季节生产的特色面粉6种,对其维生素和矿物质进行分析。结果：12个样品维生素E含量为0.061~0.404 mg/100 g,维生素B1、维生素B2、烟酸含量分别为0.139~0.230 mg/100 g、1.380~1.900 mg/100 g、3.425~4.350 mg/100 g,维生素B2和烟酸含量远高于我国小麦粉平均水平。铁、钙、磷、镁含量偏低,但硒含量为0.043~0.250 mg/kg,已达到富硒农产品标准。结论：河套地区小麦粉含有丰富的维生素B2、烟酸、硒,本研究就小麦粉的营养化发展提出对策建议。     

婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的GC-MS法测定及暴露危险分析

目的：建立婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的气相色谱—质谱联用（GC-MS）测定方法,并对部分市售婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的含量进行调查。方法：用乙醚+石油醚（1∶1）提取奶粉样品中脂肪,以1 mL甲醇钠甲醇溶液（0.25 mol/L）将脂肪中的3-氯丙醇酯（3-MCPD酯）水解成3-氯丙醇（3-MCPD）并用硅藻土小柱净化后,经七氟丁酰基咪唑衍生,再用选择离子监测的气相色谱—质谱联用法测定,采用内标法定量。结果：3-MCPD酯在250～5 000 μg/kg范围内线性良好（r>0.999）,3个浓度水平下加标回收率为71.5%～99.6%,相对标准偏差为2.3%～6.0%。20份奶粉样品中,检出率65%,含量为0.26～0.97 mg/kg脂肪、0.042～0.22 mg/kg样品。不同阶段统计婴幼儿配方奶粉平均暴露量,一阶段 3.32 μg/（kg·bw）、二阶段 2.42 μg/（kg·bw）、三阶段 2.72 μg/（kg·bw）、四阶段 0.23 μg/（kg·bw）。结论：该方法灵敏度高、定量准确度,适合婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的检测。     

HPLC法同时测定草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B

为建立高效液相色谱法同时测定草苁蓉干燥全草中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B的含量的分析方法,采用色谱柱:Klimail 100-5 C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:以乙腈为流动相A,以0.5%甲酸水溶液为流动相B,梯度洗脱条件:0~12 min,15%A;12~30 min,15%~20%A;30~40 min,20%~25%A;40~45 min,25%~30%A;45~60 min,30%~100%A;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:260 nm;柱温:30℃;进样量:20μL。得到草苁蓉纳拉苷的线性范围为4.688~150μg·mL^-1(R²=0.999 5);草苁蓉苷B的线性范围为3.438~110μg·mL^-1(R²=0.999 1);平均回收率分别为97.86%、96.55%;RSD分别为1.01、1.23(n=9)。本研究利用高效液相色谱法建立了同时测定草苁蓉全草中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B两种组分的方法。方法学的验证结果证明,该方法简便、快捷,重现性好,可以用于草苁蓉中草苁蓉纳拉苷和草苁蓉苷B两种组分的含量测定。     

婴儿喂养方式的改变对肠道菌群多样性的影响

目的分析婴儿喂养方式的改变对肠道菌群的影响。方法招募45名(月龄1~3个月)志愿者,随机分为三组(母乳组:母乳喂养;对照组:干预后市售普通配方奶粉喂养;产品组:干预后试验配方奶粉喂养),利用平板计数和PCR-DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术分析婴儿干预前和干预后其肠道菌群的变化。结果饮食干预后,婴儿肠道内双歧杆菌的数量,母乳组和产品组比较差异无统计学意义(t=0.510,P=0.614),产品组和对照组比较差异存在统计学意义(t=2.541,P=0.016);婴儿肠道内微生物的多样性指数,母乳组和产品组都显著增高(P≤0.05)。结论产品组配方奶粉是一款利于婴幼儿肠道有益菌增殖的产品。     

蝙蝠蛾拟青霉液体发酵工艺优化及菌丝体腺苷含量的检测

通过摇瓶液体培养的方法,以菌丝体生物量为主要考察指标,筛选蝙蝠蛾拟青霉PH-2菌株液体发酵的培养基成分和条件。进一步采用正交试验,以菌丝体生物量和腺苷含量为联合指标,确定PH-2菌株液体发酵高产菌丝体和腺苷的培养基配方。通过试验获得的最佳配方为：玉米淀粉40g/L,葡萄糖5g/L,玉米浆25g/L,硫酸镁·7H₂O 1g/L,磷酸二氢钾1g/L,硫酸锌1.5g/L,维生素B1 25mg/L;培养条件为：初始pH 6.0,装液量150mL/500mL,接种量8%（V/V）,温度26℃,转速120r/min,培养7d。在该工艺下,菌丝体生物量达到25.2g/L。应用高效液相色谱（HPLC）法,检测到菌丝体中腺苷含量为2.76mg/g。该方法简便、快速、准确,可作为蝙蝠蛾拟青霉菌丝体或其相关产品中腺苷的检测手段。本工艺的优化试验获得了较高的菌丝体收率,菌丝体质量良好。     

