骨髓间充质干细胞在脱细胞真皮基质再生过程中的初步研究

较大的腹壁缺损需要应用补片修复来缓解腹横筋膜的张力,人工合成补片的应用一定程度上实现了无张力修补的目的,但它在腹壁外科应用中有诸多的并发症,诸如复发率高,腹腔黏连,肠穿孔导致腹膜炎,侵袭性肠瘘等影响患者术后的正常生活,而脱细胞真皮基质(Acellular dermal matrix,ADM)作为一种新型的生物材料应用在腹壁外科中能解决上述人工合成补片所带来的并发症发挥强大作用且能与周围组织较好的融合,最后改建成宿主自身组织已并在多学科领域中广泛应用;骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)能参与组织自我修复,并能分化成为多种功能细胞,分泌各种生长因子,在ADM内源性转归过程中可发挥作用。本文就对骨髓间充质干细胞在ADM生物补片应用于临床疝修补术中转归机制的研究做一综述。     

脱细胞异体真皮加自体刃厚皮复合移植在创面修复中的护理体会

复合移植术是治疗大面积深度烧伤的方法之一,而与之褶适应的术后护理也很重要。我科自2006年3月采用脱细胞异体真皮＋自体刃厚皮复合移植治疗各种原因引起的烧伤创面和瘢痕切除后继发创面35例,收到满意的效果,现将护理体会报告如下。     

深度烧伤创面异体脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植的临床观察

目的：探讨深度创面修复的有效方法。方法：30例患者随机分为两组,治疗组采用异体脱细胞真皮基质和自体刃厚皮片移植,对照组单纯采用自体刃厚皮片移植。最后采用温哥华瘢痕量表对患者术后1个月、6个月、12个月进行评分。结果：术后1个月,两组间温哥华评分无统计学差异。术后6个月、12个月,治疗组的温哥华评分低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：异体脱细胞真皮基质和自体刃厚皮移植是深度烧伤创面修复的一种有效方法。     

深度烧伤创面异体脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植 的临床观察

目的:探讨深度创面修复的有效方法。方法:30例患者随机分为两组,治疗组采用异体脱细胞真皮基质和自体刃厚皮片移植,对照组单纯采用自体刃厚皮片移植。最后采用温哥华瘢痕量表对患者术后1个月、6个月、12个月进行评分。结果:术后1个月,两组间温哥华评分无统计学差异。术后6个月、12个月,治疗组的温哥华评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:异体脱细胞真皮基质和自体刃厚皮移植是深度烧伤创面修复的一种有效方法。     

猪脱细胞真皮基质与RV-23抗菌肽复合材料的制备及生物学特性初步研究

目的:制备低免疫原性猪脱细胞真皮基质(PADM)与抗菌肽RV-23的复合材料,并对其生物学特性进行初步评价。方法:将抗菌肽RV-23分别以1、5、20μmol/L的浓度加到直径6 mm、厚约1 mm的低免疫原性PADM上,制备复合材料;菌落计数分析实验检测复合材料的抗菌能力;溶血实验检测复合材料对红细胞膜的裂解能力;CCK-8实验检测复合材料对真核细胞的细胞毒性;Tricine-SDS-PAGE检验RV-23的稳定性。结果:制备了PADM与抗菌肽RV-23复合材料;活菌计数实验表明复合材料对大肠杆菌有很强的抗菌活性,并随着抗菌肽浓度的升高不断增强;溶血实验表明PADM能有效降低RV-23裂解红细胞膜的能力,增加血液相容性;CCK-8实验显示PADM能够有效降低RV-23的细胞毒性,复合材料对人表皮角化细胞HaCaT和小鼠成纤维细胞NIH-3T3几乎没有毒性;Tricine-SDSPAGE实验结果显示复合材料抗菌肽RV-23稳定性较好。结论:PADM/RV-23复合材料比较稳定,不仅具有较强的抗菌性,而且有良好的血液相容性和极低的细胞毒性,有望成为新型创伤修复材料。     

