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1.
相思豆毒素研究及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
相思豆毒素类似于蓖麻毒素,是一种植物蛋白毒素,具有极强的细胞毒性作用,特别是对某些恶性肿瘤细胞的毒性更强,这使它成为用于杀伤肿瘤细胞的候选毒素之一。本就其性质、基因克隆、结构与功能,以及在肿瘤导向治疗方面的应用作一简要的综述。 相似文献
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两种虎纹捕鸟蛛昆虫毒素的分离纯化及生物学活性鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
结合离子交换和反相高效液相色谱从虎纹捕鸟蛛粗毒分离纯化到 2种虎纹捕鸟蛛毒素 ,命名为虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅶ和虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅷ .经质谱测定这 2种毒素的分子量分别为 3981 0 2和 4 171 12 .氨基酸序列分析发现 ,这 2种虎纹捕鸟蛛毒素同源性非常高 ,只有 6个残基位点的不同 .虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅶ和虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅷ的生物学功能相似 ,都能对蝗虫起到麻痹作用 ;对小鼠的中枢神经作用高剂量能使小鼠产生致死 ,但低剂量虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅷ能使小鼠产生惊厥反应 ,而低剂量虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅶ不能使小鼠产生惊厥反应 ;这 2种毒素都能阻断小鼠离体膈神经膈肌的神经肌肉传递 ,且与虎纹捕鸟蛛毒素 I混合后都具协同作用 相似文献
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葡萄球菌中毒性休克毒素的分离纯化及其体外抗肝癌活性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
采用固体膜进行TSST-1的产毒培养,然后从金葡菌产毒产物中经CM纤维素离子交换层析、SephadexG-75、Sephacryl S-200三步纯化,成功地获得了纯度为95.3%的毒素,SDS-PAGE呈现单一条带,与其对应抗血清有免疫学特异反应,不含核酸、糖和其它肠毒素等物质。与同类方法相比,该方法步骤少、快速、简便。对其体外抗肝癌活性进行了分析,首次证明即使TSST-1的浓度为10^-8g/L仍然对人肝癌细胞有显著抑制作用。 相似文献
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本文用山东产马氏蝎(Buthus martensii kashi)粗毒为材料,经SephadexG-50和Sp-Sephadex C-25二次柱层析,分离纯化获得三个毒峰部分,毒性比粗毒分别提高40—100倍。 纯度鉴定表明三个毒峰的聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳均为一条带,等电点分别为8.7,9.1,9.1,分子量用SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分别为6,600,5,000和8,500。对纯化蝎毒毒素的氨基酸组分也作了分析。 蝎毒毒素对人红细胞膜作用的初步探索结果表明:它使人红细胞膜的Na.K-ATP酶活性和膜脂流动性有所降低。 相似文献
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经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-SephadexC-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素(DaHT-1和DaHT-2).SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸(Asx,Glx)分别占23%和24%,DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具蛋白水解酶活性,无对TAME,BAEE的水解活性和PLA2酶活性.两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关.DaHT-1和DaHT-2的最适温度分别为35℃和40℃,最适pH为6-9,对热均不稳定,温度高于60℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含0.5mol的Zn,1mol的Ca,较多的Na、K、Mg,不含Co。 相似文献
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湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质 总被引:3,自引:0,他引:3
