水稻转座子Tourist—Os6从sbe1基因启动区切离的证明

为研究ｓｂｅｅ１基因的表达调控机理,籼稻ＩＲ３６品种的ｓｂｅ１基因被克隆。经测序一与已报告的ｓｂｅ１上比,ＩＲ３６水稻品种ｓｈｅ１基因５‘上游区顺序中除了有分散的３２个碱基差异外,值得注意的是缺少一般３３５ｂｐ长的Ｔｏｕｒｉｓｔ－Ｏｓ６序列,并在缺失的位置上留下转座子切离后的特征性足印顺序,这表明ＩＲ３６品种的Ｔｏｕｒｉｓｔ－Ｏｓ６已从ｓｂｅ１基因中切离。因而为Ｔｏｕｒｉｓｔ－Ｏｓ６是可移动的转座     

水稻转座子Tourist-Os6从sbe1基因启动区切离的证明

为研究sbe1基因的表达调控机理,籼稻IR36品种的sbe1基因被克隆。经测序后与已报告的sbe1基因顺序相比,IR36水稻品种sbe1基因5'上游区顺序中除了有分散的32个碱基差异外,值得注意的是缺少一段335 bp长的Tourist-Os6序列,并在缺失的位置上留下转座子切离后的特征性足印顺序,这表明IR36品种的Tourist-Os6已从sbe1基因中切离。因而为Tourist-Os6是可移动的转座子提供了一个有力的证据。     

rhIL 1β、rhIL 2和rhIL 6诱导体外培养大鼠海马神经元Fos表达——免疫组织化学研究

采用免疫组织化学方法, 观察了人重组白细胞介素１ （ｒｈＩＬ１β）、人重组白细胞介素２ （ｒｈＩＬ２）和人重组白细胞介素６ （ｒｈＩＬ６） 诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。结果显示, 培养１２ ｄ 的海马神经元分别与ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 培养２ｈ 后, Ｆｏｓ免疫反应（ＦｏｓＩＲ） 阳性细胞百分率增多。随着所给剂量增加,ＦｏｓＩＲ阳性细胞百分率明显增多。图像分析的结果显示,ＦｏｓＩＲ阳性细胞的平均光密度亦随所给剂量的增大而增加。以上结果表明, ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 均能诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 对体外培养的大鼠海马神经元具有生物学作用。推测Ｆｏｓ表达可能是ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 等细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。     

棉花法呢基焦磷酸合酶cDNA克隆、序列分析及其在种子发育过程中的表达特征

根据法呢基焦磷酸合酶（ＦＰＳ）保守域设计简并引物,应用ＮｅｓｔＰＣＲ和ＰＣＲ９６孔板筛库技术分离到亚洲棉（ＧｏｓｙｐｉｕｍａｒｂｏｒｅｕｍＬ．）法呢基焦磷酸合成酶的ｃＤＮＡ。序列分析表明,该ｃＤＮＡ全长１２８０ｂｐ,开放阅读框共编码３４２个氨基酸残基,推断蛋白质分子量约为３９ｋＤ,推测的氨基酸顺序与拟南芥和青蒿的ＦＰＰ合酶序列同源性为７８９％和８０７％。应用ＲＴＰＣＲ定量分析ｆｐｓ１基因在“苏棉６号”（Ｇ．ｈｉｒｓｕｔｕｍＬ．ｃｖ．“Ｓｕｍｉａｎ６”）种子发育过程中的表达特征,发现从胚珠开始形成种子（开花后２０ｄ）至种子成熟（开花后４０ｄ）,ｆｐｓ１ｍＲＮＡ转录水平发生明显变化。在种子发育早期,开花后２０ｄ至２７ｄｆｐｓ１基因保持相对稳定的表达水平;但从开花后２７ｄ到种子成熟,ｆｐｓ１ｍＲＮＡ的转录水平迅速增高,此期倍半萜棉毒素在种子中的积累亦呈明显的增长趋势,完全风干成熟的种子中倍半萜棉毒素的含量可达１３ｍｇ／ｇ。推测ｆｐｓ１基因在转录水平参与种子中倍半萜类物质合成的调控。     

