分枝杆菌脂聚糖的分离、纯化及其结构和功能分析

【目的】建立分离、纯化分枝杆菌脂聚糖的方法,初步比较分析不同菌株来源的脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan,LAM)和脂甘露聚糖(Lipomannan,LM)的结构差异及研究脂聚糖刺激对巨噬细胞环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表达的影响。【方法】应用Triton X-114液相法提取脂聚糖,电洗脱法分离纯化,基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)进行分子量鉴定;基于特异性识别非还原性末端α-D-甘露糖基的刀豆球蛋白(Concanavalin A,Con A)分析新诺分枝杆菌JDM601、结核分枝杆菌H37Rv标准株和耻垢分枝杆菌mc2155脂聚糖的结构差异;进一步用Western blot检测脂聚糖刺激的RAW 264.7巨噬细胞COX-2蛋白的表达。【结果】通过电洗脱法成功纯化出3种菌株脂聚糖;MALDI-TOF/TOF-MS鉴定发现,分子量从小到大依次为新诺分枝杆菌JDM601、耻垢分枝杆菌mc2155和结核分枝杆菌H37Rv来源的脂聚糖。Western blot显示,Con A能与结核分枝杆菌H37Rv标准株来源的LAM相互作用,而不能与新诺分枝杆菌JDM601和耻垢分枝杆菌来源的LAM相互作用;并且发现Con A与新诺分枝杆菌JDM601来源的LM有很强的反应,然而与其余两种来源的LM反应很弱。3种菌株来源的脂聚糖均能刺激RAW 264.7巨噬细胞COX-2蛋白的表达。【结论】首次成功对来源于中国临床分枝杆菌分离株的脂聚糖进行了分离纯化,初步探讨了不同菌株来源分枝杆菌脂聚糖的结构差异,并表明LAM和LM均能刺激巨噬细胞诱导COX-2蛋白的表达,为进一步研究其对宿主的毒力和免疫机制奠定了基础。     

生物防治

960665 利用从贮藏苹果上分离的芽孢杆菌品种防治苹果采后病害[英]/Sholberg, P.L.…∥Can.J.Microbiol.-1995,41(3).-247～252[译自DBA,1995,14(12),95-07143] 在所测的77个苹果中,有38个苹果含有细菌菌丛,从中分离出95种分离物。在营养肉汤,右旋糖和V8果汁液上得到的分离物数量最高,分别有     

结核分枝杆菌磷脂酰肌醇甘露糖苷的研究进展

磷脂酰肌醇甘露糖苷(phosphatidyl-myo-inositol mannoside,PIM)在结核分枝杆菌细胞膜内外含量丰富,靠磷脂酰肌醇(phosphatidyl-myo-inositol,PI)锚定在细胞膜上,并含有1-6个甘露糖和最多4个酰链。PIM不仅是结核分枝杆菌重要的组成物质,也是合成脂甘露聚糖(lipomannan,LM)和脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomannan,LAM)的结构基础。本文就PIM的合成途径、相关酶、与脂蛋白的关系,及PIM在细菌生理和免疫调节中的作用作一简要综述。     

其它药剂

<正> 852899植物Brickellia arguta中抗白内障活性成分黄酮类化合物的分离和鉴定[英]/Rosler,K.H.A.…//J.Nat.Prod.-1984,47(2).-316～319[译自DBA,1984,3(16),84-07594]许多黄酮类化合物是强有效的水晶体醛糖还原酶的抑制剂,它对糖尿病和白内障引     

鲟分枝杆菌病及其病原研究

20092010年间,我国人工养殖的中华鲟（Acipenser sinensis）、史氏鲟（Acipenser schrencki）和杂交鲟（hybrid sturgeon:A. baeri-A. gueldenstaedtii）暴发了细菌性疾病。患病鲟通过组织切片观察,病原菌的分离、鉴定以及组织样品中病原菌的检测,结果显示从19条患病鲟中分离到49株分枝杆菌。病原菌经过多个保守基因的测序分析和部分生理生化特征的鉴定,共发现有7种分枝杆菌,分别为龟分枝杆菌（Mycobacterium chelonae）、海分枝杆菌（Mycobacterium marinum）、戈登氏分枝杆菌（Mycobacterium gordonae）、偶发分枝杆菌（Mycobacterium fortuitum）、苏尔加分枝杆菌（Mycobacterium szulgai）、猪分枝杆菌 （Mycobacterium porcinum）和Mycobacterium arpuense。在诊断过程中发现两种或三种分枝杆菌同时存在于同一样品中,分子生物学的诊断结果表明分枝杆菌复合感染十分常见,而海分枝杆菌是分枝杆菌复合感染中最为常见的分枝杆菌。分离的病原菌对斑马鱼的攻毒试验结果表明在以上7种分枝杆菌中海分枝杆菌的毒力最强。以上结果表明海分枝杆菌是鲟分枝杆菌病的主要致病菌,分枝杆菌复合感染是鲟分枝杆菌病的主要感染形式。研究中史氏鲟和中华鲟的分枝杆菌病,以及在病鱼体内分离的猪分枝杆菌和M. arupense在国内外均尚未见报道。       

