工业用菌种筛选的现代战略(续)

抗菌素产品效价变化中的直接筛选筛选分两类:直接筛选和间接筛选。直接筛选含产品分析,可用生物测定或化学测定。间接筛选不以产品分析为主,而是测定与产品有关菌种的不同特征。直接筛选的最基本方式是随机诱变和选择筛     

庆丰霉素的“土坑发酵”生产

庆丰霉素“土坑发酵”生产法是用固体种子代替二级液体种子,用土坑发酵代替温室瓶罐发酵或曲盘发酵,从而能有效地扩大生产规模,节约设备、投资、燃料和劳力。产品抗菌素效价7000单位左右。此法也适用于春雷霉素、灰黄霉紊等的士法生产。     

对有效组分含量测定方法的初探

对有效组分含量测定方法的初探田浩,陈丽媛（辽宁省微生物研究所,朝阳１２２０００）水溶性抗菌素有效物质的测定,通常采用抑菌圈法,而非水溶性物质在培养基中不易扩散,若采用同样方法,则无法准确地测定其含量。对此,我们经多次试验研究发现,非水溶性抗菌素有效物...     

改进发酵消泡剂的初步探讨

使用以玉米粉、豆饼粉、淀粉等为主要原料生产抗菌素时,由于培养基的浓度、温度、搅拌、通气等条件的不同,在发酵过程中产生泡沫的时间和数量也不同;而大量泡沫的涌现,不仅影响正常操作,造成发酵液的损失,也极容易引起染菌、降低效价、严重则导致发酵失败。     

福氏志贺氏菌3型菌株(56050)免疫家兔时Ⅲ型凝集素效价的升降动态

使用我所饲育的家兔,用56050株3型福氏志贺氏菌免疫以制备Ⅲ血型清时,免疫次数不宜超过三次,如果大量免疫家兔而又无法用吸收方法测试Ⅲ型凝集素特异效价时,可以考虑免疫三次即进行全采血。如果免疫家兔数量较少,而且有条件进行“吸收法”试血时,最好在首次免疫后开始,逐次进行“吸收法”试血以测定Ⅲ型凝集素特异效价,如能达到1:1280或更高,则可以进行全采血。 免疫过得中“Ⅲ”型凝集素效价曲线是独立的,不一定与复合凝集素效价曲线的趋势平行。效价达高峰后,继续免疫即不能使其效价增高,反而可以抑制其效价,在实际工作中必须予以注意。     

抗菌素生成基因的克隆和表达

最近在抗菌素生物合成的分子遗传学方面的进展为改进抗菌素生产开辟了新的前景。看来编码抗菌素生物合成有关的酶的基因是簇集在产生抗菌素生物的DNA上。已开发了一些低和高拷贝的质粒和噬菌体载体以便在产生抗菌素的链霉属(strcptomyces)中进行克隆。借助于聚乙烯乙二醇的转化或转染链霉属原生质体的方法可将DNA引入。一些对抗菌素生物合成特异的基因已被克隆。     

急性肠道传染病实验手册(续一)——(腹泻病控制计划——CDD83.3)

<正>4、抗菌药物敏感性试验 下法常用于对抗菌药物的抗性试验。 稀释试验:为定量测定抗菌素活性,可把抗菌素稀释入肉汤或琼脂培养基中,然后接种试验菌株。过夜培养后能阻止活菌生长的抗菌素最小浓度,作为该药物的最小抑菌浓度(MIC)。 扩散试验:在均匀混入试验菌株的琼脂培养基上放上抗菌素浸泡过的纸片或药片。在纸片周围生长的细菌受到抑制,抑制距离大小同该菌的敏感性相关,从而形成了抗菌药物的浓度梯度。     

肉毒毒素和类毒素抗原

用毒素或福尔马林处理的类毒素免疫家兔制备抗肉毒血清(A和E型)。用类毒素连续吸收抗类毒素,能完全吸收掉小鼠保护效价;但其在吸收抗毒素时,却保留较高的保护效价,而此只能为毒素所除去。由于肉毒类毒素和毒素的明显差别,所以能将两者区分为免疫抗元和(或)抗血清吸收抗元。     

