高压灭菌对培养基成分的影响

综述了高压蒸汽消毒对培养基无机盐,碳水化合物,氨基酸、渗压剂、植物激素和培养基渗透压、ｐＨ值的影响,就如何缩小高压蒸汽消毒对培养基成分的影响,提出了一些建议。     

100～700 mL液体培养基的微波灭菌效果观察

为研究家用微波炉对少量液体培养基的灭菌效果,对100 -700 mL液体培养基采取微波分别进行灭菌,测定其灭菌时间,并对达到灭菌效果的培养基通过接种不同细菌进行质检.结果显示100、200、300、400、500、600、700 mL液体培养基分别在4.5、5.0、7.0、9.0、12.0、19.0、25.0 min达到最有效的灭菌效果.室温保存15 d仍无细菌生长.枯草杆菌黑色变种芽胞菌测试无菌生长.金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及普通变形杆菌在液体培养基里的生长现象、特种后细菌的菌落和形态染色特征及其生化反应均无明显差异.实验表明2 450 MHz,700 W的微波炉对100 - 700 mL的液体培养基不但能快速达到有效的灭菌效果,且营养成分不会被破坏.     

培养基灭菌程序的验证

目的:验证培养基的灭菌参数,使培养基的灭菌程序及灵敏度符合要求。方法:以2010年版中国药典中的检查方法为依据,检查培养基的灵敏度。结果:灵敏度检查符合要求。结论:通过此法验证的培养基的灭菌程序是是可行的。     

培养基灭菌程序的验证

目的:验证培养基的灭菌参数,使培养基的灭菌程序及灵敏度符合要求。方法:以2010年版中国药典中的检查方法为依据,检查培养基的灵敏度。结果:灵敏度检查符合要求。结论:通过此法验证的培养基的灭菌程序是是可行的。     

罗勒的组织培养和快速繁殖

1植物名称罗勒(Ocimum basilicum L.). 2材料类别顶芽或带腋芽茎段. 3培养条件基本培养基为MS培养基.(1)诱导愈伤组织培养基:MS 6-BA 4 mg·L-1(单位下同) NAA 0.1;(2)诱导丛生芽及生根培养基:MS 6-BA 3 NAA 0.5.以上培养基均含1%琼指、3%蔗糖,pH 5.6～5.8.高压灭菌锅中121℃下灭菌20 min.培养温度为23～24℃,光照时间12 h·d-1,光照度为1 000～1 500 lx.     

高温高压灭菌对MS培养基pH的影响

常规蒸气高温高压灭菌明显改变MS培养基的pH值。灭菌前营养液pH在5～7范围时,其平均降低值（-△pH）约为0．56。灭菌前pH为7～8或8～9时,则-△pH分别为0．87和1．13。文中还比较了灭菌时间、培养基体积、琼脂、脱脂棉、PVP、NaCl、CaCl2、蔗糖、活性炭等因素对灭菌过程中MS培养基pH改变的效应。     

一种有效地提高银杉人工菌根苗诱导率的方法

 银杉（Cathaya argyrophylla）是一种极其珍稀的濒危松科植物。该研究建立了一种有效的银杉人工菌根诱导技术。通过将银杉种子播种于琼脂培养基7 d后,切除1/5～1/3的 种皮以及胚乳,从而使银杉种子的发芽率达到60％以上;同时筛选出既适合外生菌根菌土生空团菌（Cenococcum geophilum）平铺扩展生长的要求,又能满足银杉幼苗生长的培养基 RM, 使银杉的侧根能最大程度地与菌丝接触,确保了菌根的诱导率;通过紫外线照射加70％酒精 或0.05%NaOCl的表面消毒的双重处理,使不能高压灭菌的容器达到表面消毒效果,同时验证了用该灭菌法既能达到完全的灭菌效果又不会对植物的生长产生不良影响,而且银杉小苗的菌根形成率达到87.5%。该方法对于银杉的菌根学研究以及其它基础研究具有实际应用价值     

