细胞共养和BrdU对人和小鼠NOR。活性的影响

不同种类细胞的共养可引起不同种细胞间 的代谢协同现象,即在细胞相互接触的地方进 行细胞间分子交换。它可降低姐妹染色单体互 换频率1121促进细胞DNA合成E73、细胞代谢缺 陷互补125,261和提高细胞对药物的敏感性(^9,28)     

中国仓鼠核仁形成区的活性在仓鼠-小鼠杂交细胞中受抑制

用Polyethyleneglycol(PEG)将中国仓鼠骨髓细胞与小鼠细胞株PG19细胞融合,获得杂交细胞克隆。染色体C-带分析表明,早在细胞繁殖的第4代,杂交细胞就迅速地丢失了17条仓鼠染色体。在杂交细胞中,只有9.4％的仓鼠核仁形成区(NORs)有活性,而且所有这些有活性的NORs都位于仓鼠第3号染色体上,占该号染色体原有NORs总活性的40％,因此我们的结果不仅首次表明在中国仓鼠-小鼠杂交细胞中,绝大部分(90.6％)的仓鼠NORs活性被抑制,而且还发现了位于不同染色体上的仓鼠NORs活性受抑制的程度可有明显的不同,NORs活性很可能与它们所在的染色体的结构有关。小鼠NORs的活性在杂交细胞中没有受到明显的影响。     

5-溴脱氧尿苷抑制中国仓鼠核仁形成区活性的研究

当培养基中BrdU浓度提高至9—30μg/ml时,会使中国仓鼠二倍体细胞和细胞株wg3h的银染NORs(Ag-NORs)总数明显减少。不同浓度的BrdU对中国仓鼠细胞NORs活性影响的研究表明,中国仓鼠细胞NORs活性受抑制的程度随培养基中BrdU浓度的提高而加强,还与BrdU处理的时间有密切的关系。这些细胞在无BrdU的培养基里继续生长30小时后,它们的NORs活性可以得到恢复。BrdU对中国仓鼠细胞NORs活性的抑制作用很可能是一种毒性效应。本文还对BrdU抑制中国仓鼠细胞NORs活性的机制进行了初步的讨论。     

BrdU抗性细胞特性的研究——Ⅱ.四个抗性亚系核仁形成区(NORs)活性和DrdU抑制NORs活性机制的探讨

从中国仓鼠细胞株Wg3h中,通过BrdU处理获得了两个抗30μg/ml BrdU和两个抗60μg/ml BrdU的抗性细胞亚系。银染NORs(Ag-NORs)的分析表明,除了一个抗性细胞亚系外,其他3个亚系NORs的活性都明显地被BrdU所抑制,即主要是表现在细胞Ag-NORs数和携带Ag-NORs染色体数的明显减少。不同BrdU抗性亚系NORs活性被抑制的程度可有很大的差异。在培养基里除去BrdU后,抗性细胞被BrdU抑制的NORs活性可以逐步得到恢复,但其恢复的速度显然比Wg3h细胞缓慢得多。抗性细胞NORs活性受抑制,与Wg3h细胞一样,是由于BrdU毒性的缘故。     

不同鼠龄Wistar大鼠肝腺泡Ⅰ、Ⅲ带肝细胞rDNA活化的形态计量学研究

目的　研究不同鼠龄组组间及组内肝腺泡Ⅰ、Ⅲ带肝细胞rDNA活化之形态计量的差异。方法　以甲酸明胶硝酸银混合制成Ag NORs染色液 ,活化的rDNA被染成深棕色 ,Ag NORs颗粒由Mais 2 0 0 0图像分析仪对各鼠龄组 (3、13、2 5、33月 )肝腺泡Ⅰ、Ⅲ带肝细胞核之Ag NORs分别进行了Ag NORs数、平均灰度与核面积比的形态计量测定。结果　Ⅲ带肝细胞核Ag NORs平均数 ,以 33月龄组分别少于 3、13、2 5月龄组 (P <0 0 5 )。Ag NORs平均灰度以 33月龄组分别小于 3、13、2 5月龄组 (P <0 0 5 )。结论　 33月龄肝腺泡Ⅲ带肝细胞核rDNA活性分别较 3、13、2 5月龄低     

小鼠肿瘤细胞染色体核仁组织者的细胞化学观察

本文报道用Ag-AS染色技术对几种小鼠肿瘤细胞(Ehrlich腹水瘤,肉瘤180,淋巴瘤1号)核仁组织者(NORs)的观察结果,发现肿瘤细胞的NORs即18 S+28 S rDNA或核糖体基因的位置和大小与正常细胞的不同。正常小鼠细胞有3—6条染色体带有银染色的核仁组织者(Ag-NORs),分布位置都紧靠在着丝点下方;而三种小鼠肿瘤细胞都有一个中等大小的近端着丝点染色体,其Ag-NOR的位置移至长臂的中部。小鼠淋巴瘤1号     

