小型昆虫整体玻片标本的简便制法

1.处死固定将蚊、蚜等置于70%酒精中杀死固定. 2.脱脂将材料装人试管中注入适量70%的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右. 3.清水漂洗:脱脂后用纱布过滤碱液,用蒸馏水或清水漂洗2-3次,再用蒸馏水将材料浸泡半小时左右. 4.染色用75%酒精、酸性品红饱和液染     

做减数分裂实验的几种好材料

1.大葱花序在地里越冬的大葱(2n=16),第二年春天三四月便可长出花序,待花序长到象枣大小时,颜色呈绿色(呈黄色时已晚),采摘花序,置于卡诺固定液中(3份酒精:1份冰醋酸),固定24小时,然后取出花序,挑取小花即可制片。如不及时制片,可将固定后的花序,用95％酒精冲洗后(直至闻不到醋酸味为止),放入70％酒精中,存于冰箱内,可随时取用。     

在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

聚乙烯醇封藏水绵永久装片

用聚乙烯醇不仅可以封藏较大的生物标本(参见本刊1983年第四期第54页聚乙烯醇膜藏叶脉标本一文),经过实验,还可用来封藏显微玻片标本,效果十分理想,特别是含水的标本。采集水绵投入FAA固定液中固定24小时,取出浸入50％酒精中(一段时间),移入清水中2—3小时,浸渍洗除固定液,在这期间要注意换清水,如果是流水清洗1小时即可。把水绵放入滴有品红染液的表面皿中染色10分钟,经镜检认为满意便可用清水洗去浮色。     

哺乳动物脑和脊髓灰白质标本制作法

取哺乳动物的新鲜羊脑组织和牛颈部脊髓,先用逐渐增加浓度(75％、85％、96％)的酒精溶液将材料固定,在每一种酒精溶液中要固定3—4天。从酒精溶液中将脑组织和牛脊髓取出,用锋利的刀片切成薄片和小段,再转入1％硫酸铜溶液中浸泡,经半小时后,     

小麦幼穗减数分裂进度的研究

为了顺利地开展小麦细胞遗传学研究,我们研究了小麦幼穗不同小穗同位小花和同一小穗不同位小花与减数分裂进度的关系,以期迅速地找到需要观察的减数分裂时期。去年我们在大田试验地选取小麦品种农大139的幼穗65个,固定在卡诺氏液(95%酒精:冰醋酸=3:1)中24小时,然后换入70%的酒精中以备进行细胞学观察。细胞学观察前,先量出幼穗的长度,然后自下而上逐小穗逐小花地进行观察,如此观察了65个幼穗中的45个,得到了小麦幼穗减数分裂进度的初步概念。在此基础上,当观察了幼穗的一个小穗的一朵小花以后,即对它相邻小穗和小花的减数分裂时期进行预测。例如另外     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。     

蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

不同固定方法处理小鼠视网膜行免疫荧光染色的效果比较

目的:免疫荧光染色(ImmunofluorescenceStaining, IF)是进行视网膜研究的重要方法之一。为了获得最优的IF结果,我们对视网膜的固定方法进行优化。方法:以小鼠视网膜为观察对象,分别采用浸泡固定方法(Immersion, I)、灌注法(Perfusion, P)以及两者联合(I+P)的方法进行固定,以IF方法对Pax6和Rhodopsin等抗原进行染色,对比各组视网膜组织的IF染色效果。其中,具体分组包括:浸泡固定2小时组(I2),浸泡固定12小时组(I12),浸泡固定24小时组(I24),灌注组(P),灌注+浸泡后固定2小时组(P+I2),灌注+浸泡后固定12小时组(P+I12)。结果:从大体结构来看,P+I2组的固定良好率达100%,I12、I24、P+I12组的良好率达83.33%,I2组和P组较低,分别是16.67%和0%。从Pax6的IF染色来看,I12组的染色满意度达100%,P+I2组和P+I12组的满意度为83.33%,I2组、I24组和P组的满意度较低,为16.67%。从Rhodopsin的IF染色结果来看,P+I2组和P+I12组的染色满意度为83.33%,I24组为50%,I2组、I12组和P组都为0%。P+I12组的视网膜切片行NF-M、PKC-α和glutamine synthetase (GS)染色也可获得良好的阳性结果。结论:综合大体结构、Pax6染色以及Rhodopsin染色等结果,P+I2组和P+I12组的效果最好,视网膜组织结构完整,IF方法行Pax6和Rhodopsin等的染色效果良好。因此,针对小鼠的神经视网膜进行IF相关实验时,灌注结合浸泡后固定2至12小时,可以作为最优的组织固定方法。     

