亲和层析纯化猪脑尾状核乙酰胆硷酯酶

将乙酰胆硷酯酶的可逆抑制剂(间-羧苯二甲基碘乙基季铵盐)共价连接到Sepharose 4B上,用0.5%胆酸钠抽提的猪脑尾核乙酰胆硷酯酶经上述凝胶亲和层析,比活提高1024倍,得率为32%。纯化制剂的琼脂免疫双扩散呈单一的沉淀线,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出四条酶活力区带,对硫代乙酰胆硷的米氏常数为:8.9×10~(-5)M。     

亲和层析纯化猪脑尾状核乙酰胆硷酯酶

将乙酰胆硷酯酶的可逆抑制剂(间-羧苯二甲基碘乙基季铵盐)共价连接到Sepharose 4B上,用0.5%胆酸钠抽提的猪脑尾核乙酰胆硷酯酶经上述凝胶亲和层析,比活提高1024倍,得率为32%。纯化制剂的琼脂免疫双扩散呈单一的沉淀线,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出四条酶活力区带,对硫代乙酰胆硷的米氏常数为:8.9×10~(-5)M。     

猫中脑网状结构内注射乙酰胆硷对脑电图及行为的影响

在輕度乙醚麻醉下及正常生理状态下的猫,分別注射不同剂量乙酰胆硷于中脑网状結构內,观察其脑电图及行为变化。主要結果如下:小剂量乙酰胆硷注射于中脑网状結构內可引起皮层电活动异步化(兴奋过程),而大剂量却导致同步化(抑制过程)。在出現异步化时伴有动物行为上的觉醒,同步化时动物陷入睡眠中。动物的乙酰胆硷兴奋阈值不全相同。推測皮层在注射前机能活动水平不同,可能导致不同的表現。从直接注射乙酰胆硷于中脑网状結构的实驗結果来看,乙酰胆硷在这里是一种兴奋介质的可能性是存在的。     

正常及高血压狗在服降压药过程中的去甲肾上腺素升压反应和乙酰甲胆硷降压反应

本实驗采用2只正常狗,2只腎型和2只神經源型高血压狗研究了利血平、中国蘿芙木总硷和双氫氯噻嗪对血压反应的影响。在給药前、給药第5—10天及停药后血压恢复到正常时,各測去甲腎上腺素升压反应及乙酰甲胆硷降压反应两次,同时观察脉搏变化。結果表明,利血平使去甲腎上腺素升压反应稍加强,蘿芙木总硷降低此升压反应,双氫氯噻嗪无影响。利血平及蘿芙木总硷使乙酰甲胆硷降压反应减少,前者还使乙酰甲胆硷引起的脉搏加速减少,后者无此作用。双氫氯噻嗪的作用不同,它使乙酰甲胆硷的降压反应显著加强,維持时間也延长,这一作用在高血压动物更为明显。神經源型高血压狗在服用双氫氯噻嗪时,注射乙酰甲胆硷引起的脉搏加速反应消失,在腎型高血压狗明显减弱,而在正常狗无改变或稍加强。双氫氯噻嗪对MeCh反应的影响在同时补充氯化鈉或氯化鉀时即不出現,但靜脉注入右旋醣酐以补充血浆容量时不能改变这項影响。本实驗的結果反映了三种降压药的作用机制不同。     

下丘脑和第三脑室内注射乙酰胆硷对兔血浆自由脂肪酸浓度的影响

本工作用雄性家兔做慢性实验。通过脑内埋藏套管向下丘脑微量注射乙酰胆硷溶液7微升,在注射后的10、20、40及60分钟分别自耳缘静脉取血,测定血浆自由脂肪酸的浓度。85次实验的结果总结如下:(一)将生理盐水或高强盐水7微升注入下丘脑并不引起血浆自由脂肪酸浓度明显的改变,其波动范围分别为6.5%及16.4%。肌肉或静脲注射乙酰胆硷1.4毫克,1小时内血浆自由脂肪酸浓度变化不超过11%。(二)将乙酰胆硷0.7—1.4毫克注入下丘脑结节区,可引起血浆自由脂肪酸水平明显升高,在注射后的第10及20分钟分别较注射前升高78.5%及85.0%,60分钟时恢复原水平。将同量乙酰胆硷注入视前-隔区及乳头区,均不引起血浆自由脂肪酸浓度明显改变。(三)将乙酰胆硷0.7—1.4毫克注入第三脑室,观察到血浆自由脂肪酸浓度缓慢而轻度的降低,在1小时未降低24%。总结以上结果可以认为,下丘脑,特别是其结节区可以显著影响血浆自由脂肪酸水平,其机制有待进一步阐明。     

