猪圆环病毒2型ORF2基因序列分析及真核表达载体的构建

根据ＧｅｎＢａｎｋ中猪圆环病毒２型（ＰＣＶ－２）ＯＲＦ２基因序列,设计一　对引物,应用ＰＣＲ从疑患断奶仔猪多系统消耗综合症（ＰＭＷＳ）的死亡仔猪组织病料中扩增出ＯＲＦ　２全基因（７０２ｂｐ）。将此片段克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ　ｅａｓｙ载体,筛选获得重组质粒ｐＴＯＲＦ２,并对此质　粒中的插入序列进行了测序分析,结果表明本试验克隆的ＯＲＦ２与美国ＰＣＶ－２分离株ＡＦ２６４０３９　的核苷酸及氨基酸序列同源性均达到１００％,与其他ＰＣＶ－２毒株同源性分别为９２．３％～９８．　６％和　９２．３％～９６．６％。重组质粒ｐＴＯＲＦ２经　Ｂａｍ　Ｈ　Ｉ、Ｅｃｏ　Ｒ　Ｖ双酶切,回收ＯＲＦ２基因,转　移入真　核表达载体ｐＳｅｃＴａｇ２／ＨｙｇｒｏＢ的相应酶切位点之间,构建成重组质粒ｐＳｅｃＴａｇＯＲＦ２。此重组表　达载体的构建成功为进一步研究ＯＲＦ２编码蛋白的生物学活性及建立ＰＣＶ诊断试剂盒打下基础。     

河南紫荆属订正

河南紫荆属订正朱长山，李学德（河南农业大学，郑州４５０００２）（郑州师范学校，郑州４５００５２）ＡＲＥＶＩＳＩＯＮＯＦＣＥＲＣＩＳＦＲＯＭＨＥＮＡＮ￥ＺＨＵＣｈａｎｇ－Ｓｈａｎ；ＬＩＸｕｅ－Ｄｅ（ＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ...     

联合固氮研究进展

联合固氮研究进展李久蒂安千里（中国科学院植物研究所,北京１０００９３）ＡＤＶＡＮＣＥＳＩＮＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤＮＩＴＲＯＧＥＮＦＩＸＡＴＩＯＮＲＥＳＥＡＲＣＨＬｉＪｉｕ－ｄｉＡｎＱｉａｎ－ｌｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃ...     

APPLICATION OF NONLINEAR FORECASTING METHOD TO ANALYSIS OF ISI IN NERVOUS SYSTEM

ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＮＯＮＬＩＮＥＡＲＦＯＲＥＣＡＳＴＩＮＧＭＥＴＨＯＤＴＯＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＩＳＩＩＮＮＥＲＶＯＵＳＳＹＳＴＥＭＧｏｎｇＹｕｎｆａｎ（龚云帆）ＸｕＪｉａｎｘｕｅ（徐健学）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＭｅｃ...     

云南锡兰莲属一新变种

云南锡兰莲属一新变种费勇（中国科学院昆明植物研究所，昆明６５０２０４）ＡＮＥＷＶＡＲＩＥＴＹＯＦＮＡＲＡＶＥＬＩＡＦＲＯＭＹＵＮＮＡＮＦｅｉＹｏｎｇ（ＫｕｎｍｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓ，...     

云南兰科二新种

云南兰科二新种刘方媛（中国科学院昆明植物研究所，昆明６５０２０４）ＴＷＯＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＯＦＯＲＣＨＩＤＡＣＥＡＥＦＲＯＭＹＵＮＮＡＮＬＩＵＦａｎｇ－Ｙｕａｎ（ＫｕｎｍｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃ...     

Incorporation of Resistance Gene into Tomato using Binary Vector System

ＩｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｏｆＲｅｓｉｓｔａｎｃｅＧｅｎｅｉｎｔｏＴｏｍａｔｏｕｓｉｎｇＢｉｎａｒｙＶｅｃｔｏｒ　ＳｙｓｔｅｍＺＨＡＯＳｈｕ－ｈｕｉ（赵淑慧）;ＸＵＥＧｕｏ－ｘｉｏｎｇ（薛国雄）（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏ...     

花的衰老与切花保鲜

花的衰老与切花保鲜李宪章（中国科学院植物研究所北京１０００４４）ＦＬＯＷＥＲＳＥＮＥＳＣＥＮＣＥＡＮＤＰＲＥＳＥＲＶＡＴＩＯＮＯＦＣＵＴＦＬＯＷＥＲＳ￥ＬｉＸｉａｎ－ｚｈａｎｇ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＡｃａｄｅｍｉａＳｉｎｉｃａ,Ｂｅｉ...     

