化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾脏足细胞骨架蛋白的干预作用

通过化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏足细胞骨架蛋白α-actinin-4、Synaptopodin的干预作用,探讨化瘀通络中药减少蛋白尿,防治DN的可能作用机理。选取健康雄性SD大鼠50只并按随机数字表法分为正常组(C组)10只,其余40只采用高糖高脂饲料联合1%链脲佐菌素(STZ)腹腔注射复制糖尿病(DM)大鼠模型,72 h后尾静脉取血检测血糖,血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病大鼠造模成功,成模大鼠再随机分为3组,分别为模型组(M组)、化瘀通络中药组(Z组)、厄贝沙坦组(I组)。各治疗组分别给予不同干预,16周后分别检测各组大鼠24 h尿蛋白(24 h UTP)、血凝及血小板参数等指标;采用蛋白质印迹法(Western-Blot)、实时荧光定量(Real-time PCR)方法检测各组大鼠肾脏足细胞骨架蛋白α-actinin-4、Synaptopodin的表达情况。结果显示,与C组比较,其余各组大鼠24 h UTP明显升高(P0.01),血凝、血小板相关指标均出现明显变化;与M组相比,24h UTP均明显减少(P0.01),血凝、血小板相关指标均有明显改善;与I组比较,中药组大鼠24 h UTP明显减少(P0.05)。与C组相比,其他各组大鼠肾组织α-actinin-4、Synaptopodin表达水平均明显降低(P0.05,P0.01);与M组相比,两治疗组两种蛋白表达均明显升高(P0.05,P0.01);与I组比较,中药组大鼠Synaptopodin的基因和蛋白表达均明显上调(P0.05)。以上结果说明化瘀通络中药可以降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白,其机制可能与改善血液高粘、高凝状态,上调足细胞骨架蛋白α-actinin-4、Synaptopodin,维持足细胞正常结构和功能有关。     

化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及对肾小球P-cadherin表达的影响

为观察化瘀通络中药不同配伍对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾小球足细胞裂孔膜蛋白P-cadherin表达的影响,将70只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组、化瘀通络组、厄贝沙坦组、化瘀组和通络组,灌胃干预16周。检测大鼠的体重、肾重、肾脏指数、24 h尿蛋白定量,分别采用实时定量PCR和蛋白印迹法检测P-cadherin的表达。结果显示,与模型组比较,化瘀通络组大鼠的肾脏指数、24 h尿蛋白定量明显下降(P0.01),体重增加、P-cadherin mRNA和蛋白表达明显上调(P0.01)。提示化瘀通络中药可能通过上调P-cadherin mRNA和蛋白的表达,减少尿蛋白,延缓糖尿病肾病病程进展。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病瘀血阻络证大鼠肾皮质核因子-κB表达的影响

探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)瘀血阻络证大鼠肾皮质核因子-κB表达的影响。60只大鼠选取10只为正常组,余大鼠予高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组及中药组,相应药物剂量灌胃,16周末测量各组大鼠饮水量、饮食量、尿量、体重及空腹血糖。检测不同时间点(第3天、第8周、第16周)各组大鼠24 h尿蛋白定量(24 h UTP)的变化,留取肾皮质观察肾脏病理损伤及采用Real-time PCR、Western-blot检测NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达。结果显示与正常组比较,模型组大鼠出现明显多饮、多食、多尿、消瘦的症状(P0.05),第8、16周24 h UTP明显增多(P0.05),NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达增强(P0.05),肾脏病理出现明显损伤;与模型组比较,两干预组在第8周、16周24h UTP明显减少(P0.05),NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达明显下调(P0.05),中药组饮水量、尿量、体重有显著改善(P0.05);与厄贝沙坦组比较,中药组饮水量、第16周24 h UTP及NF-κB p65蛋白表达明显减少(P0.05)。结果表明化瘀通络中药抑制NF-κB p65的高表达可能是该药物对DN大鼠肾脏保护作用的靶点之一。     