经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-Sephadex C-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮蛇毒中纯化出两个出血毒素。SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸分别占23%和24%。DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具 相似文献
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志贺氏毒素B亚单位的分离纯化及其多克隆抗体的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
从高效表达志贺氏毒素B亚单位(StxB)的工程菌株DH5α/pSU108分离纯化了StxB,并用它制备了多克隆抗体。ELISA试验表明抗StxB抗血清的滴度达1×104。Westernblot结果显示该抗血清能与StxB发生特异反应。这为研究志贺氏毒素B亚单位的免疫保护作用和痢疾志贺氏Ⅰ型菌苗的研制打下了基础 相似文献
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橡胶树树皮质膜H~+-ATPase在橡胶树产排胶过程中扮演着重要角色,制备高纯度及高活性的质膜是研究质膜H~+-ATPase特性和功能的必要条件。该研究以一年生巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)树皮为材料,利用差速离心法获得粗膜微粒体,通过两相分配法分离纯化质膜,并研究两相体系中不同浓度聚合物(5.9%、6.1%、6.3%、6.5%、6.7%,W/W)和KCl(2、5、8、11、14 mmol·L~(-1))对质膜蛋白得率和纯化效率的影响。通过Bradford法对质膜蛋白得率进行检测,同时采用酶活性检测法对质膜纯度进行检测,分析结果表明选用6.4%(W/W)聚合物浓度和5mmol·L~(-1)KCl组成的两相体系可获得较高纯度和得率的橡胶树树皮质膜。通过电镜观察法在形态学上对质膜纯度进一步评价,利用铅铀能侵染全部膜组分使其染色,而磷钨酸只能专一性地侵染质膜并使其染色这一特性,分别使用铅铀和磷钨酸对切片进行染色,并通过透射电镜对切片染色程度进行直接观察,结果表明提取的粗膜微粒体中质膜组分较少,存在大量的细胞器膜污染,而纯化后的质膜膜组分较单一,其他膜组分污染较少,而且质膜大小较均一,可以用于进行后续橡胶树树皮质膜H~+-ATPase特性和功能的研究。 相似文献
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海南捕鸟蛛毒素-Ⅵ的分离纯化及鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
从分布于我国海南省的海南捕鸟蛛(Selenocosmia hainana)粗毒中,应用阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到1种多肽神经毒素,命名为海南捕鸟蛛毒素-Ⅵ(Hainantoxin-Ⅵ,HNTX-Ⅵ)。MALDI-TOF南谱分析及氨基酸序列分析表明该多肽毒素分子量为3.998 49kDa,序列为NH2-ECKYLWGTCEKDE-HCCEHLGCNKKHGWCGWDGTF-COOH,其中的6个Cys形成3对二硫键。HNTX-Ⅵ能阻断小鼠膈神经膈肌标本神经肌肉接头传递,脑室及硬膜外注射毒能使小鼠瘫软。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Grammostola spatulata毒素HaTx和蜘蛛Scodra griseipes中的SGTx1毒素有很高的同源性,而后两种毒素均为K^ 通道阻断剂。 相似文献
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豆薯(Pachyrrhizuserosus)种子经磷酸盐缓冲液抽提,S-SepharoseFastFlow柱,DE-52纤维素柱和SephadexG-75柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为PachyrinⅠ和Ⅱ.SDS-PAGE测得其分子量分别为33kD和14.5kD,但HPLC分子筛的结果显示PachyrinⅡ的分子量为28kD,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,PachyrinⅡ电泳的结果都完全相同,表明该蛋白的亚基不是以二硫键相连。两种蛋白的等电点分别为4.5和6.5.用酸解法测定了它们的氨基酸组成。在无细胞体系中,它们对蛋白合成有较弱的抑制活性,显示它们可能是核糖体失活蛋白(RIPs)家族中的新成员。 相似文献
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豆薯种子中两种蛋白质的分离纯化及其性质研究 总被引:2,自引:0,他引:2
豆薯(Pachyrrhizuserosus)种子经磷酸盐缓冲液抽提,S-SepharoseFastFlow柱,DE-52纤维素柱和SephadexG-75柱层析,提取出两种高纯度的蛋白成分,命名为PachyrinI和II,SDS-PAGE测得其分子量分别为33kD和14.5kD,但HPLC分子筛的结果显示PachyrinⅡ的分子量为28kD,无论在还原条件下,还是在非还原条件下,PachyrinI 相似文献
