RG50864对PDGF诱导的肺动脉平滑肌增殖细胞核抗原表达的影响

研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌增殖细胞核抗原表达的影响。应用原代培养的小牛肺动脉平滑肌细胞,采用流式细胞仪分析ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌增殖细胞核抗原及ＤＮＡ含量的变化,并用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析技术观察了ＲＧ５０８６４对ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌细胞酪氨酸磷酸化的影响。结果表明：与对照组相比,ＲＧ５０８６４处理组可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌增殖细胞核抗原的表达,发现细胞周期Ｓ期受抑制。Ｗｅｓｔ－ｅｒｎＢｌｏｔ分析显示ＲＧ５０８６４可明显地抑制ＰＤＧＦ诱导的肺动脉平滑肌细胞酪氨酸磷酸化程度。提示ＲＧ５０８６４可显著地抑制ＰＤＧＦ诱导肺动脉平滑肌增殖细胞核抗原的表达,其机制可能是抑制酪氨酸蛋白激酶活性     

植物细胞中NuMA类似蛋白的分布及其在细胞周期中的变化

免疫荧光染色结果说明植物细胞核内含有与抗动物ＮｕＭＡ多抗呈阳性交叉反应的多肽。选择性抽提并结合免疫荧光染色结果说明这种多肽位于核基质纤维蛋白网络上。免疫印迹反应显示胡萝卜（ＤａｕｃｕｓｃａｒｏｔａＬ．）悬浮培养细胞核基质蛋白与抗动物ＮｕＭＡ蛋白多抗的阳性反应条带为７４ｋＤ和７６ｋＤ。有丝分裂各期免疫荧光染色的结果表明植物细胞中的ＮｕＭＡ类似蛋白在有丝分裂过程中呈现有规律的变化。结合选择性抽提的有丝分裂各期的免疫荧光染色的结果表明核基质在此过程中也发生明显变化。应用选择性抽提并结合ＤＧＤ包埋去包埋电镜技术对植物细胞间期及有丝分裂期核基质的形态结构进行了观察。结果显示胡萝卜悬浮培养细胞间期核内存在一个非染色质性的纤维蛋白网络体系,而在正处于分裂的细胞中则未观察到。以上结果说明ＮｕＭＡ类似蛋白是核基质的组分之一并与有丝分裂密切相关。     

SRS－淋巴瘤细胞染色质超敏位点相关蛋白的研究

 ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质超敏位点相关蛋白的研究钟叔平,何开玲,温博贵（汕头大学医学院生化教研室,汕头５１５０３１）自１９７６Ｗｅｉｎｔｒａｕｂ首先报道脱氧核糖核酸酶Ｉ（ＤＮａｓｅＩ）优先消化鸡红细胞核活性基因以来。有关ＤＮａｓｅＩ优先水解超敏位点（Ｄ...     

对果蝇S期细胞内组蛋白基因的原位定量分析

利用微型计算机控制的荧光显微镜、荧光强度检测仪和图像记录装置并结合荧光原位杂交法对果蝇细胞核内组蛋白基因的复制时期进行了研究,从而建立了一套细胞内直接定量分析的方法。根据果蝇胚胎原代培养细胞核的ＤＡＰＩＩ杂色强度确定处于Ｓ期的细胞。用杂交信号的荧光强度与细胞核荧光强度的相关关系来反映组蛋白基因的复制时期。结果表明果蝇组蛋白基因的复制是在ＤＮＡ合成早期进行的。这套方法至少可直接在细胞上对每套基因组１     

家兔肾脏内髓集合管细胞的分离与原代培养

目的：为了分离,培养肾脏内髓集合管（ＬＭＣＤ）细胞。方法;本文采用胶原酶消化和低渗溶解等步骤分离家兔肾脏加ＩＭＣＤ细胞,分离ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养基、３７℃,５％ＣＯ２的空气环境中培养;经透射电镜和角蛋白抗体免疫细胞化学等鉴定。结果：几乎所有的培养细胞均被染为棕黄色;电镜观察培养的细胞核大,呈菜成椭形。胞浆少,细胞器少见。细胞膜表面存在许多短而粗的微绒毛。与原ＩＭＣＤ细胞的形态和免疫细胞化学特征相符     

