烧伤患者血浆和红细胞游离氨基酸变化及输注氨基酸对其变化的影响

动态测定烧伤患者血浆及红细胞内游离氨基酸的含量 ,探讨输入外源性氨基酸后对血及红细胞内游离氨基酸的影响。以日立 835— 5 0型氨基酸自动分析仪测定烧伤患者血浆及红细胞内游离氨基酸含量。结果发现烧伤患者血浆总游离氨基酸浓度从伤后到 2 1天均显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;赖、苯丙和苯丙 酪氨酸比值显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;色、组、精、丙、甘、苏、脯和丝氨酸比值显著降低 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;缬、亮、异亮、酪、胱和支链氨基酸伤后早期降低。烧伤患者红细胞内总游离氨基酸含量不同程度降低 ,其中 1、3、7天降低显著 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;红细胞内苯丙和苯丙 酪氨酸比值未见显著性升高 ;色、蛋、精、脯氨酸含量很低或基本未测出。输注复合氨基酸注射液后未能显著改善患者血及红细胞内游离氨基酸含量。结果提示烧伤患者红细胞内游离氨基酸含量的变化趋势与血浆游离氨基酸变化趋势基本一致 ;烧伤后红细胞内苯丙氨酸及苯丙 酪氨酸比值有别于血浆变化。本研究条件下补充外源性氨基酸未能显著改变烧伤患者血浆及红细胞内游离氨基酸的含量     

发现一种具有生长激素释放活性的新多肽——hpGRF

新近Guillemin等和Vale等分别报道了两例具有肢端肥大症体征的胰腺瘤患者。他们从胰瘤中各自发现了有44和40个氨基酸组成的能使GH释放的多肽,称之为人胰促生长激素释放因子(hpGRF)。44个氨基酸的序列为:酪-丙-天冬-丙-异亮-苯丙-苏-天冬酰-丝-酪-精-赖-缬-亮-甘-谷氨酰-亮-丝-丙-精-赖-亮-亮-谷-天冬-异亮-甲硫-丝-精-谷-谷-甘-谷-丝-天冬酰-谷-谷-精-甘-丙-精-丙-精-亮-NH_2。Vale报道的GRF含有40个氨基酸,其结构与Guillemin报道的大分子N-端序列相同。该多肽无论在试管内或在整体内均能特异地促使GH释放,但对脑垂体的其它激素,如催乳素、促性腺激素、ACTH和促甲状腺素均无释放效应。     

镰刀形红细胞的形成

镰刀形红细胞贫血症是一种严重的溶血性疾病,其特点是在氧分压低的情况下,红细胞就由正常的双凹圆饼状变成镰刀形。产生镰刀形细胞贫血症的根本原因是基因突变,导致转录、翻译错误,使血红蛋白分子的β多肽链上,第六位的谷氨酸被缬氨酸代替,这一个氨基酸分子的改变是怎样引起红细胞形成镰刀状的呢? 从蛋白质分子的一级结构看,正常血红蛋白(HbA)与镰刀形红细胞血红蛋白(HbS)的差异,是位于β链N端第六位上的氨基酸残基不同,其氨基酸残基顺序如下: HbA:缬-组-亮-酷-脯-谷-谷-赖…… HbS:缬-组-亮-酪-脯-缬-谷-赖……谷氨酸的侧链基团带负电荷,缬氨酸的侧链基     

蛋鸡育成期日粮氨基酸模式的研究

测定不同氨基酸组成日粮对罗曼褐蛋鸡育成期日增重、饲料效率和尿素氮等指标的影响,探讨蛋鸡育成期日粮理想氨基酸模式。结果表明,Ⅱ组饲料氨基酸配比理想．通过数学模型推出蛋鸡育成期日粮理想氨基酸模式为(假定赖氨酸为100)：蛋：胱：苏：精：异亮：亮：赖=32：30：66：22：75：32：100。这样饲料蛋白质水平降低约2个百分点而不影响鸡的生长发育,降低生产成本,提高经济效益;同时降低氮排出量,减少环境污染。     