化瘀通络中药对高糖刺激下足细胞裂孔膜蛋白的干预作用

通过化瘀通络中药对H-2Kb-ts A58条件性永生化小鼠足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP表达的干预作用,探讨化瘀通络中药降低糖尿病肾病蛋白尿、保护肾功能的可能作用机制。实验以体外培养小鼠足细胞为研究对象,将其分为正常糖组(CG)、高糖组(HG)、高糖加药组(HG+Z),通过免疫细胞化学(ICC)、蛋白质印迹法(Western-Blot)、实时荧光定量(Real-time PCR)方法检测不同时间点不同干预后各组podocin、CD2AP蛋白及基因的表达情况。结果显示干预足细胞48 h后,与CG组比较,其余两组podocin、CD2AP两种蛋白表达量均明显降低(P0.05,P0.01);与HG组比较,(HG+Z)组两种蛋白表达量均明显升高(P0.05)。与同时间点CG组比较,其余两组podocin、CD2AP mRNA表达均显著降低(P0.01);与同时间点HG组比较,(HG+Z)组48 h两种蛋白的基因表达量均明显升高(P0.01),24、72 h与同时间点HG组无明显差异(P0.05)。以上结果说明化瘀通络中药可以上调高糖刺激下足细胞裂孔膜蛋白podocin、CD2AP的表达,其可能为化瘀通络中药减少糖尿病肾病蛋白尿、保护肾功能的作用机制之一。     

化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠肾组织纤维连接蛋白和层粘连蛋白的影响

探讨化瘀通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠的干预作用和对肾组织纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的影响。选用SD雄性大鼠55只,随机取10只作为正常对照组(C组),其余利用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病(DM)大鼠模型,成模大鼠分组如下:模型组(M组)、化瘀中药治疗组(H组)、通络中药治疗组(T组)、厄贝沙坦治疗组(I组)。各治疗组给予相应药物灌胃16周,于16周末检测大鼠空腹血糖(FBG)、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、凝血酶原时间(PT)、血肌酐(Scr)、甘油三脂(TG);取大鼠肾组织做病理学观察;免疫组化法检测肾组织FN和LN的表达。结果显示与正常对照组比较,模型组大鼠FBG、24h UTP、PT、TG、Scr水平明显升高(P0.05),FN、LN表达明显增加(P0.05)。与模型组比较,各治疗组大鼠24h UTP、PT、TG水平明显降低(P0.05),FN、LN表达明显减少(P0.05)。以上结果说明化瘀通络中药对糖尿病肾病大鼠的肾脏有一定的保护作用,其机制可能与调节脂代谢紊乱,纠正血液高凝状态,下调FN、LN表达,延缓肾脏纤维化有关。     

缺血再灌注对大鼠肾脏足细胞podocin的表达影响及意义

目的:观察SD大鼠缺血再灌注肾损伤足细胞表面相关蛋白(podocin)表达的变化,探讨podocin分子在足细胞损伤中的作用.方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(S组)30只和模型组(M组)30只,各组又分为lh、3h、6h、12h、24h、48h六个亚组,每个亚组各5只.采用Westemblot蛋白印迹法检测肾皮质足细胞podocin蛋白表达.并观察各组血肌酐、尿素氮的变化.结果:与S组相比,肾缺血再灌注损伤后,M组尿素氮于6h开始升高,且48h达高峰(P＜0.05);血肌酐48 h才升高(P＜0.05).Podocin 蛋白在3h表达开始下降,以后随缺血再灌注时间的延长podocin蛋白的表达逐渐下降,且48h组下降最明显(P＜0.01).结论:(1)缺血再灌注肾损伤时大鼠肾功明显发生改变,尿素氮早期开始升高,血肌酐晚期升高明显,说明造模成功.(2)大鼠肾脏足细胞podocin的蛋白表达随着缺血再灌注时间的延长而改变,早期下降不明显,3h组开始逐渐下降,48h组下降最明显.此结果表明podocin蛋白在肾脏缺血再灌注肾损伤表达减少.我们可以推想在缺血再灌注肾损伤时,podocin随缺血时间延长而表达逐渐减少的同时,也破坏了与足细胞相关蛋白之间的联系,这种关系的破坏最终导致足细胞受损.通过对足细胞表面蛋白podocin的研究,对将来肾脏足细胞损伤的防治提供新的思路.     

