Paraoxonase-1介导硫化氢的抗甲醛神经毒性作用

我们以往的研究工作证实了硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对甲醛神经毒性和氧化应激具有拮抗作用.Paraoxonase-1(PON-1)是机体重要的内源性抗氧化剂.本研究的目的是探讨PON-1是否可介导H2S的抗甲醛神经毒性作用.采用甲醛损伤PC12细胞为甲醛神经毒性的细胞模型.硫氢化钠(NaHS,一种H2S的供体)不仅可以上调PC12细胞PON-1的活力,还可恢复甲醛对PC12细胞PON-1表达与活力的抑制作用.2-hydroxyquinoline(2-HQ)是一种选择性PON-1抑制剂,它可显著降低H2S对甲醛细胞毒性、凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)累积的抑制作用.而且,2-HQ可阻止H2S逆转甲醛激活PC12细胞caspase-3和下调PC12细胞bcl-2表达.结果提示H2S依赖PON-1去保护PC12细胞对抗甲醛的神经毒性.我们的这一发现表明PON-1有希望成为防治甲醛神经损伤的新靶点.     

甲基苯丙胺中毒大鼠相关脑区多巴胺能神经毒性研究

目的：探讨MA中毒多巴胺能神经毒性的损伤机制。方法：将Wistar大鼠40只,随机分成对照组10只和实验组30只（实验组分成三个亚组,分为末次给药后1天组、4天组和7天组,n=10）。实验组给予20mg/kg的MA腹腔注射,对照组给予同样剂量的生理盐水,每天注射一次,注射时间为20：00,连续注射4天。分别于末次给药后1天,7天,14天处死实验大鼠,用免疫组织化学染色法（S-P法）和荧光分光光度计法检测大鼠中脑黑质致密区（SNC）、中脑腹侧被盖区（VTA）、前额叶皮质（PFC）以及纹状体（CPu）四个脑区的多巴胺神经元细胞的形态和数量的变化,对神经纤维进行灰度值分析。结果：1、黑质致密区和腹侧被盖区TH阳性细胞图像分析结果与细胞计数分析结果一致：与对照组相比,各实验组TH免疫反应阳性降低,差异具显著性（P〈0.05）,d1组开始降低（P〈0.05）,d7组达到低谷（P〈0.01）,d14天组黑质致密区和腹侧被盖区TH免疫反应阳性有不同程度的恢复（P〈0.05）。2、纹状体和前额叶皮质TH阳性纤维图像定量分析结果：各实验组TH免疫反应阳性均减低（P〈0.05）,d7组阳性反应最弱（P〈0.01）,d14组仍未恢复（P〈0.05）。3、黑质致密区、腹侧被盖区、纹状体及前额叶皮质荧光分光光度计检测DA递质含量结果：与上述免疫组化结果基本一致。结论：1、大鼠各脑区TH阳性表达和DA含量,均出现不同程度的减低。2、MA中毒大鼠各脑区DA递质含量的变化与TH的变化结果基本一致。     

甲基苯丙胺中毒大鼠相关脑区多巴胺能神经毒性研究

目的:探讨MA中毒多巴胺能神经毒性的损伤机制。方法:将Wistar大鼠40只,随机分成对照组10只和实验组30只(实验组分成三个亚组,分为末次给药后1天组、4天组和7天组,n=10)。实验组给予20mg/kg的MA腹腔注射,对照组给予同样剂量的生理盐水,每天注射一次,注射时间为20:00,连续注射4天。分别于末次给药后1天,7天,14天处死实验大鼠,用免疫组织化学染色法(S-P法)和荧光分光光度计法检测大鼠中脑黑质致密区(SNC)、中脑腹侧被盖区(VTA)、前额叶皮质(PFC)以及纹状体(CPu)四个脑区的多巴胺神经元细胞的形态和数量的变化,对神经纤维进行灰度值分析。结果:1、黑质致密区和腹侧被盖区TH阳性细胞图像分析结果与细胞计数分析结果一致:与对照组相比,各实验组TH免疫反应阳性降低,差异具显著性(P<0.05),d1组开始降低(P<0.05),d7组达到低谷(P<0.01),d14天组黑质致密区和腹侧被盖区TH免疫反应阳性有不同程度的恢复(P<0.05)。2、纹状体和前额叶皮质TH阳性纤维图像定量分析结果:各实验组TH免疫反应阳性均减低(P<0.05),d7组阳性反应最弱(P<0.01),d14组仍未恢复(P<0.05)。3、黑质致密区、腹侧被盖区、纹状体及前额叶皮质荧光分光光度计检测DA递质含量结果:与上述免疫组化结果基本一致。结论:1、大鼠各脑区TH阳性表达和DA含量,均出现不同程度的减低。2、MA中毒大鼠各脑区DA递质含量的变化与TH的变化结果基本一致。     

