产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性基因型分析

检测我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性和基因型。表型确定临床分离产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌56株,应用PCR基因扩增技术及双脱氧DNA测序方法,分别对TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9编码基因进行分析。产酶菌株对亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、头孢吡肟耐药性较低,对其他16种抗生素耐药性较高。在56株菌株中有50株为CTX-M型,占89%,34株为TEM型(60.7%),20株SHV型(35.7%);其中CTX-M-9型共计39株占78%,CTX-M-1型19株占38%,CTX-M-2型16株占32%。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性值得关注,主要临床流行基因型是CTX-M型。     

产超广谱β-内酰胺酶的检测及其临床应用

目的：提高产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率,以利于对产ESBLs菌株的监控和治疗。方法：采用NCCLS推荐的确认法进行试验。结果：CAZ/clav对产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌确认率分别64．7％和42．9％,CTX/c1av对其确认率分别为76．5％和71．4％。24株产ESBLs对10种抗生素的耐药性分析,结果24株产EBSLs对亚胺培南全部敏感。结论：确认试验中CTX优于CAZ;对产EBSLs菌的治疗以亚胺培南最佳。     

大肠埃希菌临床分离株CTX—M型超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的了解我院临床分离大肠埃希菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因型分布情况。方法收集我院临床分离大肠埃希菌200株,按美国临床和实验室标准协会2006年制订的标准确定ESBLs表型。PCR扩增CTX—M耐药基因,扩增产物测序,测序结果与GenBank比对,确定CTX．M基因型。结果200株大肠埃希菌中有94株ESBLs阳性,其中92株CTX-M基因扩增阳性。测序结果表明,大肠埃希菌CTX．M基因型以CTX．M14为主,占67．4％,同时CTX—M3占27．2％,5株未分型。结论大肠埃希菌中产CTX．M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX．M14和CTX．M3型为主。     

产超广谱β-内酰胺酶菌株的分布及药敏试验结果分析

目的：了解我院产超广谱β-内酰胺酶菌株的分布和耐药情况。方法：用Kirby—Bauer法检测了136株产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对10种抗生素耐药性并对其标本来源和病区分布进行了分析。结果：检出ESBLs最多的标本是呼吸道分泌物(43．4％),检出ESBLs最多的科室是普外科(22．8％)。136株产ESBLs菌株对亚胺培南和美洛培南的敏感率高达100％,对多数抗生素的敏感率低于50％。结论：呼吸道分泌物和普外科是ESBLs的主要来源。治疗产ESBLs菌株引起的感染的首选药物为亚胺培南和美洛培南。产ESBLs肺炎克雷伯菌对药物的敏感性普遍低于产ESBLs大肠埃希菌。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶产生情况及变迁

目的：了解本院培养病原菌超广谱β-内酰胺酶的产生情况及变迁。方法：采用双纸片扩散法对临床分离的194株大肠埃希菌和115株肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测。结果：ESBLs总检出率为32.4%,其中大肠埃希菌为34%,肺炎克雷伯菌为30%,1998～2000年,不同年度两菌ESBLs总检出率分别为30.2%、25.4%、38.5%,大肠埃希菌分别为28%、26%、43%。肺炎克雷伯菌分别为33%、24%、29%。经卡方检验,不同年度ESBLs检出率差异无显著性。结论：本院培养的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率高,对临床分离的肠杆菌属细菌进行ESBLs检测是非常必要的。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解杭州市第一人民医院产ESBLs大肠埃希菌的发生比例及对临床上常用的24种抗菌药物的耐药率变化.方法收集2003 2004年该院各类临床标本中分离的大肠埃希菌,采用NCCLS推荐的表型确证试验方法检测ESBLs菌株;药敏试验采用纸片扩散法.结果2003年与2004年,产ESBLs的大肠埃希菌分离率分别为46.11%（184/399）、57.44%（386/672）（P=0.0003）;2年来,ESBLs阳性菌对临床常用的24种药物表现出较高的耐药性,耐药率上升非常显著（P=0.0005）;非产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物仍保持较高的敏感率;但2004年ESBLs阴性的大肠埃希菌的耐药性,比2003年显著上升（χ^2=37.785,P=0.0005）.结论尽早开展产ESBLs菌的监测,合理使用抗菌药物,对于有效控制产ESBLs菌的播散与流行是一项重要措施.     