培养基灭菌方式对细菌分离效率的影响

自然界蕴含大量未/难培养微生物,分离这些微生物对理论研究和资源开发具有重要意义。本研究使用高压灭菌和过滤除菌方式制备培养基,采用稀释涂布方法,从红树林灰泥样品中分离获得123株细菌,通过16S rRNA基因序列分析对其进行鉴定,进而探究培养基灭菌方式对细菌分离效果的影响。结果表明：过滤除菌培养基生长的单菌落数目（339±82）个显著多于高压灭菌培养基生长的单菌落数目（179±65）个;两种培养基分离细菌的群落结构在门、科和属分类水平上总体相似,但优势类群的数目和少数类群存在差异;过滤除菌培养基分离细菌的Shannon Wiener’s指数、均匀度、新种率、基因多样性均高于高压灭菌培养基,而其与近缘模式菌株相似度的平均值和中位数则低于高压灭菌培养基。因此,过滤除菌培养基分离获得细菌的多样性、均匀性和新颖性均高于高压灭菌培养基。本研究首次探究培养基灭菌方式对细菌分离效果的影响,具有更高分离效率的过滤除菌培养基为未/难培养微生物菌株资源获取提供了借鉴。     

高压蒸汽灭菌对麦康凯琼脂培养基质量的影响

目的探讨高压蒸汽灭菌对麦康凯琼脂培养基主要质量指标(p H、性能)的影响。方法配制p H为6.80、7.00、7.10、7.20、7.30、7.40、7.50、7.60、7.70、7.80的麦康凯琼脂培养基,经高压蒸汽灭菌后进行p H测定,并将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌接种于麦康凯琼脂培养基上,37℃培养24 h,观察不同p H对细菌生长的影响。结果高压蒸汽灭菌后麦康凯琼脂培养基p H降低0.30~0.50。p H为6.78~7.28时,大肠埃希菌生长率≥0.5;p H为6.93~7.39时,鼠伤寒沙门菌生长率≥0.5;不同p H的麦康凯琼脂培养基上金黄色葡萄球菌及粪肠球菌的生长指数均为0。结论高压蒸汽灭菌可影响麦康凯琼脂培养基的p H及性能。     

高压高温灭菌前后纳米氢氧化铝佐剂理化性质的对比研究

目的 对比高温高压处理前后纳米氢氧化铝佐剂的理化性质变化。方法 通过测定浊度、pH值和粒径对比121℃ 30min高压灭菌锅处理纳米氢氧化铝前后的变化。结果 浊度没有明显的变化,pH值在经过高温高压处理后有轻微的降低,粒径变化没有变化。结论 纳米化氢氧化铝佐剂在疫苗的制备过程中可以使用高温高压处理灭菌。     

遗传转化选择培养基的改良

用根癌农杆菌（Agrobacteriumtumefacirens）的Ti质粒进行植物基因转移的遗传操作过程中,必须配制含一定浓度卡那霉素（Km）和校等青霉素（Cb）的NBK和MS选择培养基。Km是遗传转化选择剂,Cb是剩余工程菌生长抑制剂k’,两者均不耐高温。高压灭菌后只能待琼脂培养基自然冷却到45”C左右（盛培养基的容器不烫手）时再另加入并摇匀,趁培养基尚未凝固这一段时间内及时分装到50～100ml的三角瓶中。显然,这在实际操作上较为麻烦：（回）培养基高压灭菌后必须随时观察它的温度变化;（2）安排稍有不周就会耽误其它事情;（3）时间太紧迫,…     

培养基微波灭菌法探讨

应用微波作为消毒灭菌方法,是近年来发展的一项新技术,已在食品工业和医药卫生的某些方面推广应用。本文试用微波对不耐高温或高压蒸气灭菌的含糖、血清等微生物培养基进行灭菌试验,结果报告如下。     

聚合物微流控芯片消毒灭菌技术研究进展

聚合物微流控芯片成本低、易加工,目前在医药、生物检测和化学合成等领域得到了普遍应用。以热塑性聚合物聚甲基丙烯酸甲酯(polymethylmethacrylate,PMMA)和热固型聚合物聚二甲基硅氧烷(polydimethy lsiloxane,PDMS)为基材的高分子聚合物材料因具有较好的生物相容性和光学透明性,已逐渐成为聚合物微流控芯片加工的主导材料,被广泛应用于生物医药类微流控芯片的制备。鉴于该类芯片应用场景的特殊性,需在使用前进行消毒灭菌处理以避免微生物干扰。目前,针对PMMA和PDMS的消毒灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌、电子束、60Co γ射线辐射灭菌、超临界二氧化碳灭菌、乙醇消毒、环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌、绿原酸消毒、清洗剂消毒。本文从基本原理、消毒灭菌方法、应用场景等方面,回顾和总结了相关技术在PMMA和PDMS基体微流控芯片中的实现方法,并在芯片材质、适用范围等方面分析了所适用的消毒灭菌方法,为以聚合物为基材的生物医药类微流控芯片的消毒灭菌提供有益参考。     

