动物蛋白水解的复合氨基酸含量测定方法的探讨——克氏法、甲醛法与氨基酸分析仪测定结果的比较

<正> 氨基酸的含量测定,在仪器分析法出现以前,都是以化学方法——克氏法与甲醛法进行测定的。化学方法只能测定检品中的总氮量和氨基氮量,而氨基酸分析仪能测出检品中各种氨基酸的含量,这是化学方法所不可能做到的。但氨基酸分析仪价格昂贵,小厂小单位买不起,而不便自行使用。将检品送检验中心测定,若不能及时得到检验结果,生产就要受影响。因此,用化学方法测定复台氨基酸含量对小厂小单位来说,还是     

香椿等植物食用部分氨基酸含量及营养价值评价

利用日立835—50型高效氨基酸自动分析仪,对香椿头,荠菜、蕨菜、榆钱、马兰头、栀子花等植物食用部分进行分析,得出各自6N盐酸水解物中十七种氨基酸含量。测定情况及结果如下。     

日立835-50型氨基酸分析仪故障一例分析

<正> 日立835 50型氨基酸分析仪是国内分析氨基酸的主要仪器。我们这台仪器是79年购进,82年正式开始使用,至今已近十年。使用期间出现过许多故障,但从未出现这次这样的现象,使我们在排除故障的过程中走了不少弯路。现将分析排除故障过程归纳成以下几点,供同行们参考。     

放牧和季节性增加降水对毛足棒角蝗发育与存活的影响

【目的】降水和放牧是驱动草原蝗虫发生的重要因素,但其如何发挥作用尚存在争论。本文研究放牧和季节性降水增加的耦合效应通过改变栖息环境中食料植物的养分含量来驱动草原蝗虫灾害发生的生理与生态学机理。【方法】在野外设置放牧和季节性增加降水的交叉处理,利用室外笼罩和室内饲养的方法研究在不同放牧和降水处理下毛足棒角蝗Dasyhippus barbipes发育与存活的响应规律,分析放牧和季节性降雨量变化耦合对毛足棒角蝗发生程度的影响。【结果】放牧极显著地(P0.01)降低羊草Leymus chinensis叶片中可溶性糖态C和可利用C的含量,但对淀粉态C和总C的含量无显著影响;极显著地增加氨基酸态N、可利用N和总N含量,但对蛋白质态的N无影响;显著增加可利用的C︰N比值。增加降水的作用在放牧和不放牧间有波动,对可溶性糖态C和氨基酸态N有降低的趋势,但没有达到显著水平(P0.05)。放牧会极显著地(P0.01)降低毛足棒角蝗室内雌虫从5龄到成虫过程的死亡率,缩短发育历期,增加生长速率,增加成虫体重。放牧处理在野外笼罩实验中也表现出增加存活率和发育速率。降水对该蝗虫各特征的影响均不显著(P0.05)。【结论】适当放牧会降低植物中可溶性糖态C,增加氨基酸态N的含量,有利于毛足棒角蝗的生长、发育、存活,促进毛足棒角蝗种群发生。     

冷藏对米蛾卵液中游离氨基酸变化的影响

赤眼蜂的工厂化繁育常使用米蛾卵作为中间寄主卵,为了满足赤眼蜂生产的需要,需对米蛾卵进行冷藏,但冷藏米蛾卵影响赤眼蜂的生长发育。利用核磁共振技术(NMR)测定了新鲜米蛾卵(U)、新鲜杀胚米蛾卵(CK)、杀胚米蛾卵在4℃条件下冷藏15 d(N15)、30 d(N30)、45 d(N45)和60 d(N60)后,米蛾卵卵液游离氨基酸种类和含量的变化。结果共鉴定到24种游离氨基酸及其衍生物,包括昆虫发育必需的10种氨基酸。U和CK之间的游离氨基酸组分没有显著差异,N15、N30和N45游离氨基酸总量随冷藏时间的延长而显著升高,N60中的氨基酸总量与N45比较没有显著增加。对24种游离氨基酸及其衍生物的含量进行主成分分析,结果表明丙氨酸、谷氨酰胺、鸟氨酸、天冬氨酸、组氨酸、赖氨酸、丝氨酸、焦谷氨酸等8种氨基酸的含量随冷藏时间的增加而有着显著的变化,其中,丙氨酸变化幅度最为明显,随着冷藏时间的增加,含量从0.1624 mmol/L增加到8.6192 mmol/L;组氨酸在N30、N45和N60处理之间显著下降,从0.7553 mmol/L降低到0.2495 mmol/L。因此,冷藏会导致米蛾卵内游离氨基酸含量发生一定变化,这可能是冷藏米蛾卵影响赤眼蜂生长发育的重要原因之一。     