大鼠膈肌去神经后终板形态结构及胆硷酯酶活力在体与在器官培养下的变化的比较

在体骨骼肌去神经后,终板形态结构退变, 胆硷酯酶活力迅速下降。而Miledi (1962)用器官培养法培养大鼠膈肌5、6天,在测试到肌纤维终板外乙酰胆硷敏感性增加的同时,观察到终板上仍有胆硷酯酶活力。Peterson和Crain(1972)培养啮齿类动物的成年骨骼肌肌纤维残段2、3月后,也观察到终板上有明显的胆硷酯酶活力。可是这些资料均未有意识地与在体正常终板酶活力或去神     

循环滤泡辅助性T细胞亚型与重症肌无力患者临床特点之间的相关性分析

目的:分析循环滤泡辅助性T(c Tfh)细胞亚型与重症肌无力(MG)患者临床特点之间的关系。方法:横断面研究30例MG患者外周血c Tfh细胞各个亚型百分比和临床特点之间的关系。c Tfh细胞亚型的百分比是通过流式细胞术获取的。MG患者的临床特点包括性别、年龄、病程、胸腺情况、美国重症肌无力协会(MGFA)分型和重症肌无力量化(QMG)评分。结果:CD4~+CXCR5~+ICOS~+、CD4~+CXCR5~+PD-1~+和CD4~+CXCR5~+CXCR3-CCR6~+(Th17样)c Tfh细胞亚型百分比与QMG评分之间存在正相关关系;全身型重症肌无力(GMG)患者在CD4~+CXCR5~+ICOS~+、CD4~+CXCR5~+PD-1~+和Th17样c Tfh细胞亚型百分比要高于眼肌型重症肌无力(OMG)患者,OMG患者在CD4~+CXCR5~+CXCR3-CCR6-(Th2样)c Tfh亚型细胞百分比要高于GMG患者。c Tfh细胞各个亚型百分比与MG患者的性别、年龄、病程、胸腺情况均无显著相关性。结论:CD4~+CXCR5~+ICOS~+、CD4~+CXCR5~+PD-1~+和Th17样c Tfh细胞亚型百分比与MG病情严重性间存在正相关关系,提示c Tfh细胞与MG之间的密切关系。     

蒙古族人红细胞醋酶D表型及基因频率研究

酯酶D(Esterase D)简称“EsD”,是60年代Tashian等人先后发现人红细胞中含有能够分解羧酸酯键的一类酯酶,即A、B、C以及乙酰胆硷酯酶;70年代初期由Hophinson检测出来的。它是一种新型的红细胞同工酶型,     

精氨酸加压素V1受体阻断剂对毒死蜱降温效应的阻断作用

精氨酸加压素 (ＡＶＰ)能够降低致热原性和非致热原性的发热效应 ,精氨酸加压素Ｖ1受体阻断剂 (ＡＶＰＶ1受体阻断剂 )可以阻断其作用。最近几年的研究发现 ,有机磷农药杀虫剂毒死蜱 (ＣＨＰ)可以引起体温降低。目前认为ＣＨＰ引起的降温效应与体内乙酰胆硷 (Ａｃｈ)含量增加有关 ,因为Ａｃｈ参与体温调节过程。我们考虑既然ＡＶＰ有参与体温调节和降温过程 ,那么ＣＨＰ的降温作用是否与ＡＶＰ有关 ,所以本研究观察了ＡＶＰＶ1受体阻断剂对ＣＨＰ引起的体温变化的影响。1　材料与方法(1)动物与试剂　实验用 2月龄的ＳＤ雄性和雌性大鼠 ,体重…     