细鳞泥鳅味蕾的形态初步研究

一、材料与方法 本研究所用材料为细鳞泥鳅(Misgurnus mizolepis Günther.)土名为肉泥鳅。 将捕来的细鳞泥鳅先放入水族箱中生活1—2天,然后破坏脑脊髓(杀死),放入盛有生理盐水的直径为12厘米的大培养皿中,剪下口须、唇、舌、口腔顶壁和底壁、咽等部位的材料,再分别放入带标签儿的已盛好波恩式固定液的指管中固定,经8—12小时后,用50％酒精冲洗,待黄色变浅后放入70％酒精中保存。然后做石蜡切片。切片的厚度为7—8微米,用窦来飞-苏木精染色,伊红复染,使胞核呈蓝色,胞质     

玉米花粉母细胞减数分裂永久压片技术的改进

1材料与方法实验材料玉米雄株实验用品显微镜、冰箱、载玻片、盖玻片、解剖针、圆头镊子、吸水纸、培养皿、量筒、烧杯、短玻棒实验试剂冰醋酸、95%酒精、45%醋酸、正丁醇、加拿大树胶、Carnoy固定液、改良苯酚品红染液实验方法1)取材在玉米雄穗抽出喇叭口以前7～10d左右取材固定。每天上午7∶00—9∶00减数分裂最旺盛,取材时先在喇叭口的下角用手捏一捏,若有松软感的地方即是雄穗的位置,用刀在此处划开一纵切口,剥出发育适宜的花序,立即浸泡到固定液中,2d后转入70%的酒精中,放入4℃冰箱中可长期保存。2)操作方法:①取一小花放在载玻片上,…     

念珠藻的制片方法

取材普通念珠藻(Nostoc Commune)生于潮湿的土壤或草地上,在春、夏多雨季节里很容易采到.它形似木耳,俗称“地木耳”或“地皮菜”,可食用.发状念珠藻(Nostoc flagelliforme)形如发丝,俗称发菜,是重要的食用蓝藻,可从商店购得.取其中任何一种材料泡在水中,使其胶质鞘膨胀,用小毛笔刷净泥砂杂物,剪成3毫米左右长的小块(或段).选平整的材料置于载片中央,用另一张载片将材料压薄,用棉线捆紧两张载片. 固定将捆好的两张载片投入FAA固定液中24小时,松开棉线,分开载片.由于材料本身的胶质,它能粘贴在两张或其中的一张载片上(通常两张载片各粘一部分).将此材料染色和脱水. 洗涤与初染将固定好的材料用50％酒精洗涤2—3次,每次10分钟.再经40％→30％→20％→10％酒精洗,每级10分钟.最后经蒸馏水浸洗2次,每次2分钟.媒染用4％铁明矾1小时,蒸馏水洗2次后用海氏苏木精染色1小时.蒸馏水洗去浮色,1％铁明矾分色.边分色边显微镜检,至细胞内含物呈黑色,其它部分浅灰色或无色时为止.立即倒掉分色液,蒸馏水洗2—3次后,将材料浸泡于自来水中,使其变蓝     