猴B病毒抗体ELISA检测方法的建立和应用研究

目的　建立猴B病毒抗体ELISA检测方法。方法　采用方阵滴定法 ,比较不同血清稀释度、3种酶结合物、2种抗原对检测结果的影响 ,与国外同类参比实验室进行检测结果的比较 ,确定ELISA法的最佳实验条件。结果　HSV抗原包被浓度 10 μg ml,抗人IgG HRP为 1∶2 0 0 0时 ;或B病毒抗原包被浓度 10 μg ml,抗人IgG HRP为1∶4 0 0 0时 ,阴性血清和阳性血清的A值差距最大。与国外B病毒检测专业实验室的检测结果符合率分别为98 0 2 %和 97 5 2 %。结论　建立了猴B病毒抗体的ELISA检测方法 ,提高了检测方法的准确性。     

大蜡螟饲料配方的优化

大蜡螟Galleria mellonella L.广泛应用于昆虫生理生化、杀虫剂筛选和昆虫毒理学等多个领域,因此,选择物美价廉的饲料对其进行大规模饲养具有重要的现实意义。选取占饲料成本份额较高的奶粉和酵母粉作为研究对象,分5组配方进行大蜡螟的饲养实验。通过对每组各个历期和产卵数进行比较,获得了优化后的饲料配方:奶粉50g、酵母粉20g、面粉100g、麦麸100g、玉米粉100g、蜂蜡50g、蜂蜜50g及甘油60g;并首次比较了奶粉和酵母粉在大蜡螟发育过程中的作用,进而明确了酵母粉对大蜡螟幼虫期、蛹期的发育和繁殖能力具有重要的促进作用;而奶粉对幼虫期发育和繁殖能力具有促进作用,但作用小于酵母粉;同时两者与成虫的寿命无关。     

野生湖南山核桃的营养成分研究

对野生湖南山核桃果仁的油脂及其组分、总糖、蛋白质及其氨基酸组成、维生素E、维生素B1、钙、铁、锌、铜、钼等元素含量进行分析.果仁中粗脂肪、总糖、粗蛋白质、维生素E、维生素B1的含量分别为56.57%、3.51%、8.18%、3.06 mg/100 g和1.19 mg/100 g;钙、铁、锌、铜、钼元素含量的含量分别为114.6 mg/100 g、3.26 mg/100g、5.14 mg/100g、1.69 mg/100g和0.12 mg/100g.果仁的脂肪主要由软脂酸、油酸,亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸组成,其含量分别为6.41%,71.80%,19.28%,1.82%和0.69%;果仁中蛋白质氨基酸有16种,其中9种人体必需氨基酸都含有.     

100%苹果汁对甘肃省陇西县9~12岁儿童营养改善的干预评价

目的：研究100%苹果汁对贫困农村儿童营养的改善作用,探讨如何发挥社会组织在改善儿童营养工作中的新途径和新作用。方法：抽取甘肃省陇西县6所农村小学3~6年级452名学生作为研究对象,随机分为干预一组（n＝175）、干预二组（n=144）和对照组（n＝133）,干预一组每人每日饮用250mL的100%苹果汁、干预二组每隔1天饮用100%苹果汁、对照组保持正常饮食,干预期4个月;干预前后分别对受试者进行72 h膳食调查。结果甘肃省陇西县9~12岁农村儿童营养状况不容乐观,能量、蛋白质、维生素A、维生素B1、B2及钙的摄入量均有不同程度的缺乏。干预一组干预前后,平均每人每日能量、维生素B1、B2、维生素C及钾、钙、铁的摄入量均增加,差异均有统计学意义;干预二组干预前后,平均每人每日能量、维生素B1、B2、维生素C及钾、钙、铁、的摄入量均增加,差异均有统计学意义。对照组2次调查结果发现,平均每人每日能量、维生素B1、B2、及钾的摄入量均增加,钠的摄入量减少,差异均有统计学意义。结论：甘肃省陇西县农村 9~12岁儿童营养状况不容乐观,存在营养不均衡状况,虽营养状况良好的人群占大数,但也存在一定比例的营养不良和超重肥胖的情况。苹果汁的摄入能调整膳食结构,改善营养状况,促进能量、维生素和矿物质的吸收,这为高效实现农村义务教育学生营养干预提供了新方法和新思路。     