大鼠脑内鸦片受体的昼夜节律

关于生物钟调节机体各项生理机能的研究引起了人们极大的兴趣,随着研究的不断深入,近年来从分子生物学的水平已经发现多种神经介质,如去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、乙酰胆硷(ACh)和鸦片肽等的代谢,在每日24小时中也发生规律性周期变化。中枢神经介质作为神经调节中重要信息物质,自突触前释放后首先与其相应受体发生特异性的相互作用,进而激发细胞内一系列环节而最后发挥其生理功能。因此,伴随神经介质代谢的生物节律变化,是否同时发生受体的节律性变化,成为一个吸引人的问题。美国国立精神卫生研究院的Naber等人对此曾进行了大量的研究工作。他们曾报告过NE α和β受体     

重症肌无力患者的免疫指标与临床疗效分析

目的:探讨并分析重症肌无力(MG)患者的免疫指标和临床治疗效果。方法:选取我院2010年6月~2014年6月接收的200例重症肌无力患者,在治疗前和治疗后采用细胞仪检测外周血CD3、CD4和CD8及采用比浊法检测IgG、IgA和IgM,进行分类比较其变化。结果:全身型重症肌无力患者的IgG、IgA较眼肌型高(P0.05),差异具有统计学意义。在治疗前后的免疫指标(CD3、CD4、CD8、IgG、IgA及IgM)和临床资料(男/女、眼肌型/全身型、检测时病程、检测时年龄)的对比中,差异无统计学意义(P0.05)。在体液免疫低下组中,用丙种球蛋白治疗的缓解率比未用丙种球蛋白组的缓解率高(P0.01),差异具有统计学意义。结论:重症肌无力患者免疫指标IgG、IgA、IgM、CD3、CD4、CD8虽然不能作为重症肌无力患者的病情和疗效的唯一评价指标,但对指导治疗具有一定的参考价值,且体液免疫低下者用丙球蛋白的疗效较好。     

乙酰胆鹼和迷走神經对离体豚鼠心房的兴奋效应

乙酰胆鹼对心臟所表現的抑制作用是众所周知的事实。但在某些实驗条件下,也可观察到乙酰胆鹼对心臟功能具有兴奋效应。1945年以来,許多作者对这現象进行过仔细的研究,并提出不同的解釋。Hoffmann及其同事在阿托品化的离体心臟中,观察到乙酰胆鹼能加强心搏力量,并且發現此时灌流液中含有类腎上腺素物質。假如先以菸鹼或麦角毒素处理心臟,則乙酰胆鹼即不能再引起心肌收縮的增强。因此他們認为乙酰胆鹼能刺激心臟中交感神經节細胞或嗜鉻組織,使之釋放类腎上腺素物質,而后者則加强心臟     

α-银环蛇毒与菸硷样乙酰胆硷受体的研究

在神经肌接头,α-银环蛇毒结合位点集中于终板肌膜褶的顶端,其数量级为10~7。每平方微米密度为10~4数量级。去除神经支配后,受体在终板外区出现。在体外培养的胚胎细胞上,毒素结合位点最先在肌管出现,开始时分布均匀,以后聚集成群,可能在此部位形成终板。新生受体掺合至膜上是一个需能及与蛋白质合成有关的过程。对脑内毒素结合位点的分布亦进行了研究,采用了亲和层析法,已将毒素结合蛋白提纯,其分子量约为550,000,由数个亚单位组成。此蛋白具菸硷激动属性,并可影响膜对离子的通透。在亚细胞组份中,毒素结合蛋白分布在粗制线粒体的神经末梢组份中及微粒体组份中。近年有些报道指出,中枢神经系统及交感神经节的有些菸硷激动作用不被α-银环毒素所抑制,这个问题有待进一步研究阐明。     

东莨菪硷及其类似物的中枢作用的研究进展

本文着重讨论东莨菪硷及其类似物的中枢双相作用和机制。中枢抑制作用不仅是选择性地阻断大脑皮层、海马和脑干网状结构等处 M-胆硷受体,也可能与阻断中枢α-肾上腺索能受体有关。中枢兴奋作用则可能是通过促使 AGh 释放激动 N-胆硷受体,以及阻断皮层抑制性中间神经元的 M-受体。此外本文也扼要地介绍了此类药物对镇痛的影响、对黑质纹状体、呼吸中枢和脊髓的作用。     

