长角血蜱唾液腺中腺苷三磷酸双磷酸酶的纯化及其酶切机制

利用染料亲和层析(Cibacorn Blue柱)和离子交换层析(Macrosphere WCX柱)对长角血蜱Haemaphysalis longicornis唾液腺的腺苷三磷酸双磷酸酶进行纯化,经SDS-PAGE证实其分子量为66 kD。腺苷三磷酸双磷酸酶可以水解ATP和ADP,但对AMP无水解作用,水解ATP和ADP的K_m值均为0.2 μmol/L,V_max值分别为12.5和15.6 μmol/(min·mg)。腺苷三磷酸双磷酸酶水解ATP的中间产物是ADP,最终产物是AMP和正磷酸。表明腺苷三磷酸双磷酸酶水解ATP的位点是5'-核苷酸的γ-磷酸键,水解ADP的位点是5'-核苷酸的β-磷酸键。     

简述肌肉收缩时的化学变化

肌肉收缩为身体的各种活动提供基本动力,例如行走、写字、说话、呼吸、心跳等。肌肉收缩时,肌肉内部的化学变化和能量变化可概括成三个部分: 一、三磷酸腺苷(ATP)分解所提供的能量是肌肉收缩的直接能源. 当运动神经纤维上的神经冲动到达肌纤维时,肌纤维内一系列微观的兴奋性变化,激发了ATP酶活性,引起ATP分解成二磷酸腺苷(ADP)及磷酸根(P)高能磷酸键的断开可释放较多的能量(E)。     

讲授"呼吸过程中能量的储存和利用"的一点心得

呼吸作用是一个释能的过程,植物体如何储存能量和利用能量,是一个非常重要的问题.呼吸作用放出的能量,一部分以热能的形式散失到环境中,其余部分通过ADP磷酸化形成ATP,而暂时储存在高能磷酸键中.三磷酸腺苷中的高能磷酸键是最重要的能量携带者,呼吸过程中能量的储存和利用都要靠ATP.     

模拟移动床连续离交工艺在D-核糖发酵液净化中的应用

D- 核糖是存在于生物体内的一种天然戊糖,是生物体内遗传物质核酸和能量物质三磷酸腺苷(ATP)的组成成分,具有重要的生理功能和广泛的应用前景.     

大肠杆菌热诱导赖氨酰-tRNA合成酶二腺苷多磷酸三重催化活性研究

E.coli热诱导赖氨酰-tRNA合成酶(LysU,EC 6.1.1.6)是高效的Ap4A/Ap3A合成酶,已知反应模式为双重动态过程:2ATP→Ap4A+2Pi→Ap3A+3Pi。为进一步研究LysU"中间物可逆"催化模型,表达纯化了LysU蛋白并验证结构稳定性,构建了二腺苷多磷酸产物检测系统并分离了各阶段催化产物,观察了AMPPCP和AMPCPP阻断Ap3A/ADP合成的反应。圆二色光谱和荧光光谱扫描证明纯化后的LysU蛋白结构完整。LysU首先催化ATP合成83%的Ap4A,接着可逆生成67%的Ap3A。实验中发现,Ap3A并非LysU二腺苷多磷酸催化反应的终产物,Ap3A可继续逆生成80%的ADP。以AMPPCP或AMPCPP代替ATP为起始底物,发现无Ap3A转化ADP反应。上述结果证明LysU具有三重催化活性:2ATP→Ap4A+2Pi→Ap3A+3Pi→2ADP+2Pi,符合"磷酸捕获机制"催化模型:活化的赖氨酰-腺苷中间物捕获核苷酸或磷酸小分子,形成对应的二腺苷多磷酸化合物。这些研究结果可为阐明不同形式功能性腺苷酸衍生物间的相互转化提供更多的信息,有助于进一步认识功能性腺苷酸分子在生命活动中的作用。     

固定化细胞法在5'-三磷酸腺苷合成中的应用

从生物催化活性细胞、细胞的固定化形式、固定化细胞反应器3个方面对固定化细胞法合成5’-三磷酸腺苷(ATP)的研究情况作了扼要综述。分析了我国ATP生产的工业化现状,并对今后的研究和开发提出了建议。     

