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大球盖菇原生质体再生及单核化特性的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
大球盖菇原生质体再生条件及单核化特性结果。原生质体再生程度极快,涂布平板3d后肉眼即可见明显的再生菌落形成,在PGPM再生培养基上再生率为0.97-2.0%,渗稳剂种类对再生率无明显影响,但可影响再生菌落形态,液体预培养1-2d,再生率明显下降;大球盖菇原生质体单核化率高达77.6%,且再生双核体和再生单核体在形成再生菌落时无时间差,其生长速度亦无快慢之分,液体预培养可显著减少单核化率,再生单核体中存在亲本两种交配型,但二者的比率不为1。 相似文献
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大球盖菇原生质体制备与再生条件研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)菌丝原生质体制备和再生条件,结果表明:在30℃、pH5.5、0.6mol/L甘露醇、1.5%溶壁酶条件下对培养3d的菌丝体酶解2.5h,原生质体产量达到1.36×107个/mL。原生质体适宜再生培养基为马铃薯200g,蔗糖20g,蛋白胨2g,酵母粉2g,KH2PO41.5g,K2HPO41.5g,MgSO4.7H2O 1.5g,维生素B10.1g,维生素B60.1g,0.6mol/L甘露醇。采用上述培养基,双层平板法进行再生试验,再生率达到0.96%。为大球盖菇原生质体技术深入研究和应用奠定了基础。 相似文献
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茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌,在我国栽培历史悠久,但由于长期无性繁殖,导致菌种退化,栽培产量下降,严重影响产业发展。为解决茯苓育种的难题,我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法,明确了其交配系统,建立了单孢同核体杂交育种体系,但是部分茯苓菌株子实体形成困难或子实体贴生,导致担孢子收集困难,因此原生质体单核化的研究具有重要意义。本研究以两株存在较大遗传差异且同核体类型不同的菌株776和775为材料,核荧光染色表明超过60%的原生质体具有细胞核,原生质体再生率分别为11.0%和7.6%,不易生长的再生菌株中既有同核也有异核菌株。原生质体单核化获得了两个菌株的同核体菌株,比例可达到10%以上,菌株776获得了两种交配型的同核体菌株(5:3),不存在偏分离(χ2=0.5),但菌株775原生质体单核化仅获得了一种交配型的同核体菌株,表现出严重的交配型偏分离。通过杂交菌株与两亲本对峙试验及基于rpb2的杂合位点验证,证实获得了原生质体同核体杂交菌株25株,原生质体同核体与单孢同核体杂交菌株50株,表明茯苓原生质体同核体杂交育种的可行性。 相似文献
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目的探索氮源对大球盖菇生长及亚硝酸盐、硝酸盐含量的影响。方法在培养基中添加不同含氮化合物,培养菌丝,定时测定生长量,并采用重氮偶合分光光度法测定其亚硝酸盐、硝酸盐含量。结果添加亚硝酸盐的基质,菌丝生长速度比对照慢。尿素、硫酸铵、硝酸铵和硝酸钾四处理之间差异无显著性,其生长速度最快。各处理间亚硝酸盐、硝酸盐含量差异均存在非常显著性。亚硝酸钾处理,亚硝酸盐含量高达402.03 mg/kg,不宜食用。硝酸钾处理,亚硝酸盐含量为30.87 mg/kg,食用100 g,就会超出亚硝酸盐日限量;硝酸铵处理,硝酸盐含量远远超过日常蔬菜,也不宜食用。结论在栽培大球盖菇时氮源不宜使用亚硝酸盐、硝酸盐,应使用尿素或硫酸铵,有机氮源也可以。 相似文献
