电镜Formvar膜制备要点

在光学显微镜下研究各种对象时,标本都是放在载玻片上,但在电镜下,由于电子不能穿透玻璃,所以不能用玻片作为标本的支持物,于是便采用一种很薄的电子透明薄膜附着在金属网上作为支持膜,用以支持所要观察的各种样品。金属载网一般有直径3毫米与2毫米两种,常用的载网是铜质的,故称铜网,铜网上的这层薄厚度约200A。如果膜太薄时,样品容易漂移或被电子束打破,膜太厚时,分辩率将降低。支持膜除了有一定的厚度和机械强度外,这层膜还应具有透明,在电镜下无可见的结构及与所装载的样品不起化学反应等特性。常用的支持膜有火棉胶膜和Formvar膜。高分辩研究时用碳膜或微筛膜(即带孔的膜)。由于Formvar膜     

活动解剖掛图的制作方法

防腐浆糊用精白面数两,注入明矾溶液化匀,调成稀薄乳状液,在火上边煮边搅拌,及至将熟时,滴入石碳酸原液数滴,搅匀即可。柳条挑较小而干枯的柳条,用火烤成炭条,烧时,可以把十几段集结成束,放在酒精灯上燃烧,当燃烧至末端发红时,急速把它纳入酒精灯的玻璃罩盖     

牙齿釉质表面的简便影迹法

一、引言近来,研究牙齿表面的细微特征,一般都采用金属—火棉胶影迹法(metal-shadowedcollodion raplica method),这种方法,原来是物理学家用来研究金属表面结构的方法之一;它主要是用2%的火棉胶(collodion u.s.P.)均匀地涂在干净的被研究的金属表面上,晾干后,就成为一层薄膜。把它剥下,置于载玻片上。然后在高真空室中用金属蒸气(Ag或 Al)在火棉胶膜上涂上一层极薄的金属薄膜。封固后,就可以用普通光学显微镜或电     

蝗虫性细胞减数分裂制片方法的改良

最近,我室采用分离、滴片方法观察蝗虫性细胞减数分裂,取得良好效果。现介绍如下。 1.取材在麦熟和稻熟季节采集蝗虫。取其精巢固定于卡诺液中0.5—1小时。去固定液,用95％酒精洗3次,移于70％酒精中,置于低温下可长期保存。 2.制片方法 (1)用眼科镊把精巢取出,装入瓶中,加入碎玻璃反复振荡,使组织捣碎。 (2)用吸管吸取捣碎液放入离心管内,以1000转/分的速度离心3—5分钟。去上清液,     

浮游病毒的电镜观察

直接用戊二醛固定水样中的浮游病毒,通过超速离心使已固定的浮游病毒沉淀到覆有Formvar膜和碳支持膜的铜网上,经醋酸双氧铀染色后,利用透射电镜对湖水中的浮游病毒进行观察．结果可观察到球形、杆状和蝌蚪状等形态各异的浮游病毒颗粒及球形病毒的囊膜子粒、杆状病毒的核衣壳、具有不同尾部的蝌蚪状病毒等的精细超微结构．从而建立了一种简便、快捷和高效研究浮游病毒的电镜方法．     

一种高效、快速从凝胶中回收DNA的方法

目的:介绍了一种从普通琼脂糖电泳中回收DNA的简便、快捷、高效且廉价的方法.方法:利用0.5 mL离心管、1.5mL离心管、尼龙膜做成的一个小装置.把含有DNA的凝胶放在膜上,离心,收集从管底流出来的液体,用乙醇沉淀DNA.结果:最终回收率为60%左右,回收率大约为市售试剂盒的90%,接近市售DNA回收试剂盒.结论:该方法操作简单,回收率高,无其他试剂污染.     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

人琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的几种简便方法

介绍两类从普通琼脂糖电泳凝胶中回收ＤＮＡ的简便,快捷,高效且廉价的方法,第一类为电泳洗脱法,方法ａ．利用１．５ｍＬ微量离心管,１ｍＬ吸头,尼龙网膜和透析膜做成的一个小装置,快速有效回ＤＮＡ,最终回收率为７０％左右,方法ｂ：不用ＤＥＡＥ－纤维素膜,而用透析膜在凝胶中作出横隔挡在ＤＮＡ条带前,最终回收率为５０％左右,第二类为冰冻融解法,最终回收率也在５０％左右,如果联合使用冰冻融解法和电泳洗脱法,回收     