异种脱细胞真皮基质联合丝素蛋白辅料对幼儿Ⅱ度烫伤的临床疗效研究

目的分析异种脱细胞真皮基质联合丝素蛋白辅料对幼儿Ⅱ度烫伤的治疗效果。 方法随机选择湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院104例Ⅱ度烫伤患儿,采用随机数字表法分为对照组（丝蛋白敷料覆盖）和试验组（异种脱细胞真皮基质联合丝蛋白敷料覆盖）,每组52例。实验结果中计量资料用 ±s表示,组间比较采用两样本t检验,治疗前后比较采用配对t检验;计量资料采用百分比表示,比较采用χ²检验,疼痛程度采用Z检验。 结果试验组患儿换药次数（2.87±0.98）?次、完全溶痂时间（8.26±3.18）d、温哥华评分（4.25±0.87）分,对照组分别为（5.64±1.02）次、（12.38± 3.02）d、（8.12±1.04）分,差异均有统计学意义（t = 14.121,6.775,20.582,P均< 0.001）。试验组患儿浅Ⅱ度创面感染率0.00%、愈合时间（8.53±1.49）d,对照组患儿分别为17.31%、（10.61±2.05） d,差异均有统计学意义（χ² = 9.853,P = 0.002,t = 5.918,P < 0.001）。试验组患儿深Ⅱ度创面感染率5.77%、愈合时间（12.90±1.64）d,对照组患儿分别为34.62%、（15.45±1.49）d,差异均有统计学意义（χ² = 13.425,P < 0.001,t = 8.299,P < 0.001）。治疗后比较,试验组患儿创面周围炎症评分（1.91±0.48）分、创面渗出物评分（2.86±0.45）?分,对照组患儿分别为（1.33±0.37）分、（2.09±0.53）分,差异有统计学意义（t = 6.901,7.986,P均?< 0.001）。试验组患儿疼痛程度与对照组比较,差异有统计学意义（Z = 41.657,P < 0.001）。 结论采用异种脱细胞真皮基质联合丝蛋白敷料覆盖治疗Ⅱ度烫伤患儿,可减少术后感染,缩短痊愈时间,降低疼痛程度,疗效优势明显。     

钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质增高犬牙槽嵴的初步研究

目的用成年杂种犬建立钛镍记忆合金牵张器复合脱细胞真皮基质增高犬牙槽嵴动物模型,为下一步利用钛镍记忆合金牵张器行下颌后牙牙槽嵴增高术奠定基础。方法健康成年雄性杂种犬4只。全麻下拔除双侧下颌4个前磨牙和第一磨牙,1个月后拍摄双侧后牙区X线光片,观察拔牙窝愈合情况。采用4种类型的牵张器随机在4只犬的下颌两侧行牵张手术并观察牵张后1周和1月牙槽嵴增高的情况。结果拔牙后1个月,牙槽嵴黏膜愈合良好。X线片示下颌神经管清晰可见,其上方牙槽窝内有较低密度骨质存在。放置4种牵张器牵张术后1周、1月后牙槽嵴增高的高度分别为3.24 mm、3.76 mm、4.58 mm、5.09 mm;3.15 mm、3.67 mm、4.64 mm、5.01mm,术后一周X线可见后有明显的牵张间隙,1月时牵张区有新骨形成,骨密度增高。结论犬耐受力强,后牙区下颌骨体积大,手术易操作,是理想的牙槽嵴萎缩动物模型。拔牙后1个月,拔牙创愈合良好,可以进行牵张手术。D组＂S＂形牵张器牵张后的高度比较理想,能满足后期种植体的植入。     