活血化瘀方对糖尿病模型大鼠糖脂代谢、血管内皮生长因子和血管紧张素II1型受体表达的影响

目的:探讨活血化瘀方对糖尿病模型大鼠糖脂代谢、血管内皮生长因子(VEGF)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响。方法:选取健康雄性SD大鼠50只,适应性喂养7 d后以随机数字表法分成对照组10只、模型组13只、中药组14只、西药组13只。其中模型组与对照组予以纯净水灌胃,中药组予以活血化瘀通络中药配方颗粒灌胃,西药组则予以厄贝沙坦灌胃,1次/d,连续灌胃16周。分别比较各组大鼠的糖脂代谢指标水平及24 h尿蛋白定量、糖化血红蛋白、血清肌酐水平,并检测肾组织VEGF和AT1R表达情况。结果:模型组、中药组、西药组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均高于对照组,中药组、西药组大鼠LDL-C水平低于模型组,中药组大鼠FBG水平低于模型组与西药组(P0.05)。模型组、中药组、西药组大鼠24 h尿蛋白定量与糖化血红蛋白均高于对照组,中药组、西药组大鼠24 h尿蛋白定量低于模型组(P0.05)。模型组、中药组、西药组大鼠VEGF、AT1R水平均高于对照组,中药组、西药组大鼠VEGF、AT1R水平低于模型组,中药组大鼠AT1R水平低于西药组(P0.05)。结论:活血化瘀方可有效改善糖尿病大鼠糖脂代谢状态,通过抑制VEGF与AT1R的表达水平,延缓糖尿病的发生与发展。     

益生菌对胆汁淤积性黄疸大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白的影响

目的探讨双歧三联活菌(培菲康)对胆汁淤积性大鼠小肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1(zonula oc-cludens-1)和Occludin表达的调控机制。方法雄性3周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组和培菲康组,模型组和培菲康组均给予α-异硫氰酸萘酯(ANIT)50 mg/kg一次性灌胃,建立急性肝内胆汁淤积动物模型,培菲康组于造模前4 d开始给予培菲康4.2×107个活菌数/(kg.d)灌胃大鼠。分别于造模后24、48和72 h三个时间点处死大鼠,取末端回肠黏膜组织,采用免疫组化和Western blots免疫印迹法检测紧密连接蛋白ZO-1、闭锁蛋白(Occludin)的分布和表达,并利用图像分析系统对Western blots图像结果进行定量分析。结果ZO-1和Occludin蛋白主要沿大鼠小肠黏膜上皮细胞膜的顶端呈线状分布,模型组大鼠24 h时ZO-1和Occludin的阳性染色较对照组减少,48 h减少最为明显,72 h阳性染色有所恢复,而培菲康组大鼠各时间点ZO-1和Occludin的阳性染色和模型组相比均明显增多。Western blots结果与免疫组织化学结果相一致,模型组24 h已经开始下降(ZO-1 0.1294±0.0481)、(Oc-cludin 0.1950±0.0441),48 h达到最低(ZO-1 0.0395±0.0095)、(Occludin 0.0137±0.0092),72 h开始恢复(ZO-10.2024±0.0498)、(Occludin 0.1494±0.0355),各时间点与对照组(ZO-1 0.2887±0.0237)、(Occludin 0.4266±0.0670)相比差异有统计学意义(P0.01);而培菲康组各时间点蛋白表达分别为24 h(ZO-1 0.2110±0.0367)、(Occludin 0.3056±0.0572),48 h(ZO-1 0.1173±0.0423)、(Occludin 0.0521±0.0123),72 h(ZO-1 0.2601±0.0191)、(Occludin 0.2050±0.0721),与模型组相应时间点数据相比差异有统计学意义(P0.05)。结论双歧三联活菌能够影响胆汁淤积性大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白的分布和表达,可以恢复肠黏膜上皮屏障的完整性。     

