唐菖蒲球茎中抗真菌物质的部分性质研究

本文报道唐菖蒲球茎中抗真菌活性物质的成分及其分子量测定方法和结果。用沸水提取,经过超滤、透析、柱层析,纯化到一种有抗真菌活性的物质。排除了它是蛋白质、核酸、脂类及小分子物质的可能性,确定这是一种多糖,定名为唐菖蒲抗真菌多糖（Gladiolus hntifungal Polysaccharide,简称GAFS）。真空旋转蒸发干燥后,用苯酚-硫酸法测得干燥后的样品糖含量为44．08％,用FPLC（快速蛋白质液相层析仪）测其分子量为15750。     

蘑菇子实体内杀虫蛋白质的研究

许多蘑菇都对昆虫表现出毒性。为了证实与杀虫毒性有关的化合物,对14种蘑菇的毒性在水溶性、热敏性和可透析性等方面进行了研究。研究数据表明,蛋白质对大多数蘑菇子实体的杀虫活性起着重要作用,也许是一种可以用于植物抵抗害虫的基因源。在数种蛋白质中,凝集素和溶血素因不受蛋白酶的影响而成为良好的杀虫剂候选材料。     

低分子量卡拉胶马来酰化衍生物抗氧化性能研究(英文)

卡拉胶氧化降解制得两种卡拉胶低聚糖(A、B),进而与顺丁烯二酸酐反应合成得到两种低分子量卡拉胶马来酰化衍生物(MA、MB),对两种卡拉胶低聚糖及其衍生物的结构进行表征,分子量进行了测定。对四种物质进行了抗氧化性能的测定,包括超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除,以及还原能力的测定。上述物质抗氧化性能的能力为:MAA,MBB;BA,MBMA。实验结果说明,化学改性可以增强卡拉胶低聚糖的抗氧化活性,且分子量大,抗氧化活性好,这可能与卡拉胶分子的羟基数目以及取代基团的性质有关。     

一种新的非病毒基因转移载体及其体外细胞转染活性研究

目的：用低分子量的聚乙亚胺(PEI)有效地进行基因转染,为基因转染在基因治疗中的应用提供一种可靠、廉价、高效的方法。方法：将带有绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的真核表达质粒与阳离子聚合物聚乙亚胺(PEI)结合,用肝癌细胞系SMMC7721实验,研究PEI分子量与转染活性以及可能引起的细胞毒性之间的关系;进一步研究在血清存在的情况下,PEG(聚乙二醇8000)、叶酸等物质对PEI介导的转染效率的影响。结果：分子量为600Da的PEI在pH值为6．0时与质粒DNA以1：1的质量比混合,细胞转染效率最高为43．6 /-7．3％,随着分子量的增大,转染活性略有下降;进一步研究发现,在血清存在下,20μM的叶酸和15％的PEG能有效地改善PEI介导的转染活性,使其转染活性提高了13％;用光学相差显微镜检测了PEI潜在的细胞毒性,结果发现分子量为600Da的PEI没有使细胞形态改变或死亡,但是随着分子量的增大,PEI潜在的细胞毒性也相应增大。结论：PEI是一种高效、有用的非病毒载体,能够在培养的哺乳动物细胞中进行基因转移,这对疾病的基因治疗具有潜在的应用价值。     

蓖麻籽饼粕的加工利用

蓖麻籽饼粕过去一直被当作肥料使用,而不能作为饲料蛋白使用,因为它含有三种毒性物质:蓖麻子白蛋白,这是一种有毒的蛋白,蓖麻碱,一种有毒的生物碱,以及CB—1A过敏素。蓖麻子白蛋白很容易通过加热法摧毁,并且,在用溶剂提取之后,进行脱溶剂处理     

九香虫血淋巴及其纯化蛋白抑菌活性的研究

对九香虫AsporgopuschinensisDallas血淋巴及其血淋巴蛋白质分离物的抗菌活性进行了研究,抗菌活性检测指示菌为大肠杆菌Escherichiacoli和金黄色葡萄球菌Staphilocalliesacereus。测定结果表明,九香虫血淋巴及其离心上清液都具有明显的抗菌活性。用凝胶过滤法从血淋巴蛋白分离提纯获得一种小分子肽,SDS PAGE电泳为单一带,分子量约为1～1 4 4kD。该小分子蛋白对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有抑菌作用,与血淋巴对2种细菌的抗菌性一致,表明其是九香虫血淋巴中具抗菌作用的主要物质之一。     