生物固氮

960285 形成无效根瘤的苜蓿根瘤菌耐热激突变[英]/Suman,A.…∥J.Plant Biochem. Biotechnol.-1995,4(1).-5～9[译自DBA,1995,14(9),95-05285] 通过转座子Tn5诱变,从苜蓿根瘤菌Rmd201中分离出6种耐热激突变(Rmd201::Tn5)。在TY琼脂表面以小块的形式将供、受体对数期液体     

《西北植物学报》国外发行量持续增加

Endod,2005,31(2):117-119. [3]Sarkar NK,Caicedo R,Ritwik P,et al.J Endod,2005,31(2):97-100. [4]Lin CP,Chen YJ,Lee YL,et al.J Biomed Mater Res,2004,71B(2):429-440. [5]Asrari M,Lobner D.J Endod,2003,29(11):743-746. [6]Aeinehchi M,Eslami B,Ghanbar…     

Exo-glycosidases Activities in Artemisia sphaerocephalaMucilaginous Achene Germination Process

白沙蒿粘液瘦果萌发中聚糖内切水解酶的活动特性 黄振英4* Daphne J.OSBORNE ²      

利用rpoB基因芯片技术进行快速分枝杆菌菌种鉴定

利用rpoB基因芯片技术快速进行分枝杆菌菌种鉴定.以分枝杆菌rpoB基因编码序列为靶基因,用基因芯片技术检测21种分枝杆菌标准株;8种其它细菌标准株;126株临床分离株.分枝杆菌与其它细菌标准株经PCR扩增后,分枝杆菌标准株均扩增出360 bp DNA片段,在其它细菌中,除甲型溶血性链球菌和假白喉棒状杆菌出现同样片段外,其它细菌均未见扩增.21种寡核苷酸探针除海分枝杆菌与偶然分枝杆菌的探针有交叉杂交外,其余均为特异性杂交.对126株临床分离株进行鉴定,89株为结核分枝杆菌,占70.6%(89/126),非结核分枝杆菌(NTM)占9.2%(9/98).应用rpoB基因芯片技术鉴定分枝杆菌菌种,是一种快速、准确的方法,具有较高的临床应用价值.     

抗生素和干扰素

941480藻类作为生物活性产物源[英]/Glaxo/Cannell,R.J.P.∥Pestic.Sci.-1993,39(2).-147～153[译自DBA,1993,12(26),93-15067] 从藻类分离了多种生物活性次级代谢产物。这些产物包括(a)抗生素:例如由红藻科得到的卤化链烯、fimbrolides、2,3,5,6-四溴吲哚、劳藻酚、obutsol,霍氏双岐藻(Scytonema hofmanni)的氰细菌(cyanobacterin)疫苗;(b)     

牛型纯化蛋白衍生物皮内变态反应试验阳性牛中分枝杆菌的分离与鉴定

为评价牛分枝杆菌纯化蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)单纯颈部皮内变态反应试验(single intradermal cervical tuberculin,SICT)在奶牛结核病检测中的特异性,采集54头SICT阳性牛的118份组织样品进行病原分离和鉴定。结果显示,14头SICT阳性牛样品中分离到抗酸阳性菌,占SICT阳性牛总数的25.9%(14/54)。其中,10头阳性牛样品中分离到分枝杆菌,占18.5%(10/54);1头阳性牛样品中分离到牛分枝杆菌,占1.9%(1/54)。从118份组织样品中分离到16株抗酸阳性菌,其中12株为分枝杆菌,分枝杆菌分离率为10.2%(12/118)。12株分枝杆菌中,1株为牛分枝杆菌,其余11株为禽分枝杆菌、土地分枝杆菌等非结核分枝杆菌。牛分枝杆菌与非结核分枝杆菌分别占分枝杆菌分离株的8.3%(1/12)和91.7%(11/12)。病原分离和鉴定结果表明,SICT阳性牛的牛分枝杆菌分离率较低,为确保检测结果的准确性,有必要采用其他检测方法进行验证。同时,可将分枝杆菌快速分离培养及菌种鉴定检测技术引入对皮内变态反应试验阳性牛的实验室诊断,进一步提高牛结核病检测的特异性。     

基因库构建

920920分枝杆菌中的播人诱变和异常盆组〔英〕/Kalp-ana,G.V.一了Proe.Natl.Aead.Sei一U.S.A厂1991,88(12)。一5433~5437[译自DBA,1991,10(17),91一09668〕 用质粒pYUB36构建了耻垢分枝杆菌(对了卜o乙act。,艺u二‘拼eg必at云夕)基因组DNA文库。采用转座子Tnsseql,在大肠杆菌中克隆的分枝杆菌 DNA内制备了随机插入产物。含转座子的重组质 粒经同源重组被重新引入到分枝杆菌染色体中。以 此分离到几个随机营养缺陷株。为了将此方法延用 到结核分枝杆菌(M.tubec:105艺s)和BCG中, 将克隆的BCG甲硫氨酸基因在大肠杆菌接受Tns seql…     

参考文献的写法

1.期刊文献：[序号]作者.题名[J].刊名,出版年,卷（期）：起止页码. 例：[1]Wang H,Bloom O,Zhang M,et al.HMG-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice[J].Science,1999,285（5425）：248-251.     