子痫前期患者尿液中足细胞裂孔膜蛋白和标记蛋白的检测及意义

目的：检测子痫前期患者尿液中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白的浓度并探讨其临床意义。方法：本实验以62例妊娠期妇女为研究对象,分为三组,其中正常妊娠期妇女25例为正常对照组,慢性高血压的妊娠期妇女17例为高血压组,子痫前期患者20例为子痫前期组。ELISA检测各组妊娠期妇女的尿液中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白的表达;Bradford法检测各组妊娠期妇女的尿蛋白。结果：足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白在正常对照组尿液中含量极少,在高血压组中分泌增加,而子痫前期组患者中明显升高（P〈0．01）,且在子痫前期组尿液中足细胞裂孔膜蛋白和标记蛋白的分泌含量均成正相关（r2=0．79,P〈0．05）。子痫前期组患者中足细胞裂孔膜蛋白和足细胞标记蛋白与尿蛋白浓度成正相关（r2=0．58,P〈0．05;r2=0．79,P〈0．05）。结论：足细胞蛋白脱落主要发生于子痫前期患者,且足细胞蛋白脱落量与尿蛋白成正相关,能直接反映妊娠期患者的肾损伤程度,可作为预测罹患妊娠期高血压的指标。     

脓毒症致大鼠急性肾损伤中炎症介质的变化及机制探讨

目的观察脓毒症致大鼠急性肾损伤(AKI)中血清和肾脏组织中炎症介质的变化及肾脏组织中核因子-κB(NF-κB)的表达,探讨脓毒症致大鼠急性肾损伤的可能机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和盲肠结扎穿孔组(CLP组)。CLP组大鼠采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症动物模型,Sham组除不结扎穿孔盲肠外,其余处理同脓毒症组。分别于造模后6h、12h和24h观察各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平,肾脏组织中Toll样受体4(TLR4)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达;免疫组化法检测肾小管中NF-κB p65的表达,分析NF-κB p65核阳性率。结果与相同时间点Sham组比较,CLP组6h~12h大鼠血清TNF-α和IL-6水平明显升高(P0.01),CLP组6h~24h大鼠肾脏组织中TLR4mRNA表达明显升高(P0.01),CLP组12h~24h大鼠肾脏组织中HMGB1mRNA表达明显升高(P0.01),CLP组6h~24h大鼠肾小管中NF-κB p65核阳性率升高(P0.05~P0.01)。结论随脓毒症致AKI病程的延长,大鼠肾脏组织中TLR4和HMGB1mRNA表达和NF-κB p65核阳性率明显升高,其机制可能与TLR4介导的炎症通路密切相关。     

血清NGAL 在大鼠肾脏缺血再灌注损伤不同时段 的表达及其意义

目的:观察大鼠肾脏缺血再灌注损伤不同时段血中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的表达并探讨其在急性肾脏缺血再灌注损伤中的意义.方法:建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,将50只大鼠随机分为假手术组(S组)和模型组(M组),每组分为5个亚组,包括2h、6h、12h、24h、48h,每亚组大鼠5只.观察各组血NGAL,β2-微球蛋白及血尿素氮,肌酐的变化.结果:M组血NGAL于再灌注损伤后早期(2h)即开始升高,于24h达高峰,至48h仍高于正常(P＜0.05);β2-微球蛋白于12h升高至48h达高峰(P＜0.01);尿素氮于6h升高于48h达高峰(P＜0.01);而血肌酐则于48h才显著升高(P＜0.05).病理显示:M组2h时可见受损肾小管上皮细胞肿胀,管腔扩张、刷状缘消失,至6h时少量上皮细胞脱落、变性甚至坏死,管腔内可见坏死脱落的细胞碎屑,蛋白管型出现,12h时可见间质水肿压迫至管腔明显狭窄,于24h、48h可见蛋白管型显著增多.结论:血NGAL可作为肾脏缺血再灌注损伤早期敏感的生物标志物.     