药物诱导的玉米根尖细胞凋亡

同时应用ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒｉｎｇ、ＤＮＡ Ｇｅｌ Ｂｌｏｔ以及基于染色体涂片 原位末端标记技术,从染色体、细胞核和ＤＮＡ不同水平对细胞毒素类药和的放线菌Ｄ、放线菌酮和秋水仙碱诱导的玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）根尖分生组织细胞死亡作了检测。结果表明：同动物中一样,这些药物诱导的玉米根尖分生组织细胞死亡也具有ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ、染色质和细胞核浓缩等典型的调亡特征,说明这些细胞毒素类药物能够诱导植     

F—肌动蛋白是蒜根端分生组织细胞核和染色体的组成成分

以兔抗鸡肌动蛋白抗体为一抗、ＦＩＴＣ羊抗兔ＩｇＧ抗体为二抗进行间接免疫荧光标记实验,观察到蒜（ＡｌｉｕｍｓａｔｉｖｕｍＬ．）根端分生组织细胞核和染色体均发出明亮的黄绿色荧光,说明其中含有肌动蛋白。经ＴＲＩＴＣ鬼笔环肽标记后,完整的间期细胞、游离的间期细胞核、前期和中期染色体以及末期子细胞核均发出较强的红色荧光,而固定前用细胞松弛素Ｄ处理的根端分生组织细胞的荧光明显减弱或没有荧光,这些结果说明细胞核和染色体中存在着Ｆ肌动蛋白。抗肌动蛋白抗体和鬼笔环肽双标记实验结果指出,同一细胞核和染色体,在ＦＩＴＣ的激发光波长下发出代表总肌动蛋白的黄绿色的ＦＩＴＣ型荧光,在ＴＲＩＴＣ的激发光波长下则发出代表Ｆ肌动蛋白的红色的ＴＲＩＴＣ型荧光,两类荧光的分布是一致的。上述结果进一步证明Ｆ肌动蛋白是细胞核和染色体的组成成分,并说明Ｆ肌动蛋白可能是细胞核和染色体中肌动蛋白的主要存在方式。     

ScⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞核、染色体和染色体骨架的组成成分

采用机械破碎和蔗糖梯度离心方法从洋葱根端分生组织中分离出细胞核并制备出核 骨架。细胞核ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱带中１３５ｋＤ处有一多肽,免疫印迹实验结果表明,该多肽可被抗 鸡ＳｃⅡ抗体标记,核骨架中没有此多肽。经抗ＳｃⅡ抗体和ＦＩＴＣ偶联的二抗标记后,细胞核 发出代表ＳｃⅡ的特异性荧光,而核骨架中无荧光发出。经抗ＳｃⅡ抗体和蛋白Ａ胶体金处理 后,金颗粒特异性地结合在核内染色质区域。说明ＳｃⅡ类似蛋白是洋葱根端细胞核的组分, 且位于核内染色质上,但该蛋白不是核骨架成分。免疫荧光和免疫电镜实验结果还说明ＳｃⅡ 类似蛋白是洋葱根端细胞染色体和染色体骨架的组成成分。     

四膜虫（Tetrahymena thermophila）核纤层的研究

采用非树脂包埋去包埋超薄切片电镜技术,并结合选择性生化抽提方法以及间接免疫荧光染色方法显示,在四膜虫细胞内存在典型的核纤层结构。蛋白分离纯化与免疫印迹法分析结果说明四膜虫细胞核纤层可能主要由分子量为６６ＫＤ的多肽构成。蛋白分离纯化结果表明四膜虫细胞的核纤层蛋白可能不如高等动物细胞的丰富。     