绿色植物保存法的一点经验

在制作绿色植物浸渍标本时我们研究出下列方法可得满意的结果,兹介绍如后。保色液的配制:硫酸铜20克、浓盐酸2或3滴、水100毫升。将植物材料放入保色液中,如热至95℃左右,经半小时(视材料大小而略有增减)后,取出,在清水内充分洗净,然后放入5—10%福尔马林或70%酒精中保存即可。     

微小昆虫整体玻片标本的简便制法

我多年来对微小而柔软昆虫整体标本的制作摸索出几点简便方法,现介绍如下。一、几个优点 1.省去繁琐的脱水过程;2.节省时间,容易做成功;3.标本清晰,层次分明,不易变形;4、便于保存,适于鉴定、观察用。二、制作方法 1.处死固定:将蚊、蚜等置于70％酒精中杀死固定。 2.脱脂:将材料装入试管中注入适量70％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液加热脱脂,待水开后,再用文火维持15分钟左右。     

平滑肌细胞分离法

平滑肌是由平滑肌细胞(纤维)组成,某些脏器管壁的肌层部分,如胃肠道、呼吸道、泌尿生殖管道、血管、淋巴管的肌层均由平滑肌构成。平滑肌细胞核只有一个,椭圆形或长柱形,位于细胞的中部,没有横纹。细胞质称肌浆,应用特殊染色可以显示出纵列细丝,即肌原纤维。表面包有薄膜,为肌膜。材料蟾蜍的胃或猫小肠。固定 F·A·A(10％福尔马林10毫升;50％酒精85毫升;冰醋酸5毫升)。方法 1.材料从固定液中取出后,浸入30％酒精1小时,将粘膜层和浆膜刮除干净,留下肌层。     

介绍一种绿藻的保色法

取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅[Pb(ACO)_2]10克,溶于1000毫升90%酒精中,充分混匀后静置24小时,取上清液即得绿藻保色液.无鞭毛绿藻类,如石莼、礁膜、刺松藻、浒苔等,由于它们的植物体较大,只需把新采来的标本冲洗干净,去除杂藻,固着基物大小     

Zymomonas mobilis用甜菜底物生产酒精的比较

利用在葡萄糖基质培养基上培养Z.mobilis菌生产酒精比酵母有几个优点.其中最重要的是较高酒精收率(超过理论值95%)和较高酒精产率(高出3—5倍).关于用Z.mobilis在蔗糖基质培养基上进行酒精发酵有两个主要问题.首先,由于果聚精和山梨糖醇付产物的形成,酒精收率减小到理论值的70—80%.其次,在象甘蔗糖蜜这样天然底物中Zmobilis的生长和酒精产量都很低.     

大蒜根的扫描电镜图象

将蒜根切成1-2毫米长的小段,放在2%戌二醛固定液中固定4小时,并用抽气泵抽去组织中的空气;用缓冲液冲洗几次后放入5-6%高锰酸钾固定液中固定48小时,再用缓冲液冲洗后,乙酸逐级脱水,然后喷碳喷金.这种二次固定制取的样品很脆,一碰就碎,这有利于     

甘蓝与大白菜原生质体的电融合研究

用电融合法进行了萝卜胞质雄性不育甘蓝(Brassica oleracea var.capitata)叶肉原生质体与大白菜(Brassica campestris var.pekinensis)悬浮细胞原生质体的融合.使用宽间距(电极间距1.5mm)电融合小室,操作简易.两种原生质体的异源融合率最高可达46±6%,其中异源双体融合率可达11±1%.异核体在与双亲原生质体共培养(10~4/ml)时,24小时就有近10%发生第一次分裂,48小时后可达70%左右.培养24—48小时后用稀释法挑选出异核体,部份异核体可在低密度(10~2/ml)甚至单细胞条件下持续分裂.由此获得了异核体来源的愈伤组织,并在分化培养基上再生出了根.