黄芪皂苷Ⅱ对STZ诱导的糖尿病大鼠的肾脏保护作用研究

摘要 目的：研究黄芪皂苷Ⅱ（Astragaloside-Ⅱ, AS-Ⅱ）对链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）诱导的糖尿病肾病（Diabetic nephrology,DN）大鼠肾脏的保护作用。方法：将8周龄雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠随机选取5只作为正常对照组,其余大鼠予腹腔注射55 mg/kg剂量STZ建立糖尿病模型。造模成功的大鼠随机分为模型组与AS-Ⅱ 治疗组,每组5只。AS-Ⅱ 治疗组予AS-Ⅱ 3.2mg/(kgod）连续口服灌胃治疗9周,同时正常对照组和模型组给予等量生理盐水溶液灌胃。第9周末,收集大鼠24 h尿液测定尿微量白蛋白浓度,留取肾脏组织观察肾脏病理改变并检测肾组织中足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin、WT1和caspase-3的表达。结果：与糖尿病模型组比较, AS-Ⅱ 治疗组DN大鼠肾脏病理损伤明显改善, caspase-3表达明显减少,Nephrin和WT1表达增加,尿蛋白排泄减轻( P＜0. 05)。结论：AS-Ⅱ 治疗可改善DN大鼠肾脏足细胞凋亡,降低尿蛋白,具有肾脏保护作用。     

Ghrelin治疗脑出血大鼠脑水肿及MMP-9表达的影响

目的:研究Ghrelin对大鼠脑出血后脑水肿及脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:选取雄性SD大鼠80只,随机分为对照组(NC组)20只、假手术组(SHAM组)20只、脑出血组(ICH组)20只、Ghrelin治疗组(Ghrelin组)20只。利用自体动脉血注入法建立大鼠脑出血模型;Ghrelin组于建立脑出血模型后经股静脉注射Ghrelin 10 nmol/Kg·d。分别于12 h、24 h、3d、5 d、7 d时间点根据Berderson评分法评估各组大鼠神经系统功能;利用干湿重法测定各组大鼠脑组织含水量;利用蛋白质免疫印迹法(WB)检测脑组织中MMP-9表达情况。结果:在12 h、24 h、3 d、5 d、7 d,ICH组、Ghrelin组大鼠Berderson评分及脑组织含水量高于NC组、SHAM组(P0.05);在5 d、7 d,ICH组大鼠Berderson评分及脑组织含水量高于Ghrelin组(P0.05)。WB结果表明在12 h、24 h、3 d、5 d、7 d,ICH组大鼠脑组织中MMP-9的表达均高于NC组、SHAM组(P0.05);Ghrelin组MMP-9的表达在12 h、24 h、3 d高于NC组、SHAM组(P0.05),在5 d、7 d,与NC组、SHAM组无明显差异(P0.05);在5 d、7 d,ICH组MMP-9表达高于Ghrelin组(P0.05)。结论:在本研究中,Ghrelin可以在5 d后降低脑出血大鼠脑组织中MMP-9的表达程度,从而减轻脑水肿,改善脑出血大鼠神经功能。     

姜黄素和/或有氧运动对血脂紊乱大鼠肠道机能的调节作用

目的 探讨姜黄素(curcumin)和/或有氧运动对血脂紊乱大鼠肠道机能的调节作用。方法 5周龄雄性SPF级SD大鼠40只,随机分为普通饮食+安静组(CON组)、高脂饮食+安静组(HDC组)、高脂饮食+姜黄素+安静组(HDM组)、高脂饮食+有氧运动组(HDE组)和高脂饮食+姜黄素+有氧运动组(HDME组)。高脂饮食各组以高脂饲料喂养,普通饮食组以维持饲料喂养。第3周起,HDM、HDME组以200 g/(kg·d)姜黄素灌胃,其余组以等体积0.5%羧甲基纤维素钠灌胃;HDE、HDME组进行运动强度为70%～75%最大摄氧量的有氧运动,其余组无任何运动干预。6周干预结束后24 h,腹主动脉取血,取盲肠组织、盲肠内容物。全自动生化分析仪检测血脂水平;HE染色后观察大鼠盲肠组织形态;Western Blot法检测盲肠组织闭锁小带蛋白-1(zona occludens-1,ZO-1)蛋白质表达水平;16S rDNA基因测序技术检测盲肠内容物肠道菌群分布。结果 姜黄素和/或有氧运动均可降低血脂紊乱大鼠血清总胆固醇、甘油三酯(P<0.05);上调盲肠组织ZO-1蛋白质表达水平(P<0.0...     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1及肌球蛋白轻链激酶的变化