脱细胞真皮基质治疗对糖尿病足综合征合并下肢动脉硬化闭塞患者神经病变和对足部功能的影响

目的:探究脱细胞真皮基质治疗对糖尿病足综合征合并下肢动脉硬化闭塞患者神经病变的缓解作用和对足部功能的影响。方法:选择本院2017.5-2020.5收治的80例糖尿病足综合征合并下肢动脉硬化闭塞患者平均分为观察组和对照组2组,其中对照组患者给与常规干预结合下肢动脉腔内治疗,观察组则在对照组的基础上实施脱细胞真皮基质治疗。分析两组患者治疗前后TCSS评分、神经传导速度、足部功能、治疗效果、创面感染发生率、治疗费用以及并发症发生率的差异。结果:治疗后观察组患者TCSS评分和足部功能评分均较对照组低,神经传导速度较对照组快,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗总有效率、患者创面感染发生率和并发症发生率分别为100.00%、2.50%和2.50%,对照组患者则分别为80.00%、17.50%和55.00%,且对照组住院费用较观察组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脱细胞真皮基质治疗对糖尿病足综合征合并下肢动脉硬化闭塞患者神经病变具有确切的缓解作用,尤其对足部功能效果显著,值得临床广泛推广使用。     

脱细胞异体真皮在烧伤后爪型手畸形中的应用

目的探讨脱细胞异体真皮联合自体刃厚皮移植在治疗烧伤后爪型手畸形中的应用。方法对11例烧伤后爪型手畸形行瘢痕切除,松解粘连后,行脱细胞异体真皮联合自体刃厚皮移植术。结果 11例患者(18只手)均植皮成活(成活率100%),畸形矫正,功能恢复理想。结论烧伤后爪型手瘢痕切除脱细胞异体真皮联合自体刃厚皮移植效果理想。     

乳腺癌保乳术后应用紫杉醇脂质体对背阔肌肌瓣修复的疗效研究

摘要 目的：研究紫杉醇脂质体在乳腺癌保乳术后对背阔肌肌瓣修复的应用价值。方法：选取本院2015年1月~2018年10月收治的65例行保乳术治疗的乳腺癌患者作为研究对象,采用随机数表法将患者分为观察组33例和对照组32例,术后均行背阔肌肌瓣修复手术,对照组予以单纯的表柔比星+环磷酰胺+多西他赛进行术后化疗,观察组予以表柔比星+环磷酰胺+紫杉醇脂质体进行术后化疗。结果：观察组患者达到完全缓解(CR) 14例,部分缓解(PR) 13例,稳定(SD) 5例,进展(PD) 1例,客观缓解率(ORR)为81.82%;对照组患者达到CR 11例,PR 8例,SD 11例,PD 2例,ORR为59.38%,差异有统计学意义（P<0.05）。观察患者的乳房修复美学评价优良率90.91%较对照组的71.88%升高（P<0.05）;观察组满意度为90.91%,对照组满意度为78.13%,两组比较有统计学差异（P<0.05）。两组患者术后并发症发生情况比较无明显差异（P>0.05）。两组化疗相关的腹泻和呕吐等不良反应发生率比较有统计学差异（P<0.05）。结论：乳腺癌保乳术后应用紫杉醇脂质体对背阔肌肌瓣修复的疗效较好,安全性较理想。     

胸大肌肌皮瓣修复颊部缺损并应激性溃疡出血的护理

近年来,胸大肌肌皮瓣在头颈重建外科领域得到了广泛应用。但是,在移植术后约有6％～20％的患者会出现组织瓣缺血坏死等严重并发症。我科应用胸大肌肌皮瓣转移修复颊部粘膜癌切除术后组织缺损1例,术后第1天并发应激性溃疡出血,经处理后取得满意效果。现将护理体会报告如下。     