产超广谱β- 内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性及其基因分型分析

目的:了解新疆独山子地区肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、作为指示剂的五种抗生素的检出情况及ESBLs主要基因型。方法:收集临床分离的148株肺炎克雷伯菌,采用双纸片协同筛选法、NCCLS推荐的表型筛选和确证试验对细菌进行ESBLs产酶株的识别;耐药基因的质粒重组、转化,聚合酶链反应(PCR)扩增阳性产物测序,通过GenBank对序确定基因型。结果:本地区肺炎克雷伯菌ESBLs的分离率达31.1%,头孢曲松(CRO)安曲南(ATM)和头孢噻肟(CTX)头孢泊肟(CPD)、头孢他定(CAZ)作为指示剂检出率分别为97.8%、95.6%、93.4%、76.0%、65.2%;本地区产ESBLs菌株耐药基因型CTX-M-22占54.3%,CTX-M-18占41.3%,TEM61.8%,52.1%的产ESBLs肺炎克雷伯菌SHV耐药基因阳性。结论:CRO、ATM和CTX对检测ESBLs阳性率较高;CTX-M-22、CTX-M-18是本地区产ESBLs菌株的主要基因型。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性检测

目的 了解临床分离产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌对喹诺酮类等抗菌药物的耐药性。方法 NCCLS表型确证试验（纸片增强法）检测出临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株,琼脂稀释法测定产ESBLs菌株对喹诺酮类等抗菌药物的耐药性。结果 临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株的检出率为40．2％（92／229）,产ESBLs菌株以尿标本多见,对6种喹诺酮类抗菌药物的耐药率均在89％以上,哌拉西林的耐药率为100％;对头孢噻肟、头孢他啶和哌拉西林-三唑巴坦的耐药率分别为77．2％、1．1％和21．7％,对亚胺培南极其敏感,耐药率为0％。结论 产ESBLs大肠埃希菌发生率较高,对喹诺酮类抗菌药物耐药显著,临床应加强检测和监测。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测及药敏分析

目的对3年间分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌进行鉴定和药敏试验分析。方法采用1999年NCCLS建议的纸片扩散确证法,从76株肺炎克雷伯菌中分离出14抹产超广谱β-内酰胺酶细菌,检出率为18．4％。结果产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌对7种常用抗生素的药敏结果可以看出,亚胺培南对肺炎克雷伯菌作用最强,可作为治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的首选药物,敏感率高达86％,是控制感染的最有效的药物。其次为头孢哌酮／舒巴坦,敏感率达59．7％,也有一定的抗菌活性。结论产超广谱β-内酰胺酶检测对指导临床合理使用抗生素具有重要意义。     

血流感染患者大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性分析

目的分析血流感染患者大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（Extended—Spectrum Beta Lactamases,ESBLs）的现状及其耐药特征,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法对浙江省上虞市人民医院2011年1月至2012年12月住院患者血培养分离的96株大肠埃希菌,采用纸片扩散表型确证试验进行ESBLs检测,用K．B法做药敏试验。结果血培养的大肠埃希菌分离率2011年、2012年分别为19．48％、17．47％。大肠埃希菌产ESBLs的检出率2011年、2012年分别为60．00％、60．78％。产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药率显著高于不产ESBLs菌株。无论大肠埃希菌是否产ESBLs,碳青霉烯类抗生素均具有很高的敏感率。结论血流感染患者分离的大肠埃希菌产ESBLs比率高,产ESBLs菌株对多种抗菌药物耐药性高。可经验性使用碳青霉烯类抗生素治疗大肠埃希菌所致的血流感染。     