阿胶,新阿胶,黄明胶,马皮胶,杂皮胶的质量对比研究：Ⅰ.氨基酸分析

本文用835-50型氨基酸自动分析仪测定了阿胶、新阿胶、黄明胶、马皮胶和杂皮胶中游离氨基酸和总氨基酸的含量,并计算出游离氨基酸、总氨基酸按侧链基团分类和按医药用途分类的相对含量。结果表明,各种氨基酸含量一般以驴皮胶为较高,但与其他几种胶比较并无显著差异,似可以猪皮马皮、牛皮代替驴皮。这也说明,单从氨基酸的含量来鉴别胶的种类和质量似乎不可行。     

混合醇体系中测定氨基酸的茚三酮光度法

氨基酸一般利用自动分析仪定量测定,但需高精密仪器,而基层研究单位一般难以采用,而且分析也不需要如此精密。利用茚三酮能够定量测定氨基酸,除脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮形成黄色化合物外,其它所有氨基酸均与茚三酮反应形成蓝紫色物质,溶液颜色深浅与氨基酸含量成正比。据此本文对氨基酸的茚三酮光度法测定进行了研究和改进。在混合醇体系中以醋酸钠-醋酸为缓冲溶液,加入抗坏血酸以增加反应的灵敏度,100℃水浴20分钟完成显色反应。并对酸度、试剂用量、反应时间等因素进行了研究,拟定了用于混合氨基酸总量测定的操作程序。     

马尔堡病毒GP蛋白C肽的抑制活性及作用机理研究

目的:研究马尔堡病毒(MARV)包膜糖蛋白(GP)C肽的抗该病毒进入活性及初步作用机制。方法:选取MARV的GP2蛋白上CHR区域序列(611～637残基),合成该序列多肽(C肽)及突变体,利用pVAX1-MGP与pNL-4.3-Luc-R-E-质粒包装假病毒体系,测定各肽对马尔堡假病毒融合的抑制活性,利用圆二色谱、凝胶色谱分析C肽及其突变体对MARV的N肽的相互作用。结果:C肽对马尔堡假病毒融合抑制的IC_(50)为32.67μmol/L,C肽突变体的IC_(50)为9.61～33.47μmol/L,抑制活性高于C肽或与其相当;C肽与N肽形成双螺旋结构,在C肽的7元螺旋体的b、f、c、g位引入离子相互作用氨基酸可提高多肽本身的α螺旋结构含量,一些突变可提高复合物的α螺旋结构含量,但C肽与N肽混合后形成的复合物含量不高。结论:MARV的GP蛋白C肽与N肽相互作用较弱,C肽的抗病毒活性较弱,但改造后可提高活性。     

六种中药渣的营养成分

随着中药资源的大规模开发与利用,中药加工企业产生了大量的中药渣。为了探究中药渣的再利用价值,本实验测定了六种市场常见中药渣中的常规营养成分、微量元素和氨基酸的含量。结果表明,绞股蓝药渣中粗蛋白质含量最高(16.46%),妇科千金片药渣中的粗灰分(12.56%)、粗纤维(70.70%)、酸性洗涤纤维(56.35%)和中性洗涤纤维(44.86%)含量最高,各种药渣中氨基酸含量为5.92%~14.92%。上述数据表明,六种中药渣均具有一定的营养价值,可用于开发畜禽饲料添加剂的原料。     

遮荫对撂荒地草本群落生物量分配和养分积累的影响

城市化进程导致农村出现大量的撂荒地,了解撂荒地不同利用方式下的植物群落动态可为撂荒地利用与管理提供重要的基础数据。撂荒地栽植与没有栽植林木是否影响林下草本群落的生物量分配与养分积累仍有待于研究。采用50%—95%遮荫网处理,模拟林下光环境对撂荒地草本群落生物量分配和养分积累特征的影响。结果表明:随着遮荫强度增加,群落总生物量著降低。遮荫处理显著降低了地上生物量及其分配比例,而对根部生物量的影响不显著,却显著提高了根部生物量的分配比例。光照强度与总生物量和地上生物量呈极显著正相关。遮荫处理显著降低了群落地上部分C含量,显著提高了P、K含量,对N含量影响不显著;遮荫处理也显著提高了根部C、N、P含量,但对K含量的影响不显著。随遮荫强度增加,地上部分C、N、P、K的分配比例显著降低,根部C、N、P、K的分配比例显著提高。相关分析表明,光照强度仅与地上部分N含量、根部C、N、P含量极显著相关。遮荫处理显著降低了地上部分C∶N、C∶P和地下部分的C∶N,但对地下部分N∶P、C∶P影响不显著。可见,遮荫将影响撂荒地草本植物群落地上部分生物量和养分积累,而根部对光照强度改变的响应不敏感。     