脱细胞小肠黏膜下层与脱细胞心包修复大鼠腹壁缺损的对比研究

目的：观察小肠黏膜下层（small intestinal submucosa,SIS）和脱细胞心包（pericardium,PC）修复大鼠腹壁缺损的效果,比较两种生物材料相容性。方法：SD大鼠40只,体重200～250g,手术造成3 cm×2 cm全层腹壁缺损,随机分为二组（n=20）,分别采用相同面积的小肠黏膜下层（small intestinal submucosa,SIS）和脱细胞真皮基质（acellular dermal matr,ADM）补片进行修补。术后1、2、4和8周分批取出腹壁修复材料,行动物一般情况观察、腹腔内粘连情况评价、力学强度测定及组织学观察。结果：术后动物都成活,两种材料术后8周均无疝瘘发生,缺损得到完整修复。术后各期SIS组的腹腔粘连评分明显低于PC组。术后4、8周,SIS组力学强度强于PC组,有统计学意义;组织学观察两组未见明显免疫排斥反应,SIS组的组织再生和重塑、血管化优于PC组;术后炎症反应两组无明显差异。结论：SIS和PC均能修复大鼠腹壁全层缺损,SIS在生物相容性方面优于PC。     

脱细胞小肠黏膜下层与脱细胞心包修复大鼠腹壁缺损的对比研究

目的:观察小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)和脱细胞心包(pericardium,PC)修复大鼠腹壁缺损的效果,比较两种生物材料相容性。方法:SD大鼠40只,体重200～250g,手术造成3 cm×2 cm全层腹壁缺损,随机分为二组(n=20),分别采用相同面积的小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)和脱细胞真皮基质(acellular dermal matr,ADM)补片进行修补。术后1、2、4和8周分批取出腹壁修复材料,行动物一般情况观察、腹腔内粘连情况评价、力学强度测定及组织学观察。结果:术后动物都成活,两种材料术后8周均无疝瘘发生,缺损得到完整修复。术后各期SIS组的腹腔粘连评分明显低于PC组。术后4、8周,SIS组力学强度强于PC组,有统计学意义;组织学观察两组未见明显免疫排斥反应,SIS组的组织再生和重塑、血管化优于PC组;术后炎症反应两组无明显差异。结论:SIS和PC均能修复大鼠腹壁全层缺损,SIS在生物相容性方面优于PC。     

骨髓基质细胞的特征及其在细胞和基因治疗中的应用

骨髓基质细胞是一类独特的间质干细胞,可分化为多种非造血系的组织。骨髓基质细胞具有贴壁生长的特性,因而易于在体外分离和扩增;另外骨髓基质细胞可在体内外表达多种治疗性的外湖目的基因。因此,骨髓基质细胞被认为是一种理想的治疗性细胞的基因治疗中的靶细胞。本文对骨髓基质细胞的研究进展及其在细胞和基因治疗中的应用作一综述。     

骨髓基质细胞在细胞移植与基因治疗中的应用

骨髓基质细胞是研究最广泛的成体干细胞,用于临床细胞移植与基因治疗有诸多优点,论述了具有多向分化潜能的骨髓基质细胞,应用于细胞移植与基因治疗中的研究现状及发展前景 。     

改良带蒂胸大肌肌皮瓣修复口腔颌面肿瘤术后缺损的临床分析

目的:探讨只带血管蒂的改良胸大肌皮瓣转移修复口腔颌面部组织缺损的临床效果。方法:取胸大肌皮瓣时蒂部只保留血管,利用改良只带血管蒂的胸大肌皮瓣对6例不同口腔颌面部组织缺损进行修复,包括舌癌3例、舌咽癌1例、牙龈癌1例、颊癌1例。结果:术后皮瓣血供良好,完整成活,成活率100%;所有患者获得3~18个月随访,在随访期内均存活;重建的舌外形良好,虽然味觉功能无法恢复,运动功能随切除范围增加而降低,但均能满足发音、吞咽和咀嚼功能需要。结论:只带血管蒂的改良胸大肌皮瓣是修复口腔颌面部组织缺损有效而可靠的方法,为恶性肿瘤根治术后造成的缺损提供了有力修复保障。     