绿茶活性物质解除蛋白质异常沉积毒性

德国科学家研究揭示,绿茶中活性物质EGCG可解除某些蛋白质异常沉积带来的毒性,对预防老年痴呆症等疾病有一定效果。     

长裙竹荪凝集素的分离纯化与部分生化性质

凝集素是一类与糖专一结合的蛋白质或糖蛋白 ,具有众多的生物学性质[1～ 5] ,在细胞凝集、鉴别人类血型物质和分离纯化某些高分子化合物等都有着非常重要的作用 ,已成为生物化学、细胞学、免疫学及医学等领域中有用的科研材料 ,并被应用于临床诊断、治疗和某些工业生产[1] .自 1888年Ｈ .Ｓｔｉｌｌｍａｒｋ首次从蓖麻籽中发现凝集素以来 ,已分离纯化 10 0多种凝集素 ,约有 60种已成为商品 ,其研究开发日益受到人们的重视 .竹荪是一种著名的食、药兼用菌 ,具有许多药用功效 .由于竹荪含有多种生理活性物质 ,从竹荪子实体或菌丝体中分离到的…     

蓖麻蚕卵组织蛋白酶B和组织蛋白酶D活化机制及作用(英)

本文研究了蓖麻蚕卵内组织蛋白酶B和组织蛋白酶D在酸性条件下的活化机理和在卵黄蛋白水解中的作用。活性检测结果表明,酸处理用以使蛋白酶活化,但SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验表明酸化没有使蛋白酶分子量降低。推测酸化可能通过改变蛋白酶构象从而使蛋白酶活化。两种蛋白酶之间未表现出相互修饰导致分子量变化,也未表现出明显的相互促进活性的作用。蛋白酶水解产物分子量的不同,说明两种蛋白酶作用位点不同。组织蛋白酶B的水解产物分子量较小而组织蛋白酶D的水解产物分子量大,说明两种蛋白酶在体内可能作用于蛋白质水解的不同阶段或作用于不同的蛋白质。免疫扩散结果显示,抗蓖麻蚕卵蛋白酶血清可以识别柞蚕和棉铃虫卵内的成分,表明其它一些鳞翅目昆虫卵内可能存在相似的蛋白酶。     

球形芽孢杆菌Ts-l毒蛋白的分离纯化

球形芽孢杆菌Ts-1对蚊虫幼虫有高效杀灭能力,其有毒成份为一种蛋白质。纯芽孢一晶体复合物经超声波处理后,以0．05 mol／L的NaoH抽提毒素,经sephadex G-2 00葡聚糖凝胶柱层析纯化,用SDS—PAGE检验柱层析得到的杀虫活性部分,Ts—1的芽孢-晶体复合物中主要为4zkD和43KD的两种蛋白质。经聚丙烯酰胺凝股制备电泳分离纯化,生物活性测定表明这两种蛋白质都有杀蚊毒效,经DEAE纤维素柱层析进一步纯化,获得了分子量为42kD的毒蛋白。     

青环海蛇抗菌肽Hc-CATH的分子设计及药效毒理优化

为获得分子量小、毒性低的抗感染多肽药物先导分子,以来源于青环海蛇的cathelicidin家族抗菌肽Hc-CATH为模板,设计了长度分别为16和15个氨基酸残基的改造体Hc-16和Hc-15,并通过CCK8实验、最小抑菌浓度 (Minimal inhibitory concentration,MIC) 实验、ELISA实验和生物膜干涉技术 (Bio-layer interferometry,BLI),对其进行毒性、抗菌活性、抗炎活性及LPS中和活性筛选。结果显示,两种改造体中,Hc-16对包括临床耐药菌在内的病原体具有广谱抗菌活性,最小抑菌浓度仅为4.69 μg/mL。同时抑制了LPS诱导的炎症因子TNF-α、IL-6的表达,显著降低感染诱发的炎症反应及细胞毒性。此外,构效关系研究表明C-、N-两端的苯丙氨酸在Hc-16抗菌抗炎活性中起着至关重要的作用。综上,Hc-16改造肽相比原模板具有更高的抗菌抗炎活性、更低的毒性以及更小的分子量,因而具有成本低、更好的成药性优势和较好的临床应用价值。     

