蓝莓花色苷预处理对大鼠心肌梗死的保护作用

目的观察蓝莓花色苷（blueberryanthocyanin,BBA）预处理对实验性急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积,心肌肌钙蛋白-T（cTn-T）表达,Bax、Bcl-2mRNA表达的影响,探讨其干预心肌梗死的机制。方法40只Wistar大鼠随机分为假手术组,心肌梗死模型组,BBA低、中、高剂量组,药物干预4周,末次给药30min后结扎左冠状动脉前降支建立心梗动物模型。24h后,TTC检测心肌梗死面积;Westernblotting方法检测心肌细胞cTn-T蛋白表达;realtimePCR方法检测Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达。结果模型组和假手术组相比,模型组心肌梗死面积显著升高（P〈0．01）,心肌细胞cTn．T蛋白表达下降（P〈0．05）,Bcl-2mRNA表达下降（P〈0．05）,BaxmRNA表达显著升高（P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值显著降低（P〈0．01）。BBA干预给药组和模型组相比,中剂量组心肌梗死面积低于模型组（P〈0．05）,低剂量组心肌细胞cTn-T蛋白表达升高（P〈0．05）,中剂量组Bcl-2mRNA表达升高（P〈0．05）,低、中剂量组BaxmRNA表达下降（P〈0．05）,中剂量组Bcl-2／Bax比值升高（P〈0．05）。结论蓝莓花色苷对心肌梗死后心肌细胞具有明确的保护作用,其机制可能与减少心肌梗死面积,上调心肌细胞eTn-T蛋白的表达,上调Bcl-2mRNA表达、下调BaxmRNA表达,抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡有关。     

人工合成红景天苷对大鼠急性肺损伤的保护作用

为了研究人工合成红景天苷(salidroside,Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用及其机制,将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为生理盐水对照组、3 mg/kg LPS损伤组、不同剂量Sal干预组(5、20和80 mg/kg)以及5 mg/kg地塞米松(dexamethasone,Dex)干预组,气管内滴注LPS建立ALI模型,在LPS造模前0.5 h腹腔给予人工合成Sal或Dex,造模6 h后处死动物。计量肺湿/干重比值(wet/dry weight ratio,W/D),苏木素-伊红染色观测肺组织病理形态学变化和肺损伤评分。用瑞氏染色计数肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)离心沉淀的中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN),用BCA法测定BALF离心上清蛋白含量,并用酶联免疫吸附法测定TNF-α、IL-1β和IL-6的含量。测定肺组织中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测肺组织中磷酸化NF-κB和总NF-κB蛋白表达水平。结果显示,与LPS组比较,人工合成Sal能减轻肺组织损伤程度,降低肺损伤评分和W/D比值(P0.05),减少BALF中PMN计数、蛋白含量以及炎症因子水平(P0.05),降低肺组织中MPO和MDA含量(P0.05),抑制肺组织中磷酸化NF-κB蛋白的表达(P0.05)。以上结果提示,人工合成Sal对LPS诱导的ALI具有保护作用,其机制与抑制肺组织NF-κB蛋白磷酸化以及减少PMN在肺内聚集有关。     

芒果苷对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降糖作用研究

本研究以二甲双胍为阳性对照,观察芒果苷(12.5、25.0、50.0 mg/kg)灌胃给药4周,对四氧嘧啶性糖尿病小鼠糖脂代谢的影响。实验结果表明芒果苷(25.0、50.0 mg/kg)灌胃给药后显著降低糖尿病小鼠的血糖、血清甘油三酯和总胆固醇水平,增加小鼠肌、肝糖原含量,但对糖尿病小鼠血清胰岛素水平没有影响;组织病理学检查结果表明芒果苷对糖尿病小鼠胰岛和β细胞的数量无明显改善,提示芒果苷灌胃给药对四氧嘧啶性糖尿病小鼠有降血糖作用,其降糖作用可能与促进肌、肝糖原的合成,增加机体对葡萄糖的利用有关,对糖尿病小鼠的脂代谢紊乱也有一定改善作用。     

黄芩苷对STZ诱导糖尿病大鼠肾组织保护作用实验研究

目的探讨黄芩苷对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾组织的保护作用及其相关机制。方法将用STZ造模成功的糖尿病大鼠48只,随机分为模型组、黄芩苷低、中、高剂量组,每组12只,另设空白组12只。持续给药18周。给药结束后测血糖、24小时尿蛋白总量、血浆及肾组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量、转化生长因子β1(TGF-β1)。结果与模型组比较,黄芩苷中、高剂量组能明显降低糖尿病大鼠血肌酐和24小时尿蛋白量,降低血浆中AngⅡ的含量,减少TGF-β1的表达。结论黄芩苷对糖尿病大鼠肾组织具有较好的保护作用,其机制可能通过降低糖尿病大鼠血浆中AngⅡ含量,抑制TGF-β1过度表达,改善肾小球毛细血管和基底膜的通透性,对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。     

