发根土壤杆菌对葛属药用植物的遗传转化

葛根是传统中药。利用发根土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ （Ｒｉｋｅｒ ｅｔ ａｌ．）Ｃｏｎｎ）Ｒ１６０１转化野葛（Ｐｕｅｒａｒｉａ ｌｏｂａｔａ（Ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｉ）、山葛（Ｐ．ｌｏｂａｔａ ｖａｒ．ｍｏｎｔａｎａ）和三裂叶野葛（Ｐ．ｐｈａｓｅｏｌｏｉｄｅｓ（Ｒｏｘｂ．）Ｂｅｎｔｈ．）离体叶片,在叶片表面直接形成毛状根。毛状根的诱导频率分别为１６．６％、１６．２％和     

发根农杆菌介导的药用植物遗传转化

就药用植物外植体的选择、转化方法、转化毛状根的鉴定、影响植物遗传化的因素、毛状根培养与次生代谢产物的产生以及转基因药用植物的获得等方面作一综述。     

发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究进展

发根农杆菌介导的植物遗传转人旨近年来发展起来的一项新的植物遗传转化技术。本文就发根农杆菌Ｒ１闰的结构、发根农杆菌介导的植物遗传转化的方法和步骤,以及运用这一技术获得药用植物次生代谢产物的研究进展作一全面介绍。     

发根农杆菌介导的药用植物遗传转化研究

利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)诱导药用植物产生的毛状根具有生长迅速,合成能力强和遗传性稳定等优点,已成为一种新的培养系统。就影响发根农杆菌介导的药用植物遗传转化的因素作一概述。     

发根农杆菌对黄瓜的遗传转化

发根农杆菌对黄瓜的遗传转化施和平李玲潘瑞炽（华南师范大学生物系广州５１０６３１）关键词发根农杆菌,黄瓜,毛状根,冠瘿碱ＧＥＮＥＴＩＣＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＣＵＣＵＭＩＳＳＡＴＩＶＵＳＢＹＡＧＲＯＢＡＣＴＥＲＩＵＭＲＨＩＺＯＧＥＮＥＳＳＨＩ...     

发根土壤杆菌Ri质粒对黄瓜进行遗传转化的研究

以发根土壤杆菌Ｒｉ质粒介导,对载体ｐＢＴＣ－８上的Ｔ－ＤＮＡ转化黄瓜进行了初步研究。采用黄瓜的各种不同外植体片断与土壤直菌共培养的方法,诱导出具有典型毛状根特性的转化根,转化根经诱导培养形成愈伤组织,冠瘿碱检测表明,转化根及愈伤组织含有农杆碱和甘露碱。愈伤组织进一步分化培养再生出完整植株。再生植株表现卡那霉素抗性。     

高等植物在发根农杆菌介导下的遗传转化

本文介绍了发根农杆菌的生物学特性、遗传转化的操作技术、RiT-DNA转化体的形态特征以及发根农杆菌转化的利用。与根癌农杆菌不同,农杆碱型发根农杆菌的RiT-DNA含有生长素合成基因、农杆碱、甘露碱合成基因,不含有细胞分裂素合成基因,它的转化体首先是转化根。发根农杆菌介导的植物遗传转化,在次生代谢产物生产,植物抗逆性育种以及细菌与植物进化关系的研究等方面具有广泛的应用前景。     

乙酰丁香酮对发根农杆菌遗传转化黄瓜的影响

乙酰丁香酮对发根农杆菌遗传转化黄瓜的影响施和平李玲潘瑞炽（华南师范大学生物系,广州５１０６３１）ＥＦＦＥＣＴＯＦＡＣＥＴＯＳＹＲＩＮＧＯＮＥＯＮＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＣＵＣＵＭＩＳＳＡＴＩＵＳＢＹＡＧＲＯＢＡＣＴＥＲＩＵＭＲＨＩＺＯＧＥＮＥ...     

发根土壤杆菌体外转化甘草子叶及下胚轴

利用发根土壤杆菌农杆碱型15834、A_4菌株和甘露碱型8196、K_(599)菌株体外转化甘草子叶及下胚轴。结果表明:除K_(599)菌株外,其余三种菌株都能诱导产生甘草发状根无性系。其中15834菌株的诱导率最高,下胚轴的诱导率高于子叶。组织学观察表明,在感染后4天左右,下胚轴维管束鞘外细胞、特别是形成层部分细胞大量启动形成分生细胞及分生细胞团,并进一步分裂形成根原基。6—8天后根原基具单向极性生长形成完整的发状根结构。发状根能在无外源激素的培养基上迅速生长。高压纸电泳检测到发状根中存在农杆碱及甘露碱,说明Ri质粒T-DNA编码的这两种冠瘿碱合成酶基因在甘草细胞中得到了表达。     

