微生物实验中常用细菌染色方法的改良

细菌染色方法是微生物实验中观察细菌形态结构以及掌握细菌代谢、繁殖等情况的常用普及技术。微生物实验中常用的细菌染色法包括其革兰染色法、抗酸染色法等。为进一步提高实验中细菌形态的观测质量,本文就对两种常用细菌染色法进行了改良,据实验结果显示,其改进后方法操作更加简单,更有效起到细菌染色作用及观测作用。     

好氧性分解纤维素细菌的薄层沉淀纤维素计数法

安排了一个改良了的好氧性分解秆稚素釉菌的沉淀秆稚素计数法——薄层沉淀秆稚素计数法(沉淀纤维素用量7．5％、洋菜浓度0．4一0.5％,培养基厚度0．8毫米)。通过用四属五种纯种分解秆稚素糸田菌,四种不同土样,四种不同计数法,验证了这个方法的有效性。讨论了这个方法的优缺点。     

生物制品中逆转录酶活性检测

在以往报道的逆转录酶（RT）检测方法的基础上,以噬菌体MS2RNA为模板,在有外源RT作用下,缩短逆转录的时间,产生特异性cDNA,经过PCR扩增,增加了试验的灵敏度。在PCR过程中,加入了RnaseA酶消化步骤,降低了逆转录反应的pH值到5．3,并用高浓度的琼脂糖凝胶观察扩增产物,减低了由于细胞内DNA聚合酶造成的假阳性结果的产生,而且使方法得到简化。     

教学中常用的一种实验细菌：—葡萄球菌

葡萄球菌属于微球菌科葡萄球菌属(Stap-lylococcus),是观察球菌个体形态以及简单染色和革兰氏染色中常用的实验材料,同时也是常见的化脓性球菌。在进行实验观察时,如果不注意无菌操作,往往会造成葡萄球菌感染。葡萄球菌的种类繁多,在自然界分布广泛。在人体的皮肤表面及鼻、咽、肠道也常存在。绝大多数的葡萄球菌不致病,仅少数可以引起人和动物的化脓性感染。《伯杰细菌鉴定手册》(第八版)将葡萄球菌分为金黄色葡萄球菌(S.aureus)、表皮葡萄球菌(S.epulermidis)和腐生葡萄球菌(S.saprophytvcus),在教学中最常用的菌种--金黄色葡萄球菌为致病菌。     

生物制品

生物制品是指以微生物、寄生虫、动物毒素和生物组织作为起始材料,采用生物学工艺或分离纯化技术制备,并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量制成的生物活性制剂。根据应用对象,生物制品可以分为３类：用于人类的医用生物制品、用于动物的动物生物制品和用于...     

生物制品中残存DNA的研究进展

综述了近４０年生物制品中残存ＤＮＡ的争论,关于这个问题的研究进展现行标准的制订及检测方法的可靠性,以及ＷＨＯ专家委员会的意见及这个问题的发展趋势     

对USP36中微生物计数法的研究

通过对USP36中〈61〉非无菌产品微生物学检查:微生物计数检查法项下关于在存在产品的情况下微生物计数法的适用性研究,为确立微生物检测方法提供一定的依据。     

气相色谱法测定生物制品中苯酚含量

本文采用气相色谱法测定了几种生物制品中苯酚含量。样品无需进一步处理,加入内标液后直接上柱测定,色谱峰形良好,线性范围宽,平均回收率和变异系数分别为１０１．８％ 和１．０８５％ ,最小检测限为１０ μｇ／ｍ ｌ,本法操作简单,样品用量少,可作为测定生物制品中苯酚含量的一种常规方法。     

Ames试验中菌落呈色计数法的探讨

本实验利用氯化三苯四氮唑(TTC)使革兰氏阴性菌显色的原理,在平板法Ames试验中,添加TTC浓度为lmg/皿时,使测试菌株(鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型株TA97、TA98、TA100、TA102)呈为红色。试验证明TTC本身无诱变性,亦不干扰阳性物(2-AF)的诱变性。菌落呈色后便于菌落计数,并在一定程度上提高试验结果的准确性。     