中国农村2~5岁留守儿童膳食营养状况

目的：了解2013年中国农村2~5岁留守儿童膳食和能量、营养素的摄入特点。方法：采用多阶段分层整群随机抽样的方法在中国30个省55个监测点开展2013年中国0~5岁儿童乳母营养与健康状况监测调查,利用连续3天24小时膳食回顾法和称重法进行膳食调查,根据《中国食物成分表》计算儿童每人每日食物摄入量、能量及营养素摄入量,并根据《中国居民膳食指南（2016）》《中国居民膳食营养素参考摄入量（2013）》作出评价。结果：贫困农村、父亲外出打工、母亲低文化水平的留守儿童,其谷类摄入量分别高于普通农村、双亲外出打工、母亲中等文化水平,家庭低收入的留守儿童蔬菜、水产品和畜禽肉的摄入量低于家庭高收入,差异均有统计学意义。2~3岁组的留守儿童中水果、蔬菜、蛋类、水产品、大豆及其制品、奶及奶制品摄入不足的比例分别为88.1%、95.7%、56.2%、91.9%、76.2%、100%;4~5岁组的留守儿童中水果、蔬菜、蛋类、水产品、大豆及其制品、奶及奶制品摄入不足的比例分别为99.0%、97.1%、65.7%、93.1%、89.2%、97.1%。贫困农村、父亲外出打工的留守儿童,其能量、碳水化合物、维生素B1分别高于普通农村、双亲外出打工,不同的收入水平组间,留守儿童的钙、铁、锌、硒、维生素B1、尼克酸的摄入量不同,差异均有统计学意义。2~5岁的留守儿童,有超过97%的人群存在钙摄入不足的风险,超过60%的人群存在维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素C的摄入不足风险。结论：中国农村2~5岁留守儿童的谷类、畜禽肉摄入较多,水果、蔬菜、蛋类、奶及奶制品等摄入不足,钙、维生素A、维生素B2等主要营养素缺乏,贫困农村、双亲外出打工、家庭年人均低收入与留守儿童营养状况有关,仍需加强关注。     

罗布麻叶配方颗粒与传统汤剂HPLC指纹图谱的相关性

建立了罗布麻叶传统汤剂的HPLC指纹图谱,并对其与配方颗粒的HPLC指纹图谱相关性进行了评价.采用Kromasil 100-5-C18,250 mm×4.6mm,5 μm的色谱柱,以2g/L H3PO4-乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,检测波长为360 nm,柱温40℃,流速1.0 mL/min,进样体积10 μL.结...     

北京市朝阳区中小学生膳食营养摄入状况监测与分析

目的：调查2015年北京市朝阳区中小学生膳食营养摄入状况。方法：将“2015年北京市学生营养与健康状况监测”中朝阳区170名中小学生作为研究对象,采用连续3d 24h膳食回顾和称重法进行膳食调查,依据中国食物成分表计算中小学生平均每日食物消费及营养素摄入状况。结果：北京市朝阳区中小学生谷薯杂豆类、蛋及蛋制品、食用油和盐的平均每日摄入量为较为适宜,蔬菜、水果以及大豆类为推荐摄入下限值的50%～75%;奶及奶制品、水产类和坚果类摄入量分别为推荐摄入下限值的40.3%和36.8%（＜11岁组和≥11岁组）、34.0%和14.6%（＜11岁组和≥11岁组）以及26.6%和7.0%（＜11岁组和≥11岁组）;畜禽肉类高达推荐摄入上限值的130.3%和191.0%（＜11岁组和≥11岁组学生）。能量的平均摄入量为1 628.1 kcal,蛋白质、脂肪和碳水化合物的平均摄入量分别为60.0、67.7、203.1g,供能比分别占14.6%、37.2%和48.2%。中小学生维生素A、维生素B1、维生素B2和维生素C平均摄入量达到推荐摄入量（RNI）的比例分别为35.3%、20.6%、28.8%和41.8%。钙的摄入状况最差,仅1.2%的学生达到了RNI;硒、铁和锌平均摄入量达到RNI的比例分别为38.8%、75.3%和75.9%。结论：北京市朝阳区中小学生膳食结构不够合理、微量营养素摄入不足的情况普遍存在。     

奶粉伴侣中微生物污染特点分析

目的：了解婴幼儿经常食用的奶粉伴侣中微生物的污染状况。方法：2016年在我国8个省（直辖市）采集奶粉伴侣864份,按照食品安全国家标准方法检测菌落总数、大肠菌群、阪崎肠杆菌、单核细胞增生李斯特菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌。结果：104%（9/864）的奶粉伴侣菌落总数＞104 cfu/g,012%（1/864）大肠菌群＞102 cfu/g,未检出单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌,但1份样品检出阪崎肠杆菌。结论：奶粉伴侣微生物污染水平较低。     

均匀设计法优化灰树花深层培养基配方

系统研究了碳源、氮源、无机盐、维生素等培养基因素对灰树花深层发酵菌丝体产量的影响 ,并通过均匀设计法优化了发酵培养基配方。结果表明 :4 6 %玉米粉、3 5 %豆饼粉、0 1%葡萄糖、0 32 %KH2 PO4 、0 0 1%MgSO4 、少量VB1的培养基配方可使菌丝体产量达到最大。采用此配方试验 ,菌丝体产量平均值达 1 77± 0 0 6g/10 0mL。