一个高效表达、快速纯化大肠杆菌精氨酰-tRNA合成酶的新系统(英文)

编码大肠杆菌精氨酰ｔ Ｒ Ｎ Ａ 合成酶（ Ａｒｇ Ｒ Ｓ） 的基因ａｒｇ Ｓ 被克隆到ｐ Ｍ Ｆ Ｔ７５ 载体上。将此质粒转化的大肠杆菌 Ｊ Ｍ１０９（ Ｄ Ｅ３） 中, 该转化子粗抽液的比活是宿主菌的２ ５００ 倍。通过 Ｄ Ｅ Ａ Ｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｃ Ｌ６ Ｂ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ 和 Ｂｌｕｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｃ Ｌ６ Ｂ两步柱层析在一天内即可将精氨酰ｔ Ｒ Ｎ Ａ 合成酶纯化至电泳一条带, 比活为３６ ０００ ｕ／ｍｇ , 总收率可达６９ ％ 。与以前报道的 Ａｒｇ Ｒ Ｓ的高表达质粒相比, 使用该重组质粒可以很方便地将昂贵的标记氨基酸高效地参入酶分子内。目前的研究结果表明,该新系统能够很方便地提供大量的更高比活的大肠杆菌精氨酰ｔ Ｒ Ｎ Ａ 合成酶以进行该酶的 Ｎ Ｍ Ｒ 和结晶学研究     

水稻半矮秆基因sd-t的染色体定位研究

以籼型标志基因系和ＩＲ３６三体为工具材料,通过杂交研究了籼稻矮秆材料矮泰引－２所携半矮秆基因Ｓｄ－ｔ在染色体上的位置。结果表明,半矮秆基因Ｓｄ－ｔ与标志基因系０１９所携紫果皮基因Ｐｒｐ－ｂ、标志基因系Ｂ３０所携无叶舌基因１ｇ、标志基因系０２７所携灰白壳基因Ｗｈ表现连锁,ｓｄ－ｔ与Ｐｒｐ－ｂ之间的交换值为２．８５％±０．５２％,ｓｄ－ｔ与ｌｇ之间的交换值为２７．９０％±３．８１％,ｓｄ－ｔ与Ｗｈ之间的交换值为３８．６２％±２．９９％。由于Ｐｒｐ－ｂ、ｌｇ、Ｗｈ基因均位于第４染色体上,因而推定ｓｄ－ｔ基因位于第４染色体上,其排列位置可能是Ｐｒｐ－ｂ－ｓｄ－ｔ－ｌｇ－Ｗｈ。     

由RTS—barnase嵌合基因的表达导致的雄性不育水稻植株

用ＰＣ赍水稻品种ＩＲ３６的总ＤＮＡ中扩增了ＲＴＳ基因５’调控区（－１２８８＋２５＿顺序并与从解粉芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）染色体ＤＮＡ中克隆的ＲＮａｓｅ（ｂａｒｎａｓｅ）基因编码区构建了嵌合基因,通过根癌农杆菌介导转化水稻品种ＺＨ１１,所获得转基因植株的主要性状与供体亲本无显著差异,但开花后药壁不开裂,并且大多数植株的花粉不被Ｉ－ＫＩ染色,自交条件下结实率为完     

三个家猪品种和rob易位杂色体分带多态性的比较

对家猪不同品种及家系间的染色体组型、Ｃ－带、Ａｇ－ＮＯＲｓ多态性进行的研究表明：杜洛克猪：约克夏猪、长白猪体细胞染色体数２ｎ－３８、核型２ｎ＝１０ｓｍ＋１２ｍ＋４ｓｔ＋１２ｔ,而１３／１７易位纯合子猪（３６,ｒｏｂ．１３／１７）的体细胞染色体数２ｎ＝３６。核型２ｎ＝１０ｓｍ＋１２ｍ＋６ｓｔ＋８ｔ;１３／１７易位杂合子猪（３７,ｒｏｂ．１３／１７）的体细胞染色体数目为２ｎ＝３７,核型为２ｎ＝１０ｓｍ     