人骨髓基质细胞的长期培养及其对病毒的敏感性

为了长期培养骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性,我们采用静置贴壁培养法,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞,并将传至５代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变（ＣＰＥ）法,开展了对５种病毒的敏感性试验。结果表明,人骨髓基质肌样细胞对滤泡性口腔炎病毒,脊髓灰质炎病毒、Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒均敏感,能产生明显的ＣＰＥ,其效价（ＴＣＩＤ５０）可达１０＾－３～１０＾－４,其中胎儿骨髓基质肌样细胞对     

脱细胞牛颈静脉内皮细胞黏附实验研究

目的:探讨去细胞处理后牛颈静脉血管片表面改性方法,增加内皮细胞在材料表面的黏附生长.方法:选取三种表面预衬组分:纤维连接蛋白(Fibronectin)单纯组,纤维连接蛋白+Ⅳ型胶原+明胶混合组,磷酸缓冲液空白组,采用物理包裹法.剪取多步骤去垢剂-酶消化法脱细胞处理的牛颈静脉片,无茵下静态培养7天,标本血管片表面细胞记数,切片染色,扫描电镜检测,比较不同组分预衬对细胞黏附生长的影响.结果:混合组在选取时间点表面细胞数目最多,单纯组次之.第7天HE染色结果显示混合组细胞连接成片,呈单层排布;单纯组表面细胞少量细胞黏附;对照组基本无细胞.扫描电镜显示:单纯组血管片表面细胞稀疏,细胞间无桥接,与下方的纤维结构联结不明显,数目较少;混合预衬组铺连成片,细胞间长梭形有桥接和突起,与去细胞的血管片纤维之间形成连接.结论:去细胞处理的牛颈静脉血管片可生长内皮细胞.经过纤维连接蛋白单独预衬处理的血管片表面,可增强内皮细胞黏附和贴壁生长,三组分混合预衬增强细胞黏附性及贴壁生长方面效果更好.     

不同方法制备大鼠肝脏脱细胞支架及其免疫原性研究

目的:肝脏脱细胞支架(decellularized liver bioscaffold,DLB)在组织工程研究中具有良好前景,但对DLB的免疫原性尚未见探讨.本研究利用不同方案制备大鼠DLB,检测支架成分和体内重塑反应,为制备出低免疫原性的DLB提供改进依据.方法:选取文献报道的三种方案(分别以SDS,Triton X-100和NP-40为主要洗脱成分),制备F344大鼠DLB,进行HE和Masson染色,检测DLB中DNA、氨基葡聚糖(GAG)以及羟脯氨酸(HYP)含量;再将DLB埋植于C57BL/6小鼠的背部皮下,于术后第3、7和14天取出后进行形态学观察和组织学评分.结果:三种方案均成功制备出符合脱细胞标准的大鼠DLB;形态学结果提示TritonX-100和NP-40方案较SDS方案能更好地保护肝脏超微结构;成分检测结果发现NP-40方案去除DNA的能力显著强于SDS和Triton X-100方案(P＜0.05),而对GAG含量的洗脱作用最弱(P＜0.05);异种体内埋置实验提示NP-40方案制备的DLB引起的免疫反应强度明显弱于SDS和Triton X-100方案,体内重塑结局评分显著高于SDS和Triton X-100方案.结论:与SDS和TritonX-100方案相比,NP-40方案能更有效地去除肝脏DNA,较好地保留GAG,诱导移植受体对DLB的良性重塑反应,为进一步的体内研究提供更优化的支架.     

前臂皮瓣修复外伤性颌面部缺损的护理体会

目的:探讨颌面部外伤后遗留大面积软组织缺损采用血管化游离前臂皮瓣修复的护理方法。方法:采用前臂皮瓣血管吻合修复17例外伤导致的颌面部软组织缺损,围术期采取严格的护理措施,术前的心理护理、术后的严密观察,最大限度防止皮瓣血管危象发生,保证治疗效果。结果:2例出现血管危象,进行抢救,其中1例失败,另1例抢救成功,其余15例顺利成活。结论:术前进行心理护理、术后严密观察、及时抢救是确保手术成功的关键。