肿瘤组织中谷氨酰胺酶的活性

(1) 本实验比较了一些正常组织与癌瘤组织中谷氨酰胺酶活性。结果发现移植性癌瘤的酶活性以淋巴肉瘤最高。肿瘤间酶活性的变动范围不如正常组织间的变动范围大。诱发性淋巴肉瘤的酶活性较其来源组织为高,但皮肤癌则较正常表皮低。(2) 在肿瘤生长过程中,谷氨酰胺酶活性随肿瘤的重量而有所变化,如艾氏腹水癌(实质型)、脑瘤22、胸腺淋巴肉瘤等的谷氨酰胺酶活性有随肿瘤生长而升高的趋势,但这并不是肿瘤的一般规律,如脑瘤53、Walker癌、肉瘤180等则无此现象。(3) 再生肝的谷氨酰胺酶活性较正常肝低。(4) 讨论了谷氨酰胺酶与某些肿瘤生长的可能关系。     

刺果番荔枝种子中的新环肽—刺果番荔枝环肽A

从刺果番荔枝种子中得到１个新环肽,命名为刺果番荔枝环肽Ａ（ａｎｎｏｍｕｒｉｃａｔｉｎＡ）通过多种２Ｄ－ＮＭＲ技术、ｐｏｓ．ＦＡＢ－ＭＳ和氨基酸分析,其结构确定为坏（脯－苯丙－缬－丝－丙－甘）,是１个环六肽。     

11种非必需氨基酸对离体植物生长的胁迫作用

研究了11种非必需氨基酸对小麦、水稻等植物离体胚植株以及拟南芥、白菜等植物种子植株生长的影响,结果显示,L-半胱氨酸、L-酪氨酸和L-丝氨酸在浓度达到3mmol&#183;L“时开始抑制植株生长,而L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、L-甘氨酸和L-天冬氨酸4种氨基酸在5—7mmol&#183;L^-1时才有轻微抑制作用;L-胱氨酸、L-天冬酰胺和L-丙氨酸3种氨基酸,在5．7mmol&#183;L^-1内没有抑制作用。脯氨酸的3种异构体在9mmol&#183;L^-1浓度下没有抑制作用发生,且还表现出有约1个生长级别（3．4cm左右）的生长促进作用。丝氨酸和丙氨酸的D-异构体在3mmol&#183;L^-1浓度即有强烈的生长抑制作用。这些结果表明非必需氨基酸胁迫植物的途径有多态性,这些多态性对研究植物氨基酸代谢有重要意义。     

苯丙氨酸衍生物的抗肿瘤作用

<正> 许多研究者以癌瘤细胞对氨基酸的特殊要求作为依据,合成了大量的氨基酸衍生物,并进行了抗肿瘤活性的试验,因此,在合成工作上有一种比较普遍的想法,就是以氨基酸作为载体,载入具有抗肿瘤作用的分子或某些基团,既达到抑制肿瘤的生长,又达到降低原抗肿瘤药物的毒性。载体氨基酸的选择,主要取决于某种肿瘤对某些氨基酸的特殊要求。许多实验说明,苯丙氨酸对某些肿瘤的生长起着重要的作用。例如:McCoy,T.A.等人从培养     

谷氨酰胺营养生理研究进展

谷氨酰胺因其对人和动物中的重要生理作用而引起了广泛关注。谷氨酰氨是一种特殊的氨基酸,为快速繁殖细胞优先选择的呼吸燃料,如粘膜细胞和淋巴细胞;调节体内酸碱平衡;组织间氮的载体;核酸、核苷酸、氨基糖和蛋白质的重要前体。大量的证据表明谷氨酰胺是一种条件性必需氨基酸。在应激状况下,机体对谷氨酰胺的需要超过其合成能力,因此,可以通过肠外营养或饲料中添加谷氨酰胺以营养调控的方式加速动物体的康复。     