氧化胁迫在硝基苯致小鼠神经毒性中的作用

目的:探讨氧化胁迫在硝基苯致小鼠神经毒性中的作用。方法:用不同剂量的硝基苯对小鼠进行灌胃染毒,每天1次,共30d;用碱性羟胺比色法测定小鼠脑乙酰胆碱酯酶活性,用试剂盒检测脑抗氧化功能。结果:试验组小鼠的中毒症状随着染毒剂量的增加和时间的延长而越来越明显;乙酰胆碱酯酶活性降低;与对照组相比,脑各项抗氧化指标均表现出显著或极显著差异。结论:氧化胁迫在硝基苯发挥神经毒性过程中起重要作用。     

谷氨酸的神经毒性作用

谷氨酸(glutamic acid,Glu)是一种拟议中的兴奋性神经递质。1969年 Olney 报道,外周注射大剂量谷氨酸—钠(monosodiumglutamate,MSG)可损伤动物下丘脑弓状核神经元。以后又对 MSG 的神经毒性作用进行了大量研究。这些研究推动了神经解剖学、神经内分泌学、神经生理学及神经精神病理学研究的发展。     

过量大黄对小鼠肝脏细胞的毒性作用

目的探讨不同剂量的大黄对小鼠肝脏细胞的损伤及其机理,为大黄的安全用药提供理论依据。方法采用大、中、小、最小剂量的大黄灌胃昆明小鼠,观察一般状态,进行肝脏组织切片HE染色、酶指标生化检测及TNFαmRNA半定量检测。结果①小鼠一般状况随大黄剂量的增加而恶化。②小鼠ALT及γ-GT随大黄剂量增加而增高,除正常对照组和最小剂量组外,其余各组之间差异均达显著水平。③从小剂量组开始,小鼠肝脏出现脂肪变性,且随大黄剂量增加而加重。④从小剂量组开始,TNFα表达明显升高,且随大黄剂量增加而增高。结论8g/Kg/d剂量大黄对肝脏具有毒害作用,毒害作用随大黄剂量增加而加剧,过量大黄对肝脏的毒害作用主要表现为肝细胞脂肪变性。TNFα参与了过量大黄对肝脏的毒害过程,是造成肝细胞脂肪变性的损伤因子之一。     

MPTP的神经毒性作用及机制

1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-te-trahydropyridine,MPTP),是近年来在探究一些年轻的麻醉剂成瘾者突然出现帕金森氏病症状的原因时发现的一种神经毒性物质,它能较特异地损毁人和某些动物脑内黑质—纹状体通路的多巴胺(DA)能神经,从而引发帕金森氏病症状。本文介绍了 MPTP 神经毒性的发现及其作用特点、机制与其在帕金森氏病研究中的可能应用。     

3种苦参生物碱对小鼠的毒性作用研究

以小鼠为试验对象,对3种苦参生物碱(氧化苦参碱、槐定碱、苦参碱)的毒性作用进行了系统的分析.结果显示:(1)混合后的苦参生物碱毒性增加,其中苦参碱+槐定碱的增效作用最强,协同毒力指数(c.f)值达59.1,氧化苦参碱+苦参碱混合给药,c.f值为37.3,为增效作用;氧化苦参碱+槐定碱混合给药,c.f值为13.6,为相加作用.(2)血常规检测结果显示,3种苦参生物碱处理组小鼠的白细胞计数(WBC)、血小板总数(PLT)、中粒细胞(GR)较之对照组显著增高;血液生化指标检测结果显示,槐定碱和氧化苦参碱各处理组小鼠的尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平均极显著高于对照组(P＜0.01),苦参碱各处理组小鼠的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基酸转移酶(AST)水平比对照组极显著升高(P＜0.01);脏器系数的统计结果显示:槐定碱、氧化苦参碱各处理组小鼠的肾脏系数、心脏系数以及肝脏系数均极显著高于对照组(P＜0.01),苦参碱处理组小鼠的肾脏系数、心脏系数及肺脏系数显著地高于对照组(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05).研究表明,3种苦参生物碱对小鼠肝脏、肾脏有影响,初步确定它们作用的靶器官是肝脏和肾脏.     

