胰岛素增强EGF和TGF_α的促胃粘膜细胞生长作用

上皮生长因子(EGF)和转移生长因子(TGFα)是两种调节胃上皮细胞生长的因子。EGF/TGFα的mRNA已用免疫定位于胃腺上皮细胞。它们可能以局部或旁分泌方式作用于邻近的胃粘膜细胞。另外一些资料显示,胰岛素或胰岛素样生长因子在刺激胃肠道生长中起直接的或允许作用。     

胃肠道肿瘤TGF－α基因表达的研究

用分子杂交技术及流式细胞方法研究了转化生长因子α(TGFα)在人胃肠道肿瘤组织中的表达.结果表明,胃癌、结肠癌和直肠癌组织较相应癌旁组织TGFαmRNA水平增高.佛波脂(TPA 100μg/L)作用胃癌细胞MGc80-3后4h,可使细胞中TGFαmRNA水平增高,作用6h可使S期细胞百分比明显增加.这些结果提示:TGFα在胃肠道肿瘤中起重要作用,其表达可受TPA的调节.     

肺泡型细胞内表皮生长因子和转化生长因子α、β_1及其受体基因表达的研究

分离培养成年大鼠的肺泡 型细胞 ,通过斑点杂交、原位杂交和免疫组织化学染色 ,研究肺泡 型细胞内表皮生长因子 (EGF)、转化生长因子 α和 β1 (TGFα、TGFβ1 )及其受体基因的表达。结果显示肺泡 型细胞可表达 EGF、TGFα和TGFβ1 ,也可表达相应的 EGF受体 (EGFR)、TGFβ受体 型和 型 (TβR 、TβR )。表明肺泡 型细胞是合成和分泌 EGF、TGFα和 TGFβ1 的细胞之一 ;细胞凭借其 EGFR、TβR的存在 ,其增殖与分化可能受 EGF、TGFα和 TGFβ1 的旁分泌和自分泌两种途径调控。     

转化的小鼠肝细胞能表达TGFαmRNA

转化生长因子α(TGFα)可以由许多细胞、尤其是转化细胞产生。细胞转化能启动并维持TGFαmRNA的表达及其多肽产物的生成。TGFα与表皮生长因子(EGF)的受体结合,以自分泌的方式刺激细胞生长。曾有报道,EGF可诱导体外培养正常角化细胞的TGFαmRNA聚集,雌激素对大鼠乳癌细胞也有此种作用,说明     

TGFα反义寡聚核苷酸对膀胱癌BIU 87细胞株的作用

报道了23碱基组成的TGFα反义寡聚核苷酸和对照寡聚核苷酸对人膀胱移行细胞癌BIU87细胞增殖及其TGFα mRNA表达的作用,结果表明:TGFα反义寡聚核苷酸抑制体外培养的BIU87细胞的增殖、DNA合成和TGFα mRNA的表达,进一步证明了TGFα在BIU87细胞恶性增殖中的重要作用.     

转化生长因子α

转化生长因子α(transforming growth factor α,TGFα)是50个氨基酸的单链多肽,由160个氨基酸的前体加工而成。由于表皮生长因子(EGF)受体是 TGFα的功能性膜受体,因此,TGFα的许多生物学效应与 EGF 相似。TGFα最主要的功能是通过自分泌机制维持转化细胞的恶性生长。     

嵌合表皮生长因子疫苗E5T-mSEA的设计及抑瘤活性检测

表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)及其配体在多种肿瘤细胞中高表达,免疫注射表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)-载体蛋白所产生的抗体能够干扰EGFR与EGF的相互作用,进而抑制肿瘤生长。本实验室设计了EGF和TGFα的嵌合配体E5T,并将具有免疫增强作用的葡萄球菌肠毒素A(Staphylococcal enterotoxin A,SEA)与之融合。融合蛋白在大肠杆菌内表达后,通过金属螯合亲和层析,得到了纯度较高的E5T-mSEA融合蛋白。将E5T-mSEA免疫小鼠,能够产生高滴度的抗体,该抗体能够同时识别EGF和TGFα。将抗E5T-mSEA免疫血清与肿瘤细胞共培养,在1:10的稀释度下能显著抑制EGFR阳性肿瘤细胞的生长,而对EGFR阴性肿瘤细胞293T的生长没有明显影响。     

人膀胱癌转化生长因子α的研究

应用Northern印渍杂交和放射免疫分析技术证明了膀胱癌组织和细胞中TGFαmRNA的表达,并发现TPA能提高人膀胱移行上皮癌BIU-87细胞中TCFαmRNA和TGFα活性分子的水平,但对TGFα的功能受体(EGF受体)具有负调节作用。提示TGFα在膀胱肿瘤细胞的恶性增殖过程中起一定作用,蛋白激酶C的激活可能是调节TGFα基因表达的途径之一。     

