一种测定RuBP加氧酶化学发光反应的方法

最近Mogel和McFadden报道:将Mn~(2 )活化菠菜的RubisCO后,其加氧酶的催化反应过程中可产生化学发光,并且证明这种化学发光是由于RuBP加氧酶反应过程中产生的单线态氧所致。实验的原理是:RuBP加氧酶反应过程中首先是底物RuBP的烯醇化,     

测定小麦叶片游离脯氨酸含量的方法

在测定样品游离脯氨酸含量时,现多采用Troll的酸性茚三酮显色法,而对样品的前处理(提取和纯化脯氨酸)却采用了不同的方法,概括起来主要有三种,即Troll的80％乙醇浸提法,Singh的甲醇-氯仿-水浸提法和Hanson的水浸提法。前两种方法的共同点是程序复杂,费时,难以在短时间内处理大批材料,且涉及试剂种类多,用量较大,成本较高。虽然近年来有人作了改     

高效液相色谱法测定大豆乳清提取物中大豆异黄酮的含量

建立了大豆乳清提取物中大豆异黄酮含量的高效液相色谱测定方法。采用Nova-Pak C₁₈（3.9×150 mm,4 μm）色谱柱;以甲醇：0.4%磷酸=30：70（v/v）为流动相分析染料木苷和黄豆苷;流速为0.7 mL·min^-1;柱温为30℃;检测波长为260 nm。试验结果表明,大豆乳清提取物中的大豆异黄酮含量为72.5%,其组成以染料木苷和黄豆苷为主,二者比例接近1∶1,苷元型大豆异黄酮未检出。染料木苷和黄豆苷的平均回收率分别为98.1%和98.4%,相对标准偏差（RSD）分别为0.7%（n=5）和0.8%(n=5)。该方法快速、准确、重复性好。     

大豆叶片蔗糖酶的分离纯化及其特性

大豆叶片提取液中存在很高的蔗糖酶活力,皆在30 mg还原糖·克鲜重~(-1)·小时~(-1)以上。经DEAE-纤维素柱层析分离出了三种蔗糖酶。然后分别经Sephadex G—200凝胶过滤,或再经CMC柱层析,最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳证明,三种蔗糖酶都得到了较好的纯化。它们的反应有相近的最适pH范围,蔗糖酶Ⅰ最适pH在5左右,酶Ⅱ和Ⅲ的最适pH在4～5之间。三种蔗糖酶的Km值(蔗糖)基本相同,约为1.3×10~(-2)M。它们的Vmax相差较大,酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ可分别达100.57和13 mg还原糖·mg蛋白~(-1)·小时~(-1)。三种蔗糖酶的分子量非常接近,在71,000～76,000之间。     

测定水稻叶片叶绿素含量的混合液提取法

水稻叶片叶绿素含量与光合速率、作物生长率有一定相关。科研上常测定叶绿素含量以表征水稻生长状态,生产上也往往根据叶色变化作为看苗诊断和采取肥水措施的重要指标。     

光声光谱法测定植物叶片中的叶绿素含量

在植物生理学研究中常用Arnon法比色测定植物叶片中的叶绿素含量,但该法要通过研磨、提取、定容、比色和计算等一系列步骤。特别是测定样品数量较多时费时较长;同时由于研磨、提取过程中的光照,破坏了部分叶绿素,以致叶绿素含量偏低,各对照组之     

大豆和苜蓿种子中葫芦巴碱含量的测定

用高效液相色谱法测定大豆和苜蓿种子内葫芦巴碱的含量的结果表明：以氨基键合柱为固定相,乙腈和水为流动相,可快速而比较准确的测定种子中葫芦巴碱含量。大豆和苜蓿种子中葫芦巴碱的含量高于葫芦巴植物的,可作为提取葫芦巴碱的原料。     

大豆叶片淀粉酶的特性

大豆叶片的α—淀粉酶对SH—反应剂不敏感,在pH3.6时失活Ca~(2 )使它的耐热性提高至70℃.β—淀粉酶对SH—反应剂敏感,耐酸至pH 2.3,耐热至60℃. 随着叶龄的增长α—淀粉酶的同工酶数目增加,此酶在一般情况下不需要添加Ca~(2 ),EDTA对它起不可逆的失活作用,β—极限糊精及Ca~(2 )可排除EDTA对酶的影响。此酶可能是Ca—金属酶,Ca~(2 )与酶结合紧密,它位于酶的活性中心或附近。 在体外,大豆叶片α—淀粉酶可被自身的淀粉粒吸附,但容易被 pH5的醋酸缓冲液洗脱。     