大肠杆菌生产的重组尿激酶的纯化及其特性

由大肠杆菌生产的重组尿激酶的高低分子量两种形式均已经重新折叠和提纯。对该蛋白质的低分子量形式作了比活性,氨基酸组成,氨基末端分析,羧基末端分析,胰蛋白酶图谱,抗体滴定,和色谱行为等特性描述。对高分子量形式作了比活性和色谱行为等特性描述。除缺少连接了天冬酰氨302碳水化合物外,在被试验的各个方面,重组尿激酶和天然尿激酶几乎完全相同。结果表明,由于大肠杆菌生产的可适当折叠,天然尿激 酶上连接的碳水化合物在酶的催化活性中不起作用。     

灵芝凝集素分离纯化及部分性质研究

 <正> 灵芝药理作用的研究已取得很大成就,但对其具有血凝活性组分的研究还未见报道。我们以工人培养的灵芝菌丝体为材料,分离出一种具有血凝活性的蛋白组分,并对其部分理化性质及生物活性做了初步测定。这对于探讨灵芝中不同活性成份的药理作用,系统阐明其生物学作用,扩大临床应用范围都具有重要意义。     

番茄叶片中硝酸还原酶(E.C.1.6.6.2)活性稳定因子的研究

经过硫酸铵(完全饱和度)沉淀、离心(16000×g)、沸水处理、Sephadex G-75、DEAE-52层析、透析等步序,从番茄叶片中分离出了 NR 活性稳定因子,电泳后,经氨基黑染色,凝胶柱上只显示一条谱带,证明稳定因子是蛋白类物质。在60℃以下的不同水温中,稳定因子都显著地稳定和增进了番茄叶片中的 NR 活性,不同程度地避免了温度对 NR 活性的钝化影响。在体外,稳定因子能显著延缓小麦幼苗中 NR 活性,NR 在0℃保存至第9天,仍具有较高活性。在提取过程中,经热处理或始终在4℃以下低温提取的稳定因子,对 NR 活性都有稳定作用。分析其蛋白的磺基丙氨酸量,发现比另一种蛋白的高4倍以上,说明其蛋白含有较多的二硫键,是其耐热性的原因。番茄叶片中的稳定因子是一种分子量小的蛋白类物质,在叶片中有两种形式存在,一种是与大分子的蛋白质结合一起;另一种是单独存在。热处理能使它与蛋白质分开,有助于获得纯度高的稳定因子。该因子不是 FAD、血品质、脯氨酸一类物质。这些物质使 NR活性稳定的作用不明显。     

三株溶藻细菌胞外溶藻活性物质若干分离特性的研究

为了探索新分离到的3株溶藻细菌胞外溶藻活性物质的分离特性, 选择了对水华鱼腥藻生长无抑制作用的淀粉培养基培养溶藻细菌。采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、活性炭吸附与解吸等方法对其分离特性进行了研究。溶藻细菌L7的溶藻活性物质的分子量小于3.5 kD, 溶藻细菌L8、L18的溶藻活性物质的分子量在3.5 kD~7 kD之间; 3株溶藻细菌的胞外溶藻活性物质不能用乙醇沉淀法完全分离; 3株溶藻细菌的溶藻活性物质具较好的亲水性和较强的极性, 且都不能被活性炭吸附。     

中药桑寄生(Lorathlorace)抗肿瘤毒蛋白的分离及部分性质初步研究

用Sephadex G100分子筛法分离中药桑寄生中蛋白质,得到大分子量组分a和小分子量组分b;用CM-Sepharose Fast Flow分离桑寄生的大分子物质,得到四个部分:组分Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ。对以上各组分蛋白及其分子量用SDS-PAGE电泳确认;选用肝癌细胞Bel-7402,经MTT染色法检测了其抗肿瘤活性。初步得出实验结果:在我国中药桑寄生中分离到的组分Ⅱ(包含两种蛋白或亚基),分子量在31000和33000左右,具有抑制肝肿瘤细胞Bel-7402生长作用;组分Ⅲ中分子量在21000左右的蛋白抗肝肿瘤细胞Bel-7402作用不明显;组分Ⅳ中分子量小于14000的蛋白没有抗肿瘤作用,分子量为36000的蛋白的抗肿瘤作用有待进一步试验确定。     