云杉针叶三磷酸腺苷酶活性的超微细胞化学定位

用磷酸铅沉淀技术研究了云杉幼龄针叶及成龄树针叶细胞的三磷酸腺苷酶(ATPase)活性定位。从形态结构上可以看到,种子萌发的幼龄针叶细胞的细胞壁较薄, ATP酶活性反应产物磷酸铅颗粒主要分布于细胞质和细胞质膜上。成龄针叶细胞壁较厚,内质网等细胞器发达,ATP酶主要在细胞壁有较高的活性反应。两者细胞的液泡及细胞核中也有少量定位。幼龄针叶ATP酶活性较成龄针叶的活性较弱, 这种活性变化与不同发育时期叶的生理功能有关。     

分子伴侣GroE系统能量传递机制的研究

用SwissPDBViewer软件对分子伴侣GroE系统与底物的相互作用进行了模拟 ,结果表明 :GroEL顶端结构域在GroES和靶蛋白结合之后发生了明显的变化 ;GroEL的cis环上有与三磷酸腺苷ATP相结合的位点 ,ATP水解之后形成的ADP与活性中心的残基相结合 ,而这种结合除导致残基Thr30的构型发生了变化之外 ,其它残基的空间位置和构型基本保持不变 ,暗示其它残基在能量传递过程中形成了刚性骨架 ,而与ADP分子磷酸键结合的残基Thr30则是能量传递的力点。     

你听说过营养遗传学吗？

一组三磷酸腺苷酶(ATP)正穿过一个细菌细胞膜的图案构成了本期《科学》杂志的封面。在导致肺结核的细菌细胞内部，一种大有前途的二芳基唪啉新型药物能够与这种横跨膜的酶的一部分发生反应，从而通过阻碍为肺结核菌提供能量的三磷酸腺苷酶的合成来杀死这种细菌。生物试验表明，这种药能长期存留在体内，意味着可以减少剂量和服用次数，     

冬虫夏草的抗衰活性

以冬虫夏草提取物为研究对象,通过自由基清除试验及弹性蛋白酶活性抑制试验来考察冬虫夏草在生化水平上的抗衰活性,以人永生化表皮细胞(HaCaT)三磷酸腺苷(ATP)和透明质酸(HA)的合成试验来考察冬虫夏草在细胞水平上的抗衰活性。结果表明,冬虫夏草能有效清除DPPH和羟自由基,抑制弹性蛋白酶活力,促进人永生化表皮细胞表达透明质酸和三磷酸腺苷,说明冬虫夏草具有一定的抗衰活性。     

多聚磷酸激酶及其在ATP再生体系构建中的进展

构建高效的腺嘌呤核苷三磷酸(adenosinetriphosphate,ATP)再生体系可显著提高生物催化磷酸基团转移反应的效率。多聚磷酸激酶(poly phosphate kinase, PPK)能利用来源广、廉价且稳定的多聚磷酸(polyphosphate, Poly P)盐作为磷酸基供体，能够实现单磷酸腺苷(adenosine monophosphate,AMP)、二磷酸腺苷(adenosinediphosphate,ADP)、ATP、PolyP之间磷酸基的高效定向转移，已成为构建ATP再生体系的首选。本文介绍了不同类型PPK的结构特征、相关催化机制以及不同来源的PPK在酶活、催化效率、稳定性和底物偏好性的特征差异；归纳和列举了针对野生PPK酶学性质不足进行分子改造的实例，并对PPK在ATP再生体系构建的研究进展进行了总结。     

名刊封面

《科学》(2005.1.14) 抗肺结核新药一组三磷酸腺苷酶(ATP)正穿过一个细菌细胞膜的图案构成了本期《科学》杂志的封面。在导致肺结核的细菌细胞内部, 一种大有前途的二芳基喹啉新型药物能够与这种横跨膜的酶的一部分发生反应,从而通过阻碍为肺结核菌提供能量的三磷酸腺苷酶的合成来杀死这种细菌。生物试验表明,这种药能长期存留在体内,意味着可以减少剂量的服用次数,新药一个月获得     

组织细胞内ATP的动态变化研究

ATP(三磷酸腺苷)在生命活动中发挥着重要的生物学功能,它是生命活动的直接能量来源.ATP在组织细胞内是动态变化的,该变化过程是生命能源供给的基础.目前有不少研究关注于组织细胞内ATP的动态变化,以求了解与之相关的生命现象的特征和本质.本文就有关组织细胞内ATP的动态变化的研究作一综述,分析了病理和正常生理状态下细胞内ATP的动态变化过程以及该动态变化的机制,为构建ATP的动态变化过程理论模型提供信息基础,期望在临床生命救治和健康生命维护基础理论发掘上做出贡献.     