实验小鼠H-2抗原单克隆抗体的效价研究

目的　研究实验小鼠H - 2抗原单克隆抗体在初建时和经冷冻保存后的效价变化规律 ,为长期保存小鼠H - 2抗原单抗及规模性推广这一遗传监测方法奠定技术基础。方法　制备 6种抗小鼠H 2抗原的单克隆抗体 ,将具备一定抗体效价 (16 0倍以上 )的细胞株保存在 - 196℃的液氮中 ,数月后将复苏后的部分细胞株培养 4 8h后 ,取其上清液用微量细胞毒试验法测定抗体的效价 ,并与其原有效价进行比较。结果　单抗初建时效价达到 16 0倍以上的细胞株占总株数的 37%～ 5 3% ,H 2K抗体复苏后效价持平的细胞株占 13% ,效价下降的为 74 % ,效价上升的是 13% ;H 2D抗体效价持平的细胞株占 5 3% ,下降的为 31% ,上升的是 16 %。复苏后的抗体效价大部分与原效价持平或略有下降 ,个别的会有所提高。结论　单克隆抗体的效价略低于同种单价特异性抗血清 ;能否使冻存后的抗体保持原有的效价是抗体能否大量生产并推广的关键 ;要长期保存和生产H 2抗原单抗 ,应加强克隆和检测工作 ,建立稳定的制备、保存和检测系统 ,才能为实验动物的遗传监测提供技术服务     

不同NaCl浓度对降纤酶效价测定的影响

降纤酶是从长白山白眉蝮蛇或尖吻蝮蛇毒中提取的单一成分蛋白水解酶,属蛇毒类凝血酶。1997年部颁标准采用以纤维蛋白原为底物,0.04mol/LTris-HCl(pH值7.4,含0.02mol/LNaCl)缓冲液溶解稀释纤维蛋白原、降纤酶标准品和供试品,通过测定降纤酶促凝活性来测定其效价[1]。　　在降纤酶生产和质量检验过程中,曾出现冻干成品核检效价比未冻干前半成品效价降低50%左右,严重影响到生产的管理和产品质量控制。为此,我们通过对降纤酶溶液pH值、NaCl浓度和冻干过程中温度、时间的控制等可能影响效价因素进行逐一排查,发现NaCl浓度是影响降纤酶效价…     

大观霉素产生菌1043菌株的分类鉴定

在筛选新抗菌素的过程中,从我国杭州土壤中分离到一株链霉菌,编号1043.它可产生两种抗菌素.一种是碱性水溶性抗菌素——大观霉素(曾译为壮观霉素)actinospectacin.另一种是酸性酯溶性抗菌素,与曲张霉素streptovaricin相似.有关该菌株及其产生的抗菌素已作过简要报道.大观霉霉,是一广谱抗菌素,可用于治疗淋球菌.现正在进行试制研究,即将投入生产应用于临床.为此,对1043菌株的分类鉴定进行补充,现将其结果报告如下.     

抗菌素与分子生物学

按照现在较普遍的看法,抗菌素是指微生物的一类代谢产物,这类物质只要很小的剂量就可以抑制生物体的生长,或使生物体不能生存。目前已发现的抗菌素约2500种,有人估计每年新发现75种左右。 抗菌素的发现,使人类战胜疾病增加了一类强大的武器;同时,它又是研究生物科学的一类有用工具。在生物学研究已经进入分子水平     

抗菌素在生化研究过程中的应用

一、前言抗菌素作用机理的研究和分子生物学的发展是相辅相成的。分子生物学的发展为从分子水平上研究抗菌素的药理学提供了研究方法,从而把这门科学由细胞水平导向了分子水平,形成了分子药理学;抗菌素又为分子生物学的研究提供了良好的工具。例如Temin发现反转录酶,或RNA指导的DNA多聚酶,主要就是利用了放线菌素D。     