中期染色体外鞘蛋白质的研究

从１２例硬皮病患者的抗染色体抗血清中发现４例是抗中期染色体鞘的,用它们和小鼠腹水癌细胞核及全细胞裂解液ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的蛋白印迹相反应,结果显示它们和细胞核裂解液的１１条抗原蛋白相结合,而且和全细胞裂解液中除以上的１１条外的另８条相结合。     

《细胞学讲座》(Ⅳ)三、细胞膜及细胞器的结构与功能——细胞核、细胞骨架(微丝和微管)、溶酶体

一、细胞核 细胞核是细胞的重要结构。出现细胞核是生物进化上的一个重要标志,首先由布朗(Bro-wn)发现。几乎细胞的全部遗传信息都储存在胞核内。 一般讲每个细胞只有一个细胞核,但也有     

r－干扰素对喉癌细胞系HEP－2HLA－DR抗原和增殖细胞核抗原表达的影响

本实验用人重组ｒ－干扰素（ｒｈｕ－ＩＦＮ）作用ＨＥＰ－２细胞后ＨＬＡ－ＤＲ抗原和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的检测来探讨ｒ－干扰素对ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达诱导作用及体外抗增殖活性。用单克隆抗体ＣＲ３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ）和Ｋｉ－６７（抗ＰＣＮＡ）。以链霉素一生物素技术（ＬＳＡＢ）检测ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原和ＰＣＮＡ表达,结果显示：ｒ－ＩＥＮ诱导ＨＬＡ－ＤＲ抗原和抑制ＰＣＮＡ表达其强弱与ｒ－ＩＦＮ剂量有关。资料提示：ｒ－ＩＦＮ不仅对ＨＥＰ－２细胞有细胞毒作用,同时能调节其细胞膜特性,因而在喉癌的治疗中是有效的。     

与细胞周期G1→S调控点相关的几个重要元件及其与肿瘤的关系

在哺乳动物细胞周期调控中,Ｇ１→Ｓ期之间的调控点是细胞内外信号经传递、整合汇集到细胞核,对细胞的增殖进行调控的关键点,该点调控的异常与肿瘤的发生、发展关系密切。在相关的因子中,Ｒｈ、ｃｙｃｌｉｎＤ、ＣＤｋ４／６和Ｐ１６组成调控途径研究比较明确,目前被认为与Ｇ１→Ｓ调控点关系最密切,本文综述了Ｒｂ、ｃｃｌｉｎＤ１和Ｐ１６的异常与某些肿瘤发生的关系;并初步探讨了这些成分的异常与肿瘤发展的特定阶段和特定     

黑色素抑制流感病毒诱导宿主细胞凋亡

报道了流感病毒体外诱导狗肾细胞系（ＭＤＣＫ）细胞凋亡的检测结果,对黑色素选择性抑制流感病毒诱导细胞凋亡的可能性进行了探讨,同时与临床上常用的抗病毒药物病毒唑的效果进行比较。结果显示：病毒感染６ｈ后,即可观测到宿主细胞核固缩现象、ＤＮＡ凝胶电泳出现特征性的梯状图谱,感染１２ｈ后,细胞核可见明显的裂解;并且流感病毒株Ａ１／京防８６１诱导细胞凋亡能力强于Ｂ沪防／９３－１;在２０～１２５μｇ／ｍＬ浓度范围内,黑色素可有效抑制６４个血凝单位（ＨＵ）的流感病毒感染诱导的细胞凋亡而无细胞毒性作用,其抑制效率类似病毒唑。初步研究结果表明：黑色素抗流感病毒诱导细胞凋亡机理与其阻断病毒吸附侵入宿主细胞有关     

供核细胞对体细胞核移植效率的影响

利用体细胞核移植技术克隆动物、生产转基因家畜具有极大的应用潜力。然而,核移植效率低下、克隆后代形态异常等问题仍然制约着体细胞核移植技术的产业化进展。影响体细胞核移植效率的因素很多,该文着重从供核细胞的类型、细胞体外培养、细胞凋亡及转基因操作等方面阐述其对体细胞核移植效率的影响。     