结核分枝杆菌毒力的研究进展

结核分枝杆菌可以在人体内缓慢增殖,释放代谢产物,造成细胞损伤,引起结核病。其致病机制可能与其复杂的细胞壁成分密切相关。结核分枝杆菌细胞壁中的脂质、糖类及蛋白类物质在构成屏障结构,保护并辅助结核分枝杆菌在细胞内的生长及迁移,调节宿主免疫应答,造成宿主组织细胞损伤等方面发挥重要生物学作用。其表达受众多基因的精细调控。本文将对结核分枝杆菌细胞壁中的脂质阿拉伯甘露聚糖和分枝菌酸在其毒力中的作用,以及sig基因对毒力的调节作用作一综述。     

疫苗

980208 狂犬病病毒糖蛋白可溶性低聚物的稳定分泌:N-聚糖的加工对分泌的影响[英]/Wojczyk, B.…∥Biochemistry.-1995,34(8).-2599～2609[译自DBA,1995,14(8),95-04535] 通过向跨膜区外部插入终止密码子构建了狂犬病病毒糖蛋白(RGP)的可溶性构型.并表达于经质粒pRGP(WT)434和pSV2neo共转染的     

分枝杆菌属的分离和快速鉴定方法

分枝杆菌属的分离和快速鉴定,不仅是放线菌分类学中的重要问题,而且也为临床非典型分枝杆菌疾病的诊断提供依据。国际上研究过的分枝杆菌多从病灶中分离得到。到目前为止,很少有人较系统地报道从非病灶材料中分离这类微生物。为了更全面地研究分枝杆菌分类学,我们从采自国内和美国的370份土样中分离得到了48株抗酸菌,确定     

糖组学研究策略及前沿技术研究进展

糖组学是继基因组学和蛋白质组学后的新兴研究领域,主要研究聚糖结构与功能.通过与蛋白质组数据库结合,糖捕捉法能系统鉴定糖蛋白和糖基化位点.糖微阵列技术可以对生物个体产生的全部蛋白聚糖结构进行鉴定与表征,提高了聚糖分析通量.而化学选择糖印迹技术简化了聚糖纯化步骤并提高了糖基化分析的灵敏度.双消化并串联柱法通过双酶消化双柱分离,在分析聚糖结构的同时也鉴定蛋白质的序列,并与蛋白质组学研究兼容.     

猫爪草提取物对结核分枝杆菌临床分离株的可能作用靶标

利用双向电泳技术, 对猫爪草提取物作用前后的结核分枝杆菌临床分离株的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析, 发现其中22个蛋白质斑点的浓度具有差异,利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术, 对其中4个表达明显下调和1个明显上调的蛋白质斑点进行分析鉴定, 获得5个明确的肽质量指纹图谱.通过数据库检索, 确定这5个蛋白质分别为S-腺苷甲硫氨酸合成酶、吲哚-3-甘油磷酸合酶、烯酰-CoA水合酶、琥珀酰辅酶A合成酶和60 kD的分子伴侣2.其中前4个分子是首次报道参与结核分枝杆菌的重要生理活动.该结果有助于了解猫爪草提取物对结核分枝杆菌生理的影响, 为进一步确定中药猫爪草提取物对结核分枝杆菌的作用靶标和机理提供了基础.     

短小芽孢杆菌A-30耐碱性木聚糖酶的纯化及性质研究

木聚糖广泛存在于自然界 ,通常占高等植物干重的 1 5%～ 30 % ,由木糖经β- 1 ,4-糖苷键连接起来形成主链 ,并由阿拉伯糖、乙酰基甘露糖、葡萄糖醛酸等复杂侧链共同组成 .在众多可降解木聚糖的酶中 ,β-内切木聚糖酶 ( E.C3.2 .1 .8,β- 1 ,4- xylanxylanohydrolase)起主要作用 .在纺织、制浆造纸、饲料及食品等工业中具有潜在的应用价值 .近年来 ,欧美等国已将其应用在造纸制浆工业 ,降低了漂白时氯的用量 ,改善了纸张性能 ,并且减少了环境污染 .对木聚糖酶的研究成为生物技术领域研究的热点之一 .国内外对来源于不同菌种的木聚糖酶的分离…     

化工上的应用

<正> 852936从海头红属藻类中分离出多卤化单萜烯类化合物的结构研究[英]/Capon,R.J.…//Aust.J.Chem.-1984,37(3).-537～544[译自DBA,1984,3(21),84-09999]用二氯甲烷:甲醇(1:1)提取在澳大利亚西海岸发现的红藻Plocamium mertens-ii,将溶二氯甲烷的部分蒸发得到结晶物,剩