橄榄苦苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

为了探讨橄榄苦苷联合合心爽对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其保护作用机制,将50只健康大鼠分成假手术组、模型组、橄榄苦苷组、合心爽组、橄榄苦苷+合心爽组。经结扎冠脉左前降支制备心肌缺血再灌注大鼠模型,造模后药物处理7 d,用放射免疫法检测心肌肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)含量,用比色法检测心肌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,用Western blot法检测心肌内皮素-1(ednothelin-1,ET-1)的表达。结果显示与假手术组相比,模型组心肌TNF-α、IL-1β、MDA的含量显著升高(P0.01),IL-10、SOD、CAT水平均显著降低(P0.01),心肌ET-1表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,经橄榄苦苷或合心爽治疗后,心肌TNF-α、IL-1β、MDA的含量显著降低(P0.05,P0.01),IL-10、SOD、CAT水平均显著升高(P0.05,P0.01),心肌ET-1表达水平显著降低(P0.05,P0.01)。橄榄苦苷和合心爽联合治疗后心肌缺血再灌注损伤的恢复更加显著。通过本研究可以看出橄榄苦苷和合心爽对小鼠心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与降低心肌内皮素-1表达、改善抗氧化酶活性和抑制炎症因子水平有关。     

芒果苷协同氟康唑抗耐药白念珠菌作用研究

目的研究芒果苷与氟康唑合用对唑类耐药白念珠菌协同抗真菌的作用和机制。方法采用棋盘式微量稀释法测试芒果苷协同氟康唑对22株耐药白念珠菌的最小抑菌浓度MIC80;时间-杀菌曲线探究两药联用对4株耐药白念珠菌生长的抑制作用;药物生长抑制实验实验探究不同浓度芒果苷和不同浓度氟康唑协同抗耐药白念珠菌药效;通过实时定量RT-PCR检测两药联用时耐药基因CDR1、CDR2、MDR1表达水平。结果芒果苷联合氟康唑可产生协同抗唑类白念珠菌作用,协同指数(FICI)0.5;两药合用对白念珠菌生长可产生抑制作用;两药合用降低耐药基因CDR1表达水平。结论芒果苷与氟康唑合用可产生协同抗唑类耐药白念珠菌作用。     

花生油对酒精所致胃粘膜损伤的保护作用

着重研究了花生油对无水酒精所引起的大白鼠胃粘膜损伤的保护作用,并对花生油作用的有效部位和机制作了初步探讨。     

花色苷提取物对大鼠发育关键期铅致肝脏和肾脏损伤的保护作用研究

为研究天然色素花色苷（anthocyanins,ACNs）对铅中毒引起的脏器损伤的保护作用,构建了铅暴露大鼠模型,灌服不同剂量的ACNs溶液和强力排铅药二巯基丁二酸（dithioglysuccinic acid, DMSA）,连续3周,于末次给药24 h后考察脏器中的铅含量、组织病理学、血液及脏器生化指标;并采用综合生物标志物响应（integrated biomarker responses, IBR）评估ACNs对铅致发育期大鼠肝脏和肾脏氧化损伤的修复能力。实验结果表明,铅大量存在于大鼠的肝脏和肾脏组织中,造成脏器病理学结构及氧化损伤;而ACNs可促进铅排出机体,改善组织病理学结构,使血清中转氨酶、肌酐等生化指标水平明显好转,并升高肝和肾抗氧化酶的活性,减少还原性物质的含量,改善铅诱导组织的氧化损伤;IBR分析结果显示,ACNs可使铅损伤的脏器得到明显的修复。结果表明,ACNs营养干预可有效拮抗铅致机体的氧化损伤,从而有效修复铅损伤的肝肾组织。     