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从敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)粗毒中,通过阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到一种新的多肽神经毒素,命名为敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ(jingzhaotoxin-Ⅷ,JZTX-Ⅷ).经MALDI-TOF分析表明该多肽分子质量为4 329.37 Da,结合氨基酸序列分析和RACE的cDNA快速扩增法得到了敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ的氨基酸序列和全长cDNA,序列为LFECSFSCDIKKNGKPCKGSGEKKCSGGWRCKMNFCVKV-COOH,其中6个半胱氨酸形成3对二硫键.敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ能阻断小鼠膈神经-膈肌标本的神经肌肉接头传递,经初步膜片钳实验分析,表明该多肽是一种钙离子通道抑制剂. 相似文献
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虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅵ的分离纯化与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
通过离子交换及反相HPLC,从虎纹捕鸟蛛毒液中分离得到1种新的哺乳类神经毒素,命名为虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅵ(Huwentoxin-Ⅵ,HWTX-Ⅵ)。MALDI-TOF质谱仪分析及氨基酸序列分析表明该多肽毒素分子量为4.44018kDa,序列为H2N-CIGEG VPCDE NDPRC CSGLV VLKKT LHGIW IKSSY CYKCK-COOH,其中6个Cys形成3对二硫键,小鼠脑内注射实验表明,HWTX-Ⅵ对神经系统具有明显的致瘫作用。这种致瘫作用又具有可逆性。 相似文献
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运用阴离子交换层析从亲和纯的天花粉凝集囊中分离得到三个同工形式的凝集素,它们都具有结合半乳糖的能力,都能与天花粉凝集大的抗血清形成免疫沉淀线,并且其它各方面的性质如疏水结合能力也相仿。对它们生物学性质的检测,发现它们都能杀伤黑色素瘤细胞,但缺乏抑制无细胞蛋白质生物合成的能力。另外,对植物中同工形式凝集大的存在进行了讨论。 相似文献
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天花粉中三个同工凝集素的分离纯化及其生物学性质研究 总被引:2,自引:0,他引:2
运用阴离子交换层析从亲和纯的天花粉凝集素中分离得到三个同工形式的凝集素,它们都具有结合半乳糖的能力,都能与天花粉凝集素的的因清形成免疫沉淀线,并且其它各方面的性质如疏水结合能力也相仿,对它们生物学性质的检测,发现它们都能杀伤黑色素瘤细胞,但缺乏抑制无细胞蛋白质生物合成的能力,另外,对植物中同工形式凝集素的存在进行了讨论。 相似文献
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黑曲霉糖化酶的分离纯化及其性质 总被引:7,自引:0,他引:7
采用硫酸铵分级DEAE-纤维素离子交换层析、Sephadez G—150凝胶过滤等方法,从黑曲霉AS 3.4309变异株B-11的发酵液中分离出三种电泳均一的糖化酶(GI、Gill、GII)。其收率分别为0.8%、50%和18.6%。GI、Gill和GII的分子量分别为27000、67000和53000;等电点分别为3.38、3.52和3.59;含糖量分别为8.7%.13.6%和18.3%;最适pH分别为4.4、4.6和4.6;对可溶性淀粉的Km值分别为2.0、0.77和1.18g/L;二级结构中a-螺旋含量分别为18.4%、23.9%和28.9%;最适温度均为70℃。生淀粉可吸附Gill,吸附率达80%。此外还测定了三种同工酶的氨基酸组成及含量。GI、GII和GIII均由一条多肽链组成。 相似文献
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栀子多糖的分离纯化及其性质 总被引:11,自引:0,他引:11
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四季豆(PhaseolusvulgarisL.)属于豆科蝶形花亚科野百合属,在我国分布极广,普植于温带地区.虽然四季豆是一种极普通的营养作物,但贮藏过久或煮沸不透常发生中毒.四季豆种子中成分复杂,除了蛋白组分外,还含有多种小分子组分[1].一般认为,四季豆种子的毒性是这些组分复合作用的结果一直引人关注的则是其中的有毒蛋白.四季豆蛋白中很多是凝集素[2~4],四季豆凝集素是一种典型的植物血细胞凝集素(Phytohemagglutinin,PHA),是一种寡糖结合专一性的糖蛋白,具有凝聚血细胞,刺激… 相似文献