两种新的候补激素——组异肽和酪酪肽

肽类激素的发现过程,大多是先观察到粗的组织提取物中具有生物学活性,其次,进一步用生物学方法分离提纯粗制品,得到纯品激素,再后,确定激素分子结构。晚近,瑞典生化学家 Mutt 与 Tatemoto 等根据许多肽类激素都含有 C-端酰胺结构这一特性,独具匠心,设计出一种寻找肽类激素的化学新方法。即在组织提取物中先找寻含有 C-端酰胺结构的肽节段,然后用酶学方法测出 C-端及 N-端的氨基酸残基序列,最后,确定激素的分子结构。这种创造性工作,为探寻新的肽类激素开辟了广阔的道路。他们用这种方法,已经在猪的上段小肠中发现了几种以前不为人所知的肽类新激素。其中有两个,即组异肽和酪酪肽,皆是在提纯胰泌素时获得的副产品中找寻到的。组异肽(The peptide with N-terminal histidine and C-terminal isoleucine,简称 PHI),含有27个氨基酸残基。其 C-端序列为亮-异亮-NH_2,N-端序列为组-丙-门冬-甘-缬-苯丙-苏-,与胰泌素、血管活性肠肽(VIP)、胰高血糖素、肠抑胃肽(GIP)相似,属于胰泌素-胰高血糖素家族。初步观察到,它     

深海放线菌Actinomadura sp.01119的代谢产物研究

采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱和凝胶色谱等分离方法,对分离自深海沉积物中的海洋放线菌Actinomadura sp.01119的代谢产物进行研究,从中分离得到9个化合物,经1H NMR、13C NMR和MS等波谱分析并结合相关文献鉴定为环(L-苯丙-L-脯)二肽(1),环(L-脯-L-脯)二肽(2),环(L-酪-L-脯)二肽(3),环(D-酪-L-脯)二肽(4),环(L-异亮-L-脯)二肽(5),环(L-缬-L-脯)二肽(6),棕榈酸(7),对羟基苯甲酸(8),尿嘧啶(9)。其中化合物1~6为环二肽类化合物。     

某些内科系统疾病患者血浆游离氨基酸的变化及意义

为了解某些内科系统疾病的血氨基酸代谢特点。测定１７０例９种内科系统急慢性疾病患者血浆游离氨基酸浓度,并分别与５８例健康人血浆氨基酸浓度作对比分析。９种疾病的血浆胱氨基酸浓度不同程度升高,以尿毒症病人最为显著,炎症性病人血浆苯丙、蛋、赖氨酸和苯丙／酪比值显著升高,丙、组、精、脯氨酸和支／芳比值显著降低;糖尿病和甲亢病人血浆总游离氨基酸、谷、丙、酪、赖和支链氨酸显著升高;糠尿病病人支／芳比值显著升高,表明不同疾病的血氨基酸浓度有特征性变化,炎症是导致血氨基酸代谢紊乱的重要因素     

抗氧化干预对肝癌细胞增殖及N—ras基因表达的作用

探讨了抗氧化剂抑制肿瘤块生长、促进癌细胞凋亡作用。在昆明小鼠皮下接种肝癌细胞悬液,同时灌服各种抗氧化剂维生素E、β胡萝卜素、谷氨酰胺、硒酸酯多糖、云芝多糖,有不同程度抑制肿瘤块生长作用,后两种多糖抗氧化剂具有促进非特异性免疫能力提高和血浆中NO含量增高,并增强对肿瘤的抑制作用。在7721人肝癌细胞株中,加入以上各种抗氧化剂,能不同程度抑制癌细胞增殖并促使细胞凋亡,与此同时,小鼠血浆中从胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活力提高、丙二醛（MDA）含量下降。低浓度过氧化氢可促进癌细胞增殖,高浓度可促使细胞凋亡或坏死。其可能的机制一是阻断自由基对癌细胞增殖的信号转导,抑制N－ras癌基因表达;同时,Mn-SOD、c-fos、c-jun mRNA表达提高。二是通过提高非特异性免疫能力促进NO释放,直接抑制癌细胞生长。     