三株溶藻细菌胞外溶藻活性物质若干分离特性的研究

为了探索新分离到的3株溶藻细菌胞外溶藻活性物质的分离特性,选择了对水华鱼腥藻生长无抑制作用的淀粉培养基培养溶藻细菌.采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、活性炭吸附与解吸等方法对其分离特性进行了研究.溶藻细菌L7的溶藻活性物质的分子量小于3.5 kD,溶藻细菌L8、L18的溶藻活性物质的分子量在3.5 kD～7 kD之间;3株溶藻细菌的胞外溶藻活性物质不能用乙醇沉淀法完全分离;3株溶藻细菌的溶藻活性物质具较好的亲水性和较强的极性,且都不能被活性炭吸附.     

苏云金杆菌伴孢晶体的蛋白质和抗蛋白酶多肽及其毒力特性

以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了19种苏云金杆菌伴孢晶体的蛋白质和抗胰蛋白酶多肽。以鳞翅目的家蚕和双翅目的致倦库蚊进行了毒力测定。根据蛋白质和抗酶多肽的特性,19种晶体可分为7个类型。晶体蛋白质的组成、溶解特性及抗酶多肽的性质与其对两种昆虫的毒力特性密切相关。含分子量为130—138 kD(千道尔顿)或130—138 kD及60一65kD蛋白质,抗蛋白酶多肽(PRP)为68—75kD的晶体,对家蚕高毒,但绝大部分对库蚊无毒或微毒。含3种以上蛋白质(15一138kD),抗酶多肽为35—65kD的晶体,对库蚊有强烈毒性,对家蚕则无毒。缺少135kD蛋白质的两种晶体对家蚕低毒。HD一282和L—14晶体的P1蛋白质中同时含有杀鳞翅目和杀蚊毒素。讨论了伴孢晶体的蛋白质结构及结构与毒力之间的关系、晶体蛋白质及毒性肽的性质在菌株定向筛选和遗传工程研究中的意义。     

水稻谷胱甘肽过氧化物酶基因OsGPX3 和OsGPX4的分子特性研究

植物谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPX)是清除体内活性氧的一种关键酶,在植物抗逆反应中发挥重要作用.本研究从水稻中克隆到2个GPX基因,分别为OsGPX3和OsGPX4.OsGPX3和OsGPX4分别编码238和234个氨基酸组成的蛋白质,预测分子量分别是25.84 kD和25.07 kD.两个基因都包含5个内含子,但是两个基因所对应的内含子长度具有较大变异.组织表达谱分析发现这2个基因在根、茎、叶和叶鞘中均表达,是组成型表达基因.在大肠杆菌中表达并纯化了这2个基因的重组蛋白,酶活性分析显示OsGPX3和OsGPX4蛋白对底物H₂O₂、tBOOH和COOH具有较高活性,但是OsGPX3对3种底物的活性均高于OsGPX4,蛋白质酶活性的差异预示着这2个基因可能存在功能上的分化.     

猪生长瘦肉和沉积脂肪的分子与生化基础

我国畜牧业中一直存在着有碍生产、不利遗传、又难以解释的问题。亦即中国地方猪瘦肉少脂肪多 ,如湖北通城猪和江苏太湖猪 ;而外来大型猪则相反 ,瘦肉多脂肪少。对于这种复杂问题 ,华中农业大学生命科学技术学院杨在清等教授和博士们作了研究 ,发现通城猪和太湖猪血液中激素敏感脂酶活性很高 ,还有一种分子量为 4 47KDa的细胞质蛋白质和分子量为 94KDa的脂细胞膜蛋白质。这些都是外来猪斯格猪和长白猪所极少有的 ,特殊的和带有遗传性的体内物质。这些物质经蛋白质SDS PAGE分析发现 ,敏感脂酶活性比外来猪高 3倍 ,4 47KDa蛋白质和 94KD…