社区与医院感染中肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌耐药性分析

目的探讨社区和医院感染中肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌产ESBLs的情况及耐药特性。方法采用体外扩散确证试验检测ESBLs,同时用Micro scan wat RA way-40系统全自动细菌鉴定/药敏分析仪及K-B琼脂扩散法进行细菌鉴定和体外药敏试验。结果社区感染标本中分离出肺炎克雷伯杆菌79株,产ESBLs20株,阳性率为25.3%,大肠埃希菌177株,产ESBLs27株,阳性率为15.3%;医院感染标本中分离出肺炎克雷伯杆菌82株,产ES-BLs33株,阳性率为40.2%,大肠埃希菌135株,产ESBLs42株,阳性率为31.1%,社区与医院感染菌株产ESBLs比较差异均有统计学意义(P均<0.05);ESBLs阳性菌株对多种抗生素耐药,其耐药性明显高于ESBLs阴性菌株。结论肺炎克雷伯杆菌和大肠埃希菌产ESBLs菌株在临床分离率较高,医院感染标本要显著高于社区感染标本,并且对多种抗生素具有高度耐药性,产ESBLs菌株耐药性显著高于不产ESBLs菌株,临床上应加强对ESBLs的控制,以防感染流行。     

血流感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因分型

目的 了解深圳市人民医院致血流感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率及基因型特点.方法 收集来自临床血液培养标本中的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌115株,采用ESBLs表型确证试验检测菌株的ESBLs,应用PCR扩增产ESBLs菌株TEM、SHV和CTX-M基因,并对阳性扩增产物进行DNA测序分型.结果 115株菌中共检出ESBLs阳性38株,检出率为33.0％;其中大肠埃希菌阳性25株,肺炎克雷伯菌阳性13株.25株产酶肠埃希菌中18株检出CTX-M-14基因,3株检出CTX-M-9基因.13株产酶肺炎克雷伯菌均检出SHV型基因,其中SHV-12阳性10株,SHV-2阳性2株,SHV-59阳性1株;该13株产酶菌中10株同时被检出含CTX-M-14或CTX-M-13基因.结论 该院致血流感染大肠埃希菌产ES-BLs以CTX-M-14为最主要基因型,肺炎克雷伯产ESBLs最常见为SHV-12和CTX-M-14型.     

重症监护病房产ESBLs菌的基因分型

目的了解深圳市人民医院重症监护病房分离菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检出率及其基因型分布情况。方法收集来自重症监护病房大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分离株48株,采用CLSI推荐的表型确证方法筛选出ESBLs株,并利用PCR及DNA测序法分析产酶菌株的ESBL基因型。结果（1）48分离株菌中共检出产ESBLs菌24株,阳性率为50.0%。（2）产酶菌中93.8%（15/16）的大肠埃希菌和87.5%（7/8）的肺炎克雷伯菌分别检出CTX-M基因;其中72.7%（16/22）为CTX-M-14。6株肺炎克雷伯菌检出SHV基因,其中3株为SHV-11型,另3株为SHV-12型,6株含SHV基因的肺炎克雷伯菌中5株合并CTX-M基因。而所有大肠埃希菌株均未检出SHV基因。所有产酶菌中,分别有10株大肠埃希菌和2株肺炎克雷伯菌检出TEM-1基因,其中1株大肠埃希菌只检出TEM-1基因,未检出SHV型或CTX-M型基因。结论重症监护病房分离菌ESBLs检出率高,以CTX-M-14为主要基因型。     

临床分离肺炎克雷伯菌耐药性监测

目的了解临床分离肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供实验室依据。方法采用微量稀释法对392例临床分离肺炎克雷伯菌进行药物敏感性测定;超广谱β-内酰胺酶(Extendedspectrumbeta-lactamases,ESBLs)检测用微量稀释法初筛,纸片法做确证试验。结果肺炎克雷伯菌对18种抗菌药物的药敏结果中,耐药率大于30%的抗菌药物多达11种;其中氨苄西林-舒巴坦、氨苄西林、头孢噻吩、哌拉西林、复方新诺明和头孢唑啉的耐药率高达20%以上。耐药率低于10%的抗菌药物仅有4种,分别为头孢曲松(7.7%)、头孢噻肟(7.4%)、氨曲南(6.9%)和亚胺培南(3.1%)。其它抗菌药物的耐药率都高于10%。产ESBLs菌株的发生率为32.9%～45.8%,平均为39.8%;产ESBLs菌株对多种抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05)。结论临床分离肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物的耐药率较高,尤其是产ESBLs菌株的高耐药率及多重耐药性更为明显。临床应加强对肺炎克雷伯菌耐药性的监测并预防耐药菌株的传播流行。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检测及耐药性分析