四种无尾两栖类带型的分析比较以及C带、银带和次缢痕间相互关系的探讨

以骨髓为材料,利用空气干燥制片法和BSG、Ag-AS显带技术分析比较了四种蛙属两栖动物——滇蛙、牛蛙、昭觉林蛙和无指盘臭蛙的C带、银带和次缢痕。总结如下:(1)根据分布位置和染色深浅可见5种C带,无指盘臭蛙的端部C带有多态现象。(2)四种蛙都有标准NORs和众多的额外小NORs。滇蛙和无指盘臭蛙分别有14和11对NORs,它们是至今所发现的具有最高数NORs的脊椎动物。(3)滇蛙、无指盘臭蛙、昭觉林蛙和牛蛙分别有13、12、9和6对次缢痕,根据C带和银带的染色特征,它们可被归纳为5类。此外,每个种其出现频率最高的次缢痕位点就是标准NORs的位置所在。(4)对次缢痕、Ag-NORs和结构异染色质间的相互关系作了细致的考察和分析讨论。     

大鼠非致瘤四倍体细胞系的建立及细胞遗传学和酶学特征

从大鼠自然诱发的肉瘤细胞中,我们建立了一个四倍体细胞系(4n=84),命名为RC(ratcell)。它具有典型的成纤维细胞外形,能在玻璃表面贴壁生长,但不能生长在琼脂半固体培养基中。该细胞在含15％小牛血清的RPMI 1640培养基中生长良好,至今已连续繁殖112世代,细胞群体倍增时间约为15小时。染色体G-带分析表明,RC为整四倍体细胞,它的1条X染色体在第32至34区为均染区。RC细胞核仁组织者(NORs)活性显然比大鼠二倍体细胞NORs活性的加倍还高(P<0.001)。这个具有非常高NORs活性的RC细胞系对于研究细胞18S+28S rRNA基因转录活性的调控、基因表达与基因剂量关系有一定的意义。RC细胞还有异常高的磷酸酯酶活性,而且它的同工酶谱也与大鼠肌肉细胞明显不同。体内接种实验和扫描电镜的观察表明,RC是非致瘤细胞。RC细胞各号染色体的C-带图样与大鼠二倍体细胞无明显的差异。     

四细胞杂交克隆的NORs活性和均染区的巨染色体

通过聚乙二醇使3个小鼠细胞与1个中国仓鼠骨髓细胞融合,获得四细胞杂交克隆。在第6世代,该杂种细胞含有100条小鼠染色体和5条仓鼠染色体。本文报道在杂种细胞中双亲NORs活性均受抑制,不仅73.2％的仓鼠NORs活性被抑制,而且还有18.3％的小鼠NORs失去了活性。由于在杂种细胞中,仓鼠第3号染色体上的NORs活性仍保留它原来的91.2％,因此我们的结果表明:不同染色体上18s和28s rRNA基因的转录活性可有明显的差异,这可能与它们所在的染色体结构有关。我们首次报道了杂种细胞中所出现的均染色区巨染色体,并对这条巨染色体进行了G-带、C-带和Ag-NORs的分析。对这条巨染色体与18s和28srRNA基因扩增的关系进行了初步讨论。     

六种鲤科鱼类核仁组织者区的研究

采用银染及荧光染色技术,对6种鲤科鱼的NORs进行了研究。结果表明：这6种鲤科鱼中瓦氏雅罗鱼、花 、麦穗鱼、白甲鱼具有2个NORs,长春鳊、墨头鱼具有4个NORs。根据实验研究结果对鲤科鱼类NORs多态性及演化等进行了讨论。 The NORs were examined in 6 species of Cyprinidae by both silver nitrate and chromomycin A3,which led to the detections of 2 NORs in 4 species(Leuciscus waleckii,Hemibarbus maculates,Pseudorasbora parva,and Varicorhinus simus)and of 4 NORs in 2 species (Parabramis pekinensis,and Garra pingi pingi).Based on our results,the variation and evolution of fish NORs were discussed.     