肺泡Ⅱ型细胞表皮生长因子和转化生长因子α、β1及其受体表达的研究

分离培养成年大鼠的肺泡Ⅱ型细胞,通过斑点杂交、原位杂交和免疫组织化学染色,研究肺泡Ⅱ型细胞内表皮生长因子（EGF）、转化生长因子α和β1（TGFα、TGFβ1）及其受体基因的表达。结果显示肺泡Ⅱ型细胞可表达EGF、TGFα和TGFβ1,也可表达相应的EGF受体（EGFR）、TGFβ受体Ⅰ型和Ⅱ型（TβRⅠ、TβRⅡ）。表明肺泡Ⅱ型细胞是合成和分泌EGF、TGFα和TGFβ1的细胞之一;细胞凭借其EGFR、TβR的存在,其增殖与分化可能受EGF、TGFα和TGFβ1的旁分泌和自分泌两种途径调控。     

胃肠道肿瘤抗胃泌素治疗研究进展

胃泌素是胃窦和十二指肠黏膜G细胞分泌的多肽类激素 ,主要生理作用是促进胃酸分泌和胃肠道黏膜细胞生长。研究显示胃泌素是胃肠道肿瘤细胞一种自泌性的生长因子 ,通过促进增殖、抑制凋亡、刺激浸润以及和COX-2协同作用促进肿瘤生长。胃肠道肿瘤抗胃泌素治疗途径分为分泌抑制、受体拮抗、反义寡核苷酸抑制和抗胃泌素抗体治疗。其中抗胃泌素抗体治疗具有诸多优点 ,临床研究进展顺利。     

转化生长因子β的细胞生物学

无限繁殖是肿瘤细胞区别于正常细胞的主要特征之一。近年来,人们对细胞的生长分化及其调控机制的认识已有了深刻的变化。正常细胞均存在促进(如TGFα)和抑制(如TGFβ)其生长的多肽生长因子,该两种因子的平衡决定着细胞生长的生理或病理性变化。本文将简述转化生长因子β(TGFβ)近年来研究的一些进展。一、TGFβ是一组具有调节功能的多肽目前,已发现的TGFβ有五种亚型:TGFβ_1-TGFβ_5,其氨基酸有95-80%的同源性。TGFβ_1-TGFβ_3,其编码基因分别位于第19、1和14染色体上。TGFβ_1     

外泌体源性miRNAs在肺癌发生发展中的作用

外泌体(exosomes)是细胞分泌的纳米级细胞外囊泡.外泌体通过释放其内的生物活性大分子,比如微小RNA(microRNA,miRNA)到受体细胞,从而介导细胞间交流通讯. MiRNAs作为一类主要在转录后水平负向调控靶mRNAs的非编码RNAs,其在外泌体中含量最为丰富.在肺癌中,miRNAs经肿瘤细胞分泌的外泌体转运释放而发挥重要的作用.本文主要讨论了外泌体源性miRNAs在肺癌发生发展的各个阶段,包括血管生成、细胞增殖、侵袭转移、免疫逃逸、耐药等方面的作用,以及其在作为新型肺癌诊断和预后标志物方面的临床价值.     

雌激素诱发大鼠原位与移植垂体催乳素瘤中催乳素基因与TGFα和TGFβ1基因的表达

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体PRL瘤中PRL基因和两种转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)TGFα和TGFβ1基因表达水平的改变。结果表明:在E2长期作用后,原位垂体与异体移植于肾囊,从而远离下丘脑的垂体均可形成垂体PRL瘤;原位与移植垂体PRL瘤中均表现PRL基因的高表达,但移植瘤中的PRL基因表达水平低于原位垂体瘤;此外,仅在原位垂体PRL瘤中发现上述两种转化生长因子呈较高水平的表达,移植垂体PRL瘤与正常垂体中均检测不到这两种转化生长因子的表达。上述结果提示,TGFα和TGFβ1可能涉及E2诱发的原位垂体PRL瘤形成;E2诱发原位与移植垂体形成PRL瘤的机制可能不尽相同     

肿瘤细胞外泌体中融合基因的检测

目的:探究肿瘤细胞分泌的外泌体中是否可以检测到来源于源细胞的融合基因m RNA。方法:培养人非小细胞肺癌NCI-H3122细胞,采用外泌体试剂盒提取细胞上清中的外泌体,并用Western Blot实验验证外泌体是否提取成功。分别提取外泌体以及H3122细胞中的总RNA,将RNA反转录为c DNA,通过PCR反应扩增v1型EML4-ALK融合基因片段,经琼脂糖凝胶电泳确定目的条带后,将两种PCR产物送公司进行基因测序,最后对测序结果进行比对分析。结果:从H3122细胞上清中成功提取了外泌体,并且在外泌体中检测到来源于H3122细胞的m RNA;从H3122细胞外泌体中检测到EML4-ALK融合基因,并发现外泌体中的EML4-ALK融合基因的融合形式为V1,与在H3122细胞中检测到的EML4-ALK融合基因的融合形式完全相同。结论:肿瘤细胞分泌的外泌体中可以检测到肿瘤细胞来源的m RNA,并且外泌体中的m RNA可以反映肿瘤细胞m RNA的基因融合情况等生物学特性。     