鼠猪异种细胞核移植

核质关系是细胞生物学和发育生物学研究的核心问题之一。细胞核移植技术是研究发育中核质关系的重要手段。尽管最近哺乳动物的细胞核移植取得了重大突破 (Ｗｉｌｍｕｔ等 ,1997;Ｗａｋａｙａｍａ等 ,1998) ,但这些成功实验是在种内进行的 ,而异种间核移植的研究报道较少 (ＭｃＧｒａｔｈ等 ,1986 ;Ｗｏｌｆｅ等 ,1992 ;梅祺等 ,1993)。最近 ,陈大元等( 1999)报道将大熊猫的子宫上皮细胞、骨骼肌细胞和乳腺上皮细胞的细胞核移入去核的兔卵母细胞后 ,分别有9 9%、6 8%和 11 7%的重构卵发育到囊胚。Ｄｏｍｉｎｋｏ等( 1999)把绵羊、猪、猴或大…     

秋水仙素诱导的野生大豆根类细胞超微结构变化

萌发了4d的野生大豆种子经秋水仙素处理3d以后,根尖分生区细胞的超微结构发生了一些显著变化：许多质体环绕细胞核分布,这些质体中含有数量不等的淀粉粒;液泡的体积明显增大,有几个大液泡分布在细胞核周围;少数细胞中形成网状粗面内质网聚集体;细胞核所占细胞体积的比例减小,有的细胞核形状变得极不规则。从超微结构分析,这些细胞已具备了分化细胞的特征,而不再处于有丝分裂之中。     

秋水仙素诱导的野生大豆根类细胞超微结构变化

萌发了４ｄ的野生大豆种子经秋水仙素处理３ｄ以后,根尖分生区细胞的超微结构发生了一些显著变化,许多质体环绕细胞核分布,这些质体中含有数量不等的淀粉粒,液泡的体积明显增大,有几个液泡分布的细胞核周围,少数细胞中形成网状粗面内质网聚集体;细胞核所占细胞体积的比例减小,有的细胞核形状变得极不规则,从超微结构分析,这些细胞已具备了分化细胞的特征,而不再入于有丝分裂之中。     

CENP——B的基因表达与细胞周期关系的研究

本文以Ｈｅｌａ细胞为材料研究一种有丝粒蛋白ＣＥＮＰ－Ｂ的基因表达与细胞周期及细胞核骨架的关系。将Ｈｅｌａ细胞同频不同周期时相,以流式细胞光度术、同位素掺入和ＡＣＡ着丝粒染色等方法检测细胞同步化效果。我们分别提取了各周期时相细胞的总ＲＮＡ和Ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ＲＮＡ,用Ｄｏｔ ｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交方法研究ＣＥＮＰ－Ｂ在细胞周期中的表达。结果表明,ＣＥＮＰ－Ｂ基因在细胞周期中的各个时     

葡萄糖对体外培养椎间盘髓核细胞的影响

目的:探讨葡萄糖对体外培养髓核细胞的生物学特性的影响。方法:酶消化法分离培养正常椎间盘髓核细胞。对照组:DF12+20%FBS培养液(葡萄糖浓度1000mg/L)、无糖组:无糖DMEM+20%FBS(葡萄糖浓度0mg/L)培养液培养髓核细胞。HE染色观察细胞形态变化,计数板计数细胞总数,台盼蓝染色计算髓核细胞活性比率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核的变化。结果:两组培养液培养细胞形态大体正常,并无明显变化。对照组细胞总数明显多于无糖组。细胞活性率对照组也高于无糖组。Hoechst33258染色凋亡细胞,凋亡细胞核内可见致密的颗粒状和块状荧光,细胞核形态不规则,少数细胞核碎裂,部分细胞核呈月牙形。结论:葡萄糖对椎间盘髓核细胞的增殖及凋亡有显著的影响。