恒定磁场对小鼠精子毒性作用的实验研究

观察不同强度恒定磁场对雄鼠睾丸、附睾重量、精子数量、精子活动度及精子形态的影响. 结果显示睾丸与附睾重量各组无显著差异, 精子数量在实验组与对照组中亦无明显改变. 在 0.12T磁场环境暴露下, 雄鼠精子畸形率增加及活动率下降, 与对照组相比有显著差异. (P< 0.01), 提示磁场对小鼠精子有一定毒性, 并且毒性与其强度有关.     

细胞因子对中枢神经系统海马脑区的作用

细胞因子是一组多肽蛋白,一般认为其主要功能是介导非特异性免疫反应、促进未成熟白细胞增殖、分化和生长等。但近年来的研究表明,这些在免疫系统中起重要作用的调节因子及其受体也存在于中枢神经系统（ＣＮＳ）中,并发现它们对ＣＮＳ中某些神经元和胶质细胞的生理功能有调控作用。本综述细胞因子白细胞介素１、白细胞介素２和白细胞介素６对ＣＮＳ海马脑区作用的研究进展。     

不同蝮蛇抗栓酶对动物的神经毒性敏感反应

给小鼠、家兔、豚鼠等３种动物注射不同剂量的两种蝮蛇抗栓酶,观察它们的反应。结果：东北白眉蝮蛇抗栓酶未见神经毒反应,而浙江蝮蛇抗栓酶有神经毒反应,以豚鼠的反应最为敏感,主要表现为箭毒样毒性症状     

三维分析技术揭示小鼠不同脑区小胶质细胞具有不同的结构特征

小胶质细胞是中枢神经系统中具有免疫功能的细胞,其分枝状突起不断伸出或回缩监测着周围环境的变化.为了探究不同脑区中小胶质细胞突起结构特征的差异性,本项研究采用小胶质细胞表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠(Mus musculus),结合组织透明、激光共聚焦扫描成像和三维重建等技术,对小鼠大脑皮层、纹状体和海马齿状回变形层中小胶质细胞的结构进行了量化分析,并利用小胶质细胞突起均由胞体发出并在三维空间中具有连续性的特征分割出了具有复杂突起结构的单个完整小胶质细胞.研究结果显示,纹状体中小胶质细胞的空间占有体积显著高于大脑皮层和海马齿状回变形层中小胶质细胞的空间占有体积,而大脑皮层和海马齿状回变形层中小胶质细胞突起的空间占有体积之间不具有显著性差异.三维分析结果表明,大脑皮层、纹状体和海马齿状回变形层中小胶质细胞突起的总长度、分支总数、分支点个数、分支末端总数、最大分支级数均具有显著性差异.组织透明技术结合三维重建技术可在多个角度分析小胶质细胞的空间结构特征,这为进一步分析小胶质细胞结构和功能的关系及其在病理条件下的变化提供了一种新的手段.     

NO在胆红素神经毒性中的作用

目的:探讨NO的神经毒性是否能促使高胆红素血症新生兔脑损伤的形成.方法:采用新生兔制作高胆红素血症动物模型,检测脑中EAAs及NO的含量.结果:模型组脑组织中EAAs含量显著低于对照组(P＜0.01),而NO浓度显著高于对照组(P＜0.01).结论:NO可能通过介导EAAs兴奋性神经毒性及其本身对神经细胞的直接毒性作用而加重胆红素所诱导的脑损伤.     

四氯化碳联合二乙基亚硝胺对小鼠精巢的毒性作用

为了研究四氯化碳(CCL4)联合二乙基亚硝胺(DEN)对小鼠(Mus musculus domesticus)精巢的毒性作用。将昆明小鼠随机分为对照组与实验组,各12只个体。实验组每周2次腹腔注射含有15%CCl4的花生油溶液,同时自由饮用0.07‰的DEN溶液,连续诱导8周。对照组每周2次注射花生油,饮用蒸馏水。分别于第3、6、8周处死实验组及对照组小鼠各4只,对其精巢组织进行常规固定、包埋、切片、H.E染色,观察精巢的形态及精子数量的变化。与实验组比较,对照组小鼠体重明显增加,且实验组与对照组差异显著;与对照组相比,实验组睾丸系数以及精子存活率均显著减少。对照组小鼠精巢都具有正常的生精小管结构,管腔中存在大量精子;第3周,实验组小鼠的精巢与对照组类似,生精小管较为完整,生精细胞稍有散乱;第6周,实验组生精小管变形,生精细胞排列疏松,精子数目减少且畸形;第8周,实验组生精小管残缺不全,生精细胞和精子散乱排列,精子数量大大减少且变形更为严重。实验说明,CCl4联合DEN能够造成小鼠精巢组织的损害以及精子数目的减少和畸变。     