小鼠睾丸支持细胞体外培养特性

支持细胞是睾丸的重要组成部分,其主要功能是为生精细胞提供适宜的生长环境。从幼鼠睾丸中分离得到支持细胞,并通过苏木精-伊红和Fas-L免疫组化染色对分离得到的细胞进行了鉴定。通过对原代小鼠睾丸支持细胞的贴壁、生长和培养液中葡萄糖、谷氨酰胺、氨基酸等营养底物及其副产物乳酸、铵根离子等的代谢以及培养液渗透压和pH的研究,发现支持细胞的贴壁时间主要集中在接种后2～4h;当培养液中氨根离子浓度高于2.3mmol/L,渗透压高于326mosm/kg,pH≤6.8时支持细胞生长进入衰亡期;在氨基酸代谢方面,发现培养过程中丙氨酸和谷氨酸浓度迅速增加,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸浓度略有降低,丝氨酸、精氨酸和甘氨酸浓度基本保持不变。因此培养液中铵根离子浓度的过量积累、渗透压和pH的异常和贴壁面积不足是限制支持细胞静态生长的主要因素。研究结果为支持细胞大规模培养及工艺优化奠定了基础。     

谷氨酰胺和天冬酰胺对CHO细胞生长、代谢及抗体表达的影响

以离心换液的批培养为例,通过设计谷氨酰胺和天冬酰胺不同的添加方式来考察两者对CHO细胞生长,代谢及产物表达的影响。结果表明：基础培养基中谷氨酰胺和天冬酰胺不能简单地相互替换,缺失谷氨酰胺或天冬酰胺的基础培养基均不能支持dhfr-CHO细胞的正常生长和产物表达,仅谷氨酰胺和天冬酰胺的浓度同时达到4mmol/L,才能满足细胞生长所需。另外,代谢副产物氨的生成仅与谷氨酰胺和天冬酰胺的加和线性相关,与两者添加比例无关。但适当提高天冬酰胺与谷氨酰胺的比例可提高抗体表达水平,同时减少乳酸的生成。因此,为培养基开发与优化过程中谷氨酰胺和天冬酰胺的添加策略提供了依据,为建立高效的流加培养过程奠定了基础。     

肿瘤细胞能量代谢中潜在的治疗靶点

细胞能量异常是肿瘤细胞的十大特征之一。快速增殖的癌细胞生长所需要的能量主要是由糖酵解而非氧化磷酸化提供,癌细胞这种特殊的糖代谢被称为Warburg效应。近年来肿瘤的靶向治疗成为研究的热点,异常的糖酵解、脂代谢和氨基酸代谢的过程涉及到大量的限速酶和关键酶,这些都是潜在的药物治疗靶点。本文仅围绕着调控癌细胞糖酵解进程中直接调控的关键酶和限速酶,脂代谢过程中脂肪酸合成酶和谷氨酰胺代谢过程中的谷氨酰胺酶进行分析和综述。     

癌肿与氨基酸代谢的研究

研究了癌肿与氨基酸代谢的关系。这些癌肿包括喉癌HepⅡ细胞 ,急性非淋巴细胞白血病和急性淋巴细胞白血病 ,结果表明 :( 1 )喉癌细胞株培养过程中亮氨酸、赖氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、异亮氨酸、甘氨酸以及苏氨酸等水平明显降低 ,而色氨酸水平明显增加 ,说明喉癌细胞的生长繁殖必须依赖以上 7种氨基酸同时释放了色氨酸 ;( 2 )急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)患者血浆中的谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等水平明显升高 ,而苏氨酸、组氨酸、丙氨酸等水平明显降低 ,这些结果与国际报道相一致 ;( 3)经治疗后 ,ANLL患者血浆中甘氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等水平明显降低 ,而丙氨酸、组氨酸等水平明显升高 ,表明肿瘤细胞处在无氧代谢。患者经治疗后色氨酸和苯丙氨酸水平降低和组氨酸水平的升高对患者预后是有益的 ;( 4)急性淋巴细胞白血病患者血浆中苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸和酪氨酸水平提高 ,这些氨基酸能促进肿瘤生长 ,而门冬酰胺、谷氨酰胺以及天冬氨酸水平降低 ,说明这 3种氨基酸为肿瘤生长所必须。此外还发现ALL患者外周淋巴细胞中精氨酸水平增加 ,精氨酸对癌肿细胞有直接杀伤作用。     