由细菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）引起的细菌耐药性一直是临床相关感染性疾病治疗中的棘手问题。从不同病区患者标本中分离了96株大肠埃希菌和80株肺炎克雷伯菌,分剐采用双纸片协同试验和药物敏感试验检测了上述菌株产生ESBLs情况及对17种抗生素的耐药性。结果发现,27．1％（26／96）的大肠埃希菌株和22．5％（18／80）肺炎克雷伯菌株产ESBLs。ICU病房分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株ESBLs总阳性率（46．0％）与介入科病房和烧伤科病房分离菌株ESBLs总阳性率（28．6％和25．0％）无显著性差异（P〉0．05）,但明显高于呼吸科、骨科、其他病房及门诊部分离菌株ESBLs总阳性率（6．3％～14．3％,P〈0．01）。不产ESBLs大肠埃希菌株和肺炎克雷伯菌株对17种抗生素耐药率明显低于产ESBLs菌株。产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对氨曲南均敏感,对氨苄西林／舒巴坦、阿莫西林／棒酸、阿米卡星耐药率仅为15．8％-23．4％。上述实验结果提示,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床菌株中有较高的ESBLs阳性率,不同病区患者感染的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs阳性率有很大差异,氨曲南、氨苄西林／舒巴坦、阿莫西林／棒酸、阿米卡星可作为治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染性疾病的首选药物。     

同时产多种基因型ESBLs肺炎克雷伯菌的分析

目的分析汕头大学医学院第一附属医院临床分离的肺炎克雷伯菌同时产多种基因型ESBLs的情况。方法采用PCR扩增对产ESBLs的肺炎克雷伯菌初步分型,然后PCR扩增阳性产物克隆测序分析,脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型;用浓度梯度法检测10种抗菌药物对同时产多种基因型ESBLs的肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果83株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,发现9株同时产TEM、SHV和CTX-M型,测序结果为CTX-M-3、TEM-1及多种SHV型（SHV12及SHV28）。将这9株细菌作PFGE分析,结果共被分成7个型。药敏结果表明,9株菌除对亚胺培南敏感外,对氨曲南、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、丁胺卡那和四环素均高度耐药,对哌拉西林／三唑巴坦、头孢吡肟、环丙沙星极少菌株敏感。结论发现CTX—M-3超广谱-及多种SHV型超广谱-和TEM-1广谱β-内酰胺酶基因同时存在该院临床分离的肺炎克雷伯菌中,耐药十分严重,应引起重视。     

Virulence factors (aerobactin and mucoid phenotype) in Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli blood culture isolates

Abstract We examined the presence of two virulence factors in 241 blood isolates of Klebsiella pneumoniae from patients hospitalized during 1989 and 1990 in 7 French hospitals, and 125 blood isolates of Escherichia coli from one hospital. Aerobactin was scored phenotypically and genotypically with an intragenic DNA probe of 2 kb. The mucoid phenotype was assessed by culture on trypticase soy agar and by genotypic analysis (intragenic DNA probe of 235 bp). Only 6% K. pneumoniae isolates were aerobactin-positive with no significant variation according to geographical location while 20% of K. pneumoniae isolates displayed the mucoid phenotype, with a significant variation according to hospital. Aerobactin was always associated with the mucoid phenotype. The frequency of aerobactin production but not mucoid phenotype (14%) was higher among E. coli isolates (48%). They harbored two types of large plasmids. Intraperitoneal injection into mice of 10³ cfu of K. pneumoniae producing both virulence factors demonstrated that capsular serotype K2 was the more virulent K23 and K28.     