大豆黄酮对衰老小鼠不同脑区突触内[Ca2+]i的影响

目的: 检测大豆黄酮对衰老小鼠不同脑区突触内[Ca2 ]i影响.方法: 灌喂衰老模型小鼠大豆黄酮,利用荧光指示剂Fura-2/AM测定[Ca2 ]i.结果: 大豆黄酮使衰老小鼠大脑皮质、海马、间脑突触内游离[Ca2 ]i分别下降0.18倍(P<0.05)、0.34倍(P<0.01)、0.21倍(P<0.05).结论: 大豆黄酮可部分抑制由于突触[Ca2 ]i代谢失调引发的脑老化.     

四氯化碳联合二乙基亚硝胺对小鼠肾脏毒性作用的研究

为了研究四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_4)联合二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)对小鼠肾脏组织的毒性损伤作用,将30只雄性昆明鼠随机分为对照组和实验组,其中实验组小鼠每周2次腹腔注射15%CCl_4花生油溶液,并且自由饮用0.07%DEN溶液;而对照组小鼠注射等量的纯花生油,自由饮用纯净水,观察并记录各组小鼠的饮水、进食情况和体重变化,以及生活状态的改变。在实验过程中,分别于第3、6、8周解剖两组小鼠各4只,取其肾脏组织样本进行病理方面的组织切片观察。体重统计结果显示,与对照组相比,实验组小鼠体重明显下降。同时,实验组小鼠的肾脏系数明显高于对照组,并且具有显著差异(P0.05)。组织切片观察发现,对照组小鼠肾脏组织结构比较清晰,排列较规则,而实验组小鼠肾脏组织呈现出显著的变性和坏死;且随着处理时间的延长,肾脏组织变得散乱无规则,细胞凝集现象越来越明显,肾小管与集合小管管腔变窄,颗粒样变性。上述结果表明CCl_4联合DEN对小鼠肾脏具有损伤效应,处理时间越长,损伤作用越严重。     

活性氧在谷氨酸兴奋性神经毒性中的作用

活性氧在谷氨酸兴奋性神经毒性中的作用易永杨祥良徐辉碧（华中理工大学化学系,武汉４３００７４）关键词谷氨酸兴奋性毒性活性氧作为神经递质的谷氨酸贮存于神经末梢突触囊泡内,随神经冲动由钙内流介导释放到突触间隙,尔后作用于突触后膜的谷氨酸受体,在中枢神经系统...     

丙烯酰胺对小鼠血液毒性的研究

目的 为探明丙烯酰胺对小鼠血液的毒性效应.方法 采用丙烯酰胺溶液连续灌胃小鼠16天,记录小鼠体重、器官系数变化并对小鼠血液成分进行检测.结果 当染毒剂量为120、150 mg/kg时,小鼠体重增重率、肝系数、WBC、LYM、RBC、MCHC、PLT、P-LCR显著降低(P<0.05),GRAN显著增加(P<0.05);...     

成年鸣禽习鸣脑区的神经发生

成年鸣禽习鸣脑区可产生新的神经元。这些新生神经元沿神经胶质纤维迁移至鸣禽前脑高级发声控制与发声学习中枢,加入到原有的神经回路,参与发声学习记忆的感知与运动过程。这提示神经可塑性不仅适用于脑的发育,而且也是成年动物脑功能神经回路的一种正常过程。     

小鼠主要脑区组织的优化急性分离法

实验小鼠具有体型小,基因特性明确,转基因或突变体品系多,饲养方便,繁殖迅速等优点,已被广泛应用于现代生物学、医学、药理学和心理学研究。在大量采用小鼠为受试对象的同时,国内外研究者也越来越重视实验动物的保护。最大限度地利用实验动物,并尽可能地减少动物使用量,这也是国内外实验室一直追求并建立的理念。本文总结了本实验室快速分离获取小鼠不同脑区新鲜组织用于蛋白免疫印迹和神经细胞培养的经验,旨在为实验初学者提供指导的同时,也为提高实验动物的利用率和降低动物使用数量提供思路和方法。