兴安落叶松游离氨基酸的动态变化与损伤因子的关系

为研究不同损伤因子及其不同损伤程度对落叶松游离氨基酸组分及其含量的影响,用剪叶和落叶松毛虫(Dendrolimussuperans)取食损伤兴安落叶松(Larixgmelinii)幼苗,使用HPLC柱前AccQ.Tag衍生法测定针叶内游离氨基酸的组成及含量的变化。结果表明,松针中含有17种游离氨基酸,以苯丙氨酸含量最高,损伤15d后,剪叶4枝比对照增加36.6%,虫害4枝增加的百分率达到98.3%。剪叶4枝15d后及虫害4枝5d后,损伤25%与50%之间氨基酸总含量差异显著(P0.05),且昆虫取食4枝25%、50%、75%后松针内游离氨基酸总含量的变化趋势与剪叶处理后总氨基酸含量的变化一致,均在处理10d后呈现较高的含量,虽虫害后的氨基酸总含量高于剪叶损伤后的总含量,但二者之间差异不显著。剪叶4枝、8枝、12枝3个损伤程度后针叶内的游离氨基酸含量无显著差异,说明剪叶4枝即能超过落叶松的耐受阈值,达到防御诱导效应。两种处理下多种游离氨基酸的含量均有下降,其中8种氨基酸含量存在显著差异(P0.05),即丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、赖氨酸和苯丙氨酸。表明人工模拟剪叶的损伤方式与虫害都可诱导松树氨基酸组分及含量的变化,而间接影响害虫的生长发育。     

皮屑蛋白粉中氨基酸组成与评价

测定了用皮革工业下脚一皮屑蛋白粉中氨基酸含量,与常用动物蛋白源比较发现,皮屑蛋白是一种不完全蛋白质,其氨基酸组成很不平衡,但其限制性氨基酸,赖氨酸和蛋氨酸的含量与其他几种动物蛋白源具有互补性,使用时宜同其他动、植物蛋白源或单体氨基酸相配合,以提高其生物价。     

内蒙古典型草原放牧压力评价及土壤N储量响应

放牧是草原生态系统的重要干扰,是草原氮循环的重要影响因素。为了揭示放牧对土壤N储量的影响,在内蒙古典型草原,基于单位草原面积草原载畜量和单位草原生产力,建立了放牧压力评价模型,并利用1990—2011年以县为单位统计的放牧牲畜数据和2001—2011每年合成的MODIS-NDVI_(max)影像数据评估了放牧压力的空间分布。基于2011年野外调查的95个样点和2010年调查的41个样点数据,对处于低放牧压力(LG),中放牧压力(MG)和高放牧压力(HG)的样点数据进行了统计分析。结果表明:放牧压力对土壤容重(BD),土壤全碳(TC)含量和土壤全氮(TN)含量具有显著影响,特别在土壤表层(0—10cm),土壤容重、TC含量和TN含量在LG,MG和HG之间存在显著差异。TC含量和TN含量随放牧压力增加而降低,BD随放牧压力增加而增加;黏粒含量(CC)在3个放牧压力梯度上不存在显著差异;土壤N储量表现出和TN含量相似的变化特征,随土壤深度增加而降低,随放牧压力增加而减少,在0—50cm范围内,土壤N储量在LG、MG和HG之间存在显著差异(2011,P0.05;2010,P0.1)。重度放牧是草原生态系统氮损失的主要因素之一,降低放牧压力有助于降低草原氮损失和恢复植被生产力。     

褐飞虱对游离氨基酸的利用

通过测定褐飞虱虫体、蜜露及稻株中16种游离氨基酸的含量及百分率组成,并进行对比分析,初步探讨了褐飞虱对游离氨基酸的利用问题。虫体、蜜露和稻株中含量最多的氨基酸分别为丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸。褐飞虱大量吸收的氨基酸是丙氨酸,稻株中含量最少的蛋氨酸和酪氨酸,在蜜露中检测不到,认为可全部被吸收利用;相反,天门冬氨酸则很少被利用,谷氨酸被利用的相对量也不多;其他氨基酸或多或少地为褐飞虱所利用。     

低钾胁迫对不同基因型水稻苗期根系生长和内源激素含量的影响

以2个耐低钾基因型水稻N18、N19和2个低钾敏感基因型水稻N27、N28为材料,采用溶液培养试验,研究低钾胁迫对其苗期根系生长和内源激素含量的影响。结果表明,低钾胁迫下,水稻根长、地上部干重和根干重均降低,但N18和N19显著高于N27和N28。低钾胁迫使4个基因型水稻的根冠比增大,而各基因型之间差异不显著。低钾胁迫下,水稻根中IAA、GA₁和ZR含量均减少,ABA含量增加;N18、N19根中IAA、GA₁和ZR含量都高于N27、N28。此外,低钾胁迫使水稻根中IAA/ABA、ZR/ABA、GA₁/ABA值降低,但N18、N19的上述比值高于N27、N28。     