斜纹夜蛾核型多角体病毒p74基因的克隆和序列分析

用ＡｃＮＰＶｐ７４基因３’端的１．４ｋｂ片段,通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ将ＳｐｌｔＮＰＶ的ｐ７４基因定位于ＸｈｏＩ（４．９ｋｂ）、ＥｃｏＲＩ（４．４ｋｂ）、ＢａｍＨＩ（３．０ｋｂ）片段上。进一步用ＥｘｏⅢ和构建亚克隆测序法,对长２５４５ｂｐ的ｐ７４基因进行,其中１９７４ｂｐ的编码编码６５８个氨基酸,蛋白分子量约７５．８７ｋＤ,其编码蛋白与ＡｃＭＮＰＶ和ＣｆＭＮＰＶｐ７４蛋白的氨基酸序列同     

粘虫核型多角体病毒多角体蛋白基因结构和序列的研究

测定了粘虫核型多角体病毒（Ｌｅｕｃａｎｉａｓｅｐａｒａｔａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,ＬｓＮＰＶ）两个ＥｃｏＲＶ片段的共１２０１ｂｐ序列,发现了一个７１４ｂｐ的开放阅读框（ＯＲＦ）,根据其与多种ＮＰＶ多角体蛋白基因（ｏｃｕ）同源性的比较和５＇端典型的１４ｂｐ保守序列,说明此ＯＲＦ即为ＬｓＮＰＶ的ｏｃｕ基因。根据核苷酸序列预测的多角体蛋白有２４６个氨基酸,其中酸性和碱性氨基酸数相等,疏水氨基酸含量很高,氨基酸组成中以谷氨酸（Ｇｌｕ）含量最高,谷氨酰胺和半胱氨酸含量最低。编码区碱基同源性与ＭｂＮＰＶ最高,为９７．０％;氨基酸同源性与ＭｂＮＰＶ最高,为９７．５％。密码子偏爱选用以第三个碱基为嘧啶的密码子。二级结构分析表明,α－螺旋（Ｈ）和β－折叠（Ｓ）相等,β－转角含量是Ｈ和Ｓ含量之和。     

鼠源抗HFRSV衣壳蛋白McAbF3株单链抗体基因克隆构建及表达

为了获得原抗ＨＦＲＳＶ衣壳蛋白ＭｃＡｂＦ３＾１株轻链可变区基因,由连接肽体外连接获得单链抗体基因,在大肠杆菌中表达,从鼠源抗ＨＦＲＳＶ衣壳蛋白ＭｃＡｂＦ３株细胞中分离总ＲＮＡ,以ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１８为引物逆转录成ｃＤＮＡ,通过ＰＣＲ扩增出抗体的轻链（ＶＬ）和重链可变区（Ｖ１１）基因,由连接本外连接获得单链抗体（ＳｅＦｖ）基因。将此单链抗体（ＳｅＦｖ）基因插入原核表达载体ＰＥＴ２８ａ,经大肠杆菌（     

编码人疱疹病毒－6型核糖核苷酸还原酶和P41蛋白基因的克隆和序列测定

本文报道人疱疹病豢－６型（ＨＨＶ－６）ｐＳＴＹ２８ＤＮＡ片段的序列测定。应用分子克隆、缺损突变体（Ｄｃｌｅｔｉｏｎｍｕｔａｎｔ）制备和序列测定等技术,完成了３．９ｋｂＨＨＶ－６ｐＳＴＹ２８ＤＮＡ片段的全序列测定。经ＤＮＡＳＩＳ核酸蛋白软件分析,该片段含有两个开读框架（ＯＲＦ）核糖核苷酸还原酶（ＲＩＲ）ＯＲＦ有２４１４个核苷酸,可编码８０５个氨基酸;Ｐ４１蛋白由１１００个核苷酸组成。与其他疱疹病毒作氨基酸同源性比较,ＨＨＶ－６ＲｉＲ与人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）有高度同源性,最适记分（Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄｓｃｏｒｅ）达４５９。实验结果支持Ｅｓｆｔａｔｈｉｏｕ提出的论点,ＨＨＶ－６属于β－疱疹病毒。     

植物抗寒剂CR－4在湖南水稻生产中的应用效果

植物抗寒剂ＣＲ－４在湖南水稻生产中的应用效果段传嘉（湖南省水稻研究所,长沙４１０１２５）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＥＦＦＥＣＦＳＯＦＴＨＥＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＩＮＲＩＣＥＣＵＬＴＵＲＥＯＦＨＵＮＡＮＰＲＯＶＩＮＣＥ￥Ｄｕａｎｃｈｕａｎ－ｊｉ...     