白首乌C21甾苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨白首乌C21甾苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：健康清洁级 Wistar系雄性大鼠40只随机分为4组：假手术组：打开胸腔,冠状动脉左前降支（LAD）下穿线但不结扎;缺血再灌注组：结扎LAD;去势组：去势后恢复4w,然后再结扎LAD;白首乌C21甾苷治疗组：结扎LAD手术前1w胃给予白首乌C21甾苷10 g/ kg,连续7d,然后结扎LAD。采用ELISA法检测血浆肌钙蛋白（cTnT）和心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF α）,白细胞介素6（IL 6）含量,并对心肌组织进行病理学分析。结果：与缺血再灌注组比较,白首乌C21甾苷治疗组TNF α、IL 6和cTnT含量明显降低,心肌病理损伤减轻。结论：白首乌C21甾苷可显著抑制心肌炎症因子,缩小梗死面积,减轻心肌组织形态损伤,改善受损的心肌功能,从而起到保护心肌的作用。     

神经节苷脂对脂多糖损伤大鼠嗜铬细胞瘤细胞的保护作用

目的：研究内源性神经节苷脂对大鼠嗜铬细胞瘤细胞株（PC12）脂多糖（LPS）损伤后的作用及机制。方法：培养PC12细胞,建立LPS损伤模型,采用MTT法检测不同浓度LPS对PC12细胞存活率的改变、葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂D（D-PDMP）耗竭内源性神经节苷脂时LPS对PC12细胞存活率的改变以及添加外源性神经节苷脂GM1后对PC12细胞存活率的保护作用;倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞状态;RT-PCR检测NF-κB的相对表达含量。结果：LPS能导致PC12细胞形态学的改变及存活率下降,且随着LPS浓度的增加细胞存活率逐渐降低;神经节苷脂GM1能明显改善LPS所致的细胞形态学以及存活率的改变;工具药D-PDMP耗竭内源性神经节苷脂后,LPS对PC12细胞的损伤更严重,添加外源性神经节苷脂GM1,细胞形态学及存活率得到明显改善,细胞存活率上升;LPS损伤时细胞内NF-κB含量增加;D-PDMP预先耗竭内源性神经节苷脂时NF-κB含量增加更多;添加外源性神经节苷脂GM1后NF-κB含量降低。结论：内源性神经节苷脂对PC12细胞LPS损伤具有保护作用,可能是通过NF-κB信号通路来发挥作用的。     

芒果苷对慢性支气管炎大鼠CD4~+T淋巴细胞的影响

本研究旨在探讨芒果苷对香烟烟熏诱导慢性支气管炎大鼠CD4+T淋巴细胞比例及其产生淋巴因子白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)的影响。大鼠随机分为正常组、模型组与芒果苷200、100 mg/(kg·d)组,香烟烟熏6周建立慢性支气管炎大鼠模型,随后灌胃给药4周。以流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞比例;流式分选获得CD4+T淋巴细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)测定其IL-2、IL-4水平,实时荧光RT-PCR检测其IL-2、IL-4基因表达;HE染色检测支气管炎症病理形态。实验结果显示,与模型组比较,芒果苷组CD4+T淋巴细胞比例明显降低,IL-2、IL-4基因与蛋白表达水平显著下调,慢性支气管炎症显著减轻。该结果提示,芒果苷可下调CD4+T淋巴细胞比例并减少淋巴因子IL-2、IL-4的产生,此作用可能与其减轻慢性支气管炎症有关。     

大鼠BTCe对体外培养胰岛保护作用及对糖尿病大鼠降糖作用的研究

β细胞素(betacellulin,BTC)是目前较受关注的胰岛再生因子,但其促胰腺、胰岛再生的机制不清.BTCe是betacellulin的功能片段,促细胞增殖能力与BTC相同.实验通过原核表达方法获得BTCe蛋白,MTT法证实其促3T3-L1细胞增殖能力.将BTC或BTCe作用于原代培养的大鼠胰岛,观察其对胰岛分泌的急性及长期影响作用,实时定量PCR及免疫荧光检测胰岛内关键基因的表达.将质粒pcDNA3.1-BTCe注射入链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肌肉中,观察对大鼠血糖的影响作用.加入BTC或BTCe可明显提高体外培养大鼠胰岛的GSIS水平,但实时定量PCR及免疫荧光显示胰岛内4种关键基因的表达并无明显变化;pcDNA3.1-BTCe转染糖尿病大鼠15～20天后血糖出现下降,糖耐量明显改善;免疫荧光显示:胰腺内有大量PDX-1 的导管细胞及胰岛素阳性细胞出现.推测BTC及BTCe对体外长期培养的大鼠胰岛具有一定的保护作用,可能通过促进胰腺内PDX-1 的导管细胞及胰岛素阳性细胞的增殖、诱导对STZ诱导的糖尿病大鼠的高血糖具有一定缓解作用.     