基因工程产品的N末端均一性及其中残留的痕量杂质蛋白的分析

利用Edman降解法,辅之以邻苯二甲醛阻断等技术,在蛋白／多肽测序仪－PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰索、α 2干扰素和白细胞介素－2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析的原始资料,对上述蛋白质样品的N末端均一性进行了细致分析。在此基础上,借助序列库检索比较等计算机方法检定了这些样品中可能残留的痕量杂质蛋白,并对分析痕量残留蛋白的一般方法进行了讨论。分析结果表明重组人丫干扰素N束端均一;而a 2干扰素和白细胞介素一2的N末端不均一,其中主要含大致等量的N末端带有蛋氨酸与不带蛋氯酸的两种分子,仅在个别送检样品中发现痕量N末端丢失一个氨基酸的分子。通过在序列库中检索所测出的一段八肽疑似序列,推断在一批送检样品中含有痕量的卵清溶菌酶,经进一步纯化样品并测序后得以证实。本文结果为进一步优化和确定有关产品的生产流程并建立产品质量控制的标准提供了重要依据。     

灵芝富碘实验中氨基酸含量的探讨

在灵芝TW液体深层富碘培养过程中,碘元素能显著提高灵芝菌丝体中氨基酸的含量,不富碘的灵芝菌丝体氨基酸含量为26.95％,在培养基中添加0．1％碘化钾而获得的富碘灵芝菌丝体及富碘锌锗硒灵芝菌丝体氨基酸含量分别为35．37％、35．86％,另外其氨基酸的组成也相对发生了显著的变化,因而推测碘元素可能是灵芝中某些氨基酸含成过程中的辅基或是其激活因子。     

氮素水平对花生氮素代谢及相关酶活性的影响

 在大田高产条件下研究了氮素水平对花生(Arachis hypogaea)可溶性蛋白质、游离氨基酸含量及氮代谢相关酶活性的影响, 结果表明, 适当提高氮素水平既能增加花生各器官中可溶性蛋白质和游离氨基酸的含量, 又能提高硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸脱氢酶等氮素同化酶的活性, 使其达到同步增加; 氮素水平过高虽能提高硝酸还原酶和籽仁蛋白质含量, 但谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸脱氢酶(GDH)的活性下降; N素施肥水平不改变花生植株各器官中可溶性蛋白质、游离氨基酸含量以及硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸脱氢酶活性的变化趋势, 但适量施N (A2和A3处理)使花生各营养器官中GS、GDH活性提高; 氮素水平对花生各叶片和籽仁中GS、GDH活性的高低影响较大, 但对茎和根中GDH活性大小的影响较小。     

水稻品种对白背飞虱的耐虫性反应及稻株营养成分的变化

测定了不同水稻品种对白背飞虱的耐虫性反应及稻株营养成分的变化。结果表明,中抗品种N22、绿源占1号、Mudgo、K89—B5和94D—22具有较高的耐虫性,抗虫品种Ptb33和中组74以抗生性为主,感虫品种秀水11、汕优63和感虫对照品种TN1不具有耐虫性,在白背飞虱为害后,耐虫品种稻株中全N量和可溶性总糖量增加,N／糖比变化率明显下降;而感虫品种的全N量和可溶性总糖量下降,N／糖比变化率明显增加,不同品种受害后体内大多数氨基酸含量均有不同程度的增加,但品种间氨基酸含量减少的种类不同,TN1品种只有丙氨酸含量减少,N22品种除丙氨酸外蛋氨酸和苏氨酸含量也明显减少,Ptb33品种仅精氨酸略有减少。     

温州蜜柑幼果天冬酰胺代谢的研究

天冬酰胺是温州蜜柑(Citrus unshiu Marc.)幼果中游离氨基酸的主要成份。8月初,随着果皮总氮量的增加,天冬酰胺含量按指数律增加,表明了天冬酰胺可用作幼果氮素营养状况的指示剂。~(15)N数据表明,铵的最初同化是通过谷酰胺合成酶的催化,而在氮同化的最初阶段,形成天冬酰胺的活性强。利用切开的果实进行的定时实验中,硝酸盐比铵盐同化的程度低。但是,在定日实验中,通过根系所吸收的硝酸盐被同化的量比铵盐多。~(14)C-天冬酰胺迅速被代谢成不同的化合物,如天冬氨酸、酸性和中性化合物以及非醇溶性化合物。然而,天冬酰胺比天冬氨酸所形成的二氧化碳少得多。我们的试验结果表明,天冬酰胺不是一种最终产物,但是在幼果中为合成其他氨基酸和蛋白质提供氮和碳方面起了重要的作用。