籼粳不育新位点的发现及其遗传分析

粳稻０２４２８携有Ｓ－５ｎ广亲和基因,然而与籼稻ＩＲ２４杂交表现为半不育。对０２４２８与ＩＲ２４．Ｐｅｃｏｓ、秋光等品种杂交的分离世代的小穗育性进行遗传分析,结果表明：０２４２８与ＩＲ２４之间的不育性受单基因控制,遗传规律符合单位点孢子体一配子体遗传模式,不育性由非Ｓ－５的新位点引起,美国品种Ｐｅｃｏｓ具有复等位的中性基因;ＲＦＬＰ标记技术检测后初步确定,该新不育位点在第１１染色体上的标记Ｇ２４附件,与目前已报道的不育位点都不等位,新位点暂定名为Ｓ－ｐ（ｔ）。研究结果还显示,粳稻品种秋光与籼稻品种ＩＲ２４之间的不育性受２个不育位点Ｓ－５和Ｓ－ｐ（ｔ）控制,其遗传效应表现有累加作用。     

柴胡皂甙s的结构鉴定

从南柴胡（ＢｕｐｌｅｕｒｕｍｓｃｏｒｚｏｎｅｒｉｆｏｌｉｕｍＷｉｌｄ．）根中分得５个三萜皂甙。根据理化性质和波谱数据,鉴定其中新皂甙为３β,１６α,２３,２８四羟基齐墩果烷１１,１３（１８）二烯３ＯβＤ吡喃葡萄糖基（１→６）［αＬ吡喃鼠李糖基（１→４）］βＤ吡喃葡萄糖甙,命名为柴胡皂甙ｓ（ｓａｉｋｏｓａｐｏｎｉｎｓ）。另４个皂甙分别为柴胡皂甙ａ、ｃ、ｂ１、ｂ２。     

水稻sbe1启动子驱动的反义sbe-GUS融合基因在转基因水稻中的表达

为研究水稻基因启动子对外源基因在转基因水稻中表达的影响,构建了由sbe1启动子引导的反义sbe-GUS融合基因。经农杆菌介导,将不同的融合基因导入水稻中,定量测定转基因水稻植株不同组织中的GUS酶活力。结果表明,sbe1启动子可驱动反义sbe-GUS融合基因在转基因水稻植株的胚乳中高效表达,而在颖壳、胚和茎叶等组织中的表达活性较弱。证实sbe1启动子在驱动外源基因的表达上表现有明显的组织特异性。     

控制水稻胚乳淀粉合成代谢若干关键酶基因对花后高温的响应表达

以稻米品质温度敏感型的早籼稻品种嘉早935为材料,利用人工气候箱控温试验和实时荧光定量PCR技术,探讨了不同灌浆温度(日均温分别为22和32 ℃)处理下胚乳淀粉分支酶(SBE)、淀粉去分支酶(DBE)和淀粉合酶(SS)的10个同工型基因(sbe1、sbe3、sbe4、pul、isa1、isa2、isa3、Wx、sss1和sss2a)的相对表达量差异及动态变化特征.结果表明: 淀粉合成相关功能基因对水稻灌浆期高温胁迫的响应表达方式存在明显差异,而且因同工型的类型而不同.在高温处理下,sbe1和sbe3的相对表达量显著下降,二者属于SBE类基因中对高温胁迫较敏感的主要同工型;DBE基因中,pul属于高表达的同工型,而且其对高温胁迫响应比isa1、isa2和isa3敏感;在Wx、sss1和sss2a中,sss2a的相对表达量显著低于sss1和Wx, 但sss2a和sss1对高温胁迫响应比Wx敏感,因此二者可能也是高温胁迫对胚乳淀粉结构进行调控的重要位点,尤其在水稻灌浆的中后期发挥重要作用.     