静注人免疫球蛋白中白喉抗体效价对其Fc段生物学活性检测结果影响的分析

目的分析静注人免疫球蛋白(IVIG)中白喉抗体效价对其Fc段生物学活性检测的影响。方法检测20批IVIG的白喉抗体效价水平和Fc段生物学活性结果,进一步探讨白喉抗体效价与Fc段生物学活性的关系。结果20批IVIG中白喉抗体效价水平均符合中国药典的要求,在3~60 HAU/g之间,其中有两批IVIG的白喉抗体效价水平相对较高,其他18批IVIG的白喉抗体效价水平变化趋势不明显。20批IVIG的Fc段生物学活性均较高,在60%~140%之间。白喉抗体效价水平高者,其Fc段生物学活性并非高,反之亦然。结论 IVIG的Fc段生物学活性与其白喉抗体效价水平无明显的相关性。     

紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b(+)上.获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为34.4 kDa.将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清.微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1/1024,酶联法(enzyme-linkedimmunosorbant assay,ELISA)测定的效价为1/8192.     

紫藤脉花叶病毒cp基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

采用RT-PCR方法自紫藤脉花叶病毒北京分离物(WVMV-BJ)的基因组中分离出其CP基因,连接到原核表达载体pET22b( )上。获得的重组子pET-WVMVCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明,cp基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为34．4kDa。将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清。微量免疫沉淀法测定该抗血清的效价为1／1024,酶联法(enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)测定的效价为1／8192。     

微生物产生的生理活性物质——细菌的胞外多糖(综述)

所谓生理活性物质,其含义极为广泛。它包括所有对动物、植物和微生物的一些生理作用具有促进或抑制作用的物质。它可由动物、植物、微生物等生物合成,也可以通过人工合成。微生物是生理活性物质的积极产生者。由它产生的生理活性物质主要可分为以下几大类,有些已广泛应用于工、农、医等方面。 1、抗菌素类;包括能抑制植物病原菌繁殖的一般抗菌素,此外也包括杀虫     

苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的鉴定提纯和酶联法检测

苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(scv)是感染苹果和其它果树的两种重要潜隐 病毒。根据生物学特性和血清学反应,确定W-55分离物属于CLSV,W-29分离物属于SGV。采用皂土澄清,PEG 6000沉淀及超离心等步骤,得到部分提纯的病毒。经电镜观察,W-55和 W-29病毒颗粒长度分别为800nm和650nm。用CLSV W-55分离物制备的兔抗血清效价为1／3200,用SGV PV一71(ATCG)分离物制备小鼠腹水抗体效价为1／800,均用间接ELISA法测定。对感染CLSV和SGV的昆诺藜、苹果叶和花瓣检测结果表明,P／N值具有显著性。本工作为苹果无毒苗木的生产提供了快速、灵敏的病毒检测手段。     

抗菌素激素对霉菌性角膜溃疡治疗的影响

本文对１６例霉菌性角膜溃疡的治疗过程和效果进行了讨论。所有病例均使用过抗菌素治疗,一半以上病例使用过激素,其中１３例治愈,残留部分视力,３例失明。结果提示：抗菌素激素的使用,促进了霉菌性角膜溃疡的发展,增加了诊断和治疗的困难。因此,对角膜溃疡病例,应尽早明确诊断或除外霉菌性角膜溃疡后,再选用抗菌素治疗,这对于防止医原性霉菌性角膜溃疡的发生具有重要的临床意义     

白喉和破伤风类毒素的定量测定——2.Mancini试验和火箭免疫电泳试验与絮状试验的比较

<正> 在Ramon絮状试验中,最广泛用于表示白喉和破伤风毒素及类毒素浓度的Lf单位,其原始定义为分别与一个国际单位(Iu)的白喉和破伤风抗毒素等价结合的毒素或类毒素量。如果已知类毒素的浓度(Lf/ml),则可采用絮状试验测定抗毒素的效价(Iu/ml)。同样,用已知效价的抗毒素(Iu/ml)可以 测定未知类毒素的浓度(Lf/ml)。由于一些抗毒素和对应毒素的中和能力及凝絮能力不同,因此,就难于维持这种定义。这两种特性似乎不是相同的。因此,建立了用于絮状试验的白喉抗毒素专用参考品。对于破伤风抗毒素,国际标准品指定两种效价:以国际单位(Iu)标定的破伤风抗毒素效价和以Lf-当量单位标定的第二效价。 最近,决定用Lf单位标定的类毒素代替抗毒素作为参考品的结果进行了研究。这种