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本研究收集了国内外28株大球盖菇菌株,通过SRAP分子标记技术和耐高温递进式循环驯化选择出2株适合的实验材料,采用原生质体融合、原生质体再生技术进行耐高温菌株初选,筛选出2株性状优良的耐高温菌株(S20菌丝耐高温、产量高;R10 I级菇比例高、子实体耐高温),收集2菌株出菇后的孢子进行单孢杂交,在高温条件下通过多次继代培养和栽培实验,最终确定出J8L4(山农球盖3号)为最优耐高温高产菌株。该菌株能连续7d在最高料温达27-34℃、最高气温达40-47℃条件下生长良好,无杂菌污染,40d出菇,其产量达到14.56kg/m 2,生物转化率为91.03%,优质菇比例为66.21%。研究结果表明,通过多层次的驯化筛选和多项育种技术的综合使用,使得所选菌株的优良性状更显著,遗传稳定性更好。 相似文献
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【背景】茶树菇遗传育种工作是茶树菇产业持续发展的保障和关键,原生质体的制备及单核体菌株的获得可为茶树菇遗传育种工作的开展提供技术支持。【目的】获得茶树菇原生质体的再生特性、单核化特性及其交配型,为开展茶树菇的杂交育种、融合育种、诱变育种、遗传转化和功能基因挖掘等奠定基础。【方法】以茶树菇保藏菌种Aa11的菌丝为材料,采用甘露醇溶液和溶壁酶溶液直接处理平板菌丝制备茶树菇原生质体,而后对原生质体进行分离和再生培养。通过原生质体单核菌丝体两两单单对峙培养,观察对峙培养过程中的菌落形态变化。【结果】当接种块数量为7、酶解温度为33-34℃、酶解时间为60-80 min时,原生质体数量为107个/mL。茶树菇原生质体在涂布平板7 d后肉眼才可见明显的再生菌落形成,在再生培养基上再生率为0.71%,单核化率为41.1%;再生异核体和再生单核体在形成再生菌落时有时间差,从第7天开始往后连续3 d的再生菌落均为异核体菌株,往后第4天开始陆续出现单核体菌落,之后时间内的菌落均为单核体菌株。试验共得到290个原生质体单核体,分为A1B1和A2B2两种亲本交配型,A1B1和A2B2二者的比例为138:152... 相似文献
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为了解毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落特征的影响,以套种大球盖菇不同年限(0、1、2和3 a)的毛竹林为研究对象,采用Tullgren干漏斗法和Baermann湿漏斗法对土壤中小型动物群落组成及分布进行调查。试验共捕获中小型土壤动物89511只,隶属于8纲13类。土壤动物类群数和密度均随种植年限的增加呈先升高后降低趋势,以种植1 a最高(P<0.05)。各处理土壤动物类群数和密度均随土层加深而逐渐减少,呈现表聚性特征。Shannon多样性指数、Pielou均匀度指数、Margalef丰富度指数和密度-类群指数均随着种植年限的增加呈先升高后降低趋势,且均以种植1 a最高,而Simpson优势度指数呈先降低后升高趋势,种植1 a显著低于其他处理(P<0.05)。种植0和3 a、2和3 a的相似性指数为中等相似,其余各处理间的相似性指数均为极相似。综上表明,毛竹林下套种大球盖菇对中小型土壤动物群落结构具有明显影响,种植1 a后毛竹林地具有更高的土壤动物类群数、密度和多样性。随着种植时间的延长,中小型土壤动物的数量逐渐恢复到种植前水平,但群落组成可能发生改变。 相似文献
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从甘蔗(Saccharum officinarum L.)嫩叶外植体诱导愈伤组织,经继代培养后,挑选胚性愈伤组织,转入MS3 液体培养基,进行悬浮培养。当培养物分离出小粒状的细胞团,细胞变得小而圆时,用于分离原生质体。原生质体以琼脂糖固化的培养方式培养于MRP1 培养基中。由原生质体再生的愈伤组织有两种类型。挑选粒状、坚实的再生愈伤组织转移到N6 分化培养基上,“新台糖1 号”再生的愈伤组织,在含有KT 0.5 m g/L的培养基中,分化出绿芽并长成完整的植株。而“粤糖57-423”和“US66-56-9”再生的愈伤组织,在加有0.1% 的活性炭的培养基中,前者分化出白化苗,后者分化出根 相似文献
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人参原生质体培养再生愈伤组织 总被引:3,自引:1,他引:3
李乐工 《Acta Botanica Sinica》1989,31(10):815-816