冻融产氨棒杆菌细胞转化法制备三磷酸腺苷

微生物发酵和酶转化法是工业上制备三磷酸腺苷(ATP)的有效途径。以腺嘌呤为关键底物,用冻融通透化处理的产氨棒杆菌细胞转化制备ATP,用高效液相色谱(HPLC)法检测ATP含量,考察各种转化条件对ATP产率的影响,确定最优转化条件:菌体用量40 g/L,底物6 g/L,葡萄糖60 g/L,Mg SO415 mmol/L,KH2PO4120 mmol/L,反应液p H 7.4,反应温度35℃。在最优转化条件下,ATP产率达到85.00%,比优化前提高了58%,细胞用量大幅度降低,优化条件稳定可行。     

青菜原生质体三磷酸腺苷酶的特性及在病毒感染后的变化

Kasamo等人曾测定了烟草花叶病毒感染的烟草叶肉细胞质膜上三磷酸腺苷(ATP)酶的活力,它高于对照者2～4倍。他们认为烟草叶肉细胞质膜ATP酶活性的上升与烟草花叶病毒的侵染有关。近十余年来,应用原生质体为材料,研究植物病毒获得一些有意义的结果。本文报导青菜原生质体的制备及其ATP酶的特性,并初步研究了长叶车前花叶病毒     

问：ATP是唯一的直接提供可利用能量的物质吗？

答：新陈代谢所需要的能量是由细胞内的ATP直接提供的,ATP是新陈代谢所需能量的直接来源,但体内有些合成反应不一定都直接利用ATP供能,而可以利用其他三磷酸核苷。例如UTP(三磷酸尿苷)用于多糖合成、CTP(三磷酸胞苷1用于磷脂合成、GTP(三磷酸鸟苷)用于蛋白质合成等。但物质氧化时释放的能量大都是必须先合成ATP。然后ATP可使UDP、CDP或GDP生成相应的UTP、CTP或GTP。     

P2X4受体的结构功能关系研究进展

嘌呤能受体P2X4是三磷酸腺苷(ATP)-门控的阳离子通道,对生物体内多种重要生命活动起一定的调节作用。二次跨膜的三聚体通道P2X4受体的三维空间组成是由胞外结构域、跨膜域及胞内N-、C-端组成。ATP的三磷酸基团能被位于亚基界面的ATP结合口袋的带正电氨基酸特异性识别,嘌呤环则被疏水氨基酸和部分氨基酸的主链氧所识别。P2X4受体激活后,胞外阳离子更多是通过侧窗路径进入细胞内。就P2X4受体的空间结构、配体的识别、离子通透途径及门控机制作一综述。     

从大肠杆菌B／r中同时制备ATP：RNA腺苷酰转移酶和多核苷酸磷酸化酶

本文报道了从大肠杆菌B／r中同时制备ATP：RNA腺苷酰转移酶和PNPase的简便方法。菌体经压力破碎,聚乙二醇、葡聚糖分相抽提及磷酸纤维素柱层析得到ATP：RNA腺苷酰转移酸。其滤液经DEAE纤维素柱层析和Scphadex G-200凝胶过滤得到PNFasc。用Oligo dT纤维素和聚丙烯酰胺凝胶电泳对酶反应产物作了初步鉴定。     

植物蛋白磷酸化的检测方法

蛋白磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,几乎参与植物所有生命过程的调节。蛋白磷酸化过程主要指在蛋白激酶的催化作用下,将三磷酸腺苷(ATP)上的γ位磷酸基团转移到底物蛋白特定氨基酸残基上的过程。底物蛋白上被磷酸化的常见氨基酸有丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸,磷酸基团与氨基酸中的羟基通过酯键连接。该文详细描述了几种常用的蛋白质体外及体内磷酸化的检测方法及注意事项。     

植物蛋白磷酸化的检测方法

蛋白磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,几乎参与植物所有生命过程的调节。蛋白磷酸化过程主要指在蛋白激酶的催化作用下,将三磷酸腺苷(ATP)上的γ位磷酸基团转移到底物蛋白特定氨基酸残基上的过程。底物蛋白上被磷酸化的常见氨基酸有丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸,磷酸基团与氨基酸中的羟基通过酯键连接。该文详细描述了几种常用的蛋白质体外及体内磷酸化的检测方法及注意事项。