水稻栽培品种的核仁组成区数目的分布

核仁组成区（Nucleolus-Organijzer Regions简称NORs,下同）其数目与位置,一般认为具有种的特异性,所以在染色体组型分析中,普遍 受到重视,是一个比较重要的识别特征。在植物 方面,如洋葱、葱、蒜的染色体数目、大小和形态都很相似,但其NORs位置则不同,故在核型中很容易区分【a。而动物方面的研究则更为深人 和广泛。如在蛙类研究中,可将此作为区别种 间与亚种之间的重要标准［1101,为研究物种之间 的进化关系提供了一个新的指标。此外,在种 内也有人以NORs的形态作为区分鲤鱼品种 间的遗传标志［[61。在水稻方面,早在1946年管 相桓曾提及核仁数目在亚种和品种间有不同分 布［[91。作者认为水稻种内也存在有NORs的 多态现象。     

十一种灵长类染色体核仁组织者(N0Rs)的比较研究

核仁组织者区域(NORs)存在185+285核糖体核糖核酸(rRNA)的密码基因(rDNA),可用银染色技术特异性地显示出来。Schwarzacher等(1978),用光学显微镜和电子显微镜研究了银染色体的原理,证明银可染物质是活性NORs周围或外面的酸性蛋白,而不是基因本身。 许多学者先后以银染色技术,测定了狨猴(Saguinusoedipus,Saguinus fuscicollis,Callithrix jacchus)、恒河猴(Macaca mulatta)、食蟹猴(M.fasciculars)、狒狒(Papio papio)等猴子的核仁组织者区域(Bedard等,1978;Goodpasture等,1975;Dutrillaux等1979)。Tantravahi等(1976)对人、黑猩猩猿(Pan troglodytes)、大猩猩(Gorlla gorilla)、猩猩(Pongo Pygmaeus)、银色长臂(Hylobates moloch)进行了NORs的比较研究。 本文报告了我国灵长类动物5个属11个种染色体的银染色的NORs(Ag—NORs)分布,并作了初步比较。     

一例硬皮病人自发抗核仁抗体的免疫荧光及其与银染的比较研究

从硬皮病人血清中筛选出一例含有自发抗核仁抗体的血清,利用这个血清对核仁抗原的性质及其在细胞中随分裂周期不同产生的分布变化做了初步研究,并把结果与核仁嗜银蛋白做了比较。间接免疫荧光染色及细胞化学分析表明,这种核仁抗原的性质是蛋白质,其分布与嗜银蛋白相似,在间期,抗原呈颗粒状簇集在核仁中,而在分裂中期,抗原颗粒与染色体NORs部位接合,但有证据指出,这种抗原蛋白与核仁嗜银蛋白有所不同,同时还发现,经长时间秋水仙素处理诱导产生微核化的多核细胞中尽管微核的数目远多于细胞中NORs的数目,免疫荧光染色和银染都显示出每个微核中类核仁小体的存在。这说明(1)类核仁小体也是由核仁物质构成;(2)某些类核仁小体的产生可能与NORs无关。对这个现象的意义进行了讨论。     

不同地理区域鲫鱼染色体银染核仁组织者的比较研究

本文对不同地理区域的鲫鱼(Carassius auratus)—滇池高背鲫、低背鲫、方正银鲫(C.auratusgibelio)的核型及核仁组织者NORs进行了比较研究,并对高背鲫来源作些初步探讨,结果如下: 1.低背鲫Carassius auratus (back low type):2n=100,22m+30sm+48t.st,NORs=4,出现于第5—6对亚中着丝粒染色体短臂。 2.滇池高背鲫Carassius auratus(back high type):2n=156,30m+46sm+80t.st,NORs=6,出现于第5—7对亚中着丝粒染色体短臂。 3.方正银鲫C.auratus gibelio:2n=162,32m+52sm+78t.st NORs=4,出现于第5—6对亚中着粒染色体短臂。     

细胞缝隙连接与心血管疾病

目录一、细胞缝隙连接的形态和结构二、细胞缝隙连接的功能　 (一 )参与信息的传递及神经冲动的传导　 (二 )协调细胞间活动的一致性　 (三 )参与细胞的分化生长与发育　 (四 )缓冲毒性化学物质的毒害作用　 (五 )通过周围细胞滋养受损细胞　 (六 )参与局部的代谢功能三、细胞缝隙连接蛋白功能的调节四、缝隙连接和心血管疾病　 (一 )心律失常　 (二 )动脉粥样硬化　 (三 )先天性心脏病　 (四 )缺血性心脏病　 (五 )心肌病细胞间通讯是一个在进化上很古老的功能 ,细胞间的通讯方式可分为间接与直接方式。以体循环远程分泌、旁分泌或自分泌方…     