产卵前、后蟾蜍(B.bufo gargarizans)输卵管磷酸酶和粘多糖类的消长变化及其和卵胶形成的关系

Bataillon(1929,1930)和朱洗等(1942,1950,1956)曾报告过两棲类卵的受精和卵胶膜有密切的关系。他们的研究都证明蛙和蝾螈的卵,如没有外面的胶膜或用人工方法去除胶膜后都没有受精能力。由此可见,两棲类卵外的胶膜对受精作用是有很重要意义的。关于蟾蜍卵胶在受精时的机制问题,Kambara(1953)和朱洗等(1956)已作过报道。Kambara证明去掉胶膜后的蟾蜍卵,如在卵的表面涂上6％     

从琼脂糖电泳凝胶中回收DNA的几种简便方法

介绍两类从普通琼脂糖电泳凝胶中回收ＤＮＡ的简便、快捷、高效且廉价的方法．第一类为电泳洗脱法．方法ａ：利用１．５ｍＬ微量离心管、ｌｍＬ吸头、尼龙网膜和透析膜做成的一个小装置,快速有效回ＤＮＡ,最终回收率为７０％左右．方法ｂ：不用ＤＥＡＥ－纤维素膜,而用透析膜在凝胶中作出横隔挡在ＤＮＡ条带前,最终回收率为５０％左右;第二类为冰冻融解法,最终回收率也在５０％左右．如果联合使用冰冻融解法和电泳洗脱法,回收率可进一步提高至９０％．     

根表铁氧化物胶膜对水稻吸收Zn的影响

采用营养液培养方法研究了水稻根表形成的铁氧化物胶膜对水稻吸收Ｚｎ的影响．结果表明,在有Ｆｅ２＋的嫌气环境中,由于根际氧化作用水稻根表会形成红色的铁氧化物胶膜,根表的铁氧化物胶膜影响水稻对Ｚｎ的吸收．铁膜数量较少时,由于对Ｚｎ的富集作用有限,其对水稻Ｚｎ的吸收虽有促进作用,但不明显．随着根表铁膜数量的增加,这种促进作用也相应增加,并且在铁膜数量增加到一定值时,对水稻吸收Ｚｎ的促进作用达到最大．而后,随着铁膜数量的进一步增加,铁膜反而阻碍水稻对Ｚｎ的吸收,成为水稻吸收Ｚｎ的障碍层．在此过程中,水稻的根分泌物,特别是其中的植物铁载体对覆有铁膜水稻根系吸收Ｚｎ有促进作用．这种促进作用随铁膜数量的增加而逐渐减弱．因此,根表铁氧化物胶膜对水稻吸收Ｚｎ并不总是起促进作用,其作用的方向和程度取决于铁膜的数量．     

皱纹盘鲍受精过程的电镜观察

本文用透射电镜观察了皱纹盘鲍的受精过程。鲍卵子的胶膜使精子活化,并诱发了顶体反应,卵黄膜使顶体反应达到高潮。精子入卵后,卵发生皮层反应并形成受精膜开 减数分裂。此外,还观察到鲍的多精入卵现象。     

怀头鲇胚胎发育过程卵膜形态结构变化及对孵化影响

采用扫描电镜和光学解剖镜,对黑龙江水域怀头鲇(Silirus soldatovi)成熟卵膜层次构造和受精卵胚胎发育过程中卵膜形态结构变化进行观察,并比较未脱黏和人工脱黏卵受精卵膜的表面超微结构变化.结果显示,受精卵膜的胶膜表面由一层薄而致密的物质组成,上有微孔构造.未脱黏受精卵膜表面胶膜光滑致密,多孔隙,内有小梁相连,随胚胎发育逐渐膨胀、展开、变薄,破膜期自然脱落.人工脱黏几乎全部脱去鱼卵的胶膜层,从而使卵失去黏性.脱去胶膜层的受精卵膜表面由不规则的颗粒状结构紧密嵌合而成,表面粗糙,胚胎发育过程中颗粒形状变化不大,但颗粒层逐渐变薄而且疏松,直至胚胎破膜而出:胚胎发育后期颗粒层有过早脱落和破洞出现.同时对活体鱼卵进行连续比较观察,讨论了卵膜结构及动态变化与孵化效果的关系.     