目的:研究不同阶段非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的变化。方法:将60只雄性清洁级SD大鼠随机分为两组:正常饮食组(NDG)和高脂饮食组(FDG)。于4周、8周、12周时观察各组大鼠肝脏病理学改变;应用ELISA方法测定各阶段大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)的变化;应用鲎实验测定各阶段大鼠门静脉血中内毒素(ET)水平;应用免疫组化方法检测肠道粘膜肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及紧密连接蛋白(ZO-1)的表达及分布情况。结果:随着高脂饮食时间增长,高脂饮食组大鼠肝脏脂肪变性程度逐渐加重;血清ALT、AST、TG、CHOL水平逐渐升高(4周时,P0.05,8周和12周时P0.05);大鼠血浆内毒素的水平逐渐上升(0.11±0.01比0.11±0.01,P0.05;0.36±0.01比0.11±0.01,P0.05;0.44±0.15比0.18±0.03,P0.05);高质饮食组较正常饮食组大鼠紧密连接蛋白ZO-1表达逐渐下降(3.6±0.7比3.9±0.32,P0.05;2.8±0.63比3.8±0.42,P0.05;1.8±0.79比3.7±0.48,P0.05),MLCK表达逐渐增多(0.5±0.53比0.3±0.48,P0.05;1.3±0.48比0.4±0.52,P0.05;1.9±0.74比0.5±0.53,P0.05)。结论:肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1及MLCK可通过影响肠粘膜屏障功能,改变肠粘膜的通透性,促进非酒精性脂肪肝病发生发展。     

二氮嗪对大鼠脑缺血再灌注后ZO-1和Claudin-5蛋白表达的影响

目的观察二氮嗪对大鼠脑缺血再灌注后紧密连接相关蛋白ZO-1和Claudin-5蛋白表达的影响,研究其对血脑屏障紧密连接是否具有保护作用。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组及二氮嗪预处理组,采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别应用免疫组化染色和Western blot检测各组大鼠ZO-1和Claudin-5蛋白的表达水平。结果 1.假手术组ZO-1、Claudin-5在血管上的染色连续、丰富,缺血再灌注组ZO-1、Claudin-5的染色稀少、断续,二氮嗪预处理组染色较缺血再灌注组有所改善;2.Western blot定量测定与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠脑组织中ZO-1和Claudin-5蛋白表达均明显下降(P0.01),与缺血再灌注组相比,二氮嗪预处理组ZO-1和Claudin-5的蛋白表达明显增多(P0.05)。结论二氮嗪对血脑屏障紧密连接具有保护作用,其机制可能与增加紧密连接相关蛋白ZO-1和Claudin-5的表达有关。     

罗格列酮联合地塞米松上调GR减缓博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

目的:探讨PPARγ配体罗格列酮联合糖皮质激素对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用和对糖皮质激素受体(GR)表达的影响,为治疗肺纤维化提供新方向.方法:30只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、罗格列酮干预组(R组)、地塞米松干预组(D组)、罗格列酮+地塞米松干预组(R+D组),每组动物6只.气管内注入博莱霉素(5mg/kg)的方法构建大鼠肺纤维化模型,C组气管内注入同等量生理盐水作为对照;各组于造模24小时后分别给各组大鼠生理盐水、地塞米松、罗格列酮、罗格列酮+地塞米松灌胃干预;第21天以心腔抽血法处死,左肺做病理切片行HE及Masson染色观察肺纤维化情况、免疫组化测GR表达情况,右肺用比色法测羟脯氨酸(Hyp)含量.结果:(1)造模后第21天M组和R组体重均小于C组(P＜0.01)但大于D组(P＜0.01).(2)M组肺组织Hyp含量较C组增高(P＜0.01);R组和D组肺组织Hyp含量较M组减低(P＜0.01),但高于R+D组(P＜0.05).(3)Masson染色示M组肺组织纤维化程度较C组增高(P＜0.01),R组和D组肺纤维化评分较M组减低(P＜0.01),但高于R+D组(P＜0.05).(4)M组GR表达较C组下降(P＜0.01);R组和D组GR表达较M组增强(P＜0.01),但低于R+D组(P＜0.01).结论:罗格列酮和小剂量地塞米松均可上调大鼠肺组织GR的表达减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,罗格列酮对体重的影响明显小于地塞米松,二者联合使用有协同效应,提示罗格列酮和地塞米松联合有望成为治疗肺纤维化的新方法.     