银杏雌雄株叶片氨基酸组分及其含量

银杏是雌雄异株植物,依靠种子繁殖,是我国特有的活化石植物,也是重要的观赏树种。作为行道树以雄株为宜。为了有计划地进行定性栽培,就需要对幼龄植株进行早期性别鉴定。许多生理指标都可能作为性别鉴定的依据。通过对银杏中氨基酸含量和组成的分析表明,不同性别植株叶片中均含有被分析的17种氨基酸,各种氨基酸的含量和总含量在单株间没有表现出性别差异,而平均含量却表现出雄株高于雌株,其中胱氨酸和酪氨酸较为突出,分别高出雌株28.24%和40.94%,这是否反映了银杏雌雄的性别差异,值得进一步探讨。尽管脯氨酸含量与花药的正常发育有关,并大大高于雌蕊中脯氨酸的含量,但这一生理指标不适用于营养器官。     

弱光胁迫对花生功能叶片RuBP羧化酶活性及叶绿体超微结构的影响

间作套种是我国主要的花生(Arachis hypogaea)种植方式之一。然而, 与单作相比, 在间作套种体系中, 花生截获的光能较少, 生长发育差, 产量低, 研究不同品种耐阴机理对选择适宜间作套种的花生品种具有重要意义。该研究用耐阴性不同的两个花生品种‘花育22号’ (强耐阴性)和‘白沙1016’ (弱耐阴性)为材料, 在大田条件下采用不同透光率遮阴网设置50%自然光强(中度弱光胁迫)和15%自然光强(严重弱光胁迫) 2个弱光处理, 从出苗期开始遮阴40天, 以自然光强为对照, 研究了弱光胁迫对花生功能叶片RuBP羧化酶活性和叶绿体超微结构的影响。结果表明: 光强为自然光照50%和15%的处理, ‘花育22号’ RuBP羧化酶活性与对照相比虽有降低, 但差异不显著, 而‘白沙1016’分别比对照低40.1%和59.4%, 显著低于对照。与对照相比, 50%自然光强下‘花育22号’叶绿体数不变, 叶绿体基粒数和基粒片层数显著增多, 叶绿体变长且发育完好, 15%自然光强下, 叶绿体数、基粒数和淀粉粒数显著减少, 叶绿体膜和基粒片层出现破损, 但叶绿体变长, 基粒片层数增加; ‘白沙1016’在50%自然光强下, 叶绿体数目和超微结构变化同‘花育22号’相似, 在15%自然光强下叶绿体变圆, 基粒数的降幅和基粒片层破损程度大于‘花育22号’且基粒片层数减少, 淀粉粒数增多。因此, 弱光胁迫特别是严重弱光胁迫条件下, 功能叶RuBP羧化酶活性降低幅度小、叶绿体超微结构受损程度低是‘花育22号’耐阴的光合生理基础。     

不同供氮水平下冬小麦叶片中RuBP羧化酶和硝酸还原酶的活性变化

氮素营养与小麦的生长发育、光合作用以及产量之间有密切的关系。Seeni和Gnanam认为增施氮肥能提高CO_2固定速率。Evans也指出:随着小麦叶片含氮量的增加,净光合速率上升,但并不呈线性关系,而是呈二次形曲线关系;即达到一定含氮量后,光合速率不再继续上升,且有下降趋势。很多学者指出,在一般田间饱和光强度     

叶绿素含量的测定及其应用中的几个问题

本文讨论了叶绿素含量测定及应用中比较普遍存在的几个问题,指出按叶片鲜重计量叶绿素含量的弊端和按叶面积计量的好处。     

嘉兰栽培及其秋水仙碱含量测定

嘉兰原属热带性地区的植物,但从云南南部引种到广州地区种植。表现生长发育良好,且其秋水仙碱含量高达0.40—0.45％。是一种有推广种植价植的药用植物。     

荞麦与大豆叶片中草酸含量差异及其可能的原因

用1/5浓度Hoagland营养液培养荞麦和大豆幼苗l0 d后,荞麦叶片、根及其分泌物中的草酸含量均明显高于大豆,说明荞麦叶片的草酸形成能力强.荞麦叶片中存在少量的草酸氧化酶活性,而大豆中未检测到该酶活性,表明荞麦具有一定的降解草酸的能力.乙醇酸氧化酶(GO)催化乙醇酸氧化的活性两种植物之间虽差异不明显,但该酶催化乙醛酸氧化的活性荞麦显著高于大豆.荞麦GO对乙醛酸的Km值明显低于大豆GO,同时其乙醛酸含量也较高,因此其叶片中由乙醛酸形成草酸的速率应高于大豆.由此认为,由乙醛酸氧化生成草酸可能是植物草酸合成限速步骤之一,其反应速率高低可能导致不同种类植物叶片中草酸含量的差异.     