一种快速去除林蛙受精卵胶和卵黄膜的方法

研究林蛙(Rana amurensis)受精卵的表面膜,有时先要除去包裹在蛙卵外面的胶膜(卵胶和卵黄膜)。机械法剥离胶膜可以得到完整无损的裸卵,但难度大、效率低。Katagiri 从哈士蟆和日本青蛙胚胎     

湿地植物根表的铁锰氧化物膜

湿地植物根系具有泌氧能力 ,使其根表及根际微环境呈氧化状态。因而 ,土壤溶液中一些还原性物质被氧化 ,如 Fe2 ,Mn2 ,形成的氧化物呈红色或红棕色胶膜状包裹在根表 ,称为铁锰氧化物膜。铁锰氧化物膜及其根际微环境是湿地植物根系吸收养分和污染物的门户 ,势必会影响这些物质的吸收。主要综述了铁锰氧化物膜的形成和组成 ,以及根表形成的氧化物膜的生态效应 ,也就是氧化物胶膜对植物根系吸收外部介质中的养分及污染物质——重金属离子的影响     

用显微镜观察小肠绒毛的方法

取鸡小肠一段,切开,洗净。用鸡毛将绒毛轻轻地向一边扫,然后顺绒毛倒向的一边,切下长13毫米左右,宽3—4毫米的条块。将切块轻放到载玻片上,滴一滴清水,用镊子压住切块两端,再用鸡毛将绒毛向倒向的相反的一条边扫,待看到绒毛在边缘排列较整齐为止,再滴1—2滴清水,盖上盖玻片,装片就制成了。此时,将装片放在显微镜的低倍镜下,经调试,就能看到切块一边缘有多而完整的绒毛。     

肌纤维简易装片制作及横纹的观察

取蝗虫胸部小束肌肉于玻璃皿中,将10％HCl溶液滴加到肌束上解离30分钟,尔后用玻棒轻研到细绒状。用针挑少许于玻片上,先染色,后用解剖针分离,滴一滴10％亚甲蓝溶液染色1分钟,用吸水纸吸去余液,再用生理盐水冲洗几次除去浮色,然后将玻片置于解剖镜下(肉眼操作亦可),用尖细解剖     

用照相膠底板代替火棉膠作组织切片

火棉膠(Celloidin),它的商品名称许多,又叫Colloidin,是一种爆炸性易燃物质。除了在军火上用它制成烈性炸药外,在组织胚胎学、神经解剖学、病理组织学、生物学等教研组及一些研究部门常用它作包埋组织切片之用。火棉膠包埋组织制成的切片,可使组织细胞不扭转收缩,保持组织的原形,更适宜于大塊及多空隙与较软或较硬的组织切片(如结缔组织、内耳、牙、眼球等组织切片),一般神经组织切片多用火棉膠包埋,为研究工作及教学实验制作标本不可缺少之物质。市上出售者多系很淡之液体、固体及半固体的,因帝国主义禁运以至未有进口货,价钱也很贵,1两约50—70元。近来市上尚难以买到,这样对我们的工作和研究与教学用的标本制作是有些影响的。为了减少外匯和节约以及更好的开展工作,我们研究利用了已使用过的发照相膠底     

介绍一种线粒体简便染色法

染液配制取品兰0.2克加无水酒精100毫升振荡使其溶解;取上述品兰酒精液5.0毫升加无水酒精95ml混匀。操作步骤取法净的开车玻片加上述染液一小滴,待干;将耳垂或手指用75%酒精棉消毒用八号针头行刺;用干棉球     

观察植物气孔结构的简易方法

观察植物叶表面气孔结构通常采用蚕豆或天竺葵的叶片 ,撕取其下表皮制成临时装片 ,在显微镜下观察。但这种方法对有些植物来说并不能取得很好的效果。另外一种常用的方法是印迹法 ,即在植物叶的表面涂抹牛皮胶液、火棉胶液或醋酸纤维素胶液 ,胶体风干后就凝成薄膜 ,此膜就印有表皮组织各细胞的界迹边痕及气孔结构。优点是胶膜干燥速度快 ,缺点是不适合于教学 ,因这 3种胶包装大 ,费用高 ,且在中小城市及农村不易购买。我们将这一方法作了改进 ,用指甲油、乒乓球制液代替牛皮胶等。此法既具备了印迹法的优点又能就地取材 ,价格低廉。具体做法…