牛磺酸对大鼠红细胞的保护作用

牛磺酸对大鼠红细胞的保护作用刘雪芬,莫志贤（第一军医大学南方医院药材科第一军医大学中医系广州５１０５１５）陈晓佳（北京解放军２９２医院药械科１００１６８）牛磺酸广泛存在动物细胞内,对多种有害因素引起的细胞损伤具有保护作用,但对于牛磺酸细胞保护作用的机...     

紫丁香苷对小鼠急性肝损伤的保护作用

紫丁香苷是刺五加、祖师麻等中药的主要活性成分,是质量控制的重要指标。为了探讨紫丁香苷对小鼠急性肝损伤的保护作用,建立小鼠的CCl4急性肝损伤模型,测定空白对照组、模型组和紫丁香苷大、中、小剂量组小鼠血清中AST、ALT水平及肝脏中MDA含量,同时观察肝脏组织病理变化。结果显示,紫丁香苷中剂量能显著降低异常升高的AST、ALT水平（P〈0．05）;紫丁香苷低剂量能显著降低MDA含量（P〈0．05）,并有效改善肝组织变性坏死情况（P〈0．05）。说明紫丁香苷对肝组织有保护作用,作用与剂量呈相关性。     

神经节苷脂对细胞膜损伤的保护作用

观察了神经节苷脂对去垢剂Ｔｒｉｔｏｎ—Ｘ—１００损伤大鼠红细胞膜的影响。适量的红细胞与１６μｇ／ｍｌ至５×１０４μｇ／ｍｌ范围内不同浓度的神经节苷脂于３７℃孵育１小时后,加入ＴｒｉｔｏｎＸ－１００在室温下作用３分钟。离心,取上清液在５４０ｎｍ测溶液透光率,取沉淀部分的红细胞在扫描电镜下观察红细胞及其膜的形态变化。实验结果显示,在神经节苷脂浓度为１０４μ／ｍｌ时,对红细胞膜的保护作用最好,上清液透光率为正常值的８５．４％;细胞形态虽有改变,但仍的部分接近正常的细胞存在。而损伤对照组上清透光度仅为正常值的１３．４％,红细胞胞体缩小,成为棘形红细胞。结果表明,神经节苷脂对红细胞膜化学损伤有良好的保护作用。     

大鼠脑缺血皮层电图动态变化及神经节苷脂的保护作用

以阻断大脑中动脉制备大鼠脑缺血模型,构成右侧大脑皮层弥漫性缺血。部分大鼠术后即刻腹腔注射神经节苷脂。于脑缺血２－６ｈ间断记录额、中央、顶区皮层电图;经计算机采样、处理、分析各区波幅值。对左、右皮层各区皮层电图各波波幅差值率（％）进行组间相比。结果可见,脑缺血组缺血侧各区波幅在２－６ｈ均较非缺血侧为低。２ｈ以慢波（θ波）波幅降低显著,６ｈ波幅下降最明显,而以快波（β波）为重,尤以中央、顶区受损较重。脑缺血组与假手术组相应区域波幅差值率相比ｐ＜０．０５或０．０１。神经节苷脂组在２－６ｈ中央、顶区两侧波幅差值率与假手术组接近,４或６ｈ缺血侧α,β波波幅较非缺血侧为高。神经节苷脂组中央、顶区与脑缺血组相应区域波幅差值率比较,Ｐ＜０．０５或０．０１。用此法造模致脑缺血在２－６ｈ皮层电图具有明显改变,以中央、顶区为重,早期应用神经节苷脂有明显保护作用。     

天然牛黄对MODS大鼠保护作用的实验研究

目的:肠道内的消化酶在MODS发生发展过程中起着关键的作用,有研究发现非结合型胆红素可以灭活胰蛋白酶和糜蛋白酶.基于非结合型胆红素对消化酶的灭活作用,本研究主要探讨非结合型胆红素含量丰富的天然牛黄对多器宫功能障碍综合症大鼠的保护作用.方法:通过腹腔注射无菌石蜡酵母多糖混悬液的方法制作MODS大鼠模型.观察天然牛黄对MODS大鼠的生理状态,生命体征,血气分析,多指标系列生化检测,二胺氧化酶水平,以及心肺肝肾重要脏器病理组织学检查的变化及影响.结果:天然牛黄治疗纽大鼠生命体征,血气分析结果,生化指标,血清DAO水平与MODS模型纽比较,体温、心率、呼吸检测结果显著降低;pH、PaO2、SO2、AB、BE值升高,PaCO2值降低;LDH、ALT、Cr值减少;DAO水平降低,均有显著差异(P＜0.05),且心肺肝肾等组织病理变化也有明显改善.结论:天然牛黄能明显恢复石蜡酵母多糖混悬液造模方法引起的MODS大鼠生理状态,生命体征,能有效改善MODS大鼠脏器功能及病理形态,对MODS大鼠具有脏器保护作用.其机制可能是非结合型胆红素灭活消化酶所致,待进一步研究.     