人肝癌细胞与成纤维细胞共育时几种生长因子的表达

本文采用定位细胞培养技术．将人肝癌细胞和成纤维细胞有序地排列在同一容器内。采用过氧化物酶标记链霉卵白素染色法（LSAB法）．观察人肝癌细胞和成纤维细胞表达碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮细胞生长因子（EGF）和转化生长因子β1（TGFβ1）．研究肝癌细胞和成纤维细胞之间的相互调控作用。结果显示,bFGF、EGF和TGFβ1在两类细胞中的表达量随着细胞增殖率的变化也发生着动态变化。在细胞增殖率增高的时相,正性生长因子bFGF、EGF在细胞中的表达量也增高．而负性生长因子TGFβ1的表达量则降低;在细胞增殖率降低的时机．其表达量正好相反。表明肝癌细胞和成纤维细胞共育培养时,自分泌、旁分泌生长因子对细胞的增殖起着近程调控作用。     

辐射旁效应损伤潜在靶点药物研究进展

放疗是治疗恶性肿瘤的常用方法之一,但是在放疗的过程中,辐射对肿瘤细胞造成杀伤作用的同时,也会产生辐射旁效应(radiation-induced bystander effect,RIBE)对肿瘤周围正常组织造成损伤等不良反应。近期研究表明,辐射旁效应的产生是由细胞间隙连接和可溶性细胞信号分子介导的,主要包括间隙连接蛋白(Cx)、组织蛋白酶B(CTSB)、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)以及活性氧和氮氧化物等。该文针对这些关键靶点蛋白,总结了相关的治疗药物,并进一步比较分析了药物使用的优缺点,对临床预防肿瘤放疗所形成的旁效应损伤提供了一定的线索。     

F9胚胎癌细胞的转化生长因子及其免疫细胞化学定位

恶性肿瘤细胞的特性之一是在血清浓度较低的培液中也能照常增殖。1978年DeLarco和Todaro首先在小鼠肉瘤病毒转化细胞的条件培液中找到了一种转化生长因子(Trans-forming Growth Factor简称TGF),它具有(1)使正常细胞在体外生长中的接触抑制现象消失和(2)使它们的形态发生变化,并获得了锚着不依赖(anchorage independent)生长的特性。随后,他们假设肿瘤细胞自己分泌生长因子是它们对外源生长因子的需求量减少的原因。几年来不仅从很多种病毒和化学物转化的癌细胞和人类肿瘤细胞中,还在胚胎细胞,甚至正常成年组织中分离得到了多肽生长因     

外泌体源性环状RNA在肺癌病理进程及诊疗中的研究进展

外泌体是具有细胞间信号传递生物学功能的一种脂质双分子层囊泡,其内包含RNA、DNA、蛋白质等生物分子,近年来其在疾病发生发展、早期诊断和治疗等方面的作用被广泛研究。环状RNA (circular RNA, circRNA)是一类可以存在于外泌体中的单链闭合环状RNA。越来越多的研究表明外泌体源性circRNA与肺癌的发生发展密切相关,为了更好地了解外泌体源性circRNA在肺癌病理进程中的作用,本文重点讲述了外泌体源性circRNA在肺癌增殖、侵袭与转移、免疫逃逸和耐药中的作用,以及其在肺癌诊断、预后评估及治疗方面的研究进展。     

HIF-1α激活的长链非编码RNA-ANRIL与肺腺癌的关系的研究

目的:现已经证实缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)与肺腺癌(lung adenocarcinoma,LA)侵袭性有关。INK4基因座中反义非编码RNA(CDKN2B antisense RNA 1,ANRIL)是目前确认的能够促进肿瘤发生发展的一种长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)。而本研究即探究在肺腺癌中HIF-1α与ANRIL之间是否存在一定的联系。方法:利用实时定量PCR技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测人体肺腺癌组织和肺腺癌细胞系A549中HIF-1α和ANRIL的表达水平,然后利用小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)和基因过表达技术使HIF-1α低量和过量表达,再检测肺腺癌细胞系A549中ANRIL表达水平的变化。结果:ANRIL和HIF-1α在人体肺腺癌组织和肺腺癌细胞系A549中的表达水平呈现正相关,而且ANRIL和HIF-1α在癌组织中的表达水平均高于癌旁组织,并且通过HIF-1α的低量和过量表达,ANRIL亦呈现相应的变化。结论:ANRIL和HIF-1α在肺腺癌组织中的表达具有相关性,而且HIF-1α能够刺激激活ANRIL的表达,因此ANRIL-HIF-1α可能为肺腺癌的诊疗提供一个崭新的靶点。