Ames试验中菌落呈色计数法的探讨

本实验利用氯化三苯四氮唑(TTC)使革兰氏阴性菌显色的原理,在平板法Ames试验中,添加TTc浓度为1mg/皿时,使测试菌株(鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型株TA97、TA98、TA100、TA102)呈为红色。试验证明TTC本身无诱变性,亦不干扰阳性物(2-AF)的诱变性。菌落呈色后便于菌落计数,并在一定程度上提高试验结果的准确性。     

大肠杆菌快速平板直接计数法

为了提高乳制品的卫生检验质量和效率,积极预防肠道传染病,我们吸取了国内外大肠杆菌的检     

生物制品研制开发动态

本概述了近年来生物制品研制领域的新动态,包括１９９９年我国新药研制相关法规的修订、有军事背景的生物制品的开发和研制,及在生物药物研制中值得重视的新生物技术领域。另外,介绍了生物制品的知识产权保护情况及如何查找生物技术专利资源。     

生物制品专刊序言

生物制品是一类预防、诊断和治疗疫病的特殊制剂。生物制品的研发是融合微生物学、免疫学、分子生物学、细胞学、基因工程及发酵工艺等学科知识的综合技术体现。生物制品产业是整个生物技术产业的核心和热点。近年来,我国在生物制品研发方面取得了较大进步,为促进我国生物制品研究的交流,本期“生物制品”专刊集中展现了我国生物制品研究人员在预防生物制品、诊断制品、治疗生物制品领域所取得的最新进展。     

沙眼衣原体的简便计数法

目前衣原体的计数,一般采用Reeve的方法,即用姬姆萨液将经过一定处理的衣原体染色,然后在显微镜暗视野下进行计数。该方法步骤较多,耗时长,且易受细胞碎片干扰。Salari利用荧光素染料Hoechst 33258(Bisbe-     

医院常用抗菌药物使用频度与 细菌耐药性分析

目的分析我院2016年抗菌药物的临床使用情况与主要临床分离病原菌的耐药情况,为合理用药提供依据。方法通过郑州市第一人民医院HIS系统查询抗菌药物使用量与金额,计算抗菌药物用药频度(DDDs)及日均费用(DDDc);同时分析临床常见菌的耐药率。结果在10种抗菌药物中,DDDs排名前3位的依次是左氧氟沙星(28368)、头孢西丁(13346)和哌拉西林/舒巴坦(11748)。DDDc排名前3位的依次是拉氧头孢(777.00)、美罗培南(504.00)和头孢替安(424.00),左氧氟沙星的DDDc值最小。临床常见菌对左氧氟沙星的耐药率高低差别较大。临床常见G-菌对头孢哌酮/舒巴坦和多粘菌素B的耐药率较低;常见G+菌对阿米卡星、万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和米诺环素的耐药率较低。结论左氧氟沙星在临床中的使用频度最高且日均费用最低,临床常见菌对其耐药率差别较大。β-内酰胺类抗菌药的日均费用低于其他抗菌药物。大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌对常见抗菌药物的耐药率较低,说明该院抗菌药物临床应用较合理。     

应用HPLC测定生物制品中甲醛含量的研究

研究了直接用于液相色谱测定甲醛与2,4-二硝基苯肼的反应条件,使反应在菌疫苗类生物制品自身的pH范围内即弱酸性条件下,无需酸碱度调节,反应产物甲醛衍生物不需要有机溶剂萃取,避免损失,可直接用于液相色谱分析。在检出限及精确度方面更是优越于分光光度法。将样品用2,4-二硝基苯肼溶液衍生后,经C18化学键合硅胶为固定相,以乙睛∶水(60∶40,体积比)为流动相。紫外检测波长360 nm进行测定。方法的平均回收率为95.4%(n=5),两种生物制品6次独立测定的相对标准偏差分别为重组乙型肝炎疫苗(CHO)RSD=0.92%,吸附白喉破伤风联合疫苗RSD=3.92%。甲醛(0.6~3.0μg/mL)范围内,浓度与吸收面积值呈良好的线性关系。结果显示,该研究方法的色谱条件能准确定量、灵敏、准确、重复性好,优于药典的分光光度法,可用于实际检测分析。