生物固氮作用机理

生物固氮作用机理李佳格徐继（中国科学院植物研究所,北京１０００９３）ＭＥＣＨＡＮＩＳＭＯＦＢＩＯＬＯＧＩＣＡＬＮＩＴＲＯＧＥＮＦＩＸＡＴＩＯＮＬｉＪｉａ－ｇｅＸｕＪｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎｙ,ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ...     

植物抗寒剂的使用方法与效果分析

植物抗寒剂的使用方法与效果分析简令成（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＭＥＴＨＯＤＳＯＦＰＬＡＮＴＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＡＮＤＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＩＴＳＥＦＦＥＣＴＩＶＥＮＥＳＳ￥ＪｉａｎＬｉｎｇ－ｃｈｅｎｇ（Ｉｎｓ...     

转译优化对EPO基因在COS7细胞中表达的影响

利用ＣＯＳ７细胞暂时表达系统,研究转译起始序列对ＥＰＯ－ｃＤＮＡ表达的影响。通过ＤＮＡ重组技术,构建了原ＥＰＯ－ｃＤＮＡ表达载体ｐＣＳＶ－ＥＰＯ（１）,其转译起始序列为５＇ＡＡＴＴＣＡＴＧＧ３＇。同时通过定点突变技术,将起始序列改变成５＇ＣＣＡＣＣＡＴＧＧ３＇,而构建了另一表达载体ＰＣＳＶ－ＥＰＯ（２）。后经序列分析证明无误后和前均通过ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ７细胞上清,测定结果为     

戊型肝炎病毒(HEV)合成肽及基因重组抗原免疫反应性研究

用ＯＲＦ２、ＯＲＦ３合成肽抗原（１～１０号）及基因工程重组的ＯＲＦ２抗原（１和２号）分别建立了酶联免疫方法（ＥＩＡ）,检测６０份戊型肝炎病人血清中ＨＥＶＩｇＧ及ＩｇＭ１０个合成肽抗原（Ｓｐ１－Ｓｐ１０）及２个重组抗原（Ｒｅ１、Ｒｅ２）,均和ＨＥＶ阳性血清发生特异反应,但阳性率和反应强度差别很大。以Ｒｅ１（ＯＲＦ２,４０２～６６０）检测的抗体阳性率最高,为９６．７％（５８／６０）;Ｓｐ６（ＯＲＦ３,８８～１２３）次之,为９３．３％（５６／６０）;以上两种抗原混合使用阳性率为１００％（６０／６０）。Ｓｐ６、Ｒｅ１及这两种抗原混合使用检测抗ＨＥＶＩｇＭ,阳性率分别为１８．３％（１１／６０）、６６．７％（４０／６０）和６６．７％（４０／６０）。研究结果表明：合成肽６号（Ｓｐ６）及重组抗原１号（Ｒｅ１）是制备戊肝抗体诊断试剂的理想抗原。     

冰下水生维管束植物生产力的研究

冰下水生维管束植物生产力的研究刘国才,金天明,崔雅杰（内蒙古哲里木畜牧学院,通辽０２８０００）关键词冰下水生维管束植物,生产力ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＰＲＯＤＵＣＴＩＶＩＴＩＥＳＯＦＵＮＤＥＲ－ＩＣＥＶＡＳＣＵＬＡＲＨＹＤＲＯＰＨＹＴＥＳ￥ＬｉｕＧｕｏｃａ...     

利用脊髓灰质炎病毒5‘NCR和RNA聚合酶基因可提高外源基因表达

将含脊髓灰质炎病毒（ＰＶ）ＲＮＡ聚合酶的不同长度基因片段克隆到载体ｐＳＧ５质粒上,分别构建了４个表达ＲＮＡ聚合酶的质粒。体外转录实验证明,ｐＳＧ５－ＰＯＬ１．９９和ｐＳＧ５－ＰＯＬ２．０３质粒转染细胞的提取物促进了特异的ＲＮＡ转录,表明两质闰可表达ＲＮＡ聚合酶。将ＰＶ的５’ＮＣＲ序列插在载体ｐＧＲＥＥＮ ＬＡＮＴＥＲＮ－１的ＣＭＶ启动子下游,构建了ｐＧＲＥＥＮ ＬＡＮＴＥＲＮ－１－５’ＮＣＲ质粒;     

黑线姬鼠肥满度的研究

黑线姬鼠肥满度的研究ＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＲＥＬＡＴＩＶＥＦＡＴＮＥＳＳＯＦＴＨＥＳＴＲＩＰＥＤＦＩＥＬＤＭＯＵＳＥ（ＡＰＯＤＥＭＵＳＡＧＲＡＲＩＶＳ）ＫｅｙｗｏｒｄｓＳｔｒｉｐｅｄｆｉｅｌｄｍｏｕｓｅ（Ａｐｏｄｅｍｕｓ：ａｇｒａｒｉｕｓ）;Ｒｅｌａｔ...