心房肽抗心力衰竭作用的初步实验

<正> 心房肽研究,近年多集中在利钠多肽(心钠素)的利钠利尿、降低血压等生物活性方面,其他方面涉足较少;而心房肽对心力衰竭的作用,国内尚未见报导。本实验以氯化乙酰胆硷(Ach)致离体心衰模型,观察了心房肽(AP)的抗心衰作用,现将初步实验结果报导如下:     

中枢胆硷能系统结构和功能研究的一些进展

近十年来中枢胆硷能系统结构和功能的研究进展比较迅速。现已确证,在中枢神经系统的广泛区域(如运动和感觉系统、脑干网状结构上行激动系统、边缘系统以及大脑皮层等)都分布着大量的胆硷能神经元、胆硷敏感神经原及胆硷能神经束;此外,关于中枢胆硷能系统促进学习记忆、激活脑电、维持觉醒、意识及快波睡眠等重要生理功能也得到了进一步的阐明。     

321例重症肌无力患者睡眠质量分析

目的:分析312例重症肌无力患者病情稳定期的睡眠质量。方法:收集2013年2月—2014年6月第四军医大学唐都医院神经内科门诊就诊的重症肌无力患者,应用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)对患者进行近1月的睡眠质量问卷调查、重症肌无力定量评分表(QMG)进行病情评分,以P0.05为有统计学意义,对MG患者睡眠质量指数、各因子分进行分析研究。结果:符合重症肌无力诊断标准、知情同意并纳入研究患者共有321例,男156,女165。研究发现,多数重症肌无力患者有睡眠质量问题:性别与睡眠质量、病情评定无相关性(P0.05);重症肌无力患者睡眠质量问题主要表现为入睡时间、睡眠效率、睡眠障碍、日间功能方面。结论:重症肌无力患者存在睡眠质量差这一问题。改善MG患者肌无力症状的同时,应注重改善患者的睡眠质量。     

婴儿肉毒中毒

<正> 一、肉毒中毒一般概念[1-3]肉毒毒素是由肉毒梭菌产生的一种高分子蛋白的神经毒素,它能引起死亡率很高的人和易感动物的肉毒中毒,尽管根据抗原的不同已将肉毒毒素分为A、B、C_1、C_2、D、E、F和G8个型,但它们都有抑制周围胆硷能运动神经末梢释放乙酰胆硷,妨碍神经传导,引起肌肉松弛性麻痹的药理作用。它们的结构和分子量也是相似的。     

乙酰胆碱受体结构与功能的研究进展

乙酰胆碱受体是一种神经递质介导的离子通道受体 ,由 5个同源亚基组成。乙酰胆碱受体包括肌肉型和神经型两种。肌肉型乙酰胆碱受体是肌肉神经传导中的重要媒介物质以及自身免疫疾病重症肌无力的主要免疫原 ,神经型乙酰胆碱受体的突变也可导致某些疾病的发生。扼要介绍了近年来乙酰胆碱受体结构与功能的研究进展。     

重症肌无力风险基因挖掘

目的:挖掘重症肌无力(Myasthenia gravis,MG)可能的风险基因。方法:通过人工挖掘在Pub Med数据库收集重症肌无力风险基因,通过Gene数据库获取重症肌无力风险基因编号,用以表示基因或者其相应的蛋白。应用基因功能分析软件DAVID(http://david.abcc.ncifcrf.gov/)对重症肌无力风险基因进行KEGG通路富集分析,挖掘重症肌无力风险通路,进而对任意两个通路进行关联分析。应用基因功能分析软件DAVID的Gene Ontology,对MG风险基因进行功能注释,以P0.01来判定注释是否有显著意义。结果:(1)本研究挖掘出97个重症肌无力的风险基因,KEGG基因富集分析共筛选出44条与重症肌无力显著相关的通路,主要包括多种自身免疫性疾病相关通路、信号转导相关通路、肿瘤相关通路、抗原的加工提呈通路等等。(2)以上44条风险通路两两通路间均具有相关性(P.0.01)。结论:本研究共挖掘出44条重症肌无力风险通路,8个重症肌无力风险基因,分别为:NF-kB、TNFR、MEK、AP-1、Raf、MEK1/2、MSK1、TAPBP。其中,MEK同时出现在多个风险通路中,考虑其风险性更高。