Molecular analysis of the gene encoding a rice starch branching enzyme

Summary The sequence of a rice gene encoding a starch branching enzyme (sbe1) shows extreme divergence from that of the rice gene, that is homologous to bacterial glycogen branching enzyme (sbe2). sbe1 is expressed abundantly and specifically in developing seeds and maximally in the middle stages of seed development. This expression pattern completely coincides with that of the waxy gene, which encodes a granule-bound starch synthase. Three G-box motifs and consensus promoter sequences are present in the 5 flanking region of sbe1. It encodes a putative transit peptide, which is required for transport into the amyloplast. A 2.2 kb intron (intron 2) precedes the border between the regions encoding the transit peptide and the mature protein, and contains a high G/C content with several repeated sequences in its 5 half. Although only a single copy of sbe1 is present in the rice genome, Southern analysis using intron 2 as a probe indicates the presence of several homologous sequences in the rice genome, suggesting that this large intron and also the transit peptide coding region may be acquired from another portion of the genome by duplication and insertion of the sequence into the gene.     

水稻蜡质基因5'非翻译区一个与调控有关的内含子

从发育的水稻种子中分离出RNA,经RT－PCR反应并结合顺序测定,在籼稻232蜡质基因编码区5′上游非翻译区中证明确实存在一个长度为1126bp的内含于,其A＋T碱基的含量高达67．4％,它的边界符合真核基因内含子的GT-AG规则。表明该内含子与蜡质基因的表达调控有一定的关系。     

一个新的水稻叶形突变体(tll1)的遗传分析与精细定位

利用甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulphonate, EMS)诱变粳稻品种日本晴获得了一个遗传稳定的叶形突变体 thread-like leaf 1 (tll1)。该突变体在杭州表现为矮化、窄叶, 极端时仅剩主脉, 呈细丝状。将该突变体分别与籼稻品种南京6号、浙辐802和9311进行正反交配组, 遗传分析表明该突变体性状由1对隐性单基因控制。通过SSR和STS分子标记对F₂代分离群体进行遗传定位, 将该基因初步定位在第12染色体SSR标记RM247和RM101之间。随后利用已公布的粳稻品种日本晴和籼稻品种9311的基因组序列, 发展了7对有多态的STS标记, 最终将该基因定位在FL13和FL14之间约94.3 kb的区间内, 为进一步克隆TLL1基因奠定了基础。     

一个新的水稻叶形突变体（tll1）的遗传分析与精细定位

利用甲基磺酸乙酯（ethylmethane sulphonate,EMS）诱变粳稻品种日本晴获得了一个遗传稳定的叶形突变体thread-like leaf1（tll1）。该突变体在杭州表现为矮化、窄叶,极端时仅剩主脉,呈细丝状。将该突变体分别与籼稻品种南京6号、浙辐802和9311进行正反交配组,遗传分析表明该突变体性状由1对隐性单基因控制。通过SSR和STS分子标记对F2代分离群体进行遗传定位,将该基因初步定位在第12染色体SSR标记RM247和RM101之间。随后利用已公布的粳稻品种日本晴和籼稻品种9311的基因组序列,发展了7对有多态的STS标记,最终将该基因定位在FL13和FL14之间约94.3kb的区间内,为进一步克隆TLL1基因奠定了基础。     

渝17S对低温胁迫的响应及耐冷机制初步研究

重庆及西南稻区水稻幼苗期倒春寒频发,常常导致秧苗生长迟缓,白化、烂秧等发生,制约了优质水稻安全生产和轻简化技术的应用.本研究以耐冷性较强的渝17S和对低温敏感的Y58S为材料,对比研究了3叶龄幼苗经4℃低温处理后,二者可溶性糖、海藻糖、脯氨酸、丙二醛和过氧化氢的含量,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶的活性...