黄花石蒜的组织培养和植株再生

1植物名称黄花石蒜(LycorisaureaHerb.),又名忽地笑。2材料类别鳞茎。3培养条件(1)不定芽诱导培养基:MS+6-BA10mg·L-1(单位下同)+NAA0.5;(2)不定芽增殖培养基:MS+6-BA5+NAA0.5;(3)生根培养基:MS+IBA2。上述培养基均加入3%蔗糖和0.8%琼脂,培养基灭菌前pH5.8。培养温度为19￣21℃,光照时间为12h·d-1,光强为24￣30μmol·m-2·s-1。4生长与分化情况4.1不定芽的诱导将鳞茎用自来水洗净,剥去外层黑色鳞片,切去石蒜的根部和鳞茎的上半部分。将切留的鳞茎放进烧杯置于超净工作台中,先用70%酒精灭菌40￣50s,无菌水冲洗2遍,再用0.15%升汞…     

胰蛋白酶的高压灭菌

胰蛋白酶在酸性条件下经过高压灭菌,仍有活力.在细胞培养中,以这种方法对胰蛋白酶消毒比常规的过滤除菌更加简便,经济,安全可靠.     

高温灭菌操作中常见错误的分析

高温灭菌是指用热能杀死微生物。其原理是高温使原生质中的蛋白质变性、使酶失活,致使微生物死亡。高温灭菌主要有高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法和灼烧灭菌法几种。如果操作不当,即达不到预期的灭菌效果。现就常见错误分析如下。1高压蒸汽灭菌蒸汽灭菌属湿热灭菌,由于湿热灭菌有潜能存在,被灭菌物体的温度比蒸汽的低,蒸汽在其表面凝结成水,放出潜能,可迅速提高被灭菌物体的温度。又由于水和水蒸汽比空气的热容量大、导热快、穿透力强,所以,与干热灭菌相比,灭菌需要的温度低、时间短。由于高压蒸汽灭菌法水蒸汽的温度随其所受压力的…     

灭菌对杀菌剂药效的影响

灭菌会对杀菌剂的药效生产影响,实验表明,高压灭菌和常压灭菌对多菌灵,甲基托布津等杀菌的药效均会产生影响。     

半蒴苣苔的组织培养和快速繁殖

1植物名称半蒴苣苔(Hemiboea subcapitata). 2材料类别幼叶. 3培养条件(1)诱导不定芽分化培养基:MS 6-BA 0.1 mg·L-1(单位下同) NAA 0.1;(2)生根培养基:1/2MS 0.5%活性炭.以上培养基均加入3.0%蔗糖和0.7%琼脂,培养基灭菌前pH 5.8.培养室室温为(25±2)℃.光照12 h·d-1,光照度2 000lx左右.     

制备酵母菌实验材料的简易方法

笔者在实验中发现了以下制备酵母菌实验材料的简易方法。1　实验器材1 .1　药品 :玉米粉、琼脂、蔗糖和酵母粉。1 .2　器材 :小三角烧瓶 (带棉塞 )、烧杯、漏斗和电炉。1 .3　仪器 :培养箱、高压灭菌锅。2　操作步骤1 )先将三角烧瓶 (带棉塞 )、漏斗用报纸包好 ,然后进行高压灭菌 (1 2 1℃维持 2 0～ 3 0min)。2 )配制玉米粉培养基 ,方法如下 :A .蔗糖 1 3g +琼脂 1 .5g+水 80mL ,倒入大烧杯中煮沸 ,使琼脂溶解。B .玉米粉 1 7g+水 80mL倒入另一烧杯中调匀。当A中的琼脂溶解后 ,将B倒入A中 ,煮沸后移去电炉。待稍冷却后往培养基中加入 1 …     

风箱果腋芽组织培养

1植物名称风箱果[Physocarpusamurensis(Maxim.)Maxim.]。2材料类别休眠期腋芽。3培养条件(1)诱导培养基:WPM+TDZ0.01mg·L-1(单位下同)+IBA1.0;(2)增殖培养基:MS+6-BA1.1+NAA1.0;(3)壮苗培养基:MS+6-BA0.6+NAA2.0;(4)生根培养基:MS+IBA0.1。以上培养基均添加0.65%琼脂和2.5%蔗糖,在高温灭菌前pH值调至5.8。培养温度为25℃,光照时间16h·d-1,光强为30￣40μmol·m-2·s-1。4生长与分化情况4.1无菌材料的获得风箱果的枝条采自黑龙江省尚志市东北林业大学帽儿山实验林场境内。在室内水培3周后,取饱满的腋芽作外植体。腋芽用70%…