胶原多肽对亚急性酒精中毒大鼠的保护作用研究

目的：探讨胶原多肽对于亚急性酒精中毒大鼠的保护作用。方法：SPF级雌性大鼠,随机分为空白对照组、酒精对照组和胶原多肽（CPs）组（剂量分别为0.225、0.45、0.9g/kg·BW）,以乙醇6g/(kg·d)染毒4w造成大鼠亚急性酒精中毒,同时给予胶原肽干预,4w后处死大鼠,测定体重变化和血清转氨酶、血脂、蛋白、抗氧化酶等指标。结果:连续4w摄入酒精造成大鼠生活状况和一系列血清指标的改变,CPs干预能够缓解亚急性酒精中毒大鼠的生活状况,逆转酒精导致的高谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）水平,增强抗氧化酶SOD活性同时降低脂质过氧化产物丙二醛（MDA）水平,降低血清总胆固醇（TC）和总甘油三酯（TG）水平,但是由于模型的局限性,肝乙醇脱氢酶（ADH）、血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）等没有观察到明显的改变。结论：CPs对大鼠亚急性酒精中毒具有一定的保护作用,包括减轻肝脏损伤、提高机体抗氧化水平、改善脂类代谢等。     

金雀异黄素对大鼠氧化应激损伤的保护作用研究

目的观察金雀异黄素(又称染料木黄酮,genistein,Gen)对β淀粉样蛋白(Aβ)致大鼠氧化应激损伤的保护作用。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和Gen干预组,每组10只。Gen组灌胃剂量为30 mg/(kg.d),假手术组和模型组灌胃等量的0.5%羧甲基纤维素钠。连续灌胃14 d后,模型组和Gen组大鼠双侧海马CA1区注射Aβ25-35,假手术组注射等量生理盐水,于术后7 d,生物化学方法检测脑组织中SOD、GSH-Px、MDA的活性或含量,HE染色观察大鼠海马的形态学改变。结果 (1)与假手术组比较,模型组脑组织SOD及GSH-Px活力明显降低,MDA含量明显升高(P0.01),而Gen组脑组织SOD及GSH-Px活力较模型组升高,MDA含量较模型组降低(P0.05)。(2)假手术组HE染色可见大鼠海马锥体细胞排列整齐、均匀,细胞结构完整,形态正常;模型组可见海马锥体细胞脱失、排列紊乱,结构不清,部分胞核固缩、深染;Gen组海马锥体细胞排列较整齐、均匀,结构尚清晰,形态基本正常。结论 Gen能保护海马神经细胞免受Aβ的损伤,这种作用可能与改善机体氧化还原状态,提高抗氧化水平有关。     

细胞自噬对酒精诱导的肝细胞毒性的保护作用

目的：研究细胞自噬对酒精诱导的人肝细胞系（CL-1）的保护作用。方法：培养正常肝细胞系CL-1细胞,80mmol／L酒精常规处理24小时,采用CCK-8法观察酒精对细胞活力的影响;流式细胞技术观察酒精对细胞凋亡的影响;免疫蛋白印迹及转染GFP-LC3法检测细胞自噬水平;选用rapamycin和3-MA调节细胞自噬,观察酒精处理后细胞活力及凋亡的变化。结果：酒精处理体外培养的CL-1细胞,实验组较对照组细胞活力下降（P〈0．05）;实验组细胞46．2％发生凋亡,显著高于对照组8．4％;LC3II及Beclinl水平显著高于对照组;GFP-LC3荧光数显著高于对照组（P〈0．05）;调节细胞自噬水平,rapamycin组细胞活性增加（P〈0．01）,31．1％（46．2％）细胞发生凋亡;3-MA组细胞活性降低（P〈0．05）,54．1％（46．2％）细胞发生凋亡。结论：酒精处理降低CL-1细胞活性,促进凋亡,提高自噬水平;提高或降低细胞自噬水平,细胞凋亡及活力随之降低和增加;细胞自噬能够对抗酒精诱导的肝细胞凋亡。