人参原生质体培养未见报道成功。Harn(1974)曾用人参幼叶,幼根和上胚轴进行原生质体分离,但得到的数量很少,无法进行培养。本实验以人参培养细胞为材料,通过培养再生了愈伤组织。 相似文献
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胶烟草叶肉原生质体经培养得到的愈伤组织在含0.5-1.5mg/1 2,4-D的MS培养基上培养40-50天后可形成体细胞胚,2,4-D的浓度在1 mg/1时诱导频率最高,可达45%。体细胞胚在无激素的MS琼脂培养基中即可形成完整植株。通过愈伤组织分化过程中的组织学观察发现,在胚状体形成过程中细胞内淀粉粒呈一动态变化,推测胚状体邻近的愈伤组织细胞在胚状体发育提供营养方面可能起重要作用。利用根癌农杆菌改建的Ti质粒对胶烟草原生质体进行遗传转化,在无激素的MS培养基上筛选得到基因4的转化细胞克隆。电泳法证明T-DNA胭脂碱合成酶基因在转化细胞内表达。 相似文献
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天蓝苜蓿原生质体培养再生植株 总被引:9,自引:1,他引:8
苜蓿属(Medicago)植物多为优质牧草,是进行原生质体培养研究较多的一个属。至今已有10余种苜蓿属植物进行过原生质体培养的研究,多数获得了再生植株[1~6]。天蓝苜蓿是一种优质牧草、绿肥和药用植物。关于它的体外培养已有一些报道[5,7,8],但原生质体培养尚未能再生植株。本文以悬浮系为材料进行了原生质体的分离与培养,并经胚状体发生和器官发生两种途径获得了再生植株。1 材料和方法天蓝苜蓿(MedicagolupulinaL.)种子采集于吉林省西部草原。干种子用浓硫酸浸泡3min,升汞灭菌5mi… 相似文献
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高频水稻原生质体植株再生 总被引:3,自引:0,他引:3
在过去的几年中水稻(Oryza sativa L.)的原生质体培养取得了较大进展。我们在此基础上对国内大面积推广的优良粳稻品种的原生质体进行了高频植株再生的实验,并对两种不同的培养方法——琼脂糖包埋法和看护培养法进行了初步的比较研究。 相似文献
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芽孢杆菌原生质体的形成,再生及种间融合的研究 总被引:15,自引:0,他引:15
原生质体融合技术不仅能使遗传基因高频率重组,而且可以集双亲优良遗传性状为一体.自Schaeffer等人成功地进行了微生物原生质体融合以来,这项技术便广为人们所接受.枯草芽孢杆菌分泌的抗菌蛋白能抑制多种植物病原菌的生长,苏云金芽孢杆菌生成的伴孢晶体蛋白可毒杀植物害虫.利用原生质体融合技术将这两种芽孢杆菌抑菌杀虫的遗传特性融为一体,选育出防治植物病虫害的新一代生防菌株成为可能,有关这方面的研究国内外尚未见报道.本文报道了抗菌蛋白产生菌TG26-10和晶体蛋白产生菌AS1.904-17原生质体的形成,再生及种间融合的影响因素,为进一步筛选目的融合子提供基础. 相似文献
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土人参原生质体培养再生植株 总被引:6,自引:1,他引:5
分别由土人参(Talinum paniculatum (Jaeq.) Gaertn.)组织培养再生苗的叶片和幼茎诱导的愈伤组织游离出原生质体.叶肉原生质体在培养中未能进行正常分裂,存活不过1 周.愈伤组织原生质体在P4 培养基中(K8p+ 2,4-D 0.2 m g/L+ NAA 1.0 m g/L+ ZT 0.5 m g/L+椰乳50 m L/L+ 葡萄糖0.5 m ol/L)培养3 d 开始第一次分裂,培养7 d 时分裂频率为36.7% . 愈伤组织再生率在液体培养中为0.31% ,在双层培养中为0.34% . 愈伤组织在含有较低浓度的6-BA 的分化培养基上分化出不定芽. 幼苗生根后移栽到花盆中继续生长,2~3个月后开花结实,长出粗壮的肉质根. 再生小植株在试管中继代培养2~3 个月开花结实. 研究结果还表明∶(1)愈伤组织在液体培养基或增殖培养基中培养时间过长,或继代次数过多均不利于分化.(2)较低浓度的6-BA (0.5~0.7 m g/L)对愈伤组织的分化是合适的.(3)GA3 对幼苗的发育有促进作用. (4)多效唑(MET)对土人参试管苗有明显的壮苗和壮根作用 相似文献