金樱子提取液对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用

目的:研究金樱子提取液对糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)大鼠的肾脏保护作用。方法:在高糖高脂饲料喂食SD(Sprague-Dawley)大白鼠的基础上腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型,随机分为糖尿病肾病模型组(DN组)和金樱子治疗组(DN+RLM组),同时另设正常对照组(NC组)和金樱子对照组(NC+RLM组)。检测金樱子提取液对各组大鼠血糖(fasting blood-glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated haemoglobin,GHb)、24小时尿微量白蛋白和尿量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及肾脏结构的影响。结果:与DN大鼠相比,糖尿病肾病大鼠经金樱子提取液治疗后,大鼠FBG、GHb水平、24 h尿微量白蛋白、24 h尿量、肾脏指数明显降低,血脂紊乱、肾功能损害以及DN肾脏病理明显改善,且无明显副作用。结论:金樱子提取液可明显降低DN大鼠血糖,改善DN大鼠血脂、肾功能紊乱及肾脏病理变化,对糖尿病大鼠肾脏具有较强的保护作用。     

力竭运动后不同时相大鼠心肌p-p38MAPK、NF-kB、COX-2表达的动态变化

目的:观察急性力竭运动后不同时相大鼠心肌组织p38丝裂原蛋白激酶(p38MAPK)的磷酸化程度、核因子(NF-k B)和环氧合酶-2(COX-2)的动态变化,探讨其对力竭性运动损伤心肌组织的作用。方法:雄性Wistar大鼠60只随机分为对照组和力竭运动组,力竭运动组再分为运动后0 h组、3 h组、6 h组、12 h组、24 h组5个亚组(n=10)。通过一次性力竭游泳运动建立心肌损伤模型,分别于运动结束后不同时间点取大鼠左心室心肌组织,Western blot法检测p-p38MAPK、NF-k B、COX-2蛋白表达。结果:与对照组相比,力竭运动后不同时间点大鼠心肌组织中p-p38MAPK均显著增加(P0.01),且3 h组最高(P0.01);运动后0 h,大鼠心肌组织中NF-k B和COX-2含量均无明显改变,其余时间点二者均明显增加(P0.05),NF-k B含量6 h组显著高于其它各组(P0.05),COX-2含量24 h组显著高于其它各组(P0.05)。结论:一次性急性力竭运动可以激活p38MAPK信号通路,从而活化NF-k B,并上调COX-2表达,引发过度炎症反应,提示p-p38MAPK、NF-k B和COX-2在急性力竭运动诱发心肌损伤的过程中可能起着重要作用。     

Podocin蛋白对肾小球足细胞的影响

目的：探讨肾小球足细胞裂隙膜蛋白podocin对足细胞形态及蛋白尿的影响.方法：32只体重160g～220g的雄性SD大鼠按阿霉素给药剂量随机分成小剂量组（3.0mg/Kg）、肾病剂量组（7.5mg/Kg）、超剂量组（10.0mg/Kg）、正常对照组.于给药第三周末处死大鼠,用氯化苄乙氧铵比浊法检测大鼠24h尿蛋白量,用免疫胶体金电镜检测大鼠肾小球蛋白podocin的表达和足细胞形态.结果：阿霉素组大鼠24h尿蛋白排泄量明显高于正常对照组,尤以肾病组最明显（P＜0.05）;正常对照组大鼠podocin分布在靠近肾小球基底膜（GBM）的足突基底部,主要定位于裂隙隔膜的胞质面,部分金颗粒也可发现于GBM稍远的足突细胞表面.肾病组肾小球足突广泛融合,免疫胶体金颗粒几乎见不到;超剂量组和小剂量组podocin分布在靠近肾小球基底膜（GBM）的足突基底部,免疫胶体金颗粒数明显少于正常对照组,有部分足突退缩.结论：（1）podocin表达减少或消失可能是导致肾小球足突细胞融合的关键因素（2）蛋白尿的发生与肾小球足细胞裂隙膜蛋白podocin的减少或缺失有关.