采用滤袋技术快速测定杜仲叶片中杜仲胶含量

采用滤袋技术依据减重法原理测定了杜仲叶片中杜仲胶含量。通过正交设计比较了不同滤袋孔径、样品量和提取时间对提取效果的影响,并采用该方法比较了同一产地不同品种、同一品种不同产地的杜仲叶中胶含量的差异。结果表明,不同孔径的提取效果差异显著(F=3.685,p=0.043),样品量和提取时间对提取效果无显著影响。适宜的测定条件是样品量0.1 g、滤袋孔径25μm/10μm、提取时间60 min。滤袋法测得的‘华仲6号’胶含量为4.49%,传统碱煮法为3.64%。同一产地不同品种、同一品种不同产地的杜仲叶中胶含量差异极显著(F=92.689,P=0.001),其中郑州的‘华仲11号’含量最高,平均为7.00%,灵宝的‘华仲12号’含量最低,为4.28%。生产杜仲胶的原料应标明品种、产地以及树龄,这样有助于合理评估预期产量和生产成本。     

不同时期山里红叶片中多元酚类成分含量的测定

The content of polyphenolic compounds including chlorogenic acid, vitexin-4＂-O-glucoside, vitexin rhamnoside, rutin, vitexin, hyperoside in leaf of Crataegus pinnatifida Bunge var. major N. E. Br. at different times was determined by HPLC. The results show that the content of polyphenolic compounds in different times is various. In April, the total content of polyphenolic compounds and the contents of chlorogenic acid, vitexin-4＂-O-glucoside, vitexin rhamnoside, rutin reach the peak. And the content of every compound and the total content of these compounds decrease gradually with the plant growing, and reach the lowest point in July to August. Therefore, in order to extract polyphenolic compounds, the optimal harvest time for C. pinnatifida var. major leaf is April.     

应用近红外光谱预测水稻叶片氮含量

以水稻(Oryza sativa)新鲜叶片和干叶粉末两种状态的样品为研究对象, 基于近红外光谱(NIRS)技术, 应用偏最小二乘法(PLS)、主成分回归(PCR)和逐步多元回归(SMLR), 建立并评价了水稻叶片氮含量(NC)近红外光谱模型。结果表明, 基于PLS建立的模型表现最好, 鲜叶氮含量近红外光谱校正模型校正决定系数R_C²为0.940, 校正标准误差RMSEC为0.226; 干叶粉末氮含量的近红外光谱校正模型R_C²为0.977, RMSEC为0.136。模型的内部交叉验证分析表明, 预测鲜叶氮含量内部验证决定系数R_CV²为0.866, 内部验证标准误差RMSECV为0.243; 预测干叶粉末氮含量R_CV²为0.900, RMSECV为0.202。模型的外部验证分析表明, 预测水稻鲜叶氮含量的外部验证决定系数R_V²大于0.800, 外部验证标准误差RMSEP小于0.500, 预测干叶粉末氮含量的R_V²为0.944, RMSEP为0.142。说明, 近红外光谱分析技术与化学分析方法一致性较好, 且基于干叶粉末建立的近红外光谱预测模型的准确性和精确度较新鲜叶片高。     

应用近红外光谱估测小麦叶片氮含量

研究利用近红外光谱(near-infrared, NIR)和化学计量学方法估测小麦(Triticum aestivum)新鲜叶片和粉末状干叶中全氮含量的可行性, 并建立小麦叶片氮含量估测模型, 以期为小麦氮素营养的精确管理提供理论依据。以3个小麦田间试验观测资料为基础, 分别运用偏最小二乘法(partial least squares, PLS)、反向传播神经网络(back-propagation neural network, BPNN)和小波神经网络(wavelet neural network, WNN), 建立小麦叶片氮含量的鲜叶和粉末状干叶近红外光谱估测模型, 用随机选择的样品集对所建模型进行测试和检验。结果显示, 利用PLS、BPNN和WNN 3种方法构建的近红外光谱模型均能准确地估测小麦叶片氮含量, 其中基于BPNN和WNN的模型优于基于PLS的模型, 且以基于WNN的模型表现最好。对模型进行检验的结果显示, 粉末状干叶模型的预测均方根误差(RMSEP)分别为0.147、0.101和0.094, 鲜叶模型的RMSEP分别为0.216、0.175和0.169, 模型的相关系数均在0.84以上。因此, 利用近红外光谱估算小麦叶片氮素营养精确可行, 对其他作物的氮素营养估测提供了借鉴和参考。