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检测肾综合征出血热抗原特异性循环免疫复合物ELISA方法的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
检测肾综合征出血热抗原特异性循环免疫复合物ELISA方法的建立张东海,孙辉,高峰(山东省淄博第二卫生学校,淄博255015)关键词肾综合征出血热病毒,循坏免疫复合物,特异性,ELISA肾综合征出血热(HFRS)发病机理有多种学说,其中在体液免疫学说中... 相似文献
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应用敏感的免疫组织化学多重PAP法,观察了HFRS(肾综合征出血热)病毒抗原在HFRS患者尸检肝组织的定位,结果发现18例尸检肝组织中.15例肝细胞病毒抗原阳性,2例肝组织血管中白细胞也存在病毒抗原、4例肝内胆管为HFRS病毒抗原阳性,主要分布于肝内大胆管,小叶间胆管和小胆管的上皮细胞中,HFRS病毒抗原阳性物质呈地颗粒状,定位于胆管上皮细胞核上区的胞质中。 相似文献
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肾综合征出血热研究进展蔡增林,范永星(沈阳军区军事医学研究所,110031)1982年世界卫生组织(WHO)在日本东京召开的一次病毒性出血热工作会议上统一命名为“肾综合征出血热”,我国卫生部1995年规定改称流行性出血热为肾综合征出血热(Hemorr... 相似文献
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应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫转印技术对流行性出血热患才血清中免疫合物组分进行了分析。流行性出血热循环免疫复合物经SDS-PAGE分离,考马斯亮兰染色,显色主要有7条带,分子量分别为23kD,50kD,52kD,65kD,72kD,80kD及100kD。采用该病毒特异性抗血清、单克隆抗体以及人免疫球蛋白、补体成分抗血清识别,在其特环免疫复合物中可检出特异性病毒抗在及相应的免疫球状蛋白和补体成 相似文献
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卫生部兰州生物制品研究所生产的肾综合征出血热纯化疫苗在陕西,湖南,浙江的出血热流行区进行了人群免疫效果观察。基础免疫三针后,中和抗体阳转率平均50%,荧光抗体阳转率为84.26%,全程接种者26492人,疑拟发病人1人,保护率平均为96%。 相似文献
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To establish a rapid, sensitive and specific diagnostic assay for Hantavirus with microarray techniques, specific primers and probes were designed according to the conservative and specific DNA sequence of 76-118 strain and R22 strain. The probes were spotted on glass slides to form microarrays.The Cy3-1abled single stranded DNA fragments prepared by dissymmetical PCR were hybridized with the probes on the glass slides. The microarrays were scanned and analyzed with a scanner. The results showed that the DNA microarray could detect the different typed DNA of HTN and SEO with adequate specificity and sensitivity. The developed DNA microarray and techniques might be a very useful method for diagnosis and prevention, and could be widely applied in specific pathogens detection ofinfectious diseases such as hemorrhagic fever with renal syndrome. 相似文献
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对新近研制成功的地鼠肾原代细胞肾综合征出血热双价疫苗(汉滩型+汉城型)进行了Ⅱ期临床扩大观察,考核其对人体的安全性和中和抗体反应。将观察人群分别选择在中国南方和北方两个点,每个点接种589人和600人,观察其接种对象的副反应程度和采集血清样品测定其光抗体并以蚀斑减少中和法测定中和抗体,考核疫苗效果。观察结果显示,在观察的253人中分别有6人呈现轻度局部副反应和1人37.5℃以下的低热全身反应,总反应率分别为2.77%(7/253)。IFAT抗体阳转率对I型病毒为94.85%(184/194),对Ⅱ型病毒为89.69%(174/194),ELISA抗体阳转率为99.44%(179/180),GMT1325。PRNT抗体阳转率I型为92.55%(87/94),GMT10.17,Ⅱ型为93.62%(88/94),GMT11.08。经过Ⅱ期临床人体观察结果显示,该双价疫苗仅有轻度局部反应和良好的中和抗体应答。证明该疫苗对人体安全,具有较好的免疫原性。 相似文献
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应用常规病理、免疫病理及超微病理技术,对33例流行性出血热(EHF)患者皮肤活检标本的病理变化及病毒抗原、免疫复合物进行观察,同时与血清病毒抗原、抗体及循环免疫复合物检出情况进行比较。在23例EHF患者皮肤微血管内皮细胞中检出病毒抗原,部分组织中可同时检出免疫球蛋白及C3,少数组织仅能检出病毒抗原或免疫球蛋白。配对血清小也可检出EHF病毒抗原、抗体及循环免疫复合物。组织及血清免疫复合物形成与血清补体C3水平下降有关,组织内肥大细胞脱颗粒与血清IgE水平升高相关,提示多种变态反应参与了流行性出血热的发病机制。 相似文献