间充质干细胞外泌体经不同信号通路调节骨代谢的研究进展

间充质干细胞外泌体(mesenchymal stem cell exocrines,MSC-EXOs)由间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)释放，具有旁分泌作用的囊泡。MSC-EXOs可以通过传递细胞因子来介导细胞间通讯从而调节受体细胞的细胞行为。目前，已有许多研究发现，MSC-EXOs可以通过传递细胞因子介入骨代谢相关信号通路来调节骨代谢。本文对间充质干细胞外泌体调节骨代谢的主要信号通路内容及作用的研究进展进行综述总结，并讨论了外泌体中重要细胞因子的作用，旨在找寻MSCEXOs治疗骨代谢相关疾病新的治疗靶点。     

三个家猪品种和rob易位群染色体分带多态性的比较

对家猪不同品种及家系间的染色体组型、C－带、Ag－NORs多态性进行的研究表明：杜洛克猪、约克夏猪、长白猪体细胞染色体数2n＝38,核型2n＝10sm＋12m＋4st＋12t,而13／17易位纳合子猪（36,rob．13／17）的体细胞染色体数2n＝36,核型2n＝10sm＋12m＋6st＋8t;13／17易位杂合子猪（37,rob．13／17）的体细胞染色体数目为2n＝37,核型为2n＝10sm＋12m＋5st＋10t。5种家猪的C－带在13～18号染色体上存在大、中、小三种类型,且呈多态性分布。杜洛克猪、约克夏猪、长白猪、13／17易位纳合子猪、13／17易位杂合子猪的Ag－NORs均数分别为2．05、2．062．00、1．99、1．98,说明Ag－NORs在品种、个体及细胞间具有多态性.     

黄颡鱼染色体的C─带、Ag—NORs、荧光带和复制带显带的研究

采用Giemas染色、C─带、Ag—NORs、荧光染色和复制带显带的技术对黄颡鱼染色体进行了研究。结果表明,黄颡鱼只有部分的染色体呈现阳性C─带,可分为三类,其中NORs区是染色最深、染色面积最大的区域,为深染居间C─带。其Ag－NORs位于m5q末端。CMA3染色显示NORs区呈现出明亮的荧光。中复制染色体上着丝粒区、端粒区和居间区浅染。发现核仁缢痕、深染居间C─带、Ag—NORs、CMA3明亮区和中复制带浅染NORs区位置基本一致,C─带阳性区和中复制带浅染区具有对应性。     

植物次生代谢生态学

植物次生代谢 ( Plantsecondary metabolism)的概念最早是由 Kossel于 1 891年明确提出的。次生代谢是相对于初生代谢或称基本代谢 ( Primarymetabolism)而言的。与维持细胞生命活动所必需的初生代谢产物 ( Primary metabolites)不同 ,次生代谢产物 ( Secondary metabolites,也称次生产物、次生物质 )是指植物中一大类对于细胞生命活动或植物生长发育正常进行并非必需的小分子有机化合物 ,这些在植物体内含量不等的化合物均有自己独特的代谢途径 ,通常由初生代谢派生而来 (陈晓亚等 ,1 998)。植物的次生代谢是植物在长期进化中与环境(生物…     

基于线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ基因序列的细胞种属鉴别及细胞交叉污染分析

目的建立一种快速、简便、敏感和特异的基于线粒体细胞色素C氧化酶I(cytochrome C oxidase subunit I,CoI)基因序列的细胞基质检测方法,用于细胞种属鉴别和不同种属间的细胞交叉污染分析。方法①提取非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)、狗肾细胞(MDCK细胞)和牛肾细胞(MDBK细胞)基因组DNA,以PCR扩增相应细胞的线粒体CoI基因保守区的基因条码序列,将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测其基因片段的大小,并与文献报道的来源于ATCC相应细胞系线粒体CoI基因保守区的基因条码序列片段大小进行对比,以确定细胞的种属类别;②用Vero细胞、MDCK细胞和MDBK细胞的线粒体CoI基因保守区的基因的特异性引物分别与相应细胞和其他不同种属的细胞的基因组DNA进行PCR扩增,检测方法的特异性;用不同浓度的细胞基因组DNA与相应细胞的线粒体CoI基因保守区的基因的特异性引物进行PCR扩增,检测方法的灵敏度;③以不同种属细胞的线粒体CoI基因保守区的基因的特异性引物分别与多种细胞混合液提取的细胞基因组DNA进行PCR扩增,检测细胞间的交叉污染。结果 Vero细胞、MDCK细胞及MDBK细胞线粒体CoI基因保守序列中的基因条码序列片段大小,与来源于ATCC相应细胞系线粒体CoI基因保守序列中的基因条码序列片段大小相符。该方法具备较好的特异性,检测灵敏度为1.0 ng/μL,不同种属间细胞的交叉污染可被检出。结论该方法可有效地判断细胞的种属来源,亦可用于不同种属间细胞交叉污染的分析。