仙居县儿童下呼吸道感染肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的分析仙居人民医院住院下呼吸道感染患儿临床分离肺炎克雷伯菌的耐药特征,为临床合理用药提供依据。方法选择2012年7月至2013年7月该院下呼吸道感染肺炎克雷伯菌阳性患儿81例。对患儿的临床一般资料进行分析,对临床分离菌株进行细菌鉴定,用18种抗生素进行药敏试验,采用WHONET5．4分析软件进行统计。结果2012年7月至2013年7月共分离出81株肺炎克雷伯菌,ESBLs阳性42株,检出率为51．85％。所有菌株对亚胺培南、厄他培南、左旋氧氟沙星、丁胺卡那100％敏感。对氨苄西林耐药率为100％。ESBLs阴性菌株对氨曲南、头孢曲松、头孢他啶、头孢唑啉、头孢吡肟100％敏感,而ESBLs阳性菌株则100％耐药。ESBLs阴性菌株对其他抗生素的耐药率为氨苄西彬舒巴坦（12．82％）、环丙沙星（2．56％）、头孢替坦（O％）、呋喃妥因（20．51％）、庆大霉素（5．13％）、复方新诺明（17．85％）、妥布霉素（2．56％）、哌拉西林／他唑巴坦（2．56％）;ESBLs阳性菌株对其他抗生素的耐药率为氨苄西林／舒巴坦（73．80％）、环丙沙星（2．38％）、头孢替坦（16．67％）、呋喃妥因（61．90％）、庆大霉素（28．57％）、复方新诺明（54．76％）、妥布霉素（7．14％）、哌拉西林／他唑巴坦（7．14％）。结论本地区患儿中肺炎克雷伯菌耐药性较高,临床应重视病原菌的检测。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测结果分析

目的 了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)和肺炎克雷伯菌(KPN)的临床分布及耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 采用VITEK-2全自动微生物鉴定/药敏分析系统对细菌进行菌株鉴定及药敏分析,对产ESBLs的ECO和KPN的临床分布与耐药结果用WHONET 5.4软件进行统计分析,应用SPSS 11.5软件进行卡方检验.结果 1955株菌中共检出产ESBLs菌916株,检出率为46.9％,其中EC0 570株,检出率为58.9％,KPN 346株,检出率为35.0％,产ESBLs菌主要从痰液和尿液中检出,主要来自ICU、普外科和神经外科;产ESBLs菌对多种抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs菌,差异有统计学意义(P＜0.05),对哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦和亚胺培南较敏感.结论 产ESBLs菌株所致的感染以泌尿道感染和呼吸道感染为主,且呈多重耐药性,临床上要重视对产ESBLs菌株的检测和细菌耐药监测,有效控制产ESBLs菌株的产生和流行.     

Comparison of rates of fecal colonization with extended‐spectrum beta‐lactamase‐producing enterobacteria among patients in different wards,outpatients and medical students

Because asymptomatic carriage of extended‐spectrum beta‐lactamase (ESBL) producers is a risk factor for infection, data on colonization dynamics are important when planning infection control. This study investigated fecal colonization with ESBL producers among inpatients, outpatients and medical students and compares the characteristics of ESBL producers among these groups. Carriage rates were investigated in 5581 fecal samples; 4343 from inpatients (330, 1397, 619 and 1864 from adult ICUs [intensive care units], adult non‐ICUs, pediatric ICUs and pediatric non‐ICUs, respectively), 814 from outpatients and 424 from screening of medical students. ESBL producers were characterized by co‐resistance, integrons carried, and aminoglycoside resistance and ESBL genes. Dynamic regression models were built to identify relationships between combinations of time series of monthly antibiotic consumption, prevalence of carriers and infected subjects. Inpatients, ICU patients and adults showed higher prevalence than outpatients, non‐ICU patients or children (7.4%, 9.3% and 12.0% vs. 3.1%, 6.1% and 4.1%, respectively). Klebsiella pneumoniae was more frequent in ICU patients; dominance of CTX‐M‐15 producers was more marked in adult than in pediatric inpatients. ESBL carriage was shown to be a consequence of infection in adults in the time‐series analysis; antibiotic consumption had little effect. The epidemiology of colonization with ESBL producers differed between pediatric ICU, adult ICU and adult non‐ICU patients. In adults, carriage of ESBL producers seems to be the consequence of infection, especially in ICU patients; the main source of colonization is nosocomial acquisition. In contrast, children are less likely to acquire colonizer strains in hospitals; importation of ESBL producers by colonized children seems to be significant.