极性和NAA浓度对发根农杆菌遗传转化黄瓜子叶的影响

本文研究了极性和NAA浓度对发根农杆菌（Agrobacteriumrhizolgenes）R1000和R1601诱导黄瓜子叶产生毛状根的影响。结果表明,感染发根农杆菌R1000和R1601的黄瓜子叶都仅在其下端产生毛状根。培养基中加人0．1mgL-1和5．0mgL-1NAA预培养和共培养都可提高发根农杆菌R1000和R1601对黄瓜子叶外植体下端的生根能力。但仅用5．0mgL-1NAA预培养和共培养的感染发根农杆菌R1000和R1601的子叶外植体上端可不同程度地生根,生根率分别为32．5％和6．48％。经检测,毛状根均含有农杆碱和甘露碱。     

发根农杆菌介导药用甘薯西蒙1号的遗传转化

用发根农杆菌A4分别感染药用甘薯西蒙1号的叶片、茎切段、叶柄等外植体,诱导出毛状根,并对毛状根进行了离体培养.采用L9(34)正交设计法优化甘薯西蒙1号的毛状根诱导条件;PCR扩增检测转化毛状根;用高效液相色谱仪检测了毛状根中咖啡酸的含量.结果表明:转化中茎切段是最合适的外植体,最佳感染时间20 min,共培养最佳时间为2天;PCR扩增检测表明发根农杆菌Ri质粒的T-DNA片段已整合进植物的基因组中;经高效液相色谱仪证实毛状根中含有咖啡酸,含量为0.03792 mg/g.     

发根土壤杆菌及其应用研究进展

简要介绍了发根土壤杆菌的致病机理及其影响因素 ,重点综述了发根土壤杆菌在用于获得转基因植物、生产次生代谢产物和促使植物生根等方面的应用。     

发根农杆菌转化大豆的研究

本文利用发根农杆菌感染大豆不同外植体,在成熟胚靠近子叶节部位诱导产生毛状根。经冠瘿碱检测表明,毛状根及由此产生的愈伤组织均有甘露碱存在,说明Ri质粒的T-DNA已整合到大豆的转化根及愈伤组织中。转化根再生实验表明,在含NAA和IAA8mg/L的MS培养基上得到不定根的分化,MS和B_3培养基及6％蔗糖对转化丛生芽的诱导有利。转化的丛生芽在MS基本培养基上进一步长成小植株。     

超声波辅助处理对发根农杆菌介导的苦豆子遗传转化的影响

以发根农杆菌转化苦豆子的子叶和下胚轴外植体,结果表明,辅助以超声波处理有助于转化率的提高,当超声波(功率120W,震荡频率50kHz)处理25min时,转化率达到最高峰(子叶为83．7％,下胚轴为39．1％),分别高于对照(14．4％和9．8％)69．3％和29．3％。在此条件下,进一步添加AS l00μmol/L,可使转化率再进一步提高9．9％和7．6％。     

发根农杆菌的Ri T—DNA对茎用芥菜的遗传转化

茎用芥菜品种“泡叶”的倒插叶柄被携农杆碱型Ｒｉ质粒ｐＲｉ１８５５的发根农杆菌菌株ＬＢＡ９４０２感染后获得毛根,出根率为１００％。转化根在不含激素的培养基上快速生长,并表现出典型的生根性状。在含ＢＡ８．０ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ０．６ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上毛根再生成完整转化株,冠瘿碱分析表明ＴＲ－ＤＮＡ已在转化株中整合和表达,ＰＣＲ表达和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证实内含８６２ｂｐ ｒｏｌＢ序列的ＴＬ－ＤＮＡ也已     

发根农杆菌介导的菠菜毛状根遗传转化体系的建立

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)侵染植物后可诱导植物产生毛状根。菠菜(Spinacia oleracea)是常见的食用蔬菜, 目前尚未见菠菜毛状根的研究报道。经筛选得到适合诱导菠菜毛状根的发根农杆菌菌株LBA9402, LBA9402侵染菠菜外植体茎后, 毛状根的诱导率最高可达16%。菠菜毛状根呈白色, 具有丰富的根毛, 能在无外源激素的固体培养基上快速增殖生长。通过诱导菠菜毛状根产生愈伤组织并进行分化, 获得了菠菜毛状根的再生植株, 再生率为8%。此外, LBA9402可将含有Ri质粒的T-DNA和携带外源GFP基因的Ti质粒T-DNA共同导入外植体中。PCR检测和荧光显微观察结果显示, rolB及GFP基因在菠菜毛状根基因组中稳定表达, 共转化频率为50%。     

发根农杆菌介导的菠菜毛状根遗传转化体系的建立

发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)侵染植物后可诱导植物产生毛状根。菠菜(Spinacia oleracea)是常见的食用蔬菜, 目前尚未见菠菜毛状根的研究报道。经筛选得到适合诱导菠菜毛状根的发根农杆菌菌株LBA9402, LBA9402侵染菠菜外植体茎后, 毛状根的诱导率最高可达16%。菠菜毛状根呈白色, 具有丰富的根毛, 能在无外源激素的固体培养基上快速增殖生长。通过诱导菠菜毛状根产生愈伤组织并进行分化, 获得了菠菜毛状根的再生植株, 再生率为8%。此外, LBA9402可将含有Ri质粒的T-DNA和携带外源GFP基因的Ti质粒T-DNA共同导入外植体中。PCR检测和荧光显微观察结果显示, rolB及GFP基因在菠菜毛状根基因组中稳定表达, 共转化频率为50%。