谷氨酰胺对微囊化重组CHO细胞生长代谢及内皮抑素表达的影响

微囊化技术是一种有发展潜力的生物技术,在细胞移植和药物控释等方面具有广泛的应用。然而由于目前微囊化细胞规模化培养技术还不成熟,阻碍了其在临床治疗中的推广与应用。为了了解微囊化重组CHO细胞的生长代谢特性为今后规模化培养优化提供技术参考,考察了主要氮源物质谷氨酰胺对微囊化重组CHO细胞生长代谢及内皮抑素表达的影响。结果显示:当谷氨酰胺起始浓度从2.69mmolL增加到9.05mmolL时最大活细胞密度并没有增高,细胞增殖没有显著差异。当谷氨酰胺起始浓度较低(2.69mmolL)时,葡萄糖的比消耗速率较大;当谷氨酰胺起始浓度增高时(7.91mmolL～9.05mmolL)葡萄糖和谷氨酰胺的比消耗速率增大,但细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的利用率降低。谷氨酰胺对产物表达有显著影响,起始浓度为4.97mmolL时的内皮抑素累积浓度最高,达546.36ngmL,过低和过高谷氨酰胺起始浓度下内皮抑素的累积浓度均较低。     

运用氨基酸分析法和DOE法优化抗PD-1单克隆抗体生产用培养基

本研究采用氨基酸分析法结合DOE设计法优化并获得高表达抗PD-1单克隆抗体生产用基础和补料培养基。通过对市售多种基础和补料培养基进行筛选,获得细胞生长状况较优的基础培养基和抗体表达较高的补料培养基,利用氨基酸分析法检测较优基础培养基和补料培养基中氨基酸消耗情况,确定影响细胞生长和抗体表达的关键氨基酸种类,利用DOE分析软件设计分别在较优基础和补料培养基中添加不同浓度的氨基酸种类及浓度,根据细胞生长及抗体表达,优化得到抗PD-1单克隆抗体的基础和补料培养基组合。最终优化后基础培养基配方为:Hycell CHO培养基中添加1.04 mmol/L L-天冬酰胺和0.76 mmol/L L-谷氨酰胺。最终优化后补料培养基配方为:OPM CHOCD Feed1补料培养基中添加38.7 mmol/L L-组氨酸,75.0 mmol/L L-酪氨酸,64.0 mmol/L L-丝氨酸,49.2 mmol/L L-谷氨酰胺和18.7 mmol/L L-半胱氨酸。经过3 L反应器培养验证,优化后的培养基比未优化时,最大活细胞密度(PVCD)提高了62.7%,抗PD-1单克隆抗体表达量提高了71.5%,且活性无明显差异。     

癌基因

癌,我国古代称为“喦”或“岩”,意思是说癌瘤象山一样堆积,象岩石一样坚硬。现代科学文献中一般称为Cancer。所谓Cancer,希腊文原意为“螃蟹”,因为古希腊学者希波克拉底和古罗马学者盖仑曾臆想,癌症的危害是从癌瘤中伸出的出了毛病的象螃蟹爪子那样的静脉造成的。1838年,缪勒借助显微镜的观察,发现癌瘤与正常组织一样,也是由细胞组成的,正如我们现在所知,只不过癌细胞几乎完全摆脱了正常细胞的生长和分裂的调控机制,表现出不受周围组织制约的自主性和能在宿主体内扩散的侵犯性和转移性。