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在用病毒唑(Ribavirin)治疗肾综合征出血热(Hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)(以安慰剂作对照)的双盲法临床试验中,用微量酶联免疫吸附技术对确诊的64例患者血清和尿液中特异性IgG及IgM抗体水平进行动态观察与分析,结果发现,病毒唑治疗组两种血清抗体水平均较安慰剂对照组低(IgG,P<0.001;IgM,P<0.05),而两组患者尿液中两种抗体水平与阳性率均无明显差异,表明病毒唑对HFRS患者抗体的生成具有抑制作作用,本文就该作用的原因与后果进行了分析评价。 相似文献
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应用反转录-套式PCR方法检测肾综合征出血热病人血清中的汉坦病毒特异性RNA 总被引:8,自引:0,他引:8
采用5′端生物素标记汉滩病毒特异性寡核苷酸探针,结合磁性分离技术和异硫氰酸胍-酚一步法(胍酚法)提取病毒RNA,进行反转录-套式PCR,检测肾综合征出血热(HFRS)病人血清样本,胍酚法能检测血清中至少几个PFU病毒的RNA,比磁珠法敏感10倍,整个检测过程在5小时完成。应用该方法对137份汉滩型和汉城型HFRS病人血清进行检测分型,总阳性率达60.50%。其中,病程在7日以内(急性期)的病人血清仍能检测到22.73%阳性率。扩增产物经打点杂交检测证实为特异性扩增,并能准确分型。与空斑减少中和试验(PRNT)分型的符合率为100%。对20份正常人及24份非HFRS患者血清进行PCR扩增,结果均为阴性。将全部试剂做成试剂盒,为基层单位早期诊断肾综合征出血热病人提供了操作简便、特异、敏感、快速、直接的诊断方法。 相似文献
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多重PAP及多重PAP结合ABC免疫细胞化学方法的建立、敏感性分析与应用 总被引:12,自引:0,他引:12
作者在传统的 PAP 及 ABC 染色方法的基础上,通过重复使用桥抗及 PAP 的次数或重复使用生物素化桥抗及 PAP 和 ABC 的次数,使 PAP 与 ABC 方法成功地结合,增加连接于抗原部位的酶分子数,建立起两种敏感的免疫细胞化学方法。染色结果经显微分光光度图象分析,方差分析,回归分析及染色效果的直接观察表明,重复染色可增加阳性强度,扩大阳性染色范围,提高信噪比,从而提高方法的敏感性,以生物素化桥抗取代非生物素化桥抗,将 ABC 引入到多重 PAP 方法中,可使方法的敏感性进一步提高。该方法结合单克隆抗体及多克隆抗体成功地检测出用传统双PAP 及 ABC 难以或不能检测出的常规福尔马林固定石蜡包埋的肾综合征出血热尸检组织中的病毒抗原及石蜡包埋肿瘤活检组织中的桥粒抗原。 相似文献
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应用鼠单抗显示鼠组织中特异性抗原的免疫细胞化学方法 总被引:1,自引:0,他引:1
作者在应用小鼠抗肾综合征出血热病毒(HFRSV)单克隆抗体(MAbs)免疫细胞化学法定位HFRSV自然感染大鼠组织中的病毒抗原时发现,部分大鼠组织的特异性HFRSV MAbs的染色切片及无关MAb对照和空白对照染色的切片中均出现血液。血细胞,血管壁,单核吞噬细胞系统,肾小球毛细血管及散在的心肌和肝细胞阳性,说明组织中有交叉反应。免疫双扩试验,羊抗鼠IgG桥抗可与大鼠Ig产生免疫沉淀反应,提示,组织中的交叉反应是由桥抗与大鼠细胞中本身存在的Ig(EIg)反应所致。为了避免EIg对特异性病毒抗原染色的干扰,我们以HFRSV MAbs预先分别与二抗羊抗鼠IgG结合,再用正常鼠Ig结合可能存在的二抗中尚未结合MAbs的Fab结合位点,制成一抗分子复合物,并以此作为一个新的相当于羊源性单克隆抗体孵育组织,以抗羊抗体连接羊PAP的多重PAP法显示一抗分子复合物的特异性抗原结合位点,结果显示该方法具有一抗的特异性,以有多重PAP法的敏感性,可有效的避免因EIg产生的交叉反应。用小鼠抗大鼠Kappa轻链MAb按同样方法制备一抗分子复合物用于染色证实,产生交叉阳性的部位确为大鼠组织中的Ig。病毒抗原及Ig的定位结果说明,HFRSV自然感染大鼠组织中的病毒抗原有广泛分布,也存在免疫复合物,但后者有别于HFRS人体组织的分布,另外,心肌及肝细胞Ig阳性说明该组织存在因HFRSV感染所造成的组织损伤,该损伤可能与机体的免疫反应有关。 相似文献
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用原位分子杂交和免疫组化研究肾综合征出血热肾组织中的病毒感染 总被引:2,自引:0,他引:2
应用原位分子杂交和免疫组化技术研究了陕西、沈阳、上海、江西、广州等地收集的36例肾综合征出血热(HFRS)尸检肾组织中的病毒RNA和抗原的定位和分布。病毒RNA检测34例,28例阳性;抗原检测34例,30例阳性,病毒RNA及其抗原主要定位于细胞胞浆中。西安及沈阳地区的病例,病毒RNA和抗原阳性部位主要是肾小管上皮细胞,较少出现血管阳性。上海、江西和广州地区病例病毒RNA主要出现于肾间质血管和少数病例的个别肾小球毛细血管和肾小管上皮细胞;病毒抗原分布于肾间质血管和肾小管上皮中。1例(广州病例)肾血管平滑肌细胞检测到空泡状病毒NP抗原。另外在3例西安病例和9例上海病例肾远曲小管和集合管上皮中检测到NP和HA阳性的病毒包涵体。结果说明HFRS病毒可感染肾脏中肾小管上皮和血管内皮,并在肾小管上皮细胞产生包涵体。不同地区病例肾脏中病毒感染的部位不同,可能与不同地区病例所感染的病毒毒株或血清型不同有关。肾小管上皮细胞和血管内皮的损伤除病毒